胚鼠大脑皮质一氧化氮合酶阳性神经元的体外生长发育研究

本文在体外培养条件下观察了孕 14 d SD胚鼠大脑皮质中一氧化氮合酶阳性神经元的形态和发育过程。将孕 14 d SD胚鼠大脑皮质细胞悬液接种于 2 4孔培养板 ,实验按培养龄分 4组 ,分别在接种后 5d、10 d、15d和 2 0 d终止培养 ,继而进行NA DPH - d组织化学染色 ,观察各组一氧化氮合酶阳性神经元的数量和形态。结果显示 :培养后 5d即有一定数量的一氧化氮合酶阳性神经元出现 ,在 4个实验组中 ,以 15d组的一氧化氮合酶阳性神经元的数量为最多、突起最长 ,深染细胞数量也最多 ,大部分一氧化氮合酶阳性神经元的胞体与突起均局限分布在细胞团块内 ,胞体大小不一 ,只有少量的一氧化氮合酶阳性细胞散在分布在细胞团块之间 ,其突起伸向或围绕团块。本研究结果表明 ,在胚鼠大脑皮质的神经元内即已有一氧化氮合酶存在 ,提示一氧化氮可能与胚脑的生长发育有关     

大鼠视觉中枢生后发育过程中的一氧化氮合酶阳性神经元的形态及 …

本文用ＮＡＤＰＨ－黄递酶组织化学技术研究了生后不同年龄段（０、７、１４、２１、２８、３５、６０、１２０ｄ）Ｗｉｓｔａｒ大鼠视皮层（１７区）和上丘表层中一氧化氮合酶阳性神经元的形态及分布的变化。结果表明：视皮层１７区中的一氧化氮合酶阳性神经元在生后７ｄ时开始出现，但胞体小，树突分枝少而短，以双极细胞为主，占６８．０％；１４ｄ时数量达到高峰；且１４￣２１ｄ中，该神经元胞体截面积明显增大，树突分枝复杂化     

一氧化氮合酶和5-羟色胺在体外培养的胚鼠脑干神经元内的共存研究

采用 NADPH-d组织化学和 5 -羟色胺免疫组织化学双重反应技术 ,探讨在体外培养条件下 E14 d SD胚鼠脑干神经元中5 -羟色胺与一氧化氮合酶阳性神经元的体外生长发育过程以及 5 -羟色胺与一氧化氮合酶的共存。将 E14 d SD胚鼠脑干细胞悬液接种于 2 4孔培养板 ,实验按培养龄分 4组分别在接种后 5 d、10 d、15 d和 2 1d终止培养 ,先进行 NADPH-d组织化学反应 ,再行 5 -羟色胺免疫组织化学反应。结果显示 :各实验组均可观察到三种神经元 ,即 5 -羟色胺免疫阳性神经元、一氧化氮合酶阳性神经元和两者的双重阳性神经元 ,其中双重阳性神经元占多数 ,并以梭形神经元为主 ,胞体呈三角形、多角形、梭形或卵圆形。 10 d组的双重阳性神经元突起最长可达 60 0μm以上 ,末端可见明显的生长锥 ,轴突终末分支上分布有大量的膨体 ,并与其它神经元的胞体或突起之间形成接触。本研究结果证明一氧化氮合酶和 5 -羟色胺可以在体外培养的胚鼠脑干神经元内共存 ,提示一氧化氮合酶可能与 5 -羟色胺共同参与胚脑的发育。     

神经生长因子受体和一氧化氮合酶在大鼠基底前脑神经元的分布 …

用神经生长因子受体免疫组化，ＮＡＤＰＨ－ｄ组化及两者的双重反应技术观察了神经生长因子受体和一氧化氮合酶在大鼠基底前脑神经元的表达和共存。神经生长因子受体和一氧化氮合酶阳性神经元在基底前脑内部以一条连续的细胞带的形式存在。神经生长因子受体阳性神经元多为多极形，排列较密，由吻侧向尾侧数量逐渐增多；一氧化氮合酶神经元的形状与神经生长因子受体阳性和神经元相似，但数量较少，且由吻侧向尾数量相对稳定。通过双重     

单眼缝合,双眼缝合对猫视觉中枢中一气体氮合酶阳怀神经元数？…

用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法观察了在生后一周内即施行单眼缝合和双眼缝合成活至１年的猫视觉中枢（上丘表层，外膝体和视皮层１７区）中的一氧化氮合酶阳性神经元数量及形态。结果显示：（１）单眼缝合或双眼缝合并不改变上丘表层中一氧化氮合酶阳性细胞的分布模式，也不影响该神经元的数量，但单眼缝合使对侧上丘表层一氧化氮合酶阳性神经元的树突野最大半径减少，树突总长度减少；而双眼缝合可使双侧上丘中一氧化氮合酶阳性细胞     

