胃癌细胞凋亡、增殖和p53蛋白表达的研究

目的　研究胃癌细胞凋亡和细胞增殖状态的变化以及p5 3基因蛋白表达 ,探讨其在胃癌恶性转化进程中的作用。方法　采用脱氧核糖核酸转移酶介导的生物素化dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术和免疫组织化学S -P法分别检测 5 8例胃癌及癌旁粘膜组织凋亡和增殖状态及 p5 3基因的表达。结果　胃癌组织细胞凋亡指数显著低于癌旁对照组织 (2 .8± 0 .8、6 .9± 0 .3,P <0 .0 1) ;前者细胞增殖指数明显高于后者 (6 5± 16 .2、11± 1.0 1、P<0 .0 1) ,且凋亡 /增殖比率呈递减趋势 (0 .0 5±0 .0 1、0 .6 4± 0 .0 3,P <0 .0 1)。胃癌p5 3基因突变阳性组与阴性组的凋亡指数AI分别为 1.6 1± 0 .4和4 .15± 0 .7;PI分别为 72± 6 .5、5 4± 8.1,差异均有显著性 (P<0 .0 1)。结论　在胃癌组织中癌细胞凋亡明显受到抑制 ,细胞凋亡、增殖状态和 p5 3基因表达的改变是胃癌发生的重要因素之一。     

组织芯片技术在胃癌p53蛋白表达研究中的应用

目的探讨组织芯片免疫组化标记结果的可靠性，研究p53表达与胃癌临床病理特征及预后的相关性。方法将100例无术前放化疗史的胃癌手术标本和30例对照组胃粘膜制成组织芯片后，用免疫组化方法分别在组织芯片和常规切片上检测p53蛋白的表达，比较其差异；用TUNEL法进行细胞凋亡指数检测。对随访14个月至13年的47例作生存分析。结果共获得2个组织芯片蜡块。p53检测在常规切片和组织芯片同为阳性或同为阴性者占98％，不一致者占2％。p53表达在胃癌不同组织学分化、UICC分期和血管／神经侵犯、淋巴结转移中均有差异，但无统计学意义（P〉0．05）。p53表达与细胞渊亡指数呈负相关，但差异无统计学意义（P〉0。05）。随访结果生存分析显示，p53表达与预后无关，UICC分期具有独立的预后意义。结论组织芯片和常规切片免疫组化结果有较好的一致性。组织芯片技术是病理学研究中的高效、快速工具。p53表达与胃癌预后无显著相关性，UICC分期仍然是胃癌的独立预后指标。     

p73、p53蛋白在胃癌中的表达及相关性研究

目的探讨p73、p53蛋白在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系，方法应用免疫组织化学方法检测42例胃癌、22例慢性浅表性胃炎、26例慢性萎缩性胃炎、19例胃溃疡和20例胃黏膜异型增生中的p73、p53蛋白的表达情况，并结合临床病理资料进行统计学分析。结果胃癌中p73、p53蛋白的阳性表达率分别为40．48％、54．76％，与慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡和胃黏膜异型增生相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；p53蛋白表达与胃癌的组织分化程度、黏膜浸润深度、淋巴结转移相关（P〈0．05）；073蛋白表达与胃癌的组织分化程度相关（P〈0．05），与黏膜浸润深度、淋巴结转移无相关（P〉0．05）；胃癌组织中p73、p53蛋白表达之间呈正相关（P〈0．05）。结论p73、p53蛋白在胃癌组织中呈高水平表达，二者可能共同参与了胃癌的发生发展过程。     

p53、p73在胃癌及不典型增生中表达意义的研究

目的 探讨p53、p73蛋白表达与胃腺癌发生发展的关系.方法 应用免疫组化S-P法检测56例胃癌和40例不典型增生病例中p53、p73蛋白的表达情况（10例正常胃粘膜作为对照）.结果 正常胃粘膜组p53、p73蛋白无表达;p53蛋白在胃癌组阳性表达率为71.4%,显著高于不典型增生组30%（P＜0.01）;p73蛋白在胃癌组阳性表达率为64.3%,显著高于不典型增生组22.5%（P＜0.01）.结论 p53、p73蛋白在胃癌的发生、发展中可能起重要作用.     

胃癌组织中p53基因突变和p53蛋白表达

目的比较胃癌和癌旁组织中p53基因突变及p53蛋白的表达与淋巴结转移和预后的关系。方法采用PCR．SSCP技术和免疫组织化学S-P法，对石蜡包埋组织进行p53基因外显子6．7和8，9以及p53蛋白的检测。结果（1）p53蛋白的阳性表达在癌组织和癌旁组织中分别为47．6％和38．1％；有淋巴结转移的病例p53蛋白表达52．8％。（2）癌组织中p53外显子7的突变率为23．9％；癌旁组织中突变率为19．0％。癌组织中p53外显子6的突变率为10．5％；癌旁组织为8．6％。癌组织中p53外显子8，9的突变率为1．9％；癌旁组织为1．0％。结论有淋巴结转移的病例中，筇3外显子的突变率和蛋白的表达率均明显增高，提示p53外显子的突变在胃癌的发生发展中是一个重要因素，并促进肿瘤的转移。p53基因突变与p53蛋白高表达在癌组织和癌旁组织中无显著差异。     

