腺苷酸活化的蛋白激酶在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的 通过研究腺苷酸活化的蛋白激酶(AMPK)在食管鳞癌组织和正常食管组织中的表达和激活情况,探讨AMPK在食管癌发生中的意义。 方法 应用免疫印迹(Western blot)方法检测40例食管鳞癌病例标本和对应的正常食管组织中AMPK下游底物乙酰辅酶A羧化酶(ACC)及p-ACC的表达,并分析其与临床病理参数之间的关系。 结果 食管鳞癌组p-ACC蛋白的表达低于正常食管组织,差异有统计学意义(P<0.05)。p-ACC表达下调率在低分化鳞癌组是81.8%(9/11),高于中高分化鳞癌组3.5%(1/29),差异有统计学意义(χ2=22.11,P<0.05)。统计分析表明,p-ACC表达下调与食管癌患者的年龄、性别、TNM分期及淋巴结转移无相关性(P>0.05)。 结论 p-ACC在食管鳞癌中的表达下调,并与食管癌的组织分化程度相关,提示p-ACC表达的下调可能与食管癌的发生、发展相关,这对评估食管癌生物学行为及为寻找食管癌新的治疗靶点有一定的指导作用。     

腺苷酸活化蛋白激酶与消化道肿瘤的分子靶向治疗

哺乳动物的腺苷活化蛋白激酶(AMPK)是一类丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶,属于蛋白激酶级联系统的中心元件。作为细胞的能量感受器,AMPK调节多条代谢途径,AMPK异常导致多种代谢异常综合征,且活化状态的AMPK可通过多条途径抑制细胞生长并诱导凋亡,包括抑制在人类绝大多数肿瘤细胞中激活的mTORC1激酶。因此,它已经成为治疗2型糖尿病、肥胖症甚至肿瘤的良好药物靶。     

山楂叶总黄酮对高脂血症大鼠心脏保护作用的实验研究

目的 研究山楂叶总黄酮(HLF)对高脂血症(HLP)大鼠心脏的保护作用及其机制.方法 取48只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、辛伐他汀对照组(8mg/kg)、HLF低、中、高剂量组(100、200、400mg/kg),每组8只,除空白组外,其余各组采用高脂饲料喂养8周建立HLP大鼠模型.8周后,大鼠处死、取材,计算...     

急性缺氧对大鼠心肌组织AMPK磷酸化和糖原含量的影响

目的研究急性缺氧对大鼠心肌组织AMPK磷酸化和糖原含量的影响,探讨急性缺氧时心肌组织的能量代谢状况。方法用随机数字表将16只健康雄性SD大鼠分为平原对照组(n=8)和急性缺氧组(n=8)。急性缺氧组大鼠置于模拟海拔5 000 m高原的低压舱中。24 h后测定2组大鼠血糖、血乳酸以及心肌组织糖原含量,用心导管技术测定大鼠心脏功能,Western blot法检测心肌组织AMPK、磷酸化AMPK(pAMPK)水平以及葡萄糖转运体-4(GLUT4)的表达。结果与平原对照组相比较,急性缺氧组大鼠肺动脉压显著升高,右心室功能显著增强,左心室功能无明显变化;血糖含量显著升高[(5.6±0.6)mmol/Lvs(7.5±0.5)mmol/L,P<0.05];左、右心室心肌组织GLUT4表达显著增强,糖原含量显著增加[右心室心肌:(4.78±1.29)mg/gvs(6.55±1.20)mg/g,P<0.05;左心室心肌:(4.15±0.77)mg/gvs(5.73±1.57)mg/g,P<0.05];左、右心室心肌组织AMPK含量无明显变化,但pAMPK含量显著降低,pAMPK/AMPK比值显著降低(P<0.05)。结论模拟高原5 000 m急性缺氧静息状态下心肌组织AMPK磷酸化水平降低,说明心肌能量供求处于平衡状态,心肌糖原含量增加可能是AMPK磷酸化水平降低的机制之一。     