大鼠视觉中枢生后发育过程中的一氧化氮合酶阳性神经元的形态及分布变化

本文用NADPH-黄递酶组织化学技术研究了生后不同年龄段（0、7、14、21、28、35、60、120d）Wistar大鼠视皮层（17区）和上丘表层中一氧化氮合酶阳性神经元的形态及分布的变化。结果表明：视皮层17区中的一氧化氮合酶阳性神经元在生后7d时开始出现，但胞体小，树突分枝少而短，以双极细胞为主，占68.0％;14d时数量达到高峰;且14～21d中，该神经元胞体截面积明显增大，树突分枝复杂化，长度增加，多极细胞占64％;28d后一氧化氮合酶阳性神经元胞体面积，树突分枝长度明显减小，分枝简单化;35d后接近成年动物水平（120d）.生后7d时，一氧化氛合酶阳性神经元主要位于视区的白质和皮层的5、6层中，7d后该神经元及神经纤维在第2／3及4层中明显增多，这种分布状态在35d后趋于稳定。上丘表层中的一氧化氮合酶阳性细胞在生后第2周逐渐出现，第3周迅速增加，第4周达最大值，以后下降并趋于稳定水平。结果提示：大鼠生后发育过程中视觉中枢的一氧化氮合酶阳性神经元数量及形态变化与视觉发育的可塑性有关。     

神经生长因子受体和一氧化氮合酶在大鼠基底前脑神经元的分布与共存

用神经生长因子受体免疫组化，NADPH－d组化及两者的双重反应技术观察了神经生长因子受体和一氧化氮合酶在大鼠基底前脑神经元的表达和共存。神经生长因子受体和一氧化氮合酶阳性神经元在基底前脑内都以一条连续的细胞带的形式存在．神经生长因子受体阳性神经元多为多极形．排列较密，由吻侧向尾侧数量逐渐增多；一氧化氮合酶神经元的形状与神经生长因子受体阳性神经元相似，但数量较少，且由吻侧向尾侧数量相对稳定。通过双重反应证明，基底前脑神经元包括着神经生长因子受体阳性和一氧化氮合酶阳性以及两者共存的神经元等三种类型。双重反应阳性神经元在形态上和神经生长因子受体阳性神经元相似，其数量从吻侧向尾侧逐渐减少，在前由＋1．0水平，它占一氧化氮合酶阳性神经元的70％，神经生长因子受体阳性神经元的50％；但到前连合水平则仅占一氧化氮合酶阳性神经元的20％和神经生长因子受体阳性神经元的40％。本文对神经生长因子受体与一氧化氮合酶双重反应阳性神经元的分布意义以及此二种阳性神经元之间的关系进行了讨论。     

单眼缝合、双眼缝合对猫视觉中枢中一氧化氮合酶阳性神经元数量与形态的影响

用ＮＡＤＰＨ－ｄ 组织化学方法观察了在生后一周内即施行单眼缝合和双眼缝合成活至１ 年的猫视觉中枢（上丘表层,外膝体和视皮层１７ 区）中的一氧化氮合酶阳性神经元数量及形态。结果显示：（１）单眼缝合或双眼缝合并不改变上丘表层中一氧化氮合酶阳性细胞的分布模式,也不影响该神经元的数量,但单眼缝合使对侧上丘表层一氧化氮合酶阳性神经元的树突野最大半径减小,树突总长度减少;而双眼缝合可使双侧上丘中一氧化氮合酶阳性细胞胞体减少,树突野最大半径以及树突总长度均明显减少。（２）单眼缝合导致外膝体非剥夺层中出现较多一氧化氮合酶阳性细胞,剥夺层少量出现,而双眼缝合却没有以上效应。（３）单眼缝合不影响视皮层１７ 区中一氧化氮合酶阳性细胞的空间分布模式以及该神经元在皮层各层中的分布密度;双眼缝合也不影响该神经元的分布模式,但可使ＮＡＤＰＨ－ｄ 黄递酶活性明显降低。提示视觉神经中枢中的一氧化氮合酶阳性神经元的活动受视网膜活动依赖性的调节,且受视觉经验的影响。     

