低分子质量肝素联合更昔洛韦体外抗人巨细胞病毒的作用

目的 研究低分子质量肝素(LMWH)联合更昔洛韦(GCV)体外抗人巨细胞病毒(HCMV)感染的作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定LMWH联合GCV对人胚肺成纤维细胞(HELF)的最大无毒质量浓度(TC0).应用体外细胞培养技术建立HCMV-AD169感染HELF模型.固定联合药物中LMWH的TC0(625.00 mg·L-1),设LWMH 625.00 mg·L-1、GCV 35.00 mg·L-1、GCV 17.50 mg·L-1、GCV 8.75 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 35.00 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 17.50 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 8.75 mg·L-1 7个不同用药组,分别干预HCMV感染细胞模型,使用MTT法检测各组细胞存活率,观察感染细胞特征性细胞病变(CPE),同时应用荧光定量PCR法检测用药后各组HCMV的载量.结果 联合药物的TC0中GCV的质量浓度为375.00 mg·L-1,LMWH的质量浓度为625.00 mg·L-1.当HCMV AD169浓度为100倍半数组织培养感染量(TCID50)感染HELF时,LMWH和GCV均可提高受染细胞存活率,降低受染细胞的HCMV DNA的拷贝数;当固定LMWH的TC0,与3种不同质量浓度GCV配伍时,均在HELF上有明显的抗HCMV的生物活性,并显示配伍后的抑制作用明显大于对应质量浓度单用GCV的抑制作用(P<0.01);当联合用药中GCV剂量减半时与全量应用GCV时的抗HCMV效果相同[即GCV 35.00 mg·L-1组与联合用药LMWH 625.00 mg·L-1+GCV 17.50 mg·L-1组的病毒抑制率和DNA拷贝数比较差异无统计学意义(P>0 05)];且联合用药对细胞的毒性试验结果及显微镜下观察细胞形态变化显示,随着联合用药中二者药物质量浓度的下降,细胞存活率升高,对细胞的毒性作用减弱.结论 LMWH联合GCV具有良好的体外抗HCMV作用,二者具有协同抗病毒作用.     

孕前接种人巨细胞病毒pp65 DNA疫苗对阻断小鼠人巨细胞病毒宫内传播的效果

目的探讨构建的人巨细胞病毒(HCMV)pp65 DNA疫苗能否阻断HCMV宫内垂直传播及其免疫机制。方法24只6～8周龄健康雌性Balb/c小鼠随机分为A、B二组,每组12只。A组为疫苗组,B组为对照组。A组于0、2、4周各注射pp65DNA疫苗200μg,B组同期注射9g/L盐水0.3mL。末次接种后,各组与雄鼠配笼,妊娠d3孕鼠分别注射HCMVAD169株悬液,d20仔鼠经剖宫产娩出。荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定孕鼠血清HCMVDNA载量,应用流式细胞仪技术、放射免疫法、酶联免疫吸附(ELISA)法测定其血清CD3 、CD4 、CD8 及IL-2、IFN-γ水平,比较二组间差异;比较二组孕鼠死胎率及1周内仔鼠病死率、仔鼠脑组织病理改变及血清HCMVDNA检出率。结果1.A组孕鼠死胎率及1周内仔鼠病死率分别为13.4%、3.45%,明显低于B组(54.2%、40.74%),其差异有显著性(Pa<0.01);2.A组孕鼠血清HCMVDNA拷贝数(100mg)-1为932.80±89.62,明显低于B组(387547.6±49721.07)(P<0.01);3.A组孕鼠血清CD3 、CD4 、CD8 、IL-2、IFN-γ水平明显高于B组,差异均有显著性(Pa<0.01);4.B组仔鼠脑组织有明显病理改变,A组则无;5.A组仔鼠血清HCMVDNA检测均阴性,B组检出8/12例阳性。结论pp65DNA疫苗可能通过增强孕鼠的免疫功能,尤其是细胞免疫水平阻断HCMV宫内垂直传播。     

