某国产HIV-1核酸定量检测试剂盒的应用性能评估

目的：对某国产人类免疫缺陷病毒Ⅰ型（HIV-1）核酸定量检测试剂盒（PCR-荧光探针法）的临床应用性能进行评估。方法收集不同H IV感染状态人群的血液样品共计247例,分别使用 H IV-1被评估试剂与已被SFDA批准的对照试剂进行临床检验平行对比。比较两种方法之间的相关性和一致性。对比不符样本用国际公认的Roche公司生产的 HIV-1病毒载量检测试剂进行复核。结果共检测247例样本,被评估试剂与对照试剂检测结果一致的样本有233例,检测结果不一致的样本有14例（其中8例阴阳性结果不一致、6例定量结果对数值差异大于1）,14例不符样本用复核试剂检测确认后,均与被评估试剂检测结果一致。以复核试剂检测结果最终判断：被评估试剂的一致率为100．00％。对177例被评估试剂与对照试剂定量线性范围内样本进行统计分析,定量相关性为0．9671。结论被评估试剂与已上市的国内同类产品在检测功能上具有等效性,被评估试剂灵敏度、定量准确性与Roche检测结果一致性相近,高于对照试剂。     

某国产HIV-1核酸载量试剂与罗氏试剂的对比

目的验证某国产HIV-1 RNA定量试剂的临床适用性,并将该国产试剂与罗氏试剂进行比对检测,以分析二者的一致性和相关性。方法收集2018年9月至2019年1月就诊的HIV感染者或AIDS患者的临床检测血浆样本185份,采用某国产HIV-1核酸检测试剂和罗氏COBAS TaqMan HIV-1Test(V2.0)试剂平行检测血浆HIV-1病毒载量,并对两种试剂的一致性和相关性进行线性回归分析和Bland-Altman分析。结果该国产试剂与罗氏试剂检测结果的阳性符合率为98.71%(95%CI:95.42%～99.65%),阴性符合率为100.00%(95%CI:88.65%～100.00%);一致性分析结果显示,国产试剂Kappa值(SE)为0.96,95%CI:(0.91～1.00),该国产试剂与罗氏试剂定性检测结果高度一致,差异无统计学意义(t=0.35,P0.05);相关性分析显示,两种试剂检测结果具有强相关性(r=0.98),回归方程为Y=1.08 X-0.34(P0.000 1);Bland-Altman分析结果显示,两种试剂具有较高的一致性。结论该国产HIV-1 RNA定量试剂与罗氏试剂在检测结果上具有较好的一致性和相关性,可以满足临床医学决定水平的要求。     

应用NucliSens Easy Q定量检测人类免疫缺陷病毒1型RNA

获得性免疫缺陷综合征（AIDS）是由人类免疫缺陷病毒（HIV）而导致的一种致死性疾病。     

用NucliSens HIV-1 QT试剂盒定量测定精浆中的HIV-1 RNA

目的探讨NucliSens HIV-1 QT试剂盒用于定量测定HIV-1感染者人群精液或精浆中HIV-1的可行性。方法在正常人精液、精浆和血浆中分别添加5个滴度的HIV-1RNA,用NucliSens HIV-1QT测定,观察精液和精浆成分对测定结果有无影响,进一步测定、分析15名HIV-1感染者血浆和精浆中的HIV-1病毒载量。结果发现精液中因含有严重抑制核酸扩增的现象故不能使用NucliSens HIV-1QT,但精浆中未见该抑制现象。用Nu-cliSens HIV-1QT测定分别添加HIV-1RNA的正常人血浆和精浆样本,结果之间差异无统计学意义;所测定的10份正常人精浆样本,未发现假阳性结果。在15名HIV-1感染者中,血浆和精浆的HIV-1检出率分别为80%(12/15)和40%(6/15),病毒载量范围分别为(<250-140000)cp/ml和(<250-46000)cp/ml。结论NucliSens HIV-1QT可用于定量测定HIV-1感染者人群精浆中的HIV-1,精浆和血浆中HIV-1病毒载量之间具有一定的相关性。     

某国产人类免疫缺陷病毒1型核酸定量检测试剂的临床试验研究

目的 评价某国产人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)核酸定量检测试剂(考核试剂)和对比试剂的相关性及一致性.方法 采用国产HIV-1考核试剂和对比试剂,对197例标本进行平行检测.采用相关性分析、Bland-Altman模型等统计方法分析2种检测试剂之间的相关性和一致性.结果 197例标本中该国产HIV-1考核试剂与对比...     

