产ESBLs肺炎克雷伯菌氨基糖苷类耐药性及其修饰酶基因型的研究

目的:了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类的耐药性,及其氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因型的流行状况。方法:采用K-B纸片法测定阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、奈替米星的敏感性,应用PCR方法扩增6种AMEs基因,并对PCR阳性产物进行测序以确定其基因型。结果:77株产ESBLs肺炎克雷伯菌对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、奈替米星的耐药率分别为22.1%、59.7%、44.2%、42.9%,aac(3)-Ⅱ、aac(6’)-Ib、ant(3″)-I、ant(2″)-I基因检出率分别为49.4%、35.1%、22.1%、6.5%,未检出aac(3)-I和aac(6’)-Ⅱ基因。结论:产ESBLs肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类高度耐药,其耐药性与AMEs密切相关,流行的AMEs基因型主要为aac(3)-Ⅱ、aac(6’)-Ib和ant(3″)-I。     

肺炎克雷伯菌氨基糖苷类修饰酶耐药基因研究

目的检测肺炎克雷伯菌氨基糖苷类修饰酶的分布,探讨肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类药物耐药机制。方法收集中南大学湘雅医院2009年1月至2009年7月间非重复肺炎克雷伯菌96株,所有菌株采用法国梅里埃公司的全自动微生物鉴定系统VITEK -2的革兰阴性菌GN卡鉴定和AST GN-13卡进行药敏分析。采用PCR法对氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ、aph(3′)-Ⅵa进行检测。结果经PCR扩增及测序分析,96株肺炎克雷伯菌中有18.8%的菌株携带aac(3)-Ⅰ基因（18/96）、57.3%的菌株携带aac(6′)-Ⅰb基因（55/96）、3.1%的菌株携带ant(3″)-Ⅰ基因（3/96）,未扩增出aph(3′)-Ⅵ基因。结论在湖南地区发现aac(3)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ型氨基糖苷类修饰酶基因,氨基糖苷类修饰酶基因以aac(6′)-Ⅰb为主。是肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类药物高水平耐药的主要机制之一。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的了解产ESBLs肺炎克雷伯菌中氨基糖苷类修饰酶基因存在状况。方法对35株肺炎克雷伯菌,采用聚合酶链反应（PCR）检测aac（3）-Ⅰ、aac（3）-Ⅱ、aac（6′）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ、ant（3″）-Ⅰ、ant（2″）-Ⅰ等6种氨基糖苷类修饰酶基因。结果35株肺炎克雷伯菌中,共有26株检出氨基糖苷类修饰酶基因（74.3%）。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌氨基糖苷类修饰酶基因携带率高。     

肺炎克雷伯菌老年人分离株β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶、氯己定-磺胺耐药基因研究

目的:了解肺炎克雷伯菌(KPN)老年人分离株β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶、氯已定-磺胺耐药基因存在状况.方法:对20株KPN菌进行了15种β内酰胺酶基因、2种氨基糖苷类修饰酶基因、氯已定-磺胺耐药基因检测.结果:20株KNP菌检出blaTEM、blaSHV、blaCTX-M-1群、blaCTX-M-9群、blaOXA-1群、blaDHA等6种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为95%、30%、50%、5%、5%、15%,有15株检出氨基糖苷类修饰酶基因(75%);16株检出qacE△1-sull基因(80%).结论:该20株老年人分离株KPN菌β内酰胺类、氨基糖苷类抗菌药物耐药与产β-内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶密切相关.     

