胍丁胺对皮质酮致原代培养大鼠海马神经元损伤的保护作用

目的前期证明胍丁胺作为一种新型神经递质具有抗抑郁作用，本实验通过观察胍丁胺对皮质酮致原代培养海马神经元损伤的保护作用及作用机制，探讨其抗抑郁作用的细胞分子机制。方法体外培养新生大鼠海马神经元，加入不同浓度皮质酮（50～300μmol·L^-1），采用CCK-8试剂盒比色法检测对神经元存活的影响；培养体系内加入胍丁胺，观察对神经元损伤的保护作用；加入H89（PKA特异性抑制剂）或PD98059（MEK特异性抑制剂），观察胍丁胺的神经元保护作用及可能的相关信号通路。结果皮质酮（50～300μmol·L^-1）能够浓度依赖地抑制原代培养海马神经元的存活；同时胍丁胺（5μmol·L^-1）对此损伤具有保护作用；胍丁胺的保护作用可以被H89（20μmol·L^-1）和PD98059（20μmol·L^-1）取消。结论胍丁胺具有神经元保护作用，此作用与cAMP-PKA-CREB通路和MEK-ERK-CREB通路密切相关。     

多氯联苯对体外培养大鼠海马神经元毒性的研究

目的：研究多氯联苯（PCB）对体外培养大鼠海马神经元细胞生长，存活的影响。方法：体外法培养大鼠海马神经元细胞经不同剂量PCB共培养后，用MTT法观察海马神经元细胞生长，发育，结果：高浓度的PCB明显抑制海马神经元细胞的存活率，10^-4mol.L^-1组同对照组相比相差极显著（P＜0．01），10^-7mol.L^-1,10^-6mol.L^-1组同对照组相比相差显著（P＜0．05），海马神经元细胞存活率明显降低。结论：PCB对海马神经元细胞可产生明显的神经毒性。     

大鼠睡眠剥夺后下丘脑一氧化氮合酶mRNA表达的变化

目的观察快动眼睡眠剥夺大鼠下丘脑神经元型一氧化氮合酶 (nNOS )及诱导型一氧化氮合酶(iNOS )mRNA表达的时相变化。方法小站台水环境法剥夺大鼠睡眠 2 4h、48h及 72h后 ,用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR )检测其下丘脑nNOS及iNOSmRNA的表达。结果睡眠剥夺 2 4h组nNOSmRNA表达量显著增加 (P <0 .0 1 ) ,剥夺 48h组与对照组比较无显著差异 ,剥夺 72h组nNOSmRNA的表达量低于对照组水平 (P <0 .0 5 ) ;睡眠剥夺 2 4h和 48h组iNOSmRNA的表达量无显著变化 ,但剥夺 72h组iNOSmRNA的表达量大幅度增加 (P <0 .0 1 )。结论睡眠剥夺后NOS基因表达增加 ,可能是睡眠“反跳”现象的机理之一 ;持续的睡眠剥夺状态下较高水平的NO还可能参与了睡眠剥夺对机体功能的损伤     

银杏内酯B对谷氨酸诱发原代培养皮层神经元损伤的实验研究

目的观察银杏内酯B（Ginkgobalide B，GB）对谷氨酸致原代培养皮层神经元损伤的保护作用。方法采用体外培养皮层神经元的方法，利用终浓度为0．5mmol·L^-1的谷氨酸造成皮层神经元损伤，通过测定细胞存活率、细胞活性、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、丙二醛（MDA）含量，超氧化物歧化酶（SOD）活性，研究GB对谷氨酸造成神经元损伤的保护作用机制。结果GB10^-5 mol·L^-1可抑制谷氨酸所致LDH漏出率的升高。GB10^-4、10^-5 mol·L^-1可提高神经细胞活性；扭转谷氨酸致神经细胞存活率的下降；升高SOD酶的活性，抑制谷氨酸所致MDA含量的升高。结论提示GB对谷氨酸所致原代皮层神经元的损伤具有保护作用。     