定量检测HIV-1病毒载量室内质量控制的建立和应用

随着我国人类免疫缺陷综合征（AIDS）患者治疗人数的逐年增加。原用于科研定量检测1型人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus-1,HIV-1）的病毒载量的方法已广泛应用于全国各地AIDS抗病毒治疗定点医院的临床实验室。我们利用西门子拜尔HIV-1病毒载量检测试剂盒内剩余标准品制备质控品,建立室内质量控制方法。     

HIV-1实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒的比较实验

目的比较及评价市场上主流的3个进口品牌(A-QIAGEN、B-Applied Biosystems、C-Promega) HIV-1病毒实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒的特异性、灵敏度、稳定性及所需反应时间,确定3者中较优的试剂盒,为临床HIV-1病毒的核酸检测提供方法学参考。方法根据3个品牌试剂盒的说明书,对系列稀释的国内HIV-1 RNA标准品和确证的HIV阴性的标本进行相应的荧光定量RT-PCR平行检测分析,最后将荧光收集值(RFU)均设定为100,结合扩增曲线图、Ct值及相应的分析,比较它们的特异性、灵敏度、稳定性及所需反应时间。结果 3种试剂盒的特异性都是100%,但B-Applied Biosystems试剂盒在灵敏度(比A-QIAGEN、C-Promega试剂盒的检出Ct值提前0. 4-1. 5)、稳定性(特别是低浓度(HIV-1 RNA标本浓度为2. 31×102)时)及所需反应时间上均优于A-QIAGEN试剂盒和C-Promega试剂盒。结论不同厂家检测试剂盒的特异性、灵敏度等方面存在一定的差异,导致同样的标本检测的结果会有一定的偏差,甚至漏检。因此,进行临床检测前需要对这些检测试剂盒进行评估。     

Xpert HIV-1病毒载量检测系统用于HIV-1病毒载量检测的临床价值

目的探讨Xpert HIV-1病毒载量(Xpert HIV-1 VL)检测用于HIV-1病毒载量检测的临床价值。方法采用Xpert HIV-1 VL和Abbott m2000 Real Time检测系统(Abbott m2000)同时检测191份血浆样本的HIV-1病毒载量。采用符合率、卡方检验和Kappa值等统计分析两种检测方法定性检测结果的一致性,采用相关性、回归分析和Bland-Altman模型等统计分析两种检测方法定量检测结果的一致性。结果两种检测方法的阳性符合率、阴性符合率和总符合率均为100%,两种方法检测结果一致性分析的Kappa值为1.00(P<0.001);两种方法检测结果的相关系数为0.9576,回归分析表现出较高的相关性(R2=0.9170),Bland-Altman模型分析显示两种方法检测有95.3%(164/172)的样本在95%一致性界限内。结论Xpert HIV-1 VL用于检测HIV-1 RNA具有很高的灵敏度、准确性和稳定性,且操作简单、方便、安全,适合临床用于对HIV-1患者血浆样本中HIV-1 RNA的检测。     