肌苷对Tourette综合征大鼠脑组织多巴胺D2受体和多巴胺转运蛋白的影响

目的 研究肌苷对Tourette综合征(TS)大鼠脑组织多巴胺D2受体(DRD2)和多巴胺转运蛋白(DAT)的影响,探讨肌苷治疗TS可能的作用机制.方法 将40只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组(氟哌啶醇0.5 mg·kg-1)、联合用药组(氟哌啶醇0.25 mg·kg-1+肌苷320 mg·kg-1)、肌苷组(肌苷320 mg·kg-1),每组8只.采用亚氨基二丙腈(IDNP)腹腔注射法建立TS大鼠模型.氟哌啶醇和(或)肌苷给药28 d后通过大鼠刻板行为评分、酶联免疫吸附法、原位杂交法,研究肌苷对TS模型大鼠刻板行为、大鼠脑组织DRD2、DAT水平的影响以及DRD2 mRNA表达情况.结果 1.肌苷组大鼠刻板行为评分低于模型组(P<0.01),高于阳性对照组(P<0.01),与联合用药组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).2.DRD2阳性细胞广泛分布于大脑皮质、海马、纹状体等处,以模型组DRD2阳性细胞分布最为密集.3.肌苷组DRD2水平低于模型组(P<0.01),高于阳性对照组和联合用药组(Pa<0.01),而与正常对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).4.肌苷组DAT水平高于正常对照组、模型组及阳性对照组(Pa<0.01),与联合用药组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 肌苷改善TS模型大鼠的刻板行为的作用机制可能是通过促进多巴胺释放和转运,起到类似于DRD2拮抗剂的作用.     

奥卡西平对戊四氮致癫(癎)幼鼠海马胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 探讨奥卡西平(OXC)对慢性癫(癎)幼鼠海马星形胶质细胞表达胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的影响.方法 50只21日龄SD幼年雄性大鼠,随机分为5组:A组(阴性对照组)、B组(阳性对照组)、C组(OXC低剂量组)、D组(OXC中剂量组)、E组(OXC高剂量组),每组10只.A组每日腹腔注射等量9g·L-1盐水;B组腹腔注射戊四氮(PTZ)40 mg·kg-1·d-1;C～E组腹腔注射PTZ 40 mg·kg-1·d-1后分别予OXC 100 mg·kg-1、OXC 200 mg·kg-1、OXC 300 mg·kg-1灌胃.连续用药21 d,观察幼鼠体质量、行为学表现;采用免疫组织化学方法检测幼鼠海马GFAP阳性星形胶质细胞的表达;应用实时荧光定量PCR方法检测幼鼠海马组织中GFAP mRNA表达.结果 与A组相比,其他各组幼鼠均有癫(癎)发作,海马组织中均发现GFAP阳性细胞数量增多(P＜0.01),GFAP mRNA的表达增加(P＜0.01);与B组相比,C～E组幼鼠癫(癎)发作潜伏时间延长,发作级别低,点燃率低(Pa＜0.05),GFAP阳性细胞数量逐渐减少(P＜0.05),GFAP mRNA表达降低(P＜0.05);与其他各组相比,E组幼鼠体质量增长缓慢(P＜0.05).结论 OXC对PTZ点燃的慢性癫(癎)引起的脑损伤有保护作用,其程度与剂量有关,但大剂量OXC会抑制幼鼠生长;OXC的这种神经保护作用可能是通过抑制星形胶质细胞表达GFAP实现的.     

卡介苗干预对哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液干细胞因子、巨噬细胞集落刺激因子表达的影响