运动干预对阿尔茨海默病模型大鼠记忆能力及神经元AMPK信号分子和自噬的影响

〔目的〕探讨运动干预对阿尔茨海默病模型大鼠记忆能力及神经元AMPK信号分子和自噬的影响。〔方法〕将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、运动对照组、AD模型对照组、AD模型训练组。在立体定位仪下向大鼠两侧海马注射Aβ25-35制造AD模型。实验结束后,通过Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,用Nissl法检测海马神经元存活状态;通过免疫荧光染色检测磷酸化AMPK表达;用Western blot法检测P-AMPK、LC3I、LC3II及Beclin-1的表达。〔结果〕与AD模型对照组相比较,AD模型训练组大鼠的逃避潜伏期明显减少,穿越平台区域次数明显增加(P<0.01);AD模型训练组大鼠的CAI区海马神经元形态较AD模型对照组改善明显,神经元数目显著增加(P<0.05);P-AMPK在AD模型训练组大鼠的表达明显增强,且主要在胞浆表达;与AD模型对照组相比,AD模型训练组大鼠的P-AMPK和Beclin-1的蛋白表达都明显增强(P<0.01),LC3II/LC3I比值明显增加(P<0.01)。〔结论〕8周的跑台运动可明显改善AD模型大鼠的记忆能力、减少AD模型大鼠海马CAI区神经元损伤数量。其机制可能是8周运动训练激活AD模型大鼠海马神经元AMPK通路和自噬,进而保护神经元。     

食管鳞癌中MEKK3和NF-κB的表达及其临床意义

目的研究有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3（MEKK3）、核转录因子（NF-κB）蛋白在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法收集76例食管鳞癌患者的癌组织及相应的35例癌旁异型增生组织和20例正常食管黏膜组织,应用免疫组化EnVision法检测MEKK3、NF-κB蛋白的表达。结果食管鳞癌组织中MEKK3蛋白阳性表达率高于癌旁异型增生组织和正常食管黏膜组织（均P＜0.05）;NF-κB蛋白表达阳性率在正常食管黏膜组、癌旁异型增生组、食管鳞癌组中依次升高;MEKK3、NF-κB蛋白表达与临床分期、浸润深度及淋巴结转移均相关（均P＜0.05）,而与患者年龄、性别及组织学分级均无关（均P＞0.05）;MEKK3与NF-κB蛋白的阳性表达呈正相关（r=0.308,P＜0.05）。结论 MEKK3、NF-κB蛋白异常表达与食管鳞癌的发生、浸润转移及预后相关,且两者呈正相关。联合检测MEKK3和NF-κB蛋白表达可作为食管鳞癌的诊断、预后评估的参考依据。     

芍药苷预处理激活AMPKα对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探究芍药苷预处理激活AMPKα信号通路对大鼠在体心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法本实验共用SPF级雄性SD大鼠30只,分三组,分别为假手术组、缺血再灌注组、药物预处理组,采用结扎SD大鼠心脏LAD的方法建立在体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,利用0.5%Evan's蓝灌注心肌,1%氯化三苯基四氮唑(TTC)磷酸缓冲液孵育心肌,CK-MB试剂盒来观察心肌缺血、坏死及肌酸磷酸激酶(CK-MB)和HE染色观察心肌损伤程度,利用蛋白印迹(Western blot)技术探究芍药苷预处理对腺苷酸活化蛋白激酶(AMPKα)的影响。结果芍药苷药物预处理组与缺血再灌注组比较,药物预处理组心梗面积较缺血再灌注组明显减小(P<0.01);CK-MB检测也发现药物预处理组与缺血再灌注组比较能明显降低CK-MB值(P<0.01);HE染色发现药物预处理组较缺血再灌注组能明显减轻大鼠心肌局灶性肿胀、心肌间质水肿,减少炎性细胞浸润及血管充血;蛋白印迹实验发现药物预处理组能明显促进AMPKα蛋白的表达,升高磷酸化AMPKα的表达。结论芍药苷预处理能减轻大鼠在体心肌缺血再灌注损伤,可能通过增加AMPKα蛋白的表达,促进AMPKα磷酸化而实现。     