对五种国产核酸筛查试剂检测HIV-1RNA效果的初步评价

目的 对5种国产HBV/HCV/HIV-1核酸筛查试剂(A、B1、B2、C和D)检测HIV-1 RNA的能力进行初步评价.方法 从我国不同地区收集60份HIV-1感染者样品(包含1份HIV-1感染窗口期样品)及540份HIV阴性样品,将60份HIV-1感染者样品随机分布于540份HIV阴性样品中,按照合并检测模式(pool模式)对该600份样品进行检测,将每种试剂检测结果为阳性的pool分别按说明书进一步拆分和/或鉴别试验.结果 A、B1、B2和C四种试剂检测HIV-1RNA的效果较强,其阴性和阳性符合率均为100%;D试剂则较差,其中2份HIV-1感染者样品(基因型分别为BC和B/B′,HIV-1 RNA含量分别为9.70×102 copies/ml和5.20×103 copies/ml)分别处于2个pool中,该2个pool经D试剂检测,均为HIV-1 RNA阴性.对检测结果为阳性的35个pool进行拆分检测时,D试剂检测1份HIV-1感染者样品(B/B′亚型、HIV-1 RNA含量为1.09×103 copies/ml)为HIV-1 RNA阴性,3份HIV-1 RNA阴性样品为HIV-1 RNA阳性.对于1份HIV-1感染窗口期样品,5种试剂均检测为HIV-1 RNA阳性.结论 A、B1、B2和C四种试剂均有较高的一致性,但D试剂具有一定的假阳性和漏检,应进一步提高质量.     

人类免疫缺陷病毒1型耐药性检测方法及其应用进展

近年来，艾滋病临床治疗失败中的耐药性问题，已经引起了越来越多的关注。在此背景下，耐药性检测逐步成为优化艾滋病联合化疗方案的有力工具。临床医生们能够依据耐药性检测的结果，为艾滋病感染者选择具有最大疗效和最小副作用的抗病毒药物。由于人类免疫缺陷病毒不仅在免疫学和基因水平上可以将其分为两型，而且在流行病水平上，两者也存在着明显的不同。     

中国HIV-1流行毒株的耐药基因变异研究现状

HIV耐药性的产生可能是病毒自发突变和药物压力选择的结果,但已成为维持高效抗逆转录病毒疗法(Highly active antiretroviral therapy,HAART)长期疗效的主要障碍.耐药病毒的出现促进了耐药检测方法的发展,而耐药检测的目的 在于帮助医师根据患者的个体状况选择最合适的有效治疗方法.目前,中国HIV-1流行毒株的耐药产生现状不容乐观.     

HIV-1感染者中HCV混合感染情况分析

目的：调查我国不同地区、通过不同传播途径感染人类获得性免疫缺陷病毒I型（HIV－1）患中丙型肝炎病毒（HCV）的流行情况及不同亚型的分布。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测抗－HIV－1并以蛋白印迹试验（Western blot,WB)进行确认。采用DNA分支放大（bDNA)技术检测HIV－1病毒载量，采用荧光抗体流式细胞检测技术（FACs)作CD4和CD8细胞计数。抗－HCV检测采用ELISA方法。HCV基因亚型的测定采用实时（real-time)聚合酶链反应（PCR）方法。结果：共检测了239例HIV－1感染，抗－HCV阳性率为56．9％（136／239），其中经不同传播途径感染HCV的阳性率分别为：静脉注毒：42．7％（58／136）；经血液：53．7％（73／136）；性接触途径：3．7％（5／36）。静脉注毒（云南和新疆）HCV感染以1，3，4亚型最多，而输血人群（河南省）感染的HCV以1，2亚型为主。结论：HIV－1感染中存在HCV混合感染，我国HCV基因亚型以1型为主。     

不同HIV检测试剂盒检测HIV感染的检测效能评价

目的 探讨3种人类免疫缺陷病毒(HIV)试剂盒检测HIV感染的能力,为HIV早期诊断提供参考。方法 选取2017年3月至2020年7月送至河北省承德市中心血站的12 856份血液标本作为研究对象,使用的3种HIV检测试剂盒(A试剂盒为HIV抗原抗体诊断试剂盒、B、C试剂盒均为HIV抗体诊断试剂盒)对12 856份血液标本进行检测,分析3种HIV检测试剂盒对于HIV检出时间相比于核酸检测天数差异原因及检验效能。结果 B试剂盒、C试剂盒检测HIV的阳转血清盘,检测相比于核酸检测的平均检测天数相当,分别为(16.25±3.04)、(16.75±3.32)d, A试剂盒对于HIV检出时间相比于核酸检测天数最短,为(13.50±3.58)d; 12 856份血液标本中A试剂盒检测的误诊率、漏诊率分别为0.06%、0.00%,B试剂盒分别为0.02%、0.00%,C试剂盒为0.03%、0.00%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 3种试剂盒对HIV感染均有较好的检测效果,HIV抗原检测试剂盒诊断效能与其他2种试剂盒相当,对早期检出HIV具有一定的意义。     

