自噬在X射线照射所致心肌线粒体损伤中的作用

目的观察X射线照射对大鼠心肌线粒体功能的影响以及自噬在线粒体功能损伤中的作用。方法将135只实验大鼠分成假照射组（10只）、照射组（80只）和照射＋3．甲基腺嘌呤（3-MA）组（45只）,假照射组接受0GyX射线照射,照射组给予20Gyx射线照射,照射＋3-MA组接受20Gvx射线照射前30min腹腔注射2μl 3-MA。采用蛋白免疫印迹法和实时定量PCR法检测心肌细胞的LC3II及Beclin1蛋白表达及其mRNA水平变化,检测左心室舒张压及＋-dP／dtmax（左心室压力上升及下降的最大速率）等离体心功能指标。结果与假照射组相比,照射组大鼠经20GyX射线照射后离体心功能在21d时出现降低;而在1d时心肌组织线粒体功能便出现了损伤;同时,心肌细胞自噬水平在3h、6h、12h、1d、2d、4d及7d时出现明显上升,与假照射组之间的差异显著,且在6h达到最高值。与照射组相比,照射＋3一MA组大鼠心肌LC3II及Beclin1表达水平明显下降,且心功能出现异常的时间提前至14d。结论x射线照射损伤大鼠心肌线粒体功能并诱导自噬发生,可能是心肌保护的重要因素。     

γ射线照射人正常肝细胞染色体损伤的修复

目的研究人类正常肝细胞经γ射线诱导染色体损伤的动态修复。方法应用早熟染色体凝集技术对人类正常肝脏细胞经γ射线照射导致的染色体损伤后48h内的动态修复过程进行研究。结果照射后原初染色单体断裂和等点染色单体断裂数随着照射剂量的增加而增多，染色单体断裂显著多于等点染色单体断裂；经过24h的继续培养，这两种类型的损伤都有不同程度的修复，约50％染色单体断裂得到修复，而等点染色单体断裂的修复率最多为15％；经过48h的照射后培养，染色体损伤的水平与24h相比没有显著差异。结论肝细胞经γ射线照射后染色体损伤的主要形式是染色单体断裂，易于修复；虽然等点染色单体断裂数量较少，但修复困难。提示等点染色体断裂是细胞经γ射线照射后死亡和癌变的一个重要因素。     

γ射线照射及博来霉素所致肺纤维化的病理学研究

肺纤维化是临床上一个棘手的疾病。无论急性核辐射事故、放疗、化疗及某些病毒感染等最终都可造成肺纤维化。尽管许多学者对单纯照射或单纯博来霉素所致肺纤维化进行了大量研究［１,２］,但对两者同时应用所致肺纤维化的研究并不多见。因此,作者在对两者单独使用及同时...     

γ射线照射量标准装置的建立

γ射线照射量标准装置的建立王贵林柳敏华王成国阿拉坦于凌乌兰王清芝对γ射线辐射量的监测是放射卫生防护的内容之一，特别是对放射性工作场所的监测，直接关系到从事放射性工作人员和居民的身体健康。为保证监测数据的准确可靠和量值的统一，对γ辐射防护仪器的定期检定...     

运动诱导线粒体自噬与受体蛋白FUNDC1研究进展

<正>FUN14 domain containing 1(FUNDC1)作为哺乳动物细胞内的线粒体受体蛋白,在低氧条件下已被证实能够引起线粒体自噬。线粒体自噬对机体内环境稳态和细胞正常代谢至关重要,可调节多种疾病状态。运动作为一种应激干预能够激活AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)并在丝氨酸317(Ser-317)位点磷酸化自噬     

