细胞自噬与乳腺癌的关系研究进展

<正>乳腺癌作为女性最常见的恶性肿瘤之一,近些年来其发病率逐步上升。2012年统计发现,在全球范围内约有170万新发的乳腺癌病例,其中约有52万名女性死于乳腺癌~([1])。最新数据显示,2015年仅在中国就约有30. 4万例新发乳腺癌病例,在女性恶性肿瘤发病率中排名第一~([2]),成为女性恶性肿瘤患者死亡的主要原因之一。因此,近年来,对于乳腺癌发     

铝致神经细胞凋亡及自噬的研究进展

铝是地壳中最丰富的金属元素,并无任何有益的生理作用。铝被摄入人体后,蓄积于各个脑区,损害中枢神经系统,与许多神经退行性疾病相关。大量证据显示,铝在体内体外均产生神经毒性。目前的研究表明,铝暴露与神经细胞凋亡密切关联,神经细胞凋亡及自噬参与铝诱发的脑毒性,上述机制是构成铝神经毒性的重要机制之一。本文从铝对神经细胞凋亡的形态学影响、铝致神经细胞凋亡的不同途径、铝致神经细胞凋亡及自噬的关联综述近几年铝致神经细胞凋亡及自噬的研究进展。     

自噬基因Beclin1过表达诱导人卵巢癌细胞SKOV3自噬和凋亡的研究

目的:探讨自噬基因Beclin 1在人卵巢癌SKOV3细胞中过表达对其体外生长活性的影响。方法:构建自噬基因Beclin 1的真核表达载体pcDNA3.1/Beclin1,将其稳定转染SKOV3细胞,实现Beclin 1在SKOV3中的过表达;用MTT法分析Beclin1过表达对SKOV3增殖的影响,用流式细胞仪检测凋亡和自噬情况,电镜和荧光显微镜下观察自噬现象。结果:pcD-NA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后Beclin 1在mRNA和蛋白水平均高于空质粒pcDNA3.1转染组和未转染组。Beclin 1在SKOV3中的稳定过表达后G1期细胞明显增多,S期细胞比例明显减少,细胞增殖受到抑制,凋亡率为(21.26±3.89)%,高于空质粒pcDNA3.1转染组和未转染组,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测pcDNA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后MDC标记的自噬囊泡平均荧光强度高于pcDNA3.1转染组和未转染组。pcDNA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后在电镜下可见大量自噬囊泡形成。在荧光显微镜下见pcDNA3.1/Beclin1转染后SKOV3细胞中MDC标记的自噬囊泡明显增加。结论:自噬基因Beclin1过表达可诱导人卵巢癌细胞SKOV3自噬和凋亡,针对自噬基因Beclin1的卵巢癌基因治疗可能具有可行性。     

饱和脂肪酸与单不饱和脂肪酸对HepG2细胞自噬和凋亡的影响

目的比较饱和脂肪酸棕榈酸(palmitic acid,PA)和单不饱和脂肪酸油酸(oleic acid,OA)对HepG2细胞凋亡和自噬的影响。方法 PA和OA处理HepG2细胞,CCK-8检测脂肪酸的细胞毒性,caspase-3活性测定检测脂肪酸对细胞凋亡的影响,油红O染色检测细胞内脂质沉积,酶法检测细胞内甘油三酯的含量,Western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和凋亡相关蛋白caspase-3的表达,实时荧光定量PCR检测相关基因表达。结果 PA和OA都均同时诱导HepG2细胞凋亡与自噬,但PA的影响明显强于OA;PA诱导HepG2细胞自噬相关基因LC3B和VPS38表达、促进脂肪酸β-氧化的PPARα基因mRNA水平升高,但对细胞内脂肪沉积没有明显作用;而OA则导致HepG2细胞内甘油三酯的水平明显增加,但对上述基因表达没有明显影响。结论饱和脂肪酸PA和不饱和脂肪酸OA均能引起HepG2细胞凋亡和自噬,但PA的作用强于OA。     

mTOR信号通路在细胞自噬和凋亡调节中的作用

自噬及凋亡广泛存在于细胞中,是细胞内生物大分子的降解再循环过程,在细胞生长代谢中发挥着重要作用.两者相互作用,共同推动和影响细胞的程序性死亡,维持机体自身稳态及外界环境刺激下的应激反应.mTOR信号通路是一条经典的调控自噬凋亡信号通路,在细胞代谢中发挥重要作用.结合mTOR信号通路探讨自噬及凋亡在细胞代谢及生物体生长发...     