骨肉瘤发生中p53蛋白表达对细胞凋亡的调节

目的研究骨肉瘤发生中p53蛋白表达对细胞调亡的调节。方法利用原位脱氧核糖核酸末端转移酶(In situ terminal deoxynucleotide transferase;ISTdT)标记技术和SP免疫组织化学方法分别检测骨肉瘤和良性骨肿瘤组织中凋亡细胞和p53蛋白的表达。结果骨肉瘤中p53蛋白的阳性率(76.9%,50/65)和阳性表达强度明显高于良性骨肿瘤组织(21.1%,4/19)(分别为P＜0.01和P＜0.05),但4种亚型之间差异无显著性(P＞0.05)。骨肉瘤组织中凋亡细胞密度均明显低于良性骨肿瘤组织(P＜0.01),但各亚型之间两者亦均无明显差异(P＞0.05);骨肉瘤和良性骨肿瘤组织中p53蛋白表达与凋亡细胞密度呈明显的线性负相关(r=-0.8954,P＜0.01),其表达增强则凋亡细胞密度逐渐降低。结论在骨肉瘤发生中p53基因突变可能是一种频发事件。突变型p53基因可能是通过其蛋白过度表达抑制肿瘤细胞凋亡,导致骨肉瘤的发生和发展。     

胃癌组织中凋亡相关基因Survivin、Bax、p53的表达及其相关性研究

目的探讨凋亡抑制基因生存素蛋白（Survivin）在胃癌组织中表达的临床意义，及其与Bax、p53蛋白表达的相关性分析。方法应用免疫组织化学链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法（SABC法），检测25例正常胃黏膜组织及100例胃癌组织中的Survivin、Bax、p53的表达。结果25例正常胃黏膜组织中Survivin呈阴性表达，而100例胃癌组织中81例呈阳性表达，阳性率为81．0％，差异有统计学意义（P〈0．01）。Survivin基因表达与胃癌组织分化程度、临床分期及淋巴结转移呈正相关。Bax在胃癌组织中的表达率（17．0％）显著低于正常胃黏膜组织中的表达（48．0％），P〈0．01；胃癌组织中Bax与Survivin蛋白表达呈负相关P〈0．05；Survivin与p53蛋白表达呈正相关，P〈0．05。结论胃癌组织中Survivin高表达导致凋亡抑制在胃癌的发生发展中可能起重要作用。Survivin基因的异常表达提示胃癌预后不良。p53基因突变导致凋亡异常可能与其对Survivin表达调控失识关系更为密切，Bax表达下调与Survivin表达上调可能共同在胃黏膜癌变和癌变后的恶性演进过程中起重要作用，三者联合检测有望作为预警胃癌发生和转移的病理生物学标志。     

胃癌组织及胃癌细胞系中p53的免疫组化研究

用ｐ５３单克隆抗体，对１１７例胃癌和非癌组织的石蜡切片及５株胃癌细胞，进行了免疫组化研究。结果５６例进展期胃癌阳性核染２１例，４例早期胃癌无一例阳性，非癌组织均为阴性；５株胃癌细胞均显示阳性着色，通过ＦＡＣＳ分析，５株胃癌细胞均为非二倍体。说明ｐ５３突变主要在胃癌进展中起作用，可能提示癌肿恶性度高。     

胃癌及癌前病变组织中p53蛋白表达的研究

目的：研究p53蛋白表达在胃癌发生发展过程中的变化规律。方法：利用免疫组化染色对206例胃黏膜活检组织，包括正常胃黏膜、慢性浅表性胃炎、肠上皮化生、异型增生及胃癌，进行p53蛋白表达的分析。结果：正常胃黏膜和慢性浅表性胃炎中未见p53蛋白的表达；肠上皮化生的p53蛋白表达阳性率显著高于正常胃黏膜和慢性浅表性胃炎；异型增生的p53蛋白表达阳性率高于肠上皮化生，而显著低于胃癌组织。结论：p53基因突变是胃癌发展发生过程中的一个重要环节。     

p73、p63和p53基因在人非小细胞肺癌组织中的表达

目的：探讨p73、p63和p53在非小细胞肺癌（NSCLC）的表达及与预后的关系。方法：免疫组化法测定93例NSCLCp73、p63和p53的表达并对其与年龄、性别、吸烟、病理类型、组织分化等因素进行统计学分析。结果：p53、p63和p73在正常肺组织表达阳性率分别为25％、25％和12．5％，在NSCLC的表达阳性率分别为65．6％、54．8％和71％，差异有显著性（P〈0．05）。p53表达阳性率与淋巴结转移相关（P〈0．05）；p63表达阳性率与肺癌的组织类型和淋巴结转移有关（P〈0．05）；肺鳞癌组织p63随分化程度降低表达增强（P〈0．05）。结论：p53、p63和p73均参与了NSCLC的发展、浸润和转移，可作为了解NSCLC的生物学行为和判断预后的指标。     