骨骼肌钝挫伤后线粒体自噬相关基因及自噬体变化研究

目的:探讨骨骼肌钝挫伤后线粒体自噬相关基因与自噬体变化的分子机制。方法:Wistar雄性大鼠64只,随机分为对照组、钝挫伤组(按照取材时间分为12 h组、2 d组、5 d组、7 d组、10 d组、15 d组、30 d组)。采用重物下落装置导致右小腿内侧面(其皮下为腓肠肌中段)一次打击伤,建立急性骨骼肌钝挫伤模型,通过Western-Blotting和qRT-PCR技术分别检测钝挫伤后腓肠肌缺氧及自噬相关因子,包括低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、腺苷酸活化蛋白激酶α2亚基(AMPKα2)、Bcl-2腺病毒E1B19ku相关蛋白3(BNIP3)和Bcl-2家族的类NIP3蛋白(NIX)的蛋白和mRNA表达变化情况;透射电镜观察受损部位不同恢复时间的超微结构及自噬体形成情况。结果:(1)钝挫伤后,HIF-1α、AMPKα2蛋白表达在12 h、2 d达到峰值,至伤后10 d,HIF-1α表达均明显高于对照组(P<0.05);AMPKα2表达在伤后5 d仍显著高于对照组(P<0.05),至10 d回落至正常水平;BNIP3持续高表达至5 d后开始回落,但至10 d仍高于对照组;NIX表达峰值出现在伤后12 h、2 d,持续高表达至7 d。(2)钝挫伤后,相关基因表达水平,Hif-1α与Ampkα2mRNA在2 d显著高于对照组(P<0.01),至5 d表达下降但仍高于对照组(P<0.05),随后回落至正常水平;Bnip3、Nix的mRNA变化情况与其蛋白表现基本一致。损伤后12 h在单个网孔视野中即可见到多个自噬体,至2～7 d自噬体数量逐渐增多,10 d后自噬体数量比钝挫伤后12 h～7 d组相比呈现减少趋势,至15 d后自噬体数量逐渐减少。结论:骨骼肌钝挫伤发生后,损伤早期代谢调控因子AMPKα2、缺氧敏感因子HIF-1α表达变化情况表明损伤后受损骨骼肌内部出现能量危机并形成缺氧环境;线粒体自噬、细胞凋亡相关因子BNIP3、NIX表达变化表明损伤后线粒体自噬被启动,缺氧诱导了骨骼肌钝挫伤早期的线粒体自噬;缺氧诱导的线粒体自噬可及时清除受损线粒体,维持线粒体质量、为新生线粒体提供原料,从而减小损伤程度,以利于受损骨骼肌的快速恢复,这可能是损伤发生后机体的一种代偿性机制。     

γ射线低剂量照射兔眼晶体损伤的实验观察

目的 探讨低剂量电离辐射对晶体的影响,方法用２５和５０ｃＧｙ＾６０Ｃｏγ射线一次照射兔眼后,后期用透射电镜（ＴＥＭ）和裂隙灯显微镜（ＳＬＭ）观察晶体组织及形态学变化。结果 ＴＥＭ观察到２５和５０ｃＧｙ照射后早期均有明显晶体上皮细胞损伤,表现为胞浆内粗面内质网、线粒体和高尔基氏器等膜性结构水肿及空泡变,细胞间和胞浆内明显水肿,大量空泡形成及层状小体增多。５０ｃＧｙ组更明显。ＳＬＭ观察发现两剂量组照射     

γ射线照射对平滑肌细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨近距离腔内放射治疗预防血管成行术后再狭窄的机理。方法 培养的动脉平滑肌细胞分别接受吸收剂量为３．５、７．０、１４和２８Ｇｙ＾６０Ｃｏβ射线照射,１２ｈ持以流式细胞仪检测细胞各周期百分率及凋亡率。结果 吸收剂量为３．５、７．０、１４和２８Ｇｙ组Ｇ０～Ｇ１期细胞数分别占细胞总数的５８．１３％、８３．６％、８８．７９％、８９．１５％,与对照组（５６．２９％）相比,７．０、１４、２８Ｇｙ组差异有非常显著性（Ｐ〈０．０１）;而３．５Ｇｙ组差异无显著性（Ｐ〉０．０５）;照射各组细胞凋亡率分别为０．８５％、１．０４％、１０．３８％、１６．００％,与对照组（０．８４％）相比,１４、２８Ｇｙ组差异有非常显著性（Ｐ〈０．０１）。结论 ３．５Ｇｙ＾６０Ｃｏγ射线照射对血管平滑肌细胞的增殖和凋亡均无影响,７Ｇｙ能抑制细胞增殖     