雷帕霉素对人急性淋巴细胞白血病细胞SUP-B15的增殖、凋亡与自噬的影响

目的探讨雷帕霉素(RAPA)对人急性淋巴细胞白血病SUP-B15细胞的增殖、自噬与凋亡的影响。方法常规方法复苏、传代培养SUP-B15细胞,设置空白对照组(正常培养)、雷帕霉素处理组。处理24、48、72 h后收集细胞,采用MTT比色法检测细胞的活性和增殖能力;采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;吖啶橙单染及透射电镜观察细胞自噬现象。结果 MTT检测结果显示,RAPA对SUP-B15细胞增殖有较强抑制作用(IC50=18.174 nmol/L),且抑制作用随药物剂量增加和作用时间延长而增强;流式细胞仪检测细胞凋亡结果显示,不同浓度RA-PA作用可诱导SUP-B15细胞凋亡,作用48、72 h细胞凋亡较24 h时明显;RAPA作用48 h时的细胞凋亡随药物浓度增大而增多,72 h时高剂量药物(50、100 nmol/L)引起的细胞凋亡较低剂量药物(10、20 nmol/L)少;吖啶橙单染荧光显微镜观察显示,与空白对照组相比,雷帕霉素处理组细胞胞质中出现较多红色斑点的酸性膜泡(即自噬小体),且随药物浓度增大红色斑点增多;透射电镜观察结果显示,雷帕霉素处理组细胞胞质内可见较多自噬小体和自噬溶酶体,线粒体内嵴明显紊乱,细胞核不规则,染色质边缘化。结论雷帕霉素对SUP-B15细胞生长有较强的抑制作用;雷帕霉素可诱导SUP-B15细胞发生自噬和凋亡,且自噬的发生先于凋亡出现,一定强度的自噬活性可诱导细胞凋亡增加。     

纳米材料诱导细胞自噬的研究进展

细胞自噬是一种"清道夫"式的细胞保护程序,保护自身细胞不受来自内部或外界的伤害。随着细胞自噬研究的深入进展,科学家们开始关注与细胞自噬相关的其他方面问题的研究,其中纳米材料诱导的细胞自噬得到了高度关注,且越来越多的研究表明,纳米材料能引起细胞自噬。本文从当前关于纳米材料与细胞自噬关系的现有研究结果出发,针对水溶性富勒烯及其衍生物、稀土金属氧化物、量子点、石墨烯等纳米材料对细胞自噬的诱导和抑制作用,做简单综述。     

自噬相关蛋白14对氟致人神经母细胞瘤细胞自噬和凋亡的影响

目的 探讨自噬相关蛋白14(ATG14)在氟致神经毒性中的作用.方法 不同浓度氟化钠(NaF)(0、20、40、60 mg/L)染毒人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)24 h,采用CCK-8试剂盒测定细胞存活率,流式细胞术测定凋亡率,免疫印迹法测定UNC-51样激酶1(UNC-51-like kinase 1,ULK...     

自噬组分参与细胞外囊泡介导代谢性肝病的研究进展

目的 为外源物诱导非酒精性脂肪性肝炎/肝病等损伤的预防控制和靶向干预提供线索。方法 运用PubMed数据库对自噬组分参与细胞外囊泡生物学发生的调控机制及其与肝脏代谢作用关系进行文献分析。结果 阐明不同外源物介导代谢性肝病的细胞外囊泡相关性通路及细胞外囊泡技术的靶向应用。结论 细胞外囊泡相关性自噬溶酶体通路是防治代谢性肝病潜在的干预靶点。     

自噬与糖尿病性视网膜病变的研究进展

随着生活水平的不断提高,糖尿病患者的数量逐年增多.作为糖尿病患者严重的并发症之一,糖尿病视网膜病变的患者也日益增多.目前对于糖尿病视网膜病变的机制,仍然不明确.近年来自噬在糖尿病视网膜病变的发生发展中所起的作用成为了临床研究的热点.在糖尿病视网膜病变的发生和发展中,自噬的调控与生长因子、胰岛素、营养物质及能量水平等多种...     