一氧化氮对体外培养的胚鼠脑干5-羟色胺能神经元生长发育的影响

研究体外培养条件下一氧化氮合酶(NOS)对胚鼠脑干5-羟色胺(5-HT)能神经元生长发育的影响,进一步探讨一氧化氮在胚脑发育过程中的作用。将孕14d SD胚鼠脑干细胞悬液接种于24孔培养板,实验分两组:即常规培养液组及NOS竞争性抑制剂L-NAME处理组。两组均在接种5、10、15、20d后终止培养,部分盖片行NADPH-d组织化学染色,余盖片行5-HT免疫组织化学染色。观察并计数各组NOS阳性神经元和5-HT样免疫阳性神经元的形态和数量。结果显示:经L-NAME处理的胚鼠脑干细胞在培养10d后出现NOS阳性神经元减少。虽在整个过程中未观察到5-HT样免疫阳性神经元胞体的变化,但其突起的密度及突起上膨体和生长锥的数量明显减少。以上结果表明:在生长发育的关键时期,应用NOS抑制剂会影响5-HT能神经元的形态发育和功能,提示NO参与调节神经元的发育与成熟过程。     

大鼠第三脑室一氧化氮合酶阳性触液神经元的分布及催产素的共存

应用NADPH－d组织化学方法观察了大鼠第三脑室一氧化氮合酶阳性触液神经元的分布及其形态，并结合免疫组织化学技术研究了一氧化氮合酶与催产素在第三脑室触液神经元内的共存。结果显示：在视前区至室间核后大细胞亚核平面的第三脑室室壁均有一氧化氮合酶阳性触液神经元分布，呈自前向后，由腹侧部渐向背侧部过渡迁移的特征。一氧化氮合酶阳性触液神经元绝大部分为大细胞型标记神经元，胞体呈卵圆形、梭形、多角形与倒置梨形。它们位于脑室管膜内、室管膜下，或距室管膜有一定距离处，但有突起伸至第三脑室。第三脑室催产素免疫阳性触液神经元的形态及分布与一氧化氮合酶阳性触液神经元基本相似，两者高度共存。催产素／一氧化氮合酶双标神经元，约占阳性细胞总数的90.9%。上述三种阳性触液神经元与邻近核团关系密切，尤其与室旁核之间有很多的阳性纤维互相交错。本研究结果表明，第三脑室有大量的一氧化氮合酶与催产素免疫阳性神经元分布，并且高度共存，从而建立了催产素的下丘脑－脑脊液－垂体神经体液调节环路的结构基础，对生殖与性行为起着重要的调控作用。     

大鼠端脑内一氧化氮合酶阳性神经元的发育

目的研究大鼠胚胎时期及生后早期一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元在端脑的分布,探讨一氧化氮（NO）在脑发育过程中的作用。方法应用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸脱氢酶（NADPH-d）组织化学方法观察孕14d起至生后14d大鼠端脑内NOS阳性神经元的形态和分布。结果孕14d没有观察到阳性神经元。孕15d纹状体腹外侧已有NOS阳性表达。孕17d在大脑皮质、梨状皮质观察到NOS阳性神经元,但胞体小,树突短,且分支少。随着年龄的增长神经元的胞体数目增多、染色增强或维持一定的水平。到孕20d,NOS阳性神经元分布广泛,梨状皮质、纹状体腹外侧及终纹床核均有大量NOS阳性神经元,其胞体明显增大,树突分支复杂化,长度增加。在生后,除上述脑区的阳性神经元进一步发育分化,大脑皮质和纹状体的NOS阳性纤维相互编织成疏密不等的纤维网外,在胼胝体、海马也观察到NOS阳性神经元。到生后14d,NOS阳性神经元的分布模式总体上已与成年大鼠相似。结论NOS阳性神经元在端脑独特的表达模式提示NO在脑发育和成熟过程中扮演重要角色。     

降钙素基因相关肽在大鼠纹状体内分布的生后发育研究

目的：了解大鼠纹状体内的钙离子基因相关肽（ＣＧＲＰ）在纹状体和苍白球内分布的生后发育变化。方法：对出生后１天至１年的大鼠脑行冠状组织切片,尔后进行ＣＧＲＰ的ＡＢＣ法免疫细胞化学染色。结果：ＣＧＲＰ在纹状体的近尾侧部主要分布在纹状体的边缘区,为大量的密度很高的免疫反应阳性纤维,在纹状体的远尾侧部几乎遍布整个尾壳核,但以其外侧缘和腹侧为多,在尾壳核的外侧部形成一条浓密的阳性纤维带。苍白球内可见少量的ＣＧＲＰ免疫反应纤维存在,多靠近苍白球的内侧缘。ＣＧＲＰ在纹状体内分布的生后发育特征为：Ｐ０１时边缘区有少量阳性纤维分布,Ｐ０５时形成带状纤维分布,Ｐ１０时尾壳核腹外侧部有阳性纤维分布,Ｐ３０以后同成年。结论：ＣＧＲＰ在纹状体和苍白球内具有独特的分布特征和生后发育规律。     