亚致死剂量γ射线照射后小鼠脾脏CD95阳性淋巴细胞变化规律的研究

观察γ射线照射后小鼠脾脏淋巴细胞凋亡的变化规律与ＣＤ９５（Ｆａｓ）表达的关系。方法采用ＰＩ染色及双荧光流式细胞术研究不同剂量γ射线照射后不同时间，小鼠脾脏淋巴细胞凋亡及ＣＤ９５表达的规律。结果小鼠脾脏淋巴细胞对不同剂量照射的凋亡敏感性差异有显著性，４Ｇｙ照射后凋亡率最高（在２～６Ｇｙ之间观察），淋巴细胞表面Ｆａｓ的表达随照射后细胞凋亡率的变化而改变。结论脾脏淋巴细胞在辐射后表现出明显的Ｆａｓ介导的凋亡，Ｂ细胞较Ｔ细胞具有更高的辐射凋亡敏感性。     

大剂量γ射线照射后小鼠脾脏淋巴细胞凋亡的病理 …

目的 探讨大剂量＾６０Ｃｏγ射线照射后脾脏淋巴细胞的病理形态学改变。方法 小鼠经６、９、１２、１５及２０Ｇｙγ射线照射,于照后８个不同时间点活杀取材进行光镜及电镜观察。结果 照射后林巴细胞凋亡的发生高峰与照射剂量和照后时间有关,淋巴细胞数量显著减少。结论 照射后脾脏淋巴细胞凋亡的病理形态变化有明显的分期,而在不同剂量组中细胞的死亡方式是有区别的。     

大鼠卵巢局部γ射线照射后的骨形态计量学改变

电离辐射对性腺的损伤已为人们所知 ,但对其产生的骨代谢远后效应研究甚少。早在 6 0年代 ,有人报道用 4 4Ｇｙ与30Ｇｙ的Ｘ射线局部照射大鼠卵巢 ,导致雌激素水平显著下降[1 ,2 ] 。笔者曾以 5 0ＧｙＸ射线局部照射大鼠卵巢[3] ,观察到卵巢辐射损伤后的骨吸收明显增强。在此基础上 ,笔者用5 0Ｇｙγ射线局部照射大鼠卵巢 ,90ｄ后进行血清雌二醇测定和骨组织病理学变化的观察 ,并与去势雌性大鼠和假手术大鼠进行了比较。一、材料和方法1 实验动物 :雌性ＳＤ大鼠 ,5月龄 ,体重 2 6 0～ 2 70ｇ ,由上海必凯实验动物公司提供 (清洁级 ,沪医实验…     

137Csγ射线照射建立成骨细胞衰老模型的研究

用１３７Ｃｓγ射线照射体外培养的成骨细胞，可引起成骨细胞功能、增殖率及形态的退行性改变。一次照射６．０Ｇｙ，成骨细胞的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性的抑制率为２８％、增殖率受抑制达４８．２％，功能与形态改变与自然衰老细胞的改变类似，认为辐射诱导成骨细胞提前进入衰老状态，可作为研究延缓成骨细胞衰老药物的一种细胞模型。     

2例γ射线事故照射追踪观察8例

本文报告 2例γ射线超剂量事故照射后 8年追踪观察结果。一、事故经过某医院放疗科使用山东新华医疗器械厂 1976年生产的ＦＣＤ6 0 Ⅱ型钴 6 0治疗机。 1991年 3月活度为 44 .7ＴＢｑ ,1991年 3月 14日在治疗过程中钴 6 0治疗机出现卡源情况。本文报告的 2例与另一位 (已失访 )一起对钴 6 0治疗机。在开机状态下进行检修 ,随后停止检修请放射防护部门监测 ,3人位置相同受照时间 18ｍｉｎ ,经事故调查组估算剂量 :受照剂量分别为 :例 1眼晶体 5 7～ 7 2ｃＳｖ、甲状腺 8 3～ 10 5ｃＳｖ、性腺 15 7～ 2 0 0ｃＳｖ、红骨髓 1 3～ 1 6ｃ…     