医院感染肺炎克雷伯菌耐药性及氨基糖苷类修饰酶、β-内酰胺酶基因研究

目的明确广州地区引起医院感染的肺炎克雷伯菌耐药性及氨基糖苷类修饰酶、β-内酰胺酶基因存在状况. 方法采用MicroScan微生物鉴定系统NC-21试验板微量肉汤法,测定20株医院感染分离的肺炎克雷伯菌对20种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应技术分析9种氨基糖苷类修饰酶基因和2种β-内酰胺酶基因. 结果该20株菌呈现多重耐药,除对亚胺培南敏感率高达95%外,对氨基糖苷类抗菌药物的耐药率在75.0%～90.0%之间,其他药物耐药率为55%～100%;18株（90.0%）检出氨基糖苷类修饰酶基因,ant（3″）-Ⅰ、 aac（6′）-Ⅰ、aac（3）-Ⅱ、aac（3）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ和aph（3′）-Ⅵ基因阳性率分别为80.0%、70.0%、65.0%、35.0%、25.0%和5.0%,aac（3）-Ⅲ、aac（3）-Ⅳ和ant（2″）-Ⅰ基因均阴性;20株菌均检出β-内酰胺酶编码基因,其中TEM基因阳性率85.0%,DHA基因阳性率80.0%. 结论广州地区临床分离的肺炎克雷伯菌多重耐药严重,氨基糖苷类修饰酶基因和β-内酰胺酶编码基因携带率很高,存在DHA型质粒AmpC酶基因.     

氨基糖苷类修饰酶基因在我院分离产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌中的表达

目的 调查氨基糖苷类修饰酶（AMEs）基因在泰安中心医院院内分离的产超广谱β内酰胺酶（ESBL）肺炎克雷伯菌中的表达情况,为合理使用抗菌药物提供依据.方法 采用多聚酶链反应（PCR）方法,检测aac（3）-Ⅰ、aac（3）-Ⅱ、aac（3）-Ⅲ、aac（3）-Ⅳ、aac（6＇）-Ⅰ、ac（6＇）-Ⅱ、aph（3＇）-Ⅵ、ant（3＂）-Ⅰ和ant（2＂）-Ⅰ等9种AMEs,在42株院内分离的产ESBL肺炎克雷伯菌中的表达情况.结果 42株产ESBL肺炎克雷伯菌中,36株（85.7%）携带aac（3）-Ⅱ基因,25株（59.5%）携带ant（3＂）-Ⅰ基因,9株（21.4%）携带aac（6＇）-Ⅰ基因,4株（9.5%）携带aph（3＇）-Ⅵ基因,3株（7.1%）携带aac（3）-Ⅰ基因,AMEs携带率为90.5%（38/42）.结论 我院院内分离的产ESBL肺炎克雷伯菌的AMEs基因携带率很高,其对氨基糖苷类药物耐药可能与AMEs有关.     

产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性分析与耐药基因检测

目的 了解浙江省温州、台州地区的肺炎克雷伯菌耐药性及存在状况.方法 采用VITEK 60型和VITEK 32型、肉汤稀释法测定56株产C类头孢菌素酶(AmpC)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的药敏结果;采用聚合酶链反应(PCR)分析ESBLs、质粒介导的AmpC酶和AMEs基因型.结果 产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌首选亚胺培南(100%敏感),对其他抗菌药物均有不同程度的耐药;20株菌株100%检出TEM基因,90%检出CTX-MⅠ基因,100%检出SHV基因,85%检出DHA基因,15%检出MIR基因,90%检出不同的氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因.结论 产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌表现多药耐药,碳青酶烯类药物亚胺培南是治疗效果最好的药物,同时存在2～6种不同类型的耐药基因.     

肺炎克雷伯菌氨基糖苷类药物耐药相关基因检测

目的:了解肺炎克雷伯菌氨基糖苷类修饰酶基因的存在状况。方法:自2006年1月-2006年10月住院病人标本中分离并筛选出20株多重耐药肺炎克雷伯菌,微量肉汤稀释法检测20种抗菌药物的敏感性;PCR法检测氨基糖苷类修饰酶基因。结果:20株多重耐药肺炎克雷伯菌1氨基糖苷类修饰酶aac(3)-Ⅱ基因阳性15株、aac(6)′-Ib基因阳性1株、ant(3)″-Ⅰ基因阳性16株、aph(3)′-Ⅰ基因阳性3株,ant(2)″-Ⅰ基因阳性1株。结论:肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类药物耐药的主要原因是aac(3)-Ⅱ、aac(6)′-Ib、ant(3)″-Ⅰ、aph(3)′-Ⅰ和ant(2)″-Ⅰ5种氨基糖苷类修饰酶基因的存在。     