目的 观察哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)干细胞因子(SCF)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的表达,及卡介苗(BCG)干预对其表达的影响.方法 昆明小鼠30只随机分为哮喘组、BCG干预组、对照组,每组10只.以卵清蛋白(OVA)致敏激发建立哮喘模型.BCG干预组小鼠在OVA致敏前7、3、1 d以BCG皮内注射干预.末次激发24h后收集小鼠BALF,进行BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)计数,酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组BALF中SCF、M-CSF水平.结果 哮喘组小鼠BALF中细胞总数[(27.06±4.25)×107L-1]、EOS计数[(7.58±1.30)×107L-1]较对照组[(4.93±1.43)×107L-1、0]明显增高(Pa<0.01);BCG干预组小鼠BALF中细胞总数[(18.87±2.96)×107L-1]、EOS计数[(3.78±1.44)×107L-1]较哮喘组显著降低(Pa<0.01);哮喘组SCF水平[(280.25±14.20)ng/L]与对照组[(223.59±15.61)ng/L]比较显著增高(P<0.01),而BCG干预组SCF水平[(266.77±31.15)ng/L]与哮喘组比较无显著差异(P>0.05);哮喘组M-CSF水平[(204.30±10.39)ng/L]与对照组[(181.33±8.63)ng/L]比较显著增高(P<0.01),而BCG干预组M-CSF水平[(189.97±8.50)ng/L]与哮喘组比较显著下降(P<0.01).结论 致敏前多次给予BCG干预能显著抑制哮喘小鼠呼吸道炎性反应.哮喘小鼠BALF中SCF及M-CSF的表达增高,BCG干预能降低哮喘小鼠M-CSF的表达.抑制SCF或M-CSF的表达可能成为治疗哮喘的潜在靶点.     

不同疗程更昔洛韦治疗婴儿巨细胞病毒性肝炎的疗效

目的 观察不同疗程更昔洛韦(GCV)治疗婴儿巨细胞病毒性肝炎(CMV肝炎)的效果及不良反应.方法 选取2009年1月-2010年12月在本科住院的1～4月龄CMV肝炎患儿48例,随机分为治疗1组(n=25)和治疗2组(n=23).二组均予保肝、退黄治疗,治疗1组给予GCV 5 mg·kg-1,每日2次,连用2周.治疗2组诱导期给予GCV 5 mg·kg-1,每日2次,连用2周;维持期给予GCV 5 mg·kg-1,每日1次,连用7 d.治疗前后常规检查肝、肾功能及心肌酶谱,所有患儿出院后随访2个月,监测其血CMV-IgM水平.结果 二组患儿治疗后血清ALT、总胆红素、结合胆红素水平均显著下降,与治疗前比较差异均有统计学意义(Pa＜0.05);治疗后二组ALT、总胆红素及结合胆红素水平比较差异亦有统计学意义(Pa＜0.05).治疗后随访2个月,血CMV-IgM转阴率治疗2组高于治疗1组.血常规、肾功能及心肌酶谱二组比较无统计学差异(Pa＞0.05).结论 GCV治疗婴儿CMV肝炎的疗效肯定,且 3周二期治疗方案优于2周一期治疗方案,前者能够获得高病毒转阴率和较低复发率,同时较长程疗法更少引起不良反应,较经济且易于被小婴儿耐受,易于推广.     

左卡尼汀对新生儿窒息致心肌损害的疗效

目的 探讨左卡尼汀治疗新生儿窒息致心肌损害的疗效.方法 窒息致心肌损害新生儿91例随机分为左卡尼汀治疗组(治疗组,48例)和常规治疗组(对照组,43例),二组患儿均予常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上加用左卡尼汀针0.1 g/(kg·d)静脉滴注,1次/d,10 d为1个疗程.观察治疗前以及治疗过程中患儿症状体征的变化.在治疗前和治疗1个疗程,抽取患儿静脉血3 mL,分离血清,采用免疫抑制法和酶速率法分别检测其血清CK-MB和AST水平的变化,采用免疫比浊法和溴甲酚绿比色法分别检测血清前清蛋白和清蛋白水平的变化.采用Stata 7.0软件进行t、鳘2检验.结果 治疗组临床有效率(91.67%)明显高于对照组(74.42%)(P<0.05).治疗组心率恢复正常时间[(3.18 ±1.10) d]短于对照组[(4.32±1.43) d](P<0.05);治疗组CK-MB及AST分别为(22.48±4.72) U/L、(42.18±9.27) U/L,均较对照组[(29.06±6.10) U/L、(51.31±11.81) U/L]更接近正常值(Pa<0.05);治疗组前清蛋白[(125.25±30.64) mg/L]较对照组[(110.73±25.46) mg/L]提高更为明显(P<0.05);治疗组清蛋白[(38.58±6.56) g/L]较对照组[(35.79±6.44) g/L]也提高更为明显(P<0.05).结论 左卡尼汀治疗新生儿窒息致心肌损害具有良好疗效.     