高原环境对阿莫西林药代参数的影响研究

目的探讨急进高原后大鼠体内阿莫西林药代动力学参数的变化。方法Wistar大鼠于平原地区和急进高原后灌胃给药,分别于给药前（0h）及给药后0．33、0．66、1、1．5、2、3、4、6、8、12、24h采血,采用LC—MS／MS方法测定血药浓度,并分别计算蛋白结合率和药代动力学参数。结果急进高原组血浆蛋白结合率（45．oo％）与平原组血浆蛋白结合率（36．31％）相比显著升高,药一时曲线下面积从（11616．40±1071．92）μg·L^-1·h增大到（47879．24±9417．18）μg·L^-1·h,急进高原后体内平均驻留时间延长,峰浓度增大,清除率降低。结论统计学分析结果显示急进高原后,阿莫西林在大鼠体内药代动力学参数发生显著变化,为进一步研究人体药代动力学提供实验基础和参考依据。     

重组人生长激素在猕猴体内相对生物利用度研究

目的评价重组人生长激素（rhGH）冻干粉针剂受试制剂与参比制剂在猕猴体内的相对生物利用度。方法猕猴随机分成两组，运用交叉设计方法，先后接受皮下注射受试制剂或参比制剂0．5IU·kg^-1，测定不同时间点生长激素血药浓度，并进行相关药动学参数分析。结果受试制剂与参比制剂的主要药代动力学参数Tmax分别为（3．0±1．4）、（2．3±1．8）h；Cmax分别为（173．2±79．0）、（159．0±41．3）μg·L^-1；AUC（0-12h）分别为（1139±258）、（1108±390）μg·h·L^-1；结论受试制剂的相对生物利用度为（107±16）％。     

脑源性神经营养因子对多巴胺能神经元的影响

目的观察脑源性神经营养因子对帕金森氏病大鼠模型黑质多巴胺能神经元的影响。方法选用Wistar种系大白鼠，体重230～250g，随机分3组，通过左侧中脑黑质立体定向注射法，组1为生理盐水对照组（简称对照组）10只，注射相应量（5μl）的生理盐水；组2为注射6-OHDA制作帕金森氏病模型组（简称6-OHDA组）10只，注射6-OHDA，5μl（2μg／μl）；组3为（6-OHDA＋BDNF组），在制成帕金森氏病模型后再向同侧中脑黑质注射BDNF5μl（3μg／μl），连续6d，qd。分别观察动物的旋转行为，免疫组化染色方法观察黑质酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经元的数量，高效液相法测定纹状体部多巴胺（DA）含量的变化。结果单侧黑质内注入6-OHDA制成帕金森氏病大鼠模型后，6-OHDA组与对照组比较，产生旋转行为，（6-OHDA＋BDNF）组在观察旋转行为时，症状明显改善；镜下见TH阳性神经元主要见于对照组的黑质致密部，数量为42．3±7．56个／μm^2，模型组黑质致密部TH阳性神经元数明显减少为2．41±1．07个／μm^2，（6-OHDA＋BDNF）组黑质致密部TH阳性神经元数为15．36±3．04个／μm^2；纹状体部多巴胺含量：生理盐水组为11．4±1．2μg／g，6-OHDA组3．6±0．5μg／g，（6-OHDA＋BDNF）组5．5±0．6μg／g。结论①6-OHDA对黑质多巴胺能神经元有损害作用，制成偏侧帕金森病大鼠模型。②BDNF能改善6-OHDA所致的帕金森氏病大鼠黑质多巴胺能神经元数目的减少；BDNF能明显抑制6-OHDA引起的纹状体部多巴胺含量降低；BDNF可抑制6-OHDA对黑质多巴胺能神经元的毒性作用。     

RP-HPLC法测定畅中胶囊中盐酸小檗碱的含量

目的建立RP—HPLC法测定畅中胶囊中盐酸小檗碱的含量。方法以磷酸盐缓冲液[0．05mol·L^-1磷酸二氢钾和0．05mol·L^-1庚烷磺酸钠（1：1），含0．2％三乙胺，并用磷酸调pH至3．0]-乙腈（62：38）为流动相，Thermo ODS-2 HPYERSIL为固定相，检测波长为424nm。结果盐酸小檗碱0．7325～7．325μg的范围内线性关系良好（r=0．999），平均回收率为98．93％，RSD为2．12％，结论该法快捷、简便、准确，能更好的控制其质量。     