细胞自噬与脓毒症

自噬可分为3种类型：微自噬(microautophagy)、分子伴侣介导的自噬(chaperone mediated autophagy,CMA)和巨自噬(macroautophagy)。巨自噬(简称自噬autophagy)是一种基因调控的、高度保守的细胞降解过程,也是一种重要的自我平衡的过程,发生于所有真核细胞中［1-3］。在针对应激的过程中,自噬常常扮演着细胞应答的角色［4］。而且,自噬无论在先天免疫还是适应性免疫机制中均有着不可忽视的重要作用［2］。自噬与各种疾病的病理及生理过程广泛相关（例如感染、肿瘤、神经退行性疾病、心血管及肺部疾病等）,近期的研究［5-6］也表明,自噬在脓毒症中发挥一定的保护作用。本文从细胞病理学和分子生物学角度就细胞自噬在脓毒症发生发展中的作用作一综述,为寻找脓毒症治疗的新手段提供依据与线索。     

甲基苯丙胺对SH-SY5Y细胞PINK1/Parkin介导的自噬流及凋亡影响

目的 观察甲基苯丙胺(METH)对SH-SY5Y细胞PINKl/Parkin介导的线粒体自噬的作用,探讨自噬流进程及对细胞凋亡的影响.方法 在体外培养的SH-SY5Y细胞中加入含不同浓度的METH(0.0、1.0、1.5、2.0 mmol/L)培养基,诱导24 h后,流式细胞术检测细胞凋亡情况;透射电镜观察线粒体自噬现...     

细胞自噬与人乳头瘤病毒感染研究进展

自噬是细胞在适应营养缺乏时,通过溶酶体降解自身成分来维持自稳态的一个重要过程,在炎症、神经退行性疾病、肿瘤和抗病毒感染中都有重要作用.HPV是噬上皮组织的双链DNA病毒,能够引起良性增生或增加恶性病变风险.目前已知自噬在肿瘤发生和病毒感染中有重要作用,自噬相关的Beclin1,p62,LC3等基因在HPV感染的组织样本和细胞系中,表达均有明显改变;而且HPV的早期和晚期基因也能够引起自噬过程和自噬流的改变.本文就细胞自噬与HPV感染相关进展进行综述.     

胎盘滋养细胞自噬的研究进展

自噬是一种从酵母菌到哺乳动物细胞中均广泛存在的保守性细胞物质清除机制。在细胞和组织重塑、抵御细胞外刺激和病原体的过程中,细胞内组分可以转移到溶酶体中完成物质的新陈代谢,这对于维护细胞内稳态和物质、能量平衡都至关重要。本文主要探讨滋养细胞自噬在胎盘形成、孕早期滋养细胞缺氧、胚胎着床等过程中的重要作用,并阐述自噬及自噬相关基因与子痫前期及胎儿生长受限发生的相关性。     

矽肺患者肺灌洗液巨噬细胞自噬与凋亡分析

[目的]研究不同期别矽肺患者肺灌洗回收液中巨噬细胞自噬活动强弱的变化以及与凋亡的联系.[方法]选择接尘观察对象、壹期、贰期、叁期矽肺患者各30例作为研究对象.调查职业史,并采用大容量全肺灌洗术,收集灌洗回收液,分离肺巨噬细胞.运用透射电子显微镜观察肺组织切片中自噬前体、自噬体、自噬溶酶体等,并检测肺巨噬细胞早期凋亡率. [结果]观察对象肺巨噬细胞胞核周围可观察到自噬体;壹期矽肺患者肺巨噬细胞胞核附近可观察到自噬前体、胞浆中其他细胞器均较少见;贰期矽肺患者肺巨噬细胞胞核周围自噬体、自噬溶酶体较多见;叁期矽肺患者肺巨噬细胞胞浆中可见成群大小不等初级溶酶体,但未观察到典型的自噬前体、自噬体、自噬溶酶体.观察对象、壹期、贰期、叁期矽肺患者肺巨噬细胞凋亡率分别为(15.28±0.20)％、(18.13±0.58)％、(19.56±1.07)％、(23.92±2.52)％,各组间凋亡率差异有统计学意义(P＜ 0.01). [结论]不同期别矽肺患者肺巨噬细胞自噬活动强弱以及凋亡程度不同,巨噬细胞自噬与凋亡在矽肺纤维化发生发展中可能起一定作用.     