左旋精氨酸甲酯对大鼠膈疝模型肺血管发育的影响

目的 通过对大鼠孕期一氧化氮(NO)合成的抑制,探讨一氧化氮/环磷酸鸟苷(NO/cGMP)通路在大鼠膈疝肺动脉高压发病中的意义及部分膈疝患者NO吸入效果不佳的原因.方法 随机取孕9.5 d SD大鼠13只,3只作为正常对照组(C组),给予橄榄油2 ml灌入胃内,10只予异草醚(nitrofen)橄榄油溶液(200 mg/只)灌入胃内.左旋精氨酸甲酯干预分小剂量组、大剂量组(分别为L-NAME 1组、L-NAME 2组)进行,每组各4只,自孕14 d开始分别皮下注射左旋精氨酸甲酯(L-NAME)溶液250 mg/kg/d、500 mg/kg/d至孕20 d,对照组(CL组)3只于同样时间段给予生理盐水注射.分析各组血管计数、中膜厚度百分比(MT%),同时对内皮细胞源性一氧化氮合成酶(eNOS)表达进行免疫组化检测.结果 L-NAME 1组、L-NAME 2组与CL组胎鼠成模率、生存率比较,差异无统计学意义;L-NAME 1组、L-NAME2组与CL组血管计数、MT%均较C组明显增高,但L-NAME 1组、L-NAME 2组与CL组之间相比,无显著差异;膈疝发生后,eNOS阳性表达率降低;使用L-NAME后eNOS阳性表达率进一步减低.结论 阻断NO/cGMP通路,膈疝胎鼠肺小动脉的结构未出现相应变化.NO/cGMP通路的变化仅为肺动脉压力改变的功能性因素之一,调节NO/cGMP通路无法独立影响肺动脉的压力.     

苦参碱注射液治疗婴儿巨细胞病毒性肝炎的疗效观察

目的 探讨苦参碱注射液治疗婴儿巨细胞病毒(CMV)肝炎的疗效. 方法 CMV肝炎患儿42例随机分成2组:苦参碱注射液治疗组22例与更昔洛韦治疗组20例.苦参碱治疗组用苦参碱注射液(20～25 mg/d)静脉滴注,1次/d,连用14 d.间隔7～10 d 后,用苦参碱注射液20～25 mg/d静脉滴注,1次/d,连用5 d,共2、3个疗程.更昔洛韦治疗组用更昔洛韦15 mg/(kg·d)静脉滴注,2次/d,连用14 d.间隔7～10 d后,用更昔洛韦5 mg/(kg·d)静脉滴注,1次/d,连用5 d,共2、3个疗程.治疗前后予荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测各组血清人巨细胞病毒(HCMV)DNA拷贝数,于不同时间放射免疫法测定其血清TNF -α水平.观察二组临床及实验室结果.结果 1.苦参碱治疗与更昔洛韦治疗组治疗6周血清HCMV DNA拷贝数均明显下降,二者比较无显著性差异(P＞0.05).2.用药第4周苦参碱治疗组血清TNF-α水平下降最明显,与更昔洛韦治疗组比较有显著性差异(P＜0.01).3.二组治疗6周前后ALT、总胆红素(TBIL)、结合胆红素(DBIL)、未结合胆红素(IBIL)、胆汁酸(TBA)比较均无显著性差异(Pa＞0.05).4.二组治疗6周前后肝大比较无显著性差异(P＞0.05).结论 苦参碱注射液可有效抑制HCMV DNA复制,并能调控TNF-α分泌,调节免疫功能,发挥抗HCMV感染、保护肝细胞的作用.     

