乳腺癌C-erbB-2蛋白表达与基因CpG岛甲基化状态和mRNA表达的关系

目的 探讨乳腺癌C-erbB-2蛋白表达与基因CpG岛甲基化状态和mRNA表达的关系.方法 取经病理确诊的52例乳腺癌组织,分别用甲基化特异性聚合酶链反应( MSP)、免疫组织化学法(IHC)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测C-erbB-2启动子CpG岛甲基化状态、C-erbB-2蛋白表达水平和C-er6B-...     

TFPI-2基因CpG岛甲基化与胰腺癌的关系

目的:检测胰腺癌组织组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因CpG岛甲基化的状态,并分析甲基化改变与胰腺癌的关系。方法:应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测45例胰腺癌组织、相应癌旁组织中TFPI-2基因的甲基化状态。结果:胰腺癌组织中TFPI-2基因的甲基化阳性率为71.1%(32/45),明显高于癌旁组织的31.1%(14/45)(P<0.01)。8例正常胰腺组织中均未发生甲基化。TFPI-2基因甲基化阳性率还与胰腺癌的临床分期、组织分化程度、肿瘤直径有相关性(P<0.05)。结论:TFPI-2基因在胰腺癌组织中出现异常甲基化,可能与胰腺癌的发生发展关系密切。     

结直肠癌C-erbB-2基因启动子CpG岛甲基化状态及其与C-erbB-2蛋白表达的关系

目的了解结直肠癌组织C—erbB-2基因启动子区CpG岛甲基化状态、C-erbB-2蛋白表达水平及两者之间的关系。方法取经病理确诊的43例结直肠癌组织和相应癌旁组织，分别用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）和免疫组织化学法（IHC）检测C-erbB-2启动子区CpG岛的甲基化和C-erbB-2蛋白表达水平。结果癌组织和癌旁组织中C—erbB-2启动子区CpG岛甲基化率分别为44．2％和74．4％，差异具有统计学意义（P=0．004）。癌组织和癌旁组织中C—erbB-2蛋白过度表达率分别为67．4％和27．9％，差异具有统计学意义（P=0．000）。C—erbB-2蛋白表达水平与肿瘤分期相关。结直肠癌组织C—erbB-2启动子区CpG岛甲基化状态与C—erbB-2蛋白表达水平呈显著相关（r=0．331，P=0．03）。结论结直肠癌中C—erbB-2基因启动子区CpG岛的低甲基化可能在C—erbB-2蛋白过度表达中起一定作用，有望成为有用的肿瘤分子诊断标记和治疗靶点。     

结直肠癌C-erbB-2基因启动子CpG岛甲基化状态及其与C-erbB-2蛋白表达的关系

目的了解结直肠癌组织C-erbB-2基因启动子区CpG岛甲基化状态、C-erbB-2蛋白表达水平及两者之间的关系。方法取经病理确诊的43例结直肠癌组织和相应癌旁组织,分别用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和免疫组织化学法(IHC)检测C-erbB-2启动子区CpG岛的甲基化和C-erbB-2蛋白表达水平。结果癌组织和癌旁组织中C-erbB-2启动子区CpG岛甲基化率分别为44.2%和74.4%,差异具有统计学意义(P=0.004)。癌组织和癌旁组织中C-erbB-2蛋白过度表达率分别为67.4%和27.9%,差异具有统计学意义(P=0.000)。C-erbB-2蛋白表达水平与肿瘤分期相关。结直肠癌组织C-erbB-2启动子区CpG岛甲基化状态与C-erbB-2蛋白表达水平呈显著相关(r=0.331,P=0.03)。结论结直肠癌中C-erbB-2基因启动子区CpG岛的低甲基化可能在C-erbB-2蛋白过度表达中起一定作用,有望成为有用的肿瘤分子诊断标记和治疗靶点。     

RNA干扰DNA修复蛋白Ku80对乳腺癌基因HER2表达的影响

目的 构建特异性沉默Ku80基因的真核表达栽体,检测其对乳腺癌基因HER2表达的影响.方法 设计2条表达短发夹RNA的互补DNA序列,分别克隆至真核表达载体pGCsi-U6/Neo/DsRed构建shRNA-Ku80,转化大肠埃希菌DH5α菌株扩增后,提取质粒测序分析,以相同的方法构建并鉴定Ku80基因的真核表达载体pEGFP-N1-Ku80;将2种shRNA-Ku80分别与pEGFP-N1-Ku80共转染HEK293细胞株,通过流式细胞仪检测荧光强度筛选高效敲减靶点,并在基因和蛋白水平观察抑制Ku80对乳腺癌基因HER2表达的影响.结果 成功构建Ku80特异性shRNA表达载体,shR-NA-Ku80对靶点Ku80敲减效率达到59.50％,抑制Ku80表达使乳腺癌基因HER2在基因和蛋白水平明显降低.结论 成功构建shRNA-Ku80载体,在体外可有效抑制Ku80的表达,使癌基因HER2的表达明显下调,提示Ku80有望成为乳腺癌治疗的基因靶点.     

