同步检测血清和唾液中的棘球蚴抗原及其特异性抗体

应用ＭｃＡｂ－Ｓａｎｄｗｉｃｈ－ＥＬＩＳＡ（夹心法）及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ（点免疫法）同步检测了包虫病病人的不同抗原、抗体样品,结果表明ＭｃＡｂ夹心法对患血清、唾液抗原阳性检出率分别为８０．４３％和６０．８７％;点免疫法对血清、唾液抗体检出率为８６．９６％和７８．２６％,均明显高于对照组（Ｐ〈０．０５）,对抗原,抗体的同步检测结果进行显性及相关性分析,得出血清抗原检测可取代以往的血清抗体检测,唾     

单克隆抗体74D_(11)、SJA_(111)检测慢性日本血吸虫病循环抗原的研究

本研究用双抗夹心ＥＬＩＳＡ法检测慢性日本血吸虫病人血清循环抗原，观察血吸虫感染家兔血清循环抗原的动态变化。该方法采用兔抗ＡＷＡ－ＩｇＧ作包被抗体，抗日本血吸虫成虫和虫卵单抗ＳＪＡ１１１和７４Ｄ１１组合作Ⅱ抗，１７２例经粪孵毛蚴确诊的血吸虫病人中，１３６例循环抗原阳性（７９．１％），其中轻度（毛蚴数＜５只／２０克粪）、中度（６－２０）、重度（大于２０）感染者循环抗原阳性率分别为７３．４％、８７．７％、９２．８％，检测６５例健康献血员，２０例肺吸虫病人，１２例华支睾吸虫病人，１０倒包虫病人，交叉反应率依次为１．５％、５％、０％、０％，４２例经吡喹酮治疗后的血吸虫病人用该方法复查，治后３月和６月随访粪孵毛蚴阴转者中，循环抗原阴转率分别为７８．０％和９２．１％，考核疗效明显优于检测循环抗体。用单抗ＳＪＡ１１１检测感染家兔循环抗原动态变化，循环抗原于感染后３—４周可检出，７周达高峰，以后逐渐消退，而循环抗体（ＩｇＧ）推迟１周出现，８－９周达高峰。实验结果表明，血吸虫病血清ＣＡｇ阳性率与感染度有关，可在早期检出，检测方法具有较高敏感性和特异性，可用于早期诊断和疗效考核。     

单克隆抗体反向间凝试验的建立及其在日本血吸虫病诊断上的应用

ＭｃＡｂ－Ｇ３－ＲＩＨＡ诊断血吸虫病、采用绵羊红细胞，经戊二醛固定、鞣酸鞣化，致敏纯化肠相关ＭｃＡｂ，然后冷冻干燥用于检测宿主血清中循环抗原，并以ＩＨＡ对比检测ＣＡｂ。以之检测６３０份样本，其中正常人２２４例，ＲＩＨＡ假阳性率为４．４％，ＩＨＡ为４．９１％；急性血吸虫病１６５例，ＲＩＨＡ阳性率９８．７９、ＩＨＡ９９．３９％；疫区人群２４１份，ＲＩＨＡ阳性率７１．７８％，ＩＨＡ为８４．２３％；其中粪检阳性者ＲＩＨＡ阳性率８６．６７％（６５／７５），粪检阴性者的阳性率是６５．０６％（１０８／１６６），而ＩＨＡ的阳性率分别为９６．０％（７２／７５），７８．９２％（１３１／１６６），ＥＰＧ≥３０的慢性血吸虫病者ＲＩＨＡ及ＩＨＡ阳性率均为１００．０％，当ＥＰＧ＜３０时，ＲＩＨＡ和ＩＨＡ阳性率分别是６９．２３％、９２．３１％。实验结果显示：急性血吸虫病人群循环抗原ＧＭＲＴ为慢性患者的２１．７６倍，不同感染度的慢性患者循环抗原ＧＭＲＴ较为接近。急、慢性血吸虫病血清中ＣＡｂ显著多于循环抗原。本法操作简便，有较好的特异性与敏感性，适用于血吸虫病循环抗原的检测。     