腺苷酸活化蛋白激酶在炎症性肠病的研究进展

炎症性肠病（IBD）是一种与炎症及免疫相关的慢性肠道疾病,发病率逐年递增,是全球卫生问题的重大挑战。但是目前IBD确切的发病机制仍未十分清楚。腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）是一种高度保守的细胞能量保护器,在维持体内能量平衡中发挥了十分重要的作用。近年来研究发现,AMPK可通过增强肠道屏障功能、抑制炎症反应、抗纤维化、增强自噬等方面延缓炎症性肠病疾病的进展。该文对以上方面进行综述,为IBD提供新的治疗靶点。     

高脂环境对大鼠成肌细胞AMPK的影响及Ghrelin的保护作用

目的探讨高脂环境对大鼠成肌细胞AMPK的影响及Ghrelin的保护作用,为深入研究2型糖尿病的防治提供理论依据。方法在给予原代培养大鼠成肌细胞0.3 mM棕榈酸处理12 h的同时用加入10-11M、10-9M、10-7M Ghrelin作用,用R T-PCR法检测AMPK的mR NA表达,用Western blotting法检测p-AMPK蛋白的水平。结果与对照组相比,在0.3 mM PA组中,AMPK mRNA表达未见明显改变,p-AMPK蛋白水平明显降低。与0.3 mM PA组对比,随着给予Ghrelin的浓度逐渐增加,AMPK mRNA表达未见明显改变;p-AMPK蛋白水平逐渐增加并呈剂量反应关系,其中10-7M Ghrelin组p-AMPK蛋白水平增加最为明显。结论高脂环境可以影响大鼠成肌细胞AMPK,且Ghrelin具有保护作用。     

AMPK参与肿瘤能量代谢研究进展

肿瘤细胞具有独特的能量代谢方式—Warburg现象,而肿瘤的发生发展、转移与能量代谢密切相关。腺苷酸活化的蛋白激酶(AMPK)是细胞中重要的能量感受器,主要参与维持代谢应激下能量平衡和氧化还原稳态,与肿瘤能量代谢异常密切相关。活化的AMPK可以增强分解代谢、抑制合成代谢、上调ATP水平,也参与调节糖代谢、胆固醇代谢、脂肪酸及蛋白质代谢等过程,为细胞的生长过程提供能量储备,应对能量不足;同时活化的AMPK还与肿瘤新生血管形成、转移、炎症等病理过程息息相关。本文主要对AMPK的结构、活化机制、参与物质能量代谢以及与肿瘤形成的关联做一综述。     

DAPK和P53在食管鳞癌中的表达和相关性

目的：探讨食管鳞癌死亡相关蛋白激酶（DAPK）、P53蛋白表达的变化及其与食管鳞癌临床病理因素的关系。方法：应用组织芯片免疫组化法检测104例食管鳞癌组织和癌旁正常黏膜DAPK和P53蛋白的表达。结果：食管鳞癌DAPK的阳性表达率明显低于癌旁正常黏膜,P53的阳性表达率明显高于癌旁正常黏膜（P＜0.05）;食管鳞癌DAPK表达与浸润深度和淋巴结转移有关,P53表达与分化程度和淋巴结转移有关（P＜0.05）;食管鳞癌DAPK和P53的表达呈负相关（r=-0.349,P＜0.05）。结论：食管鳞癌DAPK和P53蛋白表达呈负相关可能与食管鳞癌的发生发展密切相关。     

