信号传导和转录激活子4基因多态性与中国汉族人群扩张型心肌病的相关研究

目的 研究信号传导和转录激活子4基因(STAT4)单核苷酸多态性与中国汉族人群扩张型心肌病(DCM)的相关性。 方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法,对294例DCM患者和334例正常对照者中STAT4基因rs7574865、rs11889341位点进行群体遗传学研究,分析STAT4基因两SNP位点在两组样本间基因型频率、等位基因频率分布,探讨STAT4基因多态性是否与DCM发病相关。 结果 STAT4基因rs11889341位点GG基因型频率和G等位基因频率在DCM组患者中较高,与正常对照组相比差异有统计学意义(分别为55.8% vs.47.9%,P=0.039和76.4% vs.70.7%,P=0.023,OR=1.341,95%CI为1.042~1.727)。rs7574865位点CC+AC基因型频率在DCM组患者中较高,与正常对照组相比差异有统计学意义(94.2% vs.89.2%,P=0.025,OR=1.968,95%CI为1.081~3.585),该位点的等位基因频率分布在DCM组与对照组之间差异无统计学意义。 结论 本研究首次证明STAT4基因单核苷酸多态性与DCM相关,STAT4基因rs11889341位点GG基因型和G等位基因及rs7574865位点CC+AC基因型可能会增加DCM发生的危险性。     

Stat3信号传导通路对结肠癌细胞G1～S期的调控

目的：探讨Stat3信号传导通路对结肠癌细胞G1-S期调控的可能机制。方法：应用阳离子脂质体介导Stat3反义寡核苷酸转染人结肠癌SW480与HCT116细胞，阻断其Stat3通路；MTT法检测细胞增殖状态；流式细胞术检测细胞周期；Western blot检测Stat3、磷酸化Stat3、G1期Cyclins、CDKs、p21、p27的表达。结果：转染Stat3反义寡核苷酸后结肠癌细胞增殖受抑制，Stat3、磷酸化Stat3、G1期Cyclins、CDKs表达水平下降，p21与p27表达水平上升。结论：Stat3信号传导通路可能通过调节CDK/Cyclin复合物与CK1成员之间的平衡而调节结肠癌细胞G1-S期转换。     

系统性红斑狼疮患者信号转导及转录激活因子4基因单核苷酸多态性与其mRNA表达水平的相关性研究

目的探讨系统性红斑狼疮中信号转导和转录激活因子4(STAT4)基因rs7574865位点单核苷酸多态性(SNP)与其mRNA表达水平之间的相关性。方法以TaqMan MGB探针法在163例SLE患者中对STAT4基因rs7574865位点的SNP进行分型,用TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应法检测以上患者外周血单个核细胞(PBMC)中STAT4 mRNA表达水平,并分析两者之间的关系。结果 SLE患者中G等位基因频率为49.7%,T等位基因频率为50.3%,G/G型纯合子患者的比例为22.7%,G/T型杂合子患者的比例为65.0%,T/T型纯合子患者的比例为12.3%。具有G/T型的SLE患者的STAT4 mRNA表达水平显著高于具有G/G型或T/T型的SLE患者(P<0.05)。结论 STAT4 rs7574865位点SNP与STAT4 mRNA表达水平具有相关性,具有G/T型的SLE患者的STAT4 mRNA表达水平显著增高。     

信号传导子和激活子3通路与结直肠癌中环氧化酶2表达的相关性研究

目的 观察人结直肠恶性肿瘤中信号传导子和激活子3（Stat5）和环氧化酶2（COX-2）mRNA的表达与结直肠癌病理特征的相关性,明确Stat3通路对结直肠癌细胞增殖凋亡及COX-2基因表达的影响。方法 应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测350例结直肠癌组织及其邻近正常肠黏膜中Stat3及COX-2mRNA的表达;同时用免疫组织化学技术（SP法）检测了p-Stat3及COX-2的表达;将Stat3上游激酶JAK2抑制剂AG490,作用于结肠癌细胞系HT-29,运用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖状态;流式细胞仪观察其对细胞凋亡的影响,Western印迹法检测p-Stat5及COX-2蛋白的表达。结果 结直肠癌组织中Stat3和COX-2 mRNA表达水平明显高于正常肠黏膜（均P〈0．05）,分别为正常组织的1．97和1．88倍;COX-2表达水平与Stat3表达呈正相关（相关系数0．749,P〈0．01）,并与肿瘤分化程度及淋巴结转移有关（P〈0．05）;免疫组化结果示p-StatB与COX-2蛋白表达水平相关。用（AG490）阻断StatB通路可抑制HT-29细胞的增殖、诱导其凋亡;同时Stat3磷酸化活性随作用时间延长而下降,COX-2表达水平也逐渐降低。结论 Stat3通路对结直肠癌细胞增殖凋亡及COX-2基因表达有影响;阻断信号通路可抑制结肠癌细胞的增殖。促进其凋亡．     