伏立康唑胶囊在健康人体的生物等效性研究

目的研究伏立康唑胶囊和片剂在健康人体的生物等效性。方法采用随机自身交叉给药方法,24例健康男性志愿者单剂量口服伏立康唑胶囊与片剂。用液质联用方法测定血浆中的伏立康唑浓度,计算药代动力学参数。结果伏立康唑胶囊和片剂的的主要药代动力学参数,Tmax分别为（0．9±0．46）、（0．9±0．54）h;Cmax分别为（2340．83±607．95）、（1950．83±656．25）μg·L^-1;t1／2分别为（8．6±3．53）、（8．8±4．16）h;AUC0-tn分别为（11529．38±6501．42）、（10217．92±5428．32）μg·h·L^-1;AUC0-∞分别为（12779．70±8020．12）、（11404．55±7156．16）μg·h·L^-1。受试制剂与参比制剂比较,受试制剂的相对生物利用度F0-tn、F0-∞分别为（114．08±20．92）％、（113．84±22．50）％。结论伏立康唑胶囊和片剂具有生物等效性。     

LC-MS法测定国人血浆中非那雄胺浓度及生物等效性研究

目的建立非那雄胺血药浓度的LC—MS测定法,用于人体生物等效性研究。方法采用随机双交叉实验设计,20名健康受试者口服受试制剂和参比制剂2mg,用LC—MS法测定国人血浆中的非那雄胺浓度。结果受试制剂和参比制剂的AUC0-24分别为（123．95±25．47）、（126．35±28．16）μg·h·L;AUC0-∞分别为（126．12±27．48）、（129．85±29．12）μg·h·L^-1;Cmax分别为（22．17±3．83）、（22．48-＋4．69）μg·L^-1;Tmax分别为（3．1±0．6）、（2．9±0．8）h;T1／2分别为（4．2±0．3）、（4．3±0．5）h。受试制剂的相对牛物利用度为（99．4±9．2）％。结论经统计学分析,两种非那雄胺片剂具有生物等效性。     

多奈哌齐与维拉帕米对大鼠阿尔茨海默病的干预研究

目的探讨多奈哌齐与维拉帕米对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力、脑组织一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)浓度的影响。方法 SAD大鼠40只,随机分为假手术组、模型组、多奈哌齐组和联合用药组。采用5μl Aβ1-40(2μg/μl)右侧海马区立体定向微量注射法制备大鼠AD模型,通过Morris水迷宫和三筒互通脑功能仪检测大鼠学习记忆变化,采用生化方分光光度法检测大鼠海马及大脑皮层中NO、NOS的含量。用多奈哌齐与维拉帕米以灌胃方法对模型大鼠进行干预,观察其实验效果。结果模型组较假手术组学习记忆能力显著降低,海马及大脑皮层NO、NBOS含量显著升高;多奈哌齐组和联合用药组较模型组学习记忆能力有所升高(P<0.05),海马及大脑皮层NO含量及NOS活性均有所降低(P<0.05)。其中联合用药组有些指标与模型组有差异显著(P<0.01)。结论用Aβ1-40右侧海马区立体定向微量注射法可建立AD动物模型,多奈哌齐与维拉帕米可改善AD模型大鼠的学习记忆,降低海马及大脑皮质NO和NOS含量,并且两药联合使用效果显著。     

Fos expression in the suprachiasmatic nucleus in rats following high altitude exposure