应用McAb法检测包虫病人尿液抗原

用ＭｃＡｂ－Ｓａｎｄｗｉｃｈ－ＥＬＩＳＥ（夹心法）及ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ（点免疫法）同步检测了４６例包虫病人及４２例正常人的不同抗原样品,结果表明：ＭｃＡｂ夹心法对患血清,尿液抗原阳性检出率分别为：８０．４３％、７８．２６％,明显高于对照组（Ｐ〈０．０５）,且血清与尿液抗原检测结果无差别（Ｐ〉０．０５）,具有相关性（Ｐ〈０．０５）;点免疫法抗原检出率分别为７３．９１％、５８．７９％。两法     

酶联免疫印渍法检测脑囊虫病人循环抗原的研究

用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测脑囊虫病人血清中ＣＡｇ，并与ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ进行了比较，其阳性率分别为８９．２％和８１．１％。４０例正常人，３０例单纯绦虫病患者及２９例包虫病人血清，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测囊虫ＣＡｇ，除１例包虫病患者呈轻度交叉反应外均为阴性。结果表明本法具有高特异性与敏感性。对５７例接受阿苯达唑治疗的脑囊虫病人，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ法及ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ于治疗后１年内检测血清中ＣＡｇ，累计检出率分别为４３．９％及２２．８％。表明ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ法测ＣＡｇ具有更好的疗效考核价值。     

单克隆抗体Dot－ELISA检测包虫病人循环抗原的研究

用单克隆抗体－斑点酶联免疫吸附试验（ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测４６例确诊包虫病患者血清循环抗原,３５例呈阳性反应,阳性率为７６．０９％。１４例猪囊虫病人,５０例健康人血清均为阴性,上述结果表明本方法具有较好的敏感性和特异性,而且操作简便,试剂用量少,肉眼判断结果,可用于包虫病的诊断和疗效考核。     

斑点免疫金银染色与Dot—ELISA检测抗弓形虫抗体的对比研究

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１：３８４及１：     

~（99m）Tc－ccM4（鼠／人嵌合抗体）胃癌放射免疫显像研究

采用~（９９ｍ）Ｔｃ－ｃｃＭ４ＭｃＡｂ对１０例胃癌病人，４例非胃癌病人进行放射免应显象（ＲＩＩ）研究，观察了血清ＴＡＧ－７２抗原量、抗体注入量、组织类型和细胞反应性对ＲＩＩ阳性检出率的影响。注入（９９ｍ）Ｔｃ－ｃｃＭ４（５５５～１４８０ＭＢｑ／０．５～１．５ｍｇ）后，胃癌阳性率６０％，肝转移癌阳性率５０％，全部良性病变均显示阴性。最佳显象时间为注入抗体后８ｈ。给予一定量抗体后，增加抗体用量并不能提高ＲＩＩ的阳性率。血清ＴＡＧ－７２抗原含量与ＲＩＩ肿瘤阳性检出率明显相关。     

COMPARATIVE STUDY ON DETECTION OF ANTI-TOXOPLASM A GONDII ANTIBODIES BY USING DOT-ELISA AND DOT-IMMUNOGOLD SILVER STAINING

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１∶３８４及１∶２１８（１∶２０－１∶２５６０）。用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测，有２３份血清抗体滴度高于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，有８份低于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。二种方法所测抗体滴度呈直线正相关关系（ｒ＝０．６０８，Ｐ＜０．０１）。二种方法检测其他寄生虫感染者和对照血清，假阳性率分别为５．９５％及１３．８９％。Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ操作流程和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ相似，但敏感性、特异性均优于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，前者不使用对人体有害的底物，有较好的推广前景。     

识别血吸虫成虫多肽表位单克隆抗体细胞株的建立及用…

作者获得１株特异的抗血吸虫成虫２０－２４ｋＤａ蛋白多肽表位的杂交瘤细胞株，分泌ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１，腹水效价１．２×１０＾６。将ＳｊＡ１１１ ＭｃＡｂ－ＨＲＰ结合物用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测４９９例慢性血吸虫病患者的循环抗原，阳性者３９０例（７８．１６％）；２５例肺吸虫病人，３６例华支睾吸虫病人及１３２例正常人血清中，仅１例肺吸虫病人出现交叉反应。ＣＡｇ的检出率和阳性血清滴度倒数的几何均值（ＧＭＲＴ）     