白细胞介素12促血管平滑肌细胞增殖的实验研究

目的 观察白细胞介素12/信号传导子及转录激活子4(IL-12/STAT4)信号途径激活对体外培养的人脐动脉平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)增殖的影响.方法 不同浓度(2.5、5、10和20ng/mL)IL-12刺激后,用MTT法、Hoechst 33258染色法观察VSMC增殖和凋亡情况,RT-PCR、Westernblot分别检测STAT4的mRNA表达和STAT4、磷酸化STAT4(P-STAT4)的蛋白表达变化.结果 IL-12呈剂量和时间依赖促VSMC增殖,同时抑制VSMC凋亡.RT-PCR 检测发现STAT4的mRNA表达随IL-12浓度增高而增加、Western blot检测发现STAT4、P-STAT4的蛋白表达随IL-12浓度增高而增加.结论 IL-12可促进VSMC增殖,该作用可能与激活IL-12/STAT4途径有关.     

STAT3诱饵寡核苷酸抑制人胃癌细胞裸鼠腹腔种植的初步研究

目的 通过研究STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌MKN45细胞增生及荷瘤裸鼠的作用,探讨其对人胃癌细胞株裸鼠腹腔种植转移的影响.方法 以人胃癌细胞MKN 45为对象,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetralolium,MTT)法检测STAT3诱饵寡核苷酸对肿瘤细胞的增殖抑制效应,凝胶迟滞电泳法(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测各组细胞STAT3 DNA结合活性.裸鼠随机分为4组,将不同方法处理的胃癌细胞接种裸鼠腹腔,观察各组裸鼠的腹腔肿瘤生成、腹水产生、死亡率及生存情况.结果 ①STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌细胞生长的抑制作用呈时间依赖性.②STAT3诱饵寡核苷酸可特异性抑制胃癌细胞STAT3的DNA结合活性.③STAT3诱饵寡核苷酸能明显减少裸鼠腹水产生,降低荷瘤鼠的死亡率,延长荷瘤鼠的生存期,与其他组相比有显著性差异(P＜0.05).结论 STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌裸鼠腹腔种植有明显的抑制作用.     

信号转导和转录激活因子4基因多态性与类风湿关节炎发病的相关性

目的探讨信号转导和转录激活因子4（STAT4）基因多态性与类风湿关节炎发病的相关性。方法以聚合酶链反应连接酶检测反应（PCR-LDR）法对139例RA患者和139名正常对照组进行STAT4基因rs7574865位点的SNP分型,比较各基因型及等位基因频率在正常人群和RA患者中的差异。结果 RA组STAT4 rs7574865各基因型分布频率与正常对照组有明显差异（P〈0.05）,T型和G型等位基因频率在RA组与正常对照组比较有显著差异（P〈0.01,OR1.658,95%可信区间为1.154～2.383）。结论 STAT4 rs7574865位点GT/TT基因型与RA发病具有相关性,STAT4基因rs7574865位点T等位基因为RA患者的易感基因。     

STAT5 基因rs2272087 和rs6503694 位点多态性与哮喘相关性研究

目的探讨信号转导子和转录激活子5(STAT5)基因rs2272087和rs6503694位点多态性与哮喘易感性的关系。方法采用聚合酶链反应-直接测序法(PCR-SBT)技术检测哮喘组与对照组STAT5基因rs2272087和rs6503694位点多态性。结果 rs2272087位点基因型频率AA、AG和GG在哮喘组分别为0.600、0.412和0.167,在对照组分别为0.430、0.200和0.367;等位基因A、G频率在哮喘组分别为0.903和0.390,在对照组分别为0.656和0.097;2组的基因型频率及等位基因频率比较差别有统计学意义(P<0.05)。rs6503694位点基因型频率TT、TC和CC在哮喘组分别为0.683、0.383和0.100,对照组分别为0.583、0.167和0.083;等位基因T、C频率在哮喘组分别为0.844和0.138,对照组分别为0.866和0.124;2组的基因型频率及等位基因频率比较差别无统计学意义(P>0.05)。结论 STAT5基因rs2272087位点多态性可能是影响哮喘的重要候选基因。     