60Coγ射线离体照射诱导人线粒体COXI、ND1和ND6基因表达变化的研究

目的 探讨电离辐射诱导的人线粒体基因COXI、ND1和ND6表达的变化。方法 用⁶⁰Coγ射线(1、3、5、8和10 Gy)照射指数增长期的人淋巴细胞永生化细胞株,8 h后用反转录PCR(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)的方法检测线粒体基因(COXI、ND1和ND6)的表达变化,分析剂量-效应关系;以5 Gy剂量照射后,于不同时点(0.5、4、8、12、24、48和72 h)分析3种线粒体基因的表达变化,观察时间-效应变化。结果 通过量效关系和时效关系方面的研究发现,COXI、ND1和ND6基因表达总体上调,但3种基因又具有其各自的特征:COXI基因除5 Gy外,其他剂量照射后与对照组相比表达增强(F=116.62, P<0.05);ND1基因经1、8、10 Gy剂量照射后,与对照组相比表达增强(F=25.13, P<0.05),5 Gy剂量照射后,除8和48 h两组外,其余各组的表达改变与对照组相比,表达增强(F=223.68, P<0.05);ND6基因经1、8、10 Gy剂量照射后与正常对照组比较,基因表达增强(F=18.51, P<0.05),5 Gy剂量照射后4、8、24、48和72 h与对照组相比表达,明显增强(F=138.91, P<0.05)。结论 电离辐射可以诱导人线粒体COXI、ND1和ND6基因表达的改变,总体表达是增强的。     

电离辐射诱导乳腺癌细胞自噬相关基因DRAM表达的研究

目的 研究电离辐射对乳腺癌细胞株MCF-7自噬相关基因DRAM表达变化的影响.方法 采用GFP-LC3转染法检测自噬泡,实时荧光定量PCR方法检测DRAM基因表达,Western blot方法检测LC3和DRAM蛋白的表达,采用磷酸钙共转染法构建DRAM沉默细胞模型.结果 与假照组相比,8 GyX射线照射后细胞中GFP-LC3表达升高;时间-效应关系表明,在8 Gy照射后,自噬溶酶体蛋白LC3表达在2、4、8、16、24和32 h上升变化显著,各组均高于假照组(F=5.38、8.72、10.63、15.23、20.78和55.23,P＜0.05);DRAM蛋白表达在8 Gy照射后以时间依赖性增加,从2h开始上升,32 h达至最高值(F=116.34,P＜0.05).DRAM沉默细胞模型组中LC3和DRAM蛋白的表达明显低于假照组(F=20.36和40.35,P＜0.05);对DRAM沉默细胞模型组进行8 Gy照射后,DRAM蛋白表达与假照组相比虽有所增加,但仍低于8 Gy照射组;DRAM沉默细胞模型组LC3蛋白的表达也低于照射组,沉默前后差异均有统计学意义(F=50.34,P＜0.05).结论 X射线可能通过激活DRAM基因来促进乳腺癌细胞株MCF-7发生自噬.     

beclin1在辐射诱导的乳腺癌细胞自噬发生中表达的变化

目的 研究不同剂量X射线诱导乳腺癌细胞株MCF-7自噬发生过程中beclin 1表达的变化和作用。 方法 采用实时荧光定量PCR方法检测自噬相关基因MAP1LC3B表达,RT-PCR方法检测beclin 1基因变化,X射线Western blot方法检测beclin 1蛋白表达。结果 MAP1LC3B mRNA量效研究表明,8、16和32 h量效研究均发现表达上调,8、16 h在12 Gy,32 h在8 Gy达到表达峰值,总体表现为表达升高(F =13.831、10.996、17.019, P＜0.05);时程研究表明,2 Gy时程研究发现MAP1LC3B于16 h升高达至峰值(F =16.284, P＜0.01),8 Gy时程研究中32 h升高达至峰值(F =9.030, P＜0.05),12 Gy时程研究中16 h升高达至峰值(F =20.315, P＜0.05)。beclin 1 mRNA量效关系表明,照射后4 h beclin 1在2、4和8 Gy阶段呈剂量依赖增加趋势;8 Gy时间效应关系中发现照射后beclin 1 mRNA的变化呈时间依赖性增加。16 h蛋白量效关系表明,照射后beclin 1表达增加;2 Gy时效关系表明照射后蛋白表达增加。 结论 X射线照射能够诱导乳腺癌细胞株MCF-7发生自噬,beclin 1基因上调表达的变化提示其发挥重要作用。