细胞自噬与妊娠

细胞自噬是一种重要的生命现象,具有广泛的生理功能。细胞自噬的基本功能是对饥饿的适应,可使细胞在饥饿条件下生存,因此是一种促细胞生存机制。细胞自噬还有助于细胞稳态的维持。最近研究证明细胞自噬与妊娠密切相关。正常妊娠早期存在细胞自噬,其可保护滋养细胞生存,并可参与滋养细胞的分化、发育、侵入和母体螺旋动脉重铸的过程。妊娠中晚期也存在细胞自噬,其可促进胎盘发育,维持妊娠。细胞自噬也与病理妊娠有关：细胞自噬异常与子痫前期密切相关;细胞自噬增强参与胎儿生长受限的发病过程;细胞自噬降低与早产密切相关。     

自噬在氯化镉诱导小鼠初级精母细胞凋亡中的作用

目的 探究自噬在氯化镉(cadmium chloride, CdCl₂)诱导小鼠初级精母细胞(GC-2 spd)凋亡中的作用及其潜在作用机制。方法 以不同浓度CdCl₂(0、5和10μmol/L)染毒GC-2 spd细胞24 h。Hoechst33342染色法和单丹磺酰戊二胺法分别检测凋亡小体和自噬体;TUNEL荧光染色检测细胞凋亡情况;在不含/含CdCl₂(10μmol/L)的细胞培养液中分别加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(60μmol/L)、凋亡抑制剂胱天蛋白酶家族抑制剂(50 nmol/L)、自噬激动剂雷帕霉素(50 nmol/L)和溶酶体抑制剂氯喹(10μmol/L)处理GC-2 spd细胞24 h, Western blot检测细胞内自噬相关蛋白LC3、P62以及促凋亡蛋白cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9的表达水平。结果 CdCl₂染毒细胞24 h后,自噬体聚集且凋亡细胞增多。Western blot结果显示,5和10μmol/L CdCl_2<...     

自噬与肿瘤

自噬是细胞内清除受损或多余蛋白和细胞器的一种降解途径,通过对这些物质的重新利用应对细胞内的代谢应激。自噬既参与机体正常生理功能的调节如代谢和免疫等,影响细胞的增殖和死亡,在维护机体的生理平衡和内环境的稳定发挥重要作用;同时还参与多种疾病的发生发展,甚至影响疾病的治疗疗效,目前涉及的疾病主要包括肿瘤、感染和神经退行性变等,其中自噬与肿瘤的相关性研究备受关注。自噬对限制肿瘤坏死与炎症具有保护性作用,也可缓解代谢应激时肿瘤基因组的损伤;相反通过调控自噬水平可影响放化疗的疗效。本文在简要介绍自噬生理功能的基础上,着重阐述自噬介导肿瘤发生发展及治疗。     

自噬紊乱在锰刺激诱导SN4741细胞损伤中的作用与机制研究

目的 通过利用氯化锰刺激SN4741细胞（小鼠多巴胺能细胞）,构建体外锰暴露模型,研究自噬紊乱在锰中毒中的作用,并初步探讨机制。方法 向SN4741细胞培养基中加入400 μmol/L的氯化锰溶液,检测细胞活力通过CCK-8 (Cell Counting Kit-8,CCK-8)试剂盒,分别检测锰作用0 h~48 h的细胞活力;凋亡蛋白Caspase-3和PARP,自噬相关蛋白Atg5和LC3的蛋白表达水平采用蛋白印迹法(western blot)检测;3-MA作为实验干预组抑制自噬紊乱,之后检测上述细胞自噬蛋白水平和损伤指标,采用方差分析进行比较。结果 锰刺激48h后损伤SN4721细胞活力(t=47.42,P=0.0013),凋亡标志蛋白Caspase-3剪切增加,下游分子PARP的剪切水平升高(t=11.96,P=0.019);Atg5和LC3-Ⅱ蛋白表达在锰暴露24h有所升高,48h升高更明显(t=18.72,P=0.012);3-MA干预后降低锰对SN4741细胞损伤(t=3.92,P=0.045),且3-MA干预致Atg5水平下降,Caspase-3蛋白和PARP等标志凋亡的蛋白水平降低(t=10.21,P=0.016)。结论 锰暴露可诱导多巴胺神经元自噬功能异常,继而诱导细胞凋亡,抑制自噬能减少锰暴露引起的细胞凋亡。