STAT5、STAT6在哮喘肺组织的表达

目的探讨信号传导和转录激活因子（STAT）5、STAT6在哮喘小鼠肺组织的表达。方法 16只小鼠随机分为A组（哮喘模型组,8只）和B组（正常对照组,8只）。其中A组小鼠于第1、13天分别给予卵清蛋白（OVA）20μg和Al（OH）3 1 mg混悬液致敏,第21～30天每天予2%OVA生理盐水10 ml建立哮喘模型;B组以生理盐水代替OVA致敏和激发。31 d颈椎脱臼处死小鼠,取肺组织,经固定、石蜡包埋,制成组织切片,采用免疫组化方法检测肺组织STAT5、STAT6蛋白的表达水平。结果 A组STAT5、STAT6蛋白表达明显高于B组〔（23.25±3.28）×103 vs（2.33±0.78）×103,P〈0.01;（26.11±3.95）×103 vs（2.78±0.32）×103,P〈0.01〕。肺组织病理学改变：A组大鼠肺组织切片HE染色可见支气管和血管周围炎性细胞浸润,以淋巴细胞、嗜酸性粒细胞为主,气道腔内可见黏液栓,气道上皮多处断裂,气道上皮细胞存在STAT6的表达,而且气道上皮细胞是哮喘主要的STAT6高表达细胞,胞浆呈棕黄色,且着色较深,气道内黏液腺体增生、杯状细胞肥大、上皮剥脱。B组无上述情况。结论 STAT5、STAT6在哮喘的发病机制中起重要作用。STAT5可能参与了哮喘发病的调控过程,具有促进嗜酸性粒细胞分化、增殖作用;气道炎性细胞浸润以及气道高反应性可能与STAT6基因高表达有关。     

从附件中的电场、热场分布以及构成电缆附件等因素对电缆接头故障的分析（2）

为了研究不同孔型对平板气膜冷却的影响,针对圆形,扇形,水滴形,收敛缝形四种气膜出流孔型的流动和传热特性进行了数值模拟。研究结果表明,圆形孔、扇形孔和水滴形孔气膜出口下游出现从中心向上抬升的反向旋转涡对,将主流燃气卷吸进来;收敛缝形孔在侧向的扩张型面使得气膜出流在展向的覆盖更为均匀,这有效地阻止了高温气体的侵入;在相同吹风比下,收敛缝形孔在气膜出口附近区域的平均绝热冷却效率则明显要高于其余三种孔,随着吹风比的增大,这种差距越发明显;孔型对对流换热系数增强比的影响区域仅局限在邻近气膜孔出口大约7倍气膜孔径的范围内。      

砒石对哮喘小鼠信号转导和转录激活因子6及嗜酸粒细胞趋化因子mRNA表达的影响

目的观察砒石对哮喘小鼠肺组织中信号转导和转录激活因子6(STAT6)、嗜酸粒细胞趋化因子(eotaxin)表达的影响,探讨砒石防治哮喘的作用机制。方法56只昆明种雌性小鼠随机分为7组(n=8):正常对照组,哮喘模型组,地塞米松组,砒石0.575 mg/kg(AS0.575)组,砒石1.15 mg/kg(AS1.15)组,砒石2.3 mg/kg(AS2.3)组,砒石4.6 mg/kg(AS4.6)组;建立卵蛋白(OVA)哮喘模型,测定各组肺功能,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸粒细胞(EOS)计数;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织中STAT6、eotaxin mRNA表达水平。结果小鼠致敏3周及激发3 d后,肺功能测定表现为呼气相时间明显延长,呼气相最大压力明显增大,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01);哮喘组BALF中白细胞总数及EOS计数,肺组织STAT6、eotaxin mRNA表达水平较正常对照组明显升高(P<0.01);经地塞米松和不同剂量砒石处理后哮喘小鼠BALF中白细胞总数、EOS计数、肺组织中STAT6和eotaxin mRNA的表达水平较哮喘组下降(P<0.01),砒石对STAT6和eotaxin mRNA表达的抑制作用呈剂量效应关系。结论STAT6和eotaxin在哮喘气道炎症的发生、发展中起重要作用;砒石可显著抑制哮喘小鼠肺组织中STAT6和eotaxin mRNA表达,降低哮喘小鼠BALF中白细胞总数及EOS计数,减轻哮喘气道黏膜炎症。     