植生克雷伯菌与肺炎克雷伯菌氨基糖苷类修饰酶及16S rRNA甲基化酶基因研究

目的 分析医院克雷伯菌属的耐药性及对氨基糖苷类抗菌药物的耐药机制.方法 收集3所医院2009年10月-2011年3月分离出的20株克雷伯菌属,经鉴定确认2株为植生克雷伯菌,18株为肺炎克雷伯菌;采用K-B纸片扩散法进行药敏试验;PCR法检测8种氨基糖苷类修饰酶基因及6种16S rRNA甲基化酶基因,PCR阳性产物采用PCR直接全自动荧光法测序.结果 20株克雷伯菌属均表现对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类抗菌药物的多药耐药性,耐药率均＞80.0％,植生克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南敏感性相对良好;20株克雷伯菌属8种氨基糖苷类修饰酶基因检出aac(3)-Ⅱ、aac(6″)-Ⅰ b群、ant(3″)-Ⅰ和aph(3′)-Ⅰ等4种,阳性率分别为65.0％、70.0％、75.0％及45.0％;6种16S rRNA甲基化酶基因检测无阳性发现.结论 克雷伯菌属对氨基糖苷类耐药与产氨基糖苷类修饰酶相关.     

多药耐药肺炎克雷伯菌氨基糖苷类修饰酶与16S rRNA甲基化酶基因研究

目的 研究多药耐药肺炎克雷伯菌(MDRKP)氨基糖苷类药物耐药的遗传学背景.方法 收集2008年8月-2010年5月6所医院共47株肺炎克雷伯菌,采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析15种氨基糖苷类修饰酶和6种16S rRNA甲基化酶基因.结果 该组肺炎克雷伯菌共检出4种氨基糖苷类修饰酶和1种16S rRNA甲基化酶基因,可分为16种阳性检出模式,并发现两株菌携带aac(6′)-Ⅰ b基因新亚型[aac(6′)-Ⅰ b-hz,美国GenBank登录号:JF901756];其他16种基因未检出.结论 携带氨基糖苷类修饰酶和16S rRNA甲基化酶基因,是该组肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类药物耐药的主要原因,在多药耐药肺炎克雷伯菌中发现aac(6′)-Ⅰ b新亚型[aac(6′)-Ⅰ′ b-hz]为国内外首次报道.     

产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药基因检测及对双黄连敏感性的试验研究

目的 检测肺炎克雷伯菌产ESBLs基因型别流行情况,并探讨不同基因型别对双黄连冻干粉敏感性的差异.方法 选择2006年9月-2007年3月自哈尔滨地区连续收集的临床分离肺炎克雷伯菌231株,按照NCCLS表型确证试验检测产ESBLs菌株的发生情况;PCR检测ESBLs的基因型别;肉汤稀释法检测肺炎克雷伯菌对双黄连的敏感性,并对结果进行分析.结果 231株菌检测出产ESBLs菌株121株,阳性率52.4％;携带TEM型基因的有60株,占49.6％,携带SHV的46株占38.0％、CTX-M-1 32株占26.4％、CTX-M-9 36株占29.8％;双黄连冻干粉对肺炎克雷伯菌临床株的MIC90为50 mg/ml,MIC50为25mg/ml;产ESBLs肺炎克雷伯菌与非产ESBLs菌MIC差异无统计学意义;双黄连对产ESBLs各型别之间的MIC差异无统计学意义.结论 哈尔滨地区肺炎克雷伯菌ESBLs发生率为52.4％,以携带TEM型基因菌株最多;双黄连冻干粉对肺炎克雷伯菌的生长具有抑制作用,抑制作用不受菌株是否产ESBLs及产ESBLs基因型别的影响.     