白血病细胞孕酮受体双启动子CpG岛甲基化的实验研究

白血病细胞存在多种基因启动子高甲基化，如雌激素受体(estrogen receptor，ER)基因。孕酮受体(Progesterone renceptor，PR)作为功能性ER，其基因有两个亚型(PRA和PRB)，其表达受两个启动子调控。为探讨白血病细胞中PR基因双启动子甲基化状态及5′-杂氮-2′-脱氧胞苷(5′-Aza-Dc)对其脱甲基化的作用，以HL-60、K562和Jurkat细胞为样本，观察了5′-Aza-Dc对白血病细胞株作用前后的PR基因甲基化状态及PR mRNA的表达情况。     

ABO基因启动子CpG岛甲基化与白血病的相关性

近年来研究发现ABO血型与许多疾病的发生发展相关，某些肿瘤导致A、B血型物质减少的现象已日益引起关注。本研究探讨ABO基因启动子CpG岛甲基化与白血病的相关性。采用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测了不同血型的健康人群和各种血液病患者外周血红细胞表面ABH抗原的相对含量，用PCR和MSP—PCR分别检测血液病患者和健康人ABO基因启动子DNA序列和CpG岛甲基化，以及ABO基因启动子-102位点的甲基化。结果发现，白血病患者均出现不同程度的A、B抗原减少；通过对比检测健康人和患者的ABO基因启动子序列，未发现有序列的不同，说明启动子序列高度保守；利用重亚硫酸盐对DNA样本进行修饰后，通过对健康人和患者的ABO基因启动子序列进行扩增和测序，发现健康人和再生障碍性贫血患者在ABO基因启动子的CpG岛区没有甲基化的位点，而急性髓性白血病（AML）、急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性粒细胞白血病（CML）和部分骨髓增生异常综合征（MDS）患者在位置为-102、-101、-100、-99和-97位置的C碱基均有甲基化的现象。结论：甲基化是造成白血病患者AB抗原下降的原因；-102、-101、-100、-99和-97这几个甲基化位点有可能是白血病的特异性表现；针对-102住点检测结果提示-102位点是否甲基化有可能作为白血病鉴别诊断中一个有意义的分子标识物。     

结直肠癌BRAF基因突变与CpG岛甲基化的相关性研究进展

结直肠癌在恶性肿瘤发病率中排名前三位,其致死率居高不下.其中原癌基因和抑癌基因发生经典遗传学和表观遗传学改变是肿瘤发生的重要分子机制.而CpG岛甲基化是表观遗传学重要改变方式之一,其主要表现为基因组中的启动子区CpG岛发生DNA甲基化,如果这种甲基化发生在抑癌基因上,会使抑癌基因功能失活,从而诱发肿瘤.基因组广泛发生C...     

拮抗Wnt信号通路的CpG岛甲基化表型在肝癌预后中的临床价值

目的评价CpG岛甲基化表型（CIMP）在肝癌预后中的价值。方法收集108例肝癌（HCC）、癌旁组织、血浆及60例健康体检者血浆,采用甲基化特异性PCR方法对所有标本APC,SFRP-1,DKK-3和E-cad基因表达进行分析。结果APC在肝癌组织阳性中阳性表达率为44．44％,血浆为24．07％,APC血浆标本约为组织标本阳性表达的54．17％;SFRp-l则分别为37．04％和28．7％,血浆标本约为组织标本阳性的77．5％;DKK分别为36．1％和23．15％,血浆标本约为组织标本阳性的64．1％;E-cad分别为34．3％和16．67％,血浆标本约为组织标本阳性的48．65％。在肿瘤组织中CIMP状态与乙型肝炎表面抗原阳性与否、甲胎蛋白浓度以及肿瘤淋巴结转移有明显差异（P〈O．05）。丙型肝炎病毒抗体、肝硬化无明显差异。而在血浆中也发现CIMP状态与乙型肝炎表面抗原阳性与否、甲胎蛋白浓度以及肿瘤淋巴结转移有明显差异（P〈O．05）,与丙型肝炎病毒抗体、肝硬化无明显差异。经过一年随访后发现CIMP阳性组与CIMP阴性组在转移和复发上有明显不同。结论血浆中CIMP的表达可以作为晚期肝癌预后不良的分子标志。     

基因启动子区域CpG岛异常甲基化与急性髓系白血病的研究进展

人类的主要表观遗传学修饰方式是DNA甲基化,而功能基因启动子区域CpG岛的高度甲基化能够使该基因沉默.本文选择在急性髓系白血病(AML)中启动子区域CpG岛异常甲基化水平高、对AML患者的预后有显著影响的数个功能基因(CDKN2B/P15,WNT5A,MEG3,ESR1和DBCl)进行介绍,以期为临床评估AML患者的治疗反应和预后提供有潜力的综合检测指标,并为甲基化转移酶抑制剂治疗AML的机制研究提供一些研究思路.     