孕早期人巨细胞病毒感染对仔鼠神经行为的影响

目的探讨孕早期人巨细胞病毒(HCMV)感染对仔鼠神经行为的影响。方法将8周龄昆明小鼠按雌雄2:1合笼配对,将受精小鼠随机分为实验组与对照组,于妊娠第4天分别腹腔内注射1×10-6半数组织培养感染量HCMV悬液0.5mL和等量的人胚成纤维细胞上清液,孕第20天时每组随机选取3只作剖宫产,取胎鼠脑组织进行光镜和电镜检查;定性检测仔鼠及孕鼠血清HC-MV DNA;在仔鼠6～7周时进行Morris水迷宫和LashleyⅢ水迷宫检测。结果与对照组比较,光镜下实验组仔鼠脑组织可见神经细胞变性坏死,细胞核消失,部分细胞呈巨细胞变;电镜下发现神经元细胞明显肿胀,胞质中可见类球形病毒颗粒;实验组7只仔鼠血清中检测出特异性HCMV pp65片段。在Morris水迷宫测试中,实验组仔鼠第7天潜伏期为(30.21±12.74)s,对照组为(11.87±3.62)s,二组比较有显著性差异(P<0.05);游泳速度实验组为(19.10±1.90)cm/s,对照组为(23.21±1.02)cm/s,二组比较有显著性差异(P<0.05);在LashleyⅢ水迷宫测试中,第5天实验组潜伏期为(45.88±18.24)s,与对照组[(125.56±9.82)s]比较有显著性差异(P<0.01);错误次数实验组与对照组比较,亦存在显著性差异(P<0.05)。结论孕早期HCMV感染可使仔鼠学习记忆能力、运动能力显著下降。     

细菌脂多糖对不同成熟度新生小鼠脑发育的影响

目的 探讨细菌脂多糖(LPS)对不同成熟度新生小鼠脑发育的影响.方法 2日龄新生小鼠80只随机分成4组,分别腹腔注射不同剂量(0.3 mg·kg-1、0.6 mg·kg-1、0.9 mg·kg-1)的LPS和等容积的9g·L-1盐水,观察给药后小鼠的一般情况;测定给药后脑组织IL-6水平、体质量变化以及相对肝质量;2日龄和7日龄的新生小鼠各20只,不同日龄的新生小鼠随机分成感染组(腹腔注射0.6 ng·kg-1LPS)和对照组(腹腔注射等容积的9g·L-1盐水),连续给药5d,均至12日龄时,灌注取脑,应用免疫组织化学技术检测各组小鼠脑组织碱性髓鞘蛋白(MBP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达情况.结果0.6 mg· kg-1 LPS腹腔注射可导致新生小鼠体质量增长缓慢、肝大、脑组织IL-6水平升高(Pa＜0.05),随着LPS剂量增加,病死率增高,IL-6水平未再升高.2日龄感染组小鼠MBP、NSE表达均明显减少,而Caspase-3的表达明显增多(Pa＜0.05);7日龄感染组的MBP表达无明显减少(P＞0.05),而NSE的表达明显减少,Caspase-3的表达明显增多(Pa＜0.05).结论 新生小鼠腹腔注射0.6 mg· kg-1 LPS可以模拟临床感染;2日龄新生小鼠感染不仅影响脑白质髓鞘发育,同时也影响灰质神经元;而脑发育相对成熟的7日龄新生小鼠感染主要影响皮质神经元的发育.     