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌烧伤创面分离株的耐药性分析

目的 了解烧伤创面大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌感染株的耐药性.方法 药敏试验采用K-B法,ESBLs检测采用纸片协同确证法.结果 158株大肠埃希菌共检出产ESBLs菌51株,检出率为32.3％;53株肺炎克雷伯菌共检出产ESBLs菌21株,检出率为39.6％大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的药敏结果相仿,对氨苄西林和磺胺甲恶唑/甲氧苄啶耐药率高达75.3％～83.0％,喹诺酮类药物耐药率为41.5％～47.2％,三代头孢耐药率为39.9％～50.9％;未发现亚胺培南和美罗培南耐药株,头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率处较低水平;产酶株的耐药率高于非产酶株.结论 烧伤创面感染的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药率严重,临床应提高标本送检率,根据细菌培养、药敏试验和ESBLs检测的结果,合理选用或调整治疗用药,控制耐药菌的产生和播散.     

肺炎克雷伯菌医院感染的临床特点与耐药性分析

目的了解肺炎克雷伯菌医院感染的临床特点与耐药特征。方法分析2008年1月～2010年12月195例肺炎克雷伯菌医院感染患者的临床资料,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验及ESBLs的表型筛选和确证试验。结果医院感染肺炎克雷伯菌标本主要来源依次为痰液、血液、胆汁和尿液;检出科室以重症监护室、肝胆外科、神经外科和血液内科为主;大部分患者存在严重基础疾病和导致感染的危险因素;肺炎克雷伯菌对亚胺培南最敏感;产ESBLs菌株检出率为50.3%;产ESBLs菌株耐药率明显高于非产ESBLs株。结论 ESBLs在肺炎克雷伯菌医院感染中十分流行,多重耐药明显,做好细菌耐药性监测,合理使用抗生素十分重要。     

405株肺炎克雷伯菌感染临床分布与耐药研究

目的 分析肺炎克雷伯菌的感染分布及耐药性特点,为临床预防控制和治疗肺炎克雷伯菌感染提供依据.方法 采用MicroScan AS-4半自动细菌鉴定及药敏分析仪对临床分离菌进行鉴定和药敏分析,同时检测超广谱β-内酰胺酶,并结合临床相关资料进行分析.结果 405株肺炎克雷伯菌中,产ESBLs阳性198株,阳性率为48.89％;ESBLs阳性的肺炎克雷伯菌对所测抗菌药物显著高于产ESBLs阴性菌,并且出现5株对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌.结论 医院产ESBLs阳性的肺炎克雷伯菌感染存在相当比例,ESBLs阳性菌的耐药率远较阴性菌更加严重,应引起临床注意.     

肺炎克雷伯菌老年患者分离株氨基糖苷类药物耐药相关基因研究

目的了解肺炎克雷伯菌老年患者分离株16S rRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶基因的存在状况。方法自2006年1~10月住院患者标本中分离并筛选出20株多药耐药肺炎克雷伯菌,微量肉汤稀释法检测20种抗菌药物的敏感性;PCR法检测16S rRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶基因。结果20株多药耐药肺炎克雷伯菌16S rRNA甲基化酶(rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、armA和npmA)基因均为阴性;氨基糖苷类修饰酶aac(3)-Ⅱ基因阳性15株、aac(6′)-Ⅰb基因阳性1株、ant(3″)-Ⅰ基因阳性16株、aph(3′)-Ⅰ基因阳性3株、ant(2″)-Ⅰ基因阳性1株。结论研究结果显示,肺炎克雷伯菌老年患者分离株对氨基糖苷类药物耐药的主要原因是aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ、aph(3′)-Ⅰ和ant(2″)-Ⅰ5种氨基糖苷类修饰酶基因的存在;从肺炎克雷伯菌中检出aac(6′)-Ⅰb-Cr型和aph(3′)-Ⅰ均为国内首次。