INTRODUCTION: Disturbances of circadian rhythms occur at high altitude. We examined the suprachiasmatic nucleus (SCN), considered to be the biological clock in mammals that regulates circadian rhythmicity, in adult rats following an exposure to simulated high altitude. METHODS: Male adult Wistar rats weighing 250 g were exposed to an altitude of 8000 m in an altitude chamber, following which they were sacrificed at various time intervals ranging from 45 min to 3 d. Normal rats of similar weight kept outside the chamber were used as controls. Sections of hypothalamus containing the suprachiasmatic nucleus were processed immunohistochemically for expression of Fos, neuronal nitric oxide synthase (nNOS), and endothelial nitric oxide synthase (eNOS). RESULTS: At 45 min, 4 h, and 24 h following the altitude exposure, a large number of Fos-positive neurons were detected as compared with the control rats in which occasional Fos-positive neurons were observed. Increased expression of nNOS and eNOS was also observed at 45 min and 4 h following the altitude exposure. CONCLUSIONS: It is suggested that the neuronal activation indicated by upregulated expression of Fos and nitric oxide (NO) generated by nNOS may be involved in the disturbed circadian rhythms of the cardiovascular system (e.g., heart rate and BP), hormone secretion, and sleep-wake cycle which occur frequently during sojourns to high altitude. Increased eNOS expression also indicates excess production of NO, which may be involved in vasodialation and increased blood flow to the SCN following the exposure and may also be involved in modulating the circadian rhythms at high altitude.     

烟酰胺对甲基苯丙胺注射后大鼠脑组织中SOD、NO和MDA表达的影响

目的：观察甲基苯丙胺（MA）所致大鼠脑组织中一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的变化及烟酰胺（Nicotinamide,Ni）的保护作用。方法：实验分为4组,分别给予MA,Ni,MA＋Ni和生理盐水,观察4组脑组织中NO、SOD、MDA的变化及相互关系。结果：MA给药模型中SOD的含量有显著性下降,NO和MDA均有显著性上升。预先应用Ni能使SOD的下降和NO与MDA的上升显著减轻,MA＋Ni组与MA组间比较,差异有显著性意义（P〈0.01）。结论：Ni可以减轻MA对神经的损伤,其机制可能与提高SOD活性,清除氧自由基抑制脂质过氧化有关。     

选奇滴丸对偏头痛动物模型血清中NO 5-HT浓度的影响

目的观察选奇滴丸对偏头痛大鼠血清中一氧化氮、五羟色胺浓度的影响,探讨选奇滴丸治疗偏头痛的机制。方法 Wistar大鼠随机分为6组：空白对照组、模型对照组、阳性药物对照组（正天丸2 g·kg-1）、选奇滴丸低、中、高剂量组（0.29、0.59、1.18 g·kg-1）,各组连续灌胃给药7 d（空白对照组与模型对照组给予等量纯净水）,末次给药30 min后,除空白对照组外,其余各组采用皮下注射硝酸甘油法制备偏头痛模型。造模4 h后腹主动脉采血,采用硝酸酶还原法测定一氧化氮浓度,酶联免疫吸附法测定五羟色胺含量。结果与模型对照组比较,阳性药物对照组,选奇滴丸低、中、高剂量组均能显著降低偏头痛大鼠血清中一氧化氮浓度,升高血清中五羟色胺浓度。结论选奇滴丸治疗偏头痛与其调节偏头痛大鼠一氧化氮与五羟色胺的水平密切相关。     

阿魏酸钠对抗Aβ_（25-35）诱导的鼠神经元凋亡作用研究

目的探讨阿魏酸钠对β淀粉样蛋白（Aβ25-35）通过谷氨酸诱导的鼠皮层神经元凋亡的影响。方法 培养的皮层神经元分别与谷氨酸（20μmol/L）、Aβ25-35（5μmol/L）、Aβ25-35（5μmol/L）＋谷氨酸（20μmol/L）孵育,采用Hoechst 33258荧光染色法分析神经细胞凋亡;然后用谷氨酸（50μmol/L）诱导神经元凋亡,采用荧光染色法和Western blot观察阿魏酸钠的保护作用。结果单独应用Aβ25-35（5μmol/L）和单独加入谷氨酸（20μmol/L）引起的皮层神经元凋亡率与对照组无明显差异;Aβ25-35与皮层神经元共同孵育5天,接着用谷氨酸处理24h,细胞凋亡率从正常的9.2%±1.5%增加到43%±8%;阿魏酸钠能够显著降低谷氨酸诱导的神经细胞凋亡百分比至21%±5%,并对抗谷氨酸引起的Bcl-2蛋白表达的降低。结论阿魏酸钠能够减弱Aβ25-35提高谷氨酸毒性诱导的鼠皮层神经元凋亡。     