一氧化氮合酶同功异构酶在大鼠中枢神经系统的分布

本文采用免疫组织化学技术观察三种一氧化氮合酶同功异构酶在正常大鼠中枢神经系统的分布。结果显示：ＮＯＳ１ 阳性神经元分布于中枢神经系统的广泛区域,包括大脑皮质Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ层,海马分子层,齿状回多形层,尾壳核,中脑上丘,小脑皮质分子层和颗粒层,脊髓Ⅰ、Ⅱ层、侧角、中央灰质和前角。脊髓中央管室管膜上皮也为阳性。ＮＯＳ３ 阳性神经元的分布区域与前者有部分重叠,但也有差别：大脑皮质相同层次内的ＮＯＳ３ 阳性神经元的形态和染色不同于ＮＯＳ１;密集分布于海马锥体细胞层和齿状回颗粒细胞层;小脑浦肯野细胞ＮＯＳ３ 阳性;另外,ＮＯＳ３ 阳性神经元弥散分布于脊髓内,其胞体和核仁均呈阳性。ＮＯＳ２ 阴性。广泛的分布表明ＮＯ 与中枢神经系统的诸多功能有关,而ＮＯＳ１ 与ＮＯＳ３ 分布的差异又说明中枢神经系统不同神经元内ＮＯ的产生是由此两种同功异构酶分别参与而完成的。     

The striatal mosaic in primates: patterns of neuropeptide immunoreactivity differentiate the ventral striatum from the dorsal striatum.

Patterns of immunoreactivity for calcium-binding protein, tyrosine hydroxylase and four neuropeptides in the ventral striatum (nucleus accumbens, olfactory tubercle and ventromedial parts of the caudate nucleus and putamen) were compared to patterns of these markers in the dorsal striatum (the majority of the neostriatum) in rhesus monkey. The striatal mosaic was delineated by calcium-binding protein and tyrosine hydroxylase immunoreactivities. Both markers were found preferentially in the matrix of the dorsal striatum. The mosaic configurations of tyrosine hydroxylase, but not calcium-binding protein immunoreactivity, were similar in dorsal and ventral striatal regions. Substance P and leucine-enkephalin were not distributed homogeneously; distinct types and the prevalence of patches of substance P and leucine-enkephalin immunoreactivity distinguish the dorsal striatum from the ventral striatum and distinguish the caudate nucleus from the putamen. In the dorsal striatum, substance P and leucine-enkephalin patches consist of dense islands of immunoreactive neurons and puncta or clusters of immunoreactive neurons marginated by a dense rim of terminal-like puncta; the matrix was also enriched in leucine-enkephalin-immunoreactive neurons but contained less substance P-immunoreactive neurons. Patches were more prominent in the caudate nucleus than in the putamen. In the caudate, compartments low in tyrosine hydroxylase and calcium-binding protein immunoreactivities corresponded to cytologically identified cell islands and to patches enriched in substance P and leucine-enkephalin. These patches had a discrete infrastructure based on the location of substance P and leucine-enkephalin-immunoreactive neurons and terminals. In the ventral striatum, patches that showed low levels of substance P and leucine-enkephalin immunoreactivities were embedded in a matrix rich in immunoreactive cell bodies, fibers and terminals. In the accumbens, regions showing little tyrosine hydroxylase were in spatial register with patches low in substance P and leucine-enkephalin. Neurotensin- and somatostatin-immunoreactive neurons or processes were also compartmentally organized, particularly in the ventral striatum. Neurotensin-immunoreactive neurons were present predominantly in the nucleus accumbens but not in the dorsal striatum. Some regions enriched in neurotensin immunoreactivity were spatially registered with zones low in tyrosine hydroxylase, substance P and zones enriched in leucine-enkephalin. Areas enriched in somatostatin-immunoreactive processes overlapped with both tyrosine hydroxylase-rich and -poor regions in the ventral striatum. Our results show that the chemoarchitectonic topography of the striatal mosaic is different in the dorsal and ventral striatum of rhesus monkey and that the compartmental organization of some neurotransmitters/neuropeptides in the ventral striatum is variable and not as easily divisible into conventional patch and matrix regions as in the dorsal striatum.(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS)     

The pre- and postnatal development of the dopaminergic cell groups in the ventral mesencephalon and the dopaminergic innervation of the striatum of the rat