国产ELISA法乙肝五项检测试剂的评价

乙肝病毒标志物检测是临床实验室常规的检测项目，主要为HBsAg、抗-HBs、HbeAg、抗-Hbe、抗-HBc。临床实验室检测多采用ELISA方法。该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点。由于ELISA方法国产乙肝五项检测试剂生产众多，在灵敏度、特异度、稳定性重复性上有着较大的差异。为了解目前ELISA方法国产乙肝五项检测试剂的情况，我们选择三个厂家的试剂进行比对评价。     

治疗前血浆和全血干血斑样品HIV-1 Pol区基因型耐药检测结果比较

目的 比较治疗前静脉血浆和全血干血斑(DBS)人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)Pol区基因型耐药检测结果的差异,并分析DBS样品用于HIV-1基因型耐药检测的可行性.方法 采集44例HIV-1感染者治疗前静脉全血,分别制备全血DBS样品和血浆样品,提取RNA,检测病毒载量.采用逆转录PCR(RT-PCR)扩增Pol区...     

人类免疫缺陷病毒感染急性期的实验室检测进展

人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染急性期患者病毒载量高,传播能力强,是HIV感染的重要传染源.绝大部分急性感染期患者没有或仅有轻微的临床症状,其筛查和诊断往往依赖于实验室检测,但由于检测存在窗口期,HIV感染的早期筛查和诊断存在一定困难.近年来,针对HIV感染急性期...     

HIV初筛实验不同策略的选择及其在临床应用中的评价

目的：回顾分析南京医科大学第一附属医院近5年332例初筛阳性标本使用的多种血清学方法的检测结果,为临床实验室推荐人类免疫缺陷病毒（H IV ）初筛实验的优选方案。方法对2010年1月至2014年4月在南京医科大学第一附属医院就诊者的331968份样本进行 H IV抗体初筛,332例初筛阳性样本用第四代酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂复检,以蛋白印迹试验（WB）结果为金标准,比较分析第三代 ELISA试剂、第四代ELISA试剂以及分别与胶体金组合检测的结果。结果332例H IV抗体筛查阳性样本,经WB试验确证阳性189例。第三代ELISA试剂检测确证阳性符合率为57．27％,第四代ELISA试剂检测确证阳性符合率为89．15％,两者比较,差异有统计学意义（P＝0．00）。第三代ELISA试剂检测漏检1例确证阳性标本和1例确证不确定标本;第四代ELISA试剂检测未发现漏检阳性标本,并检出1例窗口期标本。第四代ELISA与胶体金组合后,确证阳性符合率较第三代ELISA与胶体金组合提高了3．91％。结论第四代ELISA试剂用于 HIV抗体筛查优于第三代 ELISA试剂,尤其是与胶体金的组合,明显提高了H IV检测的确证阳性符合率,并有利于H IV感染窗口期的检测,推荐作为临床实验室 H IV优选筛查方案。     

HIV-1电化学活性-非活性开关分子信标的构建及验证

目的构建人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)电化学活性-非活性开关分子信标(CAs-MB)并验证其结构及功能。方法合成并纯化针对HIV-1 gag基因保守区序列的CAs-MB,用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和循环伏安法(CV)验证其结构,用差分脉冲伏安法(DPV)信号强度评价CAs-MB的识别功能。结果胭脂红酸(CA)单体与CAs-MB FT-IR图的变化证明CA已标记于MB末端,CV图证明CAs-MB电化学活性ON和OFF状态的存在。DPV结果证实其能够在电化学平台上实现对目标序列的特异性识别,且能够区分一个碱基的差异。结论 CAs-MB作为HIV-1 gag基因的特异性识别元件有望用于构建新型HIV-1电化学基因传感器。