EGFR、HER2、VEGF在胃癌组织中的表达及相关因素分析

目的探讨胃癌组织中EGFR、HER2、VEGF的表达特点及影响其表达的相关病理学因素。方法应用免疫组织化学法检测221例胃癌组织中EGFR、HER2、VEGF的表达,并结合其临床病理特点进行分析。结果 EGFR、HER2、VEGF在胃癌组织中的阳性表达率依次为87/221（39.4%）,86/221（38.9%）,111/221（50.2%）,三者的表达与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小无关,而与肿瘤分化程度、临床分期密切相关。结论 EGFR、HER2、VEGF的表达参与胃癌的生长、侵袭和转移过程。三者的联合检测可作为判断胃癌预后、筛选高危转移患者的有效指标;同时,也可用于指导胃癌的靶向药物的选择。     

胃癌中多基因甲基化状态及其表达的研究

目的了解胃癌中p16、E-cadherin、Runx3、DAPK和CHFR基因启动子CpG岛的甲基化状态,并探讨基因异常甲基化与mRNA表达的关系及其意义。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测12例胃癌患者癌组织及其相应的癌旁正常组织中5种基因的甲基化状态,以12例胃镜活检的正常胃组织作为对照,采用RT-PCR方法相应检测了5种基因的mRNA表达水平。并分析每种基因甲基化程度与表达水平之间的关系。结果胃癌组织中,p16、E-cadherin、Runx3、DAPK和CHFR基因的甲基化率分别为41.7%、8.3%、58.3%、33.3%和58.3%,相应的癌旁正常组织中,p16、E-cadherin、Runx3、DAPK和CHFR基因的甲基化率分别为8.3%、0.0%、8.3%、8.3%和16.7%,且75%的胃癌组织中至少有一种基因甲基化,显著高于癌旁正常组织25%(P<0.05),而健康对照组织中无基因甲基化,在甲基化的胃癌组织中均无p16、E-cadherin和DAPKmRNA表达,而癌旁正常组织、非甲基化的癌组织中均有其表达。结论胃癌中多基因启动子CpG岛高甲基化是一个频繁的事件,并且基因启动子高甲基化与其mRNA表达缺失有关,这可能参与了胃癌的发生发展。     

HER2阳性乳腺癌患者ER表达状态与高频超声及SWE特征的相关性研究

目的:探讨人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor 2,HER2)表达阳性的乳腺癌患者,其雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达状态与高频超声及剪切波弹性成像(shear wave elastography,SWE)图像特征的相关性.方法:选取2019年3月—...     

急性髓系白血病E-cadherin基因表达和CpG岛甲基化状态的研究

目的 探讨急性髓系白血病（AML）患者中上皮钙黏附素（E-cadherin）基因表达及其甲基化状态。方法 分别用RT-PCR和流式细胞术方法检测55例AML患者骨髓细胞和7份正常对照骨髓细胞中E—cadherin基凶和蛋白的表达，并用甲基化特异性PCR方法分析E—cadherin基因5’端CpG岛的甲基化状况。结果 55例AML患者骨髓细胞中E-cadherinmRNA和蛋白表达阳性率分别为23．6％和18．2％，较正常对照组明显下调（P值均〈0．01）；E—cadherin基因5’端甲基化的阳性率为69．1％。E-cadherin mRNA和蛋白表达阴性的31例患者中，29例（93．5％）E—cadherin甲基化阳性，其蛋白水平和mRNA表达水平与启动子甲基化呈明显负相关（P〈0．01）。7份正常对照骨髓细胞E—cadherin mRNA和蛋白表达均为阳性，E—eadherin基因的CpG岛无明显甲基化。结论 AML的粒系分化成熟障碍可能与E—cadherin基因表达下调有关。5’端CpG岛的甲基化可能影响E-cadherin基因表达。     

恶性血液病细胞系分泌型卷曲相关蛋白基因启动子CpG岛甲基化状态的检测及意义

为了研究分泌型卷曲相关蛋白（secreted frizzled—related protein,SFRP）家族基因启动子CpG岛的甲基化状态,探讨SFRP基因启动子区CpG岛的异常甲基化状态与恶性血液病发病机制的可能联系,采用甲基化特异性PCR（Methylation—specificPCR,MSP）的方法检测了9种恶性血液病细胞系及正常人外周血单个核细胞中sFRP基因启动子区的甲基化状态。结果显示：9种恶性血液病细胞系中SFRP1、2基因启动子区均呈高甲基化状态,CA46、HL60和U937细胞中的SFRP4基因以及U266细胞中的SFRP5基因启动子区呈部分甲基化状态,其他细胞系SFRP4、5基因启动子均呈完全甲基化状态。正常人外周血单个核细胞中SFRP1、2,4、5基因启动子区均呈非甲基化状态。结论：SFRP基因启动子区异常甲基化模式与恶性血液病的发生密切相关。SFRP基因启动子区的甲基化状态有可能成为恶性血液病新的分子诊断标记物。     