单克隆抗体夹心ABC-ELISA检测包虫病人循环抗原

应用生物素标记单克隆抗体进行夹心ABC-ELISA检测包虫病人血清循环抗原(HcAg),共检测包虫病人血清103份,62价呈阳性(60.19％);检测囊虫病人血清22份,其它寄生虫病血清54份,正常人血清101份,均未出现假阳性反应。常规ELISA血清抗体阴性的10例包虫病人HcAg 5例呈阳性。HcAg的检测对血清抗体阴性的包虫病人具有辅助诊断意义。     

应用单克隆抗体ELISA检测包虫病人循环免疫复合物的研究

应用抗包虫单克隆抗体F1建立了检测包虫病人循环免疫复合物和解离抗原的ELISA法。102例包虫病人中CIC阳性率为50％(51/102),其中手术前检出率为62.62％(33/53),手术后检出率为36.73％(18/49)。二者差异显著(P<0.005)。用PEG沉淀的免疫复合物经尿素解离后检测包虫抗原的阳性率为58.82％(60/102)。CIC与解离抗原二者累积阳性率达到86.27％(88/102)。表明在包虫病人中CIC的存在是普遍的。F1单克隆抗体ELISA法在检测包虫病人CIC和解离抗原上有极高的敏感性,因而证明F1单克隆抗体所识别的抗原表位是形成CIC的主要抗原成分。在IgG型CIC阳性的血清中解离抗原的检出率仅为48.1％(23/51)。可能是由于IgG抗体的高度亲和力,由其形成的CIC解离效率低。在IgG-CIC阴性血清中,检出解离抗原的阳性率高达72.5％(37/51),证明了在相当部分包虫病人血清中可能存在着IgE和IgM型CIC。解离抗原阳性率高表明这类CIC容易解离。在17例特异性IgG抗体阴性的包虫病人中CIC阳性者10例(58.82％),解离抗原阳性者9例(52.94％),二者累积阳性率为76.47％(13/17)。说明CIC与解离抗原的检测在IgG抗体阴性的包虫病人诊断上有实际意义。     

应用特异单克隆抗体测定猪囊尾蚴病人血清和脑脊液中的循环抗原

我们应用特异的抗猪囊尾蚴抗原的单克隆抗体(CCy1),建立了单克隆抗体抑制性ELISA方法以测定囊尾蚴病患者的循环抗原(CAg)。测定灵敏度为ng水平。83例囊尾蚴病患者血清的CAg阳性率为71.1％。其范围为0.16-128μg/ml。对41例囊尾蚴病患者,同时测定了血清和脑脊液中的CAg。单项或两项阳性的总阳性率为90.2％。114例正常人血清、107例其它寄生虫病患者(包括30例包虫病患者)的血清及10例非寄生虫病患者的脑脊液的CAg量均为零。有23例囊尾蚴病患者治疗半年到1年后,有21例抗原浓度为零。另2例分别为0.64μg/ml和1.6μg/ml。表明测定CAg不仅可以确定活动性囊尾蚴感染,而且可考核疗效。     

Detection of specific circulating antigen, immune complexes and antibodies in human hydatidosis from Turkana (Kenya) and Great Britain, by enzyme-immunoassay