氯雷他定对哮喘豚鼠肺泡灌洗液及血清白细胞介素-5和嗜酸性粒细胞计数的影响

目的 观察氯雷他定对支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清IL-5表达以及嗜酸性粒细胞(EOS)计数的影响,探讨氯雷他定对哮喘豚鼠模型呼吸道高反应性的作用.方法 将32只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘组、氯雷他定低剂量组及氯雷他定高剂量组.经鸡卵白蛋白(OVA)致敏后,给予OVA雾化吸入,诱发哮喘发作制作哮喘模型,氯雷他定低剂量组和氯雷他定高剂量组分别给予氯雷他定2 mg·kg-1和10 mg·kg-1灌服.在末次雾化吸入OVA后,经动物呼吸机测定豚鼠呼吸道压力,用酶联免疫法检测其血清和BALF中IL-5水平,并计数外周血及BALF中EOS.结果 正常对照组、哮喘组、氯雷他定低剂量干预组及高剂量干预组血清IL-5水平分别为(0.27±0.04) ng·L-1、(0.41±0.03) ng·L-1、(0.38±0.02) ng·L-1及(0.31±0.03) ng·L-1,BALF中IL-5水平分别为(0.10±0.01) ng·L-1、(0.38±0.04) ng·L-1、(0.33±0.05) ng·L-1及(0.23±0.09) ng·L-1;外周血EOS计数分别为(4.0±0.6)×108L-1、(54.6±7.6)×108L-1、(44.5±3.9)×108L-1及(29.0±5.8)×108L-1;BALF中EOS计数分别为(3.0±0.5)×108L-1、(33.7±3.9)×108L-1、(27.1±3.2) ×108L-1及(18.6±3.3) ×108L-1.以上各指标任意2组比较差异均有统计学意义(Pa＜0.05,0.01).当吸入组胺质量浓度为10 mg·L-1和20 mg·L-1时,哮喘组与氯雷他定低剂量组比较差异无统计学意义,其余任意2组比较差异均有统计学意义(Pa＜0.05).结论 氯雷他定低、高剂量均能改善哮喘模型中豚鼠呼吸道高反应性,并对血清及BALF中IL-5的表达有抑制作用,同时使血清、BALF中EOS计数减少.     

氯雷他定对哮喘豚鼠白细胞介素5及嗜酸性粒细胞凋亡的影响

目的研究氯雷他定对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清IL-5的表达及肺组织嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡延迟状态的影响。方法豚鼠32只随机分为正常对照组、哮喘组、氯雷他定低剂量组、氯雷他定高剂量组。经3次20 g·L-1卵清蛋白(OVA)腹腔注射致敏后,10 g·L-1OVA雾化吸入40 min诱发哮喘发作。氯雷他定低、高剂量组豚鼠分别予2 mg·kg-1·d-1、10mg·kg-1·d-1氯雷他定灌服14 d,每天1次;哮喘组、正常对照组给予9 g·L-1盐水作对照。ELISA法检测其血清和BALF中IL-5水平,罗氏TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒检测其凋亡细胞,HE染色切片随机计数每张切片下200个EOS中凋亡细胞数。结果1.正常对照组、哮喘组、氯雷他定低剂量组、氯雷他定高剂量组血清IL-5水平分别为(0.27±0.04)ng·L-1、(0.41±0.03)ng·L-1、(0.38±0.02)ng·L-1、(0.31±0.03)ng·L-1;BALF中IL-5水平分别为(0.10±0.01)ng·L-1、(0.38±0.04)ng·L-1、(0.33±0.05)ng·L-1、(0.23±0.09)ng·L-1,血清及BALF中IL-5水平4组间两两比较差异均有统计学意义(Pa<0.05)。2.正常对照组、哮喘组、氯雷他定低剂量组、氯雷他定高剂量组豚鼠肺组织EOS发生凋亡的细胞数分别为33个、95个、129个、182个,两两比较差异有统计学意义(χ2=114.5,P<0.05)。其中哮喘组与氯雷他定低剂量组间差异无统计学意义(χ2=10.0,P>0.008 3)。结论氯雷他定对IL-5相关的EOS凋亡延迟状态有抑制作用,能改善肺组织变应性炎症状态,对哮喘的控制具有潜在的积极作用。     

孕早期人巨细胞病毒感染对仔鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基表达的影响

目的探讨孕早期人巨细胞病毒(HCMV)感染对子代SD大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚基的影响及对仔鼠学习记忆的影响。方法取8周龄SPF级SD雌鼠18只。按雌雄31合笼交配,将受精大鼠随机分为实验组和对照组,每组9只,于妊娠第5天分别腹腔内注射5×107L-1半数组织培养感染量(TCID50)HCMV悬液0.8 mL和等量的人胚成纤维细胞上清液。出生后1个月分别从每组随机抽取10只子代大鼠,取仔鼠脑组织,采用HE染色观察仔鼠海马形态学变化;使用Morris水迷宫评价子代大鼠的学习记忆功能;应用免疫组织化学方法检测大鼠海马组织NMDA受体表达变化。采用SPSS 16.0软件进行统计学处理。结果对照组子代大鼠海马未见神经元缺失,排列紧密,均匀整齐,胞核呈圆形或椭圆形,核仁明显,染色质均匀;与对照组比较,实验组子代大鼠海马有神经细胞坏死、减少、水肿、细胞核消失现象,部分细胞呈巨细胞变;在Morris水迷宫实验中,实验组子代大鼠的学习记忆成绩较对照组明显下降(Pa<0.01);免疫组织化学结果显示实验组子代大鼠海马组织NR1、NR2A及NR2B平均吸光度均较对照组低(Pa<0.01)。结论孕早期HCMV感染可导致仔鼠学习记忆能力受损,可能与其海马区NMDA受体的表达减少有关。     