激活蛋白激酶A信号通路对甲状腺鳞癌SW579细胞株的生长抑制作用

目的探讨蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)信号通路对甲状腺鳞癌SW579细胞株的生长抑制作用及机制。方法利用PKA特异性激活剂双丁酰环化腺苷酸(dbcAMP)0.5、1.0和2.0 mmol/L作用于甲状腺鳞癌SW579细胞24、48和72 h后用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测SW579细胞的生长活性;酶联免疫吸附法(ELISA法)检测经dbcAMP 1.0 mmol/L作用48 h后PKA、成熟促进因子(message processing fac-tor,MPF)的活性;免疫印迹法(Western blotting法)检测经dbcAMP 1.0 mmol/L作用48 h CDC25B-pS323(celldivision cycle 25B-pS323)磷酸化水平。结果 MTT法结果显示,在dbcAMP作用下,SW579细胞活力呈逐渐下降趋势,随dbcAMP剂量的增加和作用时间的延长,其作用越明显。ELISA法显示,dbcAMP使PKA活性升高而使MPF活性下降。未加dbcAMP组PKA、MPF活性分别为(32.5±2.49)nmol/L和(115.5±7.53)ng/L;dbcAMP组PKA、MPF活性分别为(436.33±12.85)nmol/L和(22.87±2.57)ng/L,两组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。Western blotting显示,dbcAMP能够使CDC25B-pS323磷酸化水平上调。未加dbcAMP组和dbcAMP组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论利用dbcAMP激活PKA信号通路,可以抑制甲状腺鳞癌SW579细胞生长增殖,其抑制作用可能与PKA/CDC25B/MPF信号通路的调控有关。     

食管癌鳞癌患者术前CRP检测的临床意义

目的：探讨食管鳞癌患者术前C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平与临床病理特征和预后之间的关系。方法回顾性分析2008年9月-2014年8月行食管癌切除术的111例食管鳞癌患者的临床病理资料,其中CRP升高组(>=5 mg/L)40例,CRP正常组(<5 mg/L)71例,分析CRP升高组和正常组间病理特征及预后的差异。结果2组间TNM分期、肿瘤长度、淋巴结转移分布有统计学差异,CRP升高组较CRP正常组TNM分期更晚(P=0.001),肿瘤长度更长(P=0.037),更高淋巴结转移率(P=0.001)。单因素生存分析示TNM分期(P=0.004)、肿瘤长度(P=0.045)、是否淋巴结转移(P=0.000)及CRP水平(P=0.000)是预后的危险因素。CRP升高组和CRP正常组5年生存率分别为17.5%和45.1%,P<0.001,差异有统计学意义。多因素生存分析示TNM分期(P=0.040)、淋巴结转移(P=0.000)和CRP水平升高(P=0.000)均是食管鳞癌患者的预后独立危险因素。结论食管鳞癌患者术前CRP水平与肿瘤的病理分期,长度和淋巴结转移密切相关,术前CRP水平可作为食管鳞癌患者独立预后判断指标。     

Plasma-metabolite-based machine learning is a promising diagnostic approach for esophageal squamous cell carcinoma investigation

The aim of this study was to develop a diagnostic strategy for esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) that combines plasma metabolomics with machine learning algorithms. Plasma-based untargeted metabolomics analysis was performed with samples derived from 88 ESCC patients and 52 healthy controls. The dataset was split into a training set and a test set. After identification of differential metabolites in training set, single-metabolite-based receiver operating characteristic (ROC) curves and multiple-metabolite-based machine learning models were used to distinguish between ESCC patients and healthy controls. Kaplan-Meier survival analysis and Cox proportional hazards regression analysis were performed to investigate the prognostic significance of the plasma metabolites. Finally, twelve differential plasma metabolites (six up-regulated and six down-regulated) were annotated. The predictive performance of the six most prevalent diagnostic metabolites through the diagnostic models in the test set were as follows: arachidonic acid (accuracy: 0.887), sebacic acid (accuracy: 0.867), indoxyl sulfate (accuracy: 0.850), phosphatidylcholine (PC) (14:0/0:0) (accuracy: 0.825), deoxycholic acid (accuracy: 0.773), and trimethylamine N-oxide (accuracy: 0.653). The prediction accuracies of the machine learning models in the test set were partial least-square (accuracy: 0.947), random forest (accuracy: 0.947), gradient boosting machine (accuracy: 0.960), and support vector machine (accuracy: 0.980). Additionally, survival analysis demonstrated that acetoacetic acid was an unfavorable prognostic factor (hazard ratio (HR): 1.752), while PC (14:0/0:0) (HR: 0.577) was a favorable prognostic factor for ESCC. This study devised an innovative strategy for ESCC diagnosis by combining plasma metabolomics with machine learning algorithms and revealed its potential to become a novel screening test for ESCC.     