In the adult rat the striatum is a compartmentalized structure, which is reflected in the inhomogeneous distribution of dopamine. As a first step to test the hypothesis that dopamine plays an organizational role in the development of the striatum, the ontogeny of the dopaminergic system was studied in detail with immunocytochemical methods employing antibodies against dopamine. Rat embryos, fetuses, pups and adults were perfusion-fixed with glutaraldehyde on all prenatal days from E11 onward, postnatally on P2, P4, P6, P7, P8, P13, P14, P20, P21, and in adult age. On E13 the first dopaminergic cells are detected in the ventral prosencephalon. On E14 two dopaminergic cell groups are present in the ventral mesencephalon, and fibres of these cells reach the ventrolateral part of the ganglionic eminence. In the next two days both the cell groups and their projections rapidly increase in size. On E17 the afferent dopaminergic fibres to the striatum become aligned and form huge bundles that are closely associated with the fascicles of the internal capsule. Rostrally, the development of the striatal dopaminergic innervation shows a clear ventrolateral to dorsomedial gradient, whereas more caudally the dopaminergic fibres innervate the striatum from a ventromedial position. The lateral parts of the otherwise compact mesencephalic cell groups consist of loosely arranged cells. From E17 onward these cells become arranged into a dorsal and a ventral group. Just before birth, on E21, the primordia of the dopaminergic cell groups in the substantia nigra pars compacta and pars reticulata can be observed. On E19 several centres with extensive fibre ramifications along the dorsolateral margin of the caudate putamen represent the first signs of the inhomogeneous distribution of dopaminergic fibres in the dorsal striatum seen during the next two weeks. In the following pre- and postnatal days these so-called dopaminergic "patches" also appear more medially. By the third postnatal week most of the patches are no longer detectable, and only the most dorsolaterally located ones, i.e. in the region where they first were detected on E19, remain visible through to the adult stage. Prenatally, no varicosities can be observed in the dopaminergic fibres. The first varicosities appear after birth. Their number increase rapidly during the first and second postnatal weeks and reaches near adult levels on P20. The development of the striatal dopaminergic innervation, and that of the "patches" in particular, is discussed in relation to the development of the mesencephalic dopaminergic cell groups.(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS)     

出生前后胆碱乙酰转移酶在大鼠脑内定位的研究

为探讨大鼠胚胎及生后发育期间脑内胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)的变化规律,本研究采用免疫组织化学方法,观察了胚胎和生后大鼠脑内ChAT样(ChAT-like immunoreactive,ChAT-LI)神经元表达的数量和灰度值。结果显示:ChAT-LI产物主要表达在细胞体、纤维及其末梢。ChAT-LI神经元最先在胚胎第12d(embryonic day12,E12),出现于端脑;E14时可见于隔核和中缝核;E16时内嗅区出现ChAT-LI神经元;E18时出现于视前区节细胞层;E20时,海马内部可见部分ChAT-LI纤维;生后第0d(postnatal day0,P0),少量带有生长锥的ChAT-LI纤维出现于海马;P5时,海马内出现ChAT-LI神经元,且ChAT-LI纤维进一步增加;P10时,海马、内嗅区和穹隆等结构中都可见ChAT-LI神经元胞体及纤维。上述结果提示:胆碱能神经元在出生前后的大鼠脑内,尤其是在海马记忆回路的发育过程中存在一定的变化规律,它们可能是学习记忆等功能的结构基础。     

大鼠P物质在纹状体和苍白球的生后发育研究

目的：了解大鼠纹状体和苍白球内的P物质（SP）分布的生后发育变化。方法：对大鼠脑进行连续冠状组织切片,尔后进行P物质的ABC法免疫细胞化学染色。结果：正常成年大鼠SP主要分布在纹状体的中部和尾部,其中以边缘区的含量最高,主要为免疫阳性纤维,呈背腹方向走行,在背侧与丘脑终纹的SP纤维发生联系,而在腹侧与杏仁核的SP纤维发生联系;同时在苍白球的内侧缘和尾壳核的近尾侧的背外侧亦有少量的SP阳性纤维呈背腹方向分布。大鼠P物质在纹状体内分布的生后发育变化为：P01时其阳性纤维仅在纹状体的边缘区分布,P10时在苍白球的内侧缘开始有阳性纤维带,P30时尾壳核的背侧出现阳性纤维分布,P60以后同成年。结论：P物质非均匀性地分布在纹状体和苍白球内,纹状体和苍白球内P物质的生后发育与其他神经递质有显著的差异。