姜黄素对急性心肌梗死小鼠心肌细胞凋亡相关基因表达的影响

目的 探讨姜黄素对急性心肌梗死小鼠心肌细胞凋亡相关基因表达的影响.方法 30只健康昆明种小鼠随机分为假手术组、模型组和姜黄素组.假手术组腹腔注射9 g·L-1盐水10 Ml·kg-1,每隔30 min注射1次,共2次;模型组腹腔注射9 g·L-1盐水10 Ml·kg-1,30 min后腹腔注射垂体后叶素(Pit) 10 Ml·kg-1;姜黄素组腹腔注射姜黄素100 mg·kg-1,30 min后腹腔注射Pit 10 Ml·kg-1.ELISA法检测各组小鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平.采用RT-PCR法检测各组小鼠心肌组织Fas Mrna及FasL Mrna的表达水平.结果 与假手术组相比,模型组血清LDH、cTnI和心肌组织Fas Mrna及FasL Mrna表达水平显著升高(Pa＜0.01);与模型组相比,姜黄素组血清LDH、cTnI和心肌组织Fas Mrna及FasL Mrna的表达水平显著降低(Pa＜0.01).结论 姜黄素对急性心肌梗死小鼠有较好的保护作用,其机制可能与下调Fas Mrna及FasL Mrna的表达有关.     

坏死性小肠结肠炎诱导新生大鼠全身炎症反应综合征动物模型的建立

目的将新生Wistar大鼠进行缺氧、低温、鼠乳代用品人工喂养、不同剂量脂多糖(LPS)灌胃等综合因素刺激,造成坏死性小肠结肠炎(NEC),并导致全身炎症反应综合征(SIRS)的动物模型。方法 40只新生Wistar大鼠,出生36～48h随机分成4组,每组各10只。A组为正常对照组,B、C、D组采用低温缺氧(给予1 L.L-1氮气缺氧90s,4℃冷刺激10 min,每天2次,连续2 d)、鼠乳代用品人工喂养、不同剂量LPS(5 mg.kg-1、10 mg.kg-1、20 mg.kg-1)灌胃。实验结束后处死动物,HE染色光镜下观察其回盲部近端肠组织形态学改变,采用肠损伤病理评分进行评价,组织学评分≥2分确定为NEC,根据血液白细胞总数及呼吸改变确定为SIRS。结果 B、C、D组大鼠逐渐出现腹泻、腹胀、活动减少,D组大鼠50%发生死亡。A、B、C、D4组肠损伤病理评分分别为(0.33±0.10)分、(2.03±1.16)分、(3.77±0.41)分、(3.13±0.69)分,组间差异有统计学意义(H=29.83,P<0.01)。NEC发病率分别为0%、50%、100%和100%;SIRS发生率分别为0%、30%、70%和70%。结论在鼠乳代用品人工喂养、缺氧低温刺激条件下,给予LPS灌胃可诱导新生鼠发生NEC,并导致SIRS发生,本模型与新生儿SIRS病理改变接近,是一种比较理想的研究新生儿SIRS的动物模型。     