大鼠哮喘模型肺组织信号转导子和转录激活子4及mRNA的表达及其意义

目的 研究大鼠哮喘模型肺组织信号转导子和转录激活因子4（STAT4）蛋白及其mRNA表达的变化，探讨其在哮喘性气道炎症形成中的作用。方法 复制大鼠哮喘模型，采用免疫组织化学和组织原位杂交法检测哮喘组及对照组大鼠肺组织STAT4蛋白及其mRNA的表达。结果 STAT4蛋白及其mRNA在两组大鼠气道平滑肌细胞和肺细小动脉的血管平滑肌细胞及内皮细胞上均呈不同强度的阳性表达。对照组STAT4蛋白及其mRNA含量均高于哮喘组（均P〈0．01）。结论 哮喘大鼠气道平滑肌细胞、血管平滑肌细胞及内皮细胞STAT4蛋白及其mRNA的表达被抑制。     

转染STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌细胞的影响

目的 通过研究STAT3诱饵寡核苷酸对人胃腺癌MKN45细胞增生活性及其MMP-2,CD44v6和ICAM-1表达的影响,寻求胃癌治疗中的新靶点.方法 以人胃癌细胞MKN45为对象,体外药物敏感实验(MTT)法检测STAT3诱饵寡核苷酸对肿瘤细胞的增殖抑制效应,免疫组化S-P法检测胃癌细胞MMP-2,CD44v6和ICAM-1表达变化情况.结果 (1)STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌细胞生长的抑制作用呈时间依赖性;(2)STAT3诱饵寡核苷酸可明显抑制胃癌细胞株细胞MMP-2,CD44v6和ICAM-1的表达.结论 STAT3诱饵寡核苷酸可通过抑制胃癌细胞的分裂和增殖,抑制胃癌细胞MMP-2,CD44v6和ICAM-1的表达,干扰肿瘤的转移与复发.     

癌基因STAT3与喉癌的关系研究进展

信号转导和转录激活因子3(STAT3)是STAT的重要成员,由细胞外细胞因子、生长因子等多肽类配体激活,作用于细胞核内特异的DNA片段,调控靶基因的转录,促进细胞的增殖、抑制凋亡。因此,STAT3信号通路可能成为肿瘤分子治疗的新靶位点。对STAT3癌基因的一些相关性研究,为喉癌形成机制的阐述及治疗奠定了基础。     

信号转导和转录激活因子3在宫颈癌中的研究进展

信号转导和转录激活因子3(STAT3)是细胞内关键性的信号转导蛋白,在肿瘤细胞的增殖、去分化以及肿瘤的侵袭、转移中起重要作用。研究发现,在胰腺癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、宫颈癌等肿瘤中均有STAT3的异常表达。现就STAT3蛋白的生物学特性、与肿瘤的关系及其在宫颈癌中的研究现状予以综述。     

三转基因银屑病小鼠模型建立与表型分析

目的 尿激酶型纤溶酶激活剂(PLAU)、尿激酶型纤溶酶激活剂受体(PLAUR)和信号传导与转录激活因子3(STAT3)是参与银屑病病理发生的重要基因。本文目的是制备皮肤特异性表达PLAU、PLAUR和STAT3三种基因的转基因小鼠,建立可进行性再现银屑病病理进程的小鼠模型。 方法 将PLAU、PLAUR和STAT3基因分别插入牛角蛋白5启动子(BK5)下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立在皮肤组织同时高表达PLAU、PLAUR和STAT3三种基因的转基因C57BL/6J小鼠。利用PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,Western blot检测基因表达水平,HE染色观察皮肤病理表型。 结果 PLAU、PLAUR和STAT3三种基因在选定的转基因小鼠皮肤组织均有明显表达;转基因小鼠与同龄野生型小鼠相比表皮状态差,炎症明显;4月龄的转基因小鼠真皮变簿,表皮过度角化、棘层增厚,毛囊减少、发育异常、部分毛囊内未见毛干,角化不全区域内可见Munro氏小脓肿,真皮炎细胞浸润。 结论 建立了稳定传代的皮肤特异性表达PLAU、PLAUR和STAT3基因的转基因小鼠品系,转基因小鼠具有进行性的银屑病表型,可以作为多病因综合银屑病小鼠模型。