CD44与p-糖蛋白在食管鳞状上皮细胞癌中表达的相关性及临床意义

目的:探讨CD44、p-糖蛋白(P-gp)的表达在食管癌中相关性及临床意义。方法:应用免疫组织化学法技术检测62例食管鳞状上皮细胞癌患者组织标本中CD44蛋白和P-gp的表达情况,根据检测结果进行统计学分析。结果:62例食管鳞状上皮细胞癌中CD44蛋白表达阳性39例(62.9%),P-gp表达阳性21例(33.9%);食管癌及癌旁正常上皮中CD44蛋白与P-gp表达的差异有统计学意义(P<0.001);CD44蛋白与P-gp表达存在相关性(P=0.035);CD44蛋白的表达与患者的性别年龄无关,与肿瘤的分化程度,浸润深度,淋巴结转移相关;P-gp表达与患者的性别,年龄,分化程度无关,与肿瘤的分期,淋巴结转移相关。在CD44蛋白和P-gp蛋白同时表达的17例患者,淋巴结转移率高达70.1%(12/17),而CD44蛋白和P-gp同时不表达的患者中,只有15.7%(3/19)的病人发生淋巴结转移,两组差别有统计学意义(P<0.001)。结论:CD44与P-gp的联合检测有助于综合判断食管癌的分化程度,转移潜能及临床分期,有望为断肿瘤预后的新指标;CD44与P-gp的表达存在相关性,它们对肿瘤多药耐药的影响值得进一步深入研究。     

IGFBP1基因两个单核苷酸多态性与食管鳞状细胞癌没有关联

目的:检测类胰岛素生长因子结合蛋白1(IGFBP1)基因单核苷酸多态性(SNP)rs4619和rs1065780与食管鳞状细胞癌的关系.方法:应用TaqMan方法对77例食管鳞状细胞癌患者和466例正常人进行基因分型,并用非条件性Logistic回归分析所检测的SNP与食管鳞状细胞癌的关系.结果:所检测的两个SNP与食管鳞状细胞癌的发病没有关联.结论:SNP rs4619和rs1065780在食管鳞状细胞癌的发病过程中不起主要作用.     

食管鳞癌组织中MIFmRNA的表达及其意义

目的:探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)Mrna在食管鳞癌及正常食管组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测MIFmRNA在80例手术切除的食管鳞癌组织及正常食管组织中的表达.结果:MIFmRNA表达率在食管鳞癌中为85%(68/80),而在正常食管组织15%(15/80),有显著性差异(P＜0.01).MIFmRNA的阳性表达率与肿瘤细胞分化程度及TNM分期有关(P＜0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤大小以及有无淋巴结转移无关(P＞0.05).结论:MIFmRNA的高水平表达说明其参与了食管鳞癌的发病机制.并将可能为食管鳞癌的早期诊断和治疗提供一种新的手段.     

VEGF及其受体KDR在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究食管鳞状细胞癌组织中血管内皮生长因(vascular endothelial growth factor，VEGF)及其受体KDR(kirme imert domain cotaining receptor／fetal liver kinase-1)的表达及与食管癌生物学行为的相关性。方法 采用免疫组织化学技术，检测50例手术切除、病理证实的食管鳞状细胞癌组织VEGF、KDR的蛋白表达。结果 VEGF主要在肿瘤细胞表达，KDR在间质细胞、肿瘤细胞、腺体及血管内皮细胞均有表达，并与VEGF有相似性，癌巢边缘阳性表达降低。结论 VEGF、KDR与食管鳞状细胞癌的一些生物学行为有一定的相关性。     

PI3K/Akt和AMPK信号通路在运动诱导的啮齿动物骨骼肌内GLUT4转位和表达中的作用

骨骼肌在葡萄糖稳态中扮演重要作用,葡萄糖转运体4(glucose transporter4,GLUT4)作为骨骼肌内最主要的葡萄糖转运蛋白,其转位和表达的变化与胰岛素抵抗的发生密切相关.本文综述了近年来关于啮齿动物骨骼肌内GLUT4转位和表达的运动激活以及磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinases,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)和腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)信号通路介导运动改善骨骼肌葡萄糖摄取的研究进展,旨在为全面了解和明确运动影响啮齿动物骨骼肌内GLUT4转位和表达的机制.