性激素受体和人类表皮生长因子受体2在乳腺癌原发灶与腋窝淋巴结转移灶的表达研究

目的：研究雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人类表皮生长因子受体2（HER-2）在乳腺癌原发灶及同期腋窝淋巴结转移灶之间的关系。方法选择2010年1月至2012年12月郑州大学附属肿瘤医院72例初治单侧乳腺癌同期腋窝淋巴结转移手术治疗患者为研究对象,采用免疫组织化学法检测其ER、PR和 H ER-2在原发灶及腋淋巴结转移灶的表达情况。结果 ER、PR、HER-2在原发灶与转移灶中的表达差异无统计学意义（ P＞0．05）;ER、PR在不同分期肿瘤之间的差异无统计学意义（P＞0．05）,而HER-2在Ⅲ期乳腺癌原发灶及腋窝淋巴结转移灶中的表达明显高于Ⅱ期乳腺癌原发灶,差异有统计学意义（P＜0．05）;导管癌和小叶癌ER、PR、HER-2的表达差异无统计学意义（P＞0．05）。结论乳腺癌患者的激素受体表达状况是影响患者预后的重要因素,也是内分泌治疗的重要指标。H ER-2与肿瘤分期相关,对于H ER-2阳性患者,应及早治疗,可有效改善患者预后。     

不同阶段HER2阳性乳腺癌分层治疗的要点解析

近年来抗HER2药物临床研究不断取得突破性进展，显著改善了HER2阳性乳腺癌患者的预后，改变了乳腺癌的诊疗模式。2020版《中国临床肿瘤学会（CSCO）乳腺癌诊疗指南》在HER2阳性乳腺癌的术前新辅助治疗、术后辅助治疗以及复发转移治疗部分做出重要更新，针对不同阶段患者特征分层给予治疗推荐，规范乳腺癌临床诊疗，提高患者生存率，改善患者生存质量。     

Her-2和Ki67在浸润性乳腺癌中的表达和临床意义分析

目的：探讨人类表皮生长因子受体-2和Ki67在浸润性乳腺癌中的表达情况及临床意义。方法：选择2018年6月~2019年4月经手术切除的浸润性乳腺癌组织65例及其距癌组织5 cm以上的癌旁正常乳腺组织,采用免疫组织化学法检测人类表皮生长因子受体-2和Ki67表达,分析人类表皮生长因子受体-2和Ki67在浸润性乳腺癌中的表达情况,探讨人类表皮生长因子受体-2和Ki67与浸润性乳腺癌临床病理特征的关系及二者相关性。结果：浸润性乳腺癌组织中人类表皮生长因子受体-2阳性表达率（58.46%,38/65）、Ki67阳性表达率（64.62%,42/65）,高于癌旁正常乳腺组织人类表皮生长因子受体-2阳性表达率（0.00%,0/65）、Ki67阳性表达率（0.00%,0/65）（P＜0.05）;人类表皮生长因子受体-2和Ki67在浸润性乳腺癌中的表达与TNM分期、淋巴结转移相关（P＜0.05）,与年龄、肿瘤直径无关（P＞0.05）;人类表皮生长因子受体-2和Ki67在浸润性乳腺癌中的表达呈明显正相关（r= 0.369,P＜0.05）。结论：人类表皮生长因子受体-2和Ki67表达与浸润性乳腺癌TNM分期、淋巴结转移相关,且二者呈明显正相关,联合检测能够为患者预后判断提供科学依据。     

乳腺癌组织中HER-2、VEGF和Ki67的表达及临床意义

目的探讨人表皮生长因子受体-2(HER-2)、血管内皮生长因子(VEGF)和Ki67在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系。方法采用免疫组化法检测49例乳腺癌患者组织中HER-2、VEGF和Ki67的表达。结果 HER-2、VEGF和Ki67在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为36.7%、69.4%、79.6%;HER-2在乳腺癌组织学分级和淋巴结转移中的表达差异有统计学意义(P<0.05);VEGF在乳腺癌淋巴结转移中的表达有显著差异(P<0.05);Ki67表达在乳腺癌组织学分级中的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HER-2、VEGF和Ki67与乳腺癌的发生、发展密切相关,联合检测可作为判定乳腺癌预后的评估指标。