睡眠剥夺36h对青年军人心理旋转能力的影响及其事件相关电位研究

目的:探讨36 h睡眠剥夺对青年军人心理旋转的脑电生理指标的影响。方法:15名健康青年军人在36 h睡眠剥夺条件下,分别在睡眠剥夺前后进行心理旋转任务的事件相关电位(event-related potentials,ERP)测定。测量P500的潜伏期、波幅及其错误数和反应时。结果:①与SD 0 h[正像:23%±6%,(522.64±14.26)ms;镜像:25%±5%,(542.61±12.31)ms]相比,SD 36 h正像错误率(24%±6%)差异不显著(P>0.05),镜像错误率(27%±8%)显著升高(P<0.05),正镜像反应时[正像:(589.10±16.73)ms,镜像:(616.10±14.69)ms]均显著延长(P<0.05);②与SD 0 h波幅[正像:(8.67±2.34)μV;镜像:(6.69±2.63)μV]、潜伏期[正像:(474.17±24.65)ms;镜像:(483.51±25.12)ms]相比,SD 36 h正像波幅(8.58±3.51)μV差异不显著(P>0.05),镜像波幅(6.04±2.45)μV降低,正、镜像潜伏期[正像:(490.31±34.68)ms;镜像:(498.56±35.15)ms]均延迟,均差异有统计学意义(P<0.05)。结论:36 h睡眠剥夺在一定程度上损害心理旋转能力,正镜像受损程度不一致,其中镜像心理旋转能力严重受损。     

补锌对缺锌大鼠烧伤后肠道细菌移位及毒血症的影响

目的:探讨补锌对大鼠烧伤后肠道细菌移位及毒血症的影响。方法:90只SD大鼠进食低锌饲料(含锌量:1.6ug·g-1)1周,造成缺锌模型,并随机分为正常对照组(A)、烧伤对照组(B)、烧伤治疗组(C)。B组和C组造成20%总体表面积Ⅲ度烧伤。B组伤后继续进食低锌饲料,C组伤后进食正常含锌饲料(含锌量:24.7ug·g-1)。采用甲基-3H胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)标记致病大肠杆菌,在烧伤前注人大鼠的胃肠道。在不同的时象点,检测血浆内毒素(LPS)含量、血和肝的3H放射活性。结果:(1)B、C组3H的放射活性和血浆LPS含量显著高于A组(P<0.05);同时,C组显著低于B组(P<0.05)。(2)B、C组肝的3H放射活性比A组显著增高(P<0.05),C组比B组低。结论:烧伤后补锌能减轻大鼠肠道细菌移位及毒血症。     

高原健康人缺氧诱导因子-1α、诱导性一氧化氮合酶和一氧化氮的海拔性变化与红细胞变形能力的关系研究

目的：观察缺氧诱导因子-1α、诱导性一氧化氮合酶、一氧化氮和红细胞滤过指数在不同海拔的变化,探讨缺氧诱导因子-1α、诱导性一氧化氮合酶和一氧化氮的海拔性变化对红细胞变形能力的影响。方法：对不同海拔高度（西宁2 260m A组、刚察县3 300m B组、甘德县4 800m C组）320例健康人检测了缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、诱导性一氧化氮合酶（i NOS）、一氧化氮（NO）和红细胞滤过指数（EFI）。结果：随着海拔的升高,健康人HIF-1α水平和EFI上升,而i NOS和NO随之降低;甘德组HIF-1α水平（7.65±1.36）μg/L明显高于刚察组（5.39±1.02）μg/L和西宁组（4.18±1.14）μg/L（均P〈0.01）,刚察组HIF-1α水平明显高于西宁组;甘德组血清i NOS和NO（5.86±1.43）μmol/L、（38.53±4.23）μmol/L明显低于刚察组（9.44±2.13）μmol/L、（47.85±3.77）μmol/L和西宁组（12.23±2.07）μmol/L、（59.23±4.01）μmol/L（均P〈0.01）,同时刚察组i NOS和NO水平明显低于西宁组（P〈0.01）;EFI随着海拔升高而增加[西宁组：（4.67±0.49）μmol/L、刚察组：（7.05±1.51）μmol/L、甘德组：（11.45±1.78）μmol/L],各组比较有明显差异（P〈0.01）;相关分析表明：EFI与HIF-1α水平呈正相关（P〈0.01）;而与i NOS和NO呈负相关。结论：HIF-1α、i NOS和NO海拔差异性的形成在红细胞变形能力异常的病理生理机制中发挥着重要作用,而随海拔高度升高机体i NOS和NO水平的生物学特性进一步降低是导致海拔差异健康人红细胞流变形异常加重的中心环节。     