小潮气量通气联合肺复张策略在治疗急性肺损伤患儿中的肺保护作用

目的应用小潮气量通气联合肺复张策略(RM)治疗小儿急性肺损伤(ALI),动态观察血浆肺表面活性物质相关蛋白-A(SP-A)及IL-6水平变化,并探讨其临床意义。方法前瞻性观察ALI患儿30例。分为2组,各15例,一组给予常规机械通气方式(CON组),潮气量为10～15 mL.kg-1;另一组予以小潮气量联合RM通气方式(RM组),潮气量为6～8 mL.kg-1,RM采用持续呼吸道正压通气(CPAP)方式,维持压力为2.94 kPa,每次维持30 s,每天平均进行3次,连续5 d,其他治疗均相同。分别于入组第1天,第3天,第5天留取血样,ELISA法测定其血浆SP-A及IL-6水平,比较2组结果的差异。结果入组时2组患儿IL-6水平相近,至入组第3天及第5天时,RM组IL-6水平分别降为(304.3±58.6)×10-9g.L-1和(223.0±60.6)×10-9g.L-1,同时间点CON组虽然也分别降至(374.9±105.7)×10-9g.L-1和(316.2±107.3)×10-9g.L-1,但RM组IL-6水平均显著低于CON组(Pa<0.05)。入组时2组患儿SP-A水平无差异性,入组第3天,RM组SP-A水平降至(256.0±59.4)×10-9g.L-1,而CON组为(293.5±48.6)×10-9g.L-1,二者略有不同,但差异无统计学意义;至入组第5天RM组患儿达(194.2±54.4)×10-9g.L-1,显著低于相应CON组[(252.1±71.5)×10-9g.L-1](P<0.05)。结论应用RM联合小潮气量通气治疗小儿ALI,可使血浆SP-A及IL-6水平显著下降,减轻呼吸机相关性肺损伤的程度,具有肺保护作用。     

加巴喷丁和米诺环素对癫癎持续状态大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体表达的影响

目的研究加巴喷丁(GBP)和米诺环素对戊四氮(PTZ)致癫癎持续状态(SE)大鼠海马区N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR1)表达的影响。方法 SD大鼠84只随机分为对照组、PTZ致组(PTZ组)、GBP 600 mg组(GBP组)、GBP 600 mg干预组(干预组1)、米诺环素45 mg干预组(干预组2)、米诺环素90 mg干预组(干预组3)、米诺环素180 mg干预组(干预组4),每组12只。采用PTZ溶液60 mg.kg-1.d-1腹腔注射诱发SE大鼠,PTZ注射期间出现RacineⅣ～Ⅴ级的惊厥发作持续30 min,连续3 d未死亡者为SE点燃成功。GBP组予GBP灌胃,对照组给予9 g.L-1盐水灌胃。采用头皮针状电极单极导联法观察大鼠性放电的脑电图。免疫组织化学染色检测NMDAR1表达。结果 NMDAR1表达在PTZ组显著高于对照组(P<0.01);GBP组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);干预组1表达低于PTZ组(P<0.05)。3个不同剂量的米诺环素组NMDAR1表达与PTZ组比较差异均无统计学意义(Pa>0.05)。结论 PTZ致SE大鼠海马神经元NMDAR1表达增加,GBP能降低PTZ所致的SE大鼠NMDAR1表达增加,而米诺环素45～180 mg.kg-1不能降低PTZ所致的SE大鼠NMDAR1表达增加。     

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯诱导小鼠尿道下裂及对阴茎TGF-β1表达的影响

目的 用邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)诱导建立先天性尿道下裂小鼠模型,研究DEHP对胎鼠阴茎内转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.探讨尿道下裂发生机制.方法 C57BL/6孕鼠随机分为4组:玉米油对照组、DEHP低、中、高剂量组(i00、200、500 nag·kg-1·d-1).各组分别于母鼠孕期12d至17d(GD12～17)持续经口灌注给药.测量GD19雄性胎鼠体重、肛门至尿道口距离(AGD),通过尿道管型(UC)检测尿道解剖组织结构,比较尿道发育情况.应用免疫印迹(Western blot)检测胎鼠阴茎内TGF-β1蛋白量的表达水平.结果 DEHP成功诱导出尿道下裂小鼠动物模型,中、高剂量组AGD及前尿道较对照组明显缩短(P<0.001).实验组阴茎内TGF-β1蛋白表达水平随DEHP剂量增加而逐渐上升.结论 DEHP成功诱导建立先天性尿道下裂小鼠模型,胎鼠阴茎内TGF-β1蛋白异常表达可能是尿道下裂的发生机制之一.