Circulating antigen, specific immune complexes (IgG and IgM) and specific antibodies (IgG, IgM, IgE and IgA) were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in the sera of hydatid (Echinococcus granulosus) patients from Turkana (Kenya) and the UK. Specific IgG and IgM antibodies predominated in current UK hydatid infections, while all classes of specific antibodies were lower in the Turkana patients. Circulating antigen, detected in 3% polyethylene glycol (PEG) precipitated complexes, using peroxidase conjugated hyperimmune human hydatid IgG (Fab) was more specific in ELISA than either antibody or immune complex assays where peroxidase conjugated anti-human IgG was used. Anti-human immunoglobulin ('rheumatoid' factor) was not detected in hydatid sera. Serum antigen, specific IgM immune complexes and specific IgM antibodies were associated with UK cases of current hydatid infection in contrast to patients with previous histories of hydatidosis. In 3 hydatid patients (from UK) levels of circulating antigen and specific IgM immune complexes rapidly declined within 1-4 months after surgical cyst removal. The detection of specific IgG and antigen in PEG precipitated immune complexes from false-negative/low responder Turkana hydatid sera, suggests that antibody 'mopping' by specific antigen may be occurring. After SDS-PAGE/immunoblotting analysis, antigen of mol. wt 67 000, present in hydatid cyst fluid and protoscoleces, was identified as putative circulating antigen in 3% PEG precipitates of sera from albendazole treated hydatid patients.     

包虫病人循环免疫复合物的初步研究

用包虫病人血清与亲和层析纯化的包虫病抗原制成人工免疫复合物,证实了可溶性免疫复合物主要为抗原轻度过剩的复合物成分。提示其具有致病的作用。用PEG沉淀法检测49例包虫病人血清免疫复合物的阳性率为22.45％。用Pernice法检测特异性免疫复合物的阳性率仅为8.16％。PEG沉淀物经8M尿素解离后,包虫抗原的检出率为20.4％。36例肝包虫病人pEG沉淀法阳性者10例(27.77％)尿素解离物中检出抗原者9例(25％)。8例肝包虫病人用pEG沉淀法未检出阳性,而解离物中检出抗原者1例(12.5％)。经IHA和间接ELISA法未检出血清抗体的包虫病人中,在pEG沉淀的解离物中检出抗原者各为18.18％(4/22)和10％(1/10)认为在血清pEG沉淀的解离物中检测包虫抗原是测定特异性免疫复合物的较好方法。     

纯化抗原和粗抗原诊断包虫病的效果比较

目的比较纯化细粒棘球蚴囊液抗原和囊液粗抗原诊断包虫病的效果。方法用 Burstein法纯化抗原 ,与粗抗原平行同步检测包虫病病人、健康人及其它寄生虫病病人血清 ,以标化阳性预告值 ( SPPV) ,标化阴性预告值 ( SNPV) ,标准化准确度 ( SAc)等计算综合积分指数 ( SII)。结果两种抗原检测包虫病病人与健康人 ,其 SII值 :纯化抗原为 96 .0 % ,粗抗原为 95 .5 %。包虫病与其他寄生虫病 ,其 SII值 :纯化抗原为 94 .9% ,粗抗原为92 .8%。结论表明 Burstein法纯化抗原在诊断包虫病的质和量上均优于囊液粗抗原。     

棘球蚴病CAb、CAg与CIC检测结果的评价

对棘球蚴病患者用ABC-ELISA法检测CAb,ABC-夹心双抗体法和Pernice法分别检测CAg和CIC,阳性率分别为87.0％(40/46)、15.6％(7/45)和17.8％(8/45)。在检测CAb阴性的6例中CAg阳性者4例,表明CAb与CAg同时检测可提高阳性检出率达95.6％(43/45)。 CAb阴性病例主要是肺棘球蚴病,占83.3％(5/6)。CAg的检出率仅15.6％,但特异性高,未出现交叉反应和假阳性反应。检测CIC不但检出率不高,而且非特异性反应与检测CAb时相似。     

斑点—ELISA和独特型／抗独特型抑制试验...

A monoclonal antibody (designated 8SE) against membrane antigen of adult Schistosoma japonicum labeled with HRP was used in dot-ELISA (direct method) to detect schistosomal circulating membrane antigen. Sera from 48 parasitologically confirmed schistosomiasis cases were tested, 39 (81.3%) were positive. No false positive reaction was found in sera from 24 healthy controls. No cross reaction was detected in sera from clonorchiasis or paragonimiasis in 18 cases each. This results suggest that circulating membrane antigen does exist in patients with schistosomiasis and it might be used as a complementary method for diagnosis of schistosomiasis. A preliminary result of idiotype/antiidiotype interaction inhibition reaction for detecting circulating membrane antigen was also presented.