低浓度超顺磁性氧化铁标记兔骨髓间充质干细胞的体外磁共振成像研究

目的:以浓度为25μg Fe/ml的超顺磁性氧化铁纳米粒子(SPIO)体外标记兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),并探讨1.5 T核磁共振仪成像的特征和成像所需最低标记细胞浓度,以及在标记后1 d、1周、2周、3周、4周的信号变化特征。方法:分离、纯化、培养兔BMSCs并以25μg Fe/ml的SPIO培养液浓度标记,对标记后不同时间的细胞行普鲁士蓝染色和台盼蓝拒染后显微镜观察,并进行MR成像,测量不同序列下不同浓度标记细胞管的信号强度,以确定扫描敏感序列及成像所需最低标记细胞浓度;再测量不同细胞浓度不同时相信号强度,来观察信号强度随时间变化的规律,并进行统计学分析。结果:浓度为25μg Fe/ml的超顺磁性氧化铁纳米粒子标记BMSCs的有效率接近100%,普鲁士蓝染色见细胞浆内有大小不等的蓝染铁颗粒,且在标记后4周内细胞仍具有活力,标记后的BMSCs在T2WI、尤其是GRE(T2*WI)序列信号明显降低;并且细胞浓度越高信号降低越明显,GRE序列MR成像的最低细胞浓度为5×104/ml。当标记细胞浓度为5×104/ml时,信号在T2*WI序列的降低2周后失去统计学意义;而在细胞浓度为5×105/ml时,标记3周后,信号在T2*WI序列的降低才失去统计学意义。结论:25μg/ml铁浓度标记干细胞不仅标记效率高,而且对细胞生长及增殖活力无明显影响,标记后MR信号改变与干细胞数目及标记时间相关。     

非酒精性脂肪性肝病兔肝组织硫化氢与一氧化氮的变化

目的观察非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）兔肝组织硫化氢（H2S）、一氧化氮（NO）浓度,探讨H2S、NO在NAFLD发病中的作用。方法 40只日本大耳白兔随机分为重度NAFLD组（重度组）、轻度NAFLD组（轻度组）、空白对照组（对照组）。重度组给予高脂饲料160 g/（兔.d）,轻度组给予高脂饲料80 g/（兔.d）及普通饲料80 g/（兔.d）,对照组给予普通饲料160 g/（兔.d）。均饲养13 w。实验前后采集血浆标本,检测甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）;肝组织匀浆检测NO、H2S浓度;肝组织HE染色,光镜观察肝脏病理学。结果 （1）饲养后重度组TC、TG分别为（32.12±1.25）、（6.02±2.12）mmol/L,轻度组TC、TG分别为（18.34±2.10）、（4.39±1.93）mmol/L,均高于各组饲养前（P〈0.01或P〈0.05）,饲养后重度组高于轻度组（P〈0.05）。（2）重度组（132.4±20.7）μmol/g蛋白和轻度组（95.4±20.7）μmol/g蛋白肝组织NO浓度显著高于对照组（74.9±34.7）μmol/g蛋白（P〈0.01）,重度组又显著高于轻度组（P〈0.01）。（3）与对照组比较,重度组和轻度组肝组织H2S明显下降（P〈0.01或P〈0.05）,重度组与轻度组比较下降更显著（P〈0.05）。（4）重度组肝脏病理学改变呈重度NAFLD,轻度组呈轻度至中度NAFLD。结论 NO、H2S参与NAFLD的发生、发展,通过干预NO、H2S防治NAFLD可能是未来方向。