人胃癌组织p73基因mRNA表达的研究

为了解该基因在胃癌发生发展中的作用 ,我们应用反转录多聚酶链反应技术 (ＲＴ ＰＣＲ)对胃癌及正常组织标本中ｐ73ｍＲＮＡ表达水平进行了分析。1　材料与方法1.1　研究对象　　共收集 1999年 10月至 2 0 0 0年 3月天津 2 5 4医院和西南医院手术切除标本 3 6例 ,均未经过放疗和化疗。每例包括原发癌肿和手术切缘的正常胃粘膜。经病理学检查证实肿瘤组织中癌细胞占 80 %以上 ,正常组织无癌细胞。标本放入 -80℃冰箱待检。1.2　引物　　参照文献 [1]合成 1对ｐ73基因的引物扩增其第 1～ 3外显子 ,扩增片段 166ｂｐ ,引物序列 :上游 5′ ＣＧ…     

胃癌组织P53、P63蛋白表达及细胞凋亡的研究

目的：探讨P53、P63蛋白表达及细胞凋亡在胃癌发生发展中的可能机制。方法：选择57例手术切除的胃癌及胃癌旁组织,用免疫组化方法检测组织中的P53、P63蛋白表达,同时用Tunel方法检测胃癌组织中的凋亡细胞。结果：胃癌组织P53、P63蛋白表达率显著高于胃癌旁组织（P〈0.05）;低、未分化型腺癌表达率显著高于高、中分化型腺癌（P〈0.05）;有淋巴转移显著高于无转移组（P〈0.05）;P53、P63高表达的癌组织,细胞凋亡指数减少,早期胃癌低于晚期胃癌（P〈0.05）。结论：胃癌组织P53、P63蛋白高表达,可能延缓细胞凋亡;细胞凋亡机制障碍可能是胃癌增生失控的基础。     

肝细胞癌组织中丙型肝炎NS3蛋白对P53蛋白表达的影响

目的探讨肝细胞癌（ＨＣＣ）及其癌旁肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ３蛋白对Ｐ５３蛋白表达的影响及其在肝癌发生中的作用。方法用免疫组织化学技术检测４７例乙型肝炎病毒阴性的ＨＣＣ及其癌旁肝组织中ＨＣＶＮＳ３蛋白和Ｐ５３蛋白的表达。结果ＨＣＶＮＳ３蛋白在ＨＣＣ中的阳性率（６２％）明显低于癌旁肝组织（８３％）,Ｐ＜００２５。癌组织中其表达强度与癌细胞分化程度呈相关性（Ｐ＜００２５）。Ｐ５３蛋白在癌组织中的阳性率（８１％）明显高于癌旁组织（４７％）,Ｐ＜００２５;癌细胞分化愈差,表达愈强（Ｐ＜００５）;癌组织中Ｐ５３蛋白表达与ＨＣＶＮＳ３蛋白的表达无相关性（Ｐ＞０５）,而癌旁肝组织中两者表达呈显著相关性（Ｐ＜００１）,ＨＣＶＮＳ３蛋白阳性患者中Ｐ５３蛋白表达明显高于ＨＣＶＮＳ３阴性病例,Ｐ＜００５。结论ＨＣＶＮＳ３蛋白可能是在肝细胞转化早期通过内源性机制间接作用于Ｐ５３基因使其突变导致肝细胞癌变。     

胃癌及癌前病变组织中p53、c-erbB-2基因表达

目的：探讨p53、c-erbB-2基因表达与胃癌及癌前病变生物学行为之间的关系。方法：采用免疫组化ABC法检测胃粘膜病变中的p53、c-erbB-2蛋白表达。结果：慢性浅表性胃炎组织中p53、c-erbB-2蛋白无表达；慢性萎缩性胃炎p53、c-erbB-2蛋白表达率分别为10％、20％；早期胃癌组织中分别为50％、41％；进展期胃癌中的表达率分别为73％、76．7％。结论：p53、c-erbB-2基因协同作用参与了胃癌的发生发展。     

卵巢癌细胞凋亡与端粒酶活性、p53突变的相关性研究

目的　研究卵巢癌组织中细胞凋亡与凋亡调控因子———端粒酶活性、p5 3突变之间的关系。方法　TRAP -ELISA法半定量测定卵巢癌组织的端粒酶活性 ;流式细胞计量术 (flowcytometry ,FCM)分析细胞凋亡率(Apo)、S期细胞比率 (SPF)、p5 3突变蛋白阳性率。结果　①随着临床分期、病理分级的升高及淋巴结转移 ,Apo、SPF均显著增加 (P <0 .0 1、P <0 .0 1、P<0 .0 5 ) ,直线相关分析显示二者中度相关 (r =0 .6 5 ,P <0 .0 1)。②随着临床分期、病理分级的升高及淋巴结转移 ,端粒酶阳性率、阳性程度及p5 3突变蛋白阳性率均显著增加 (端粒酶活性比较为 :P <0 .0 5 ,P <0 .0 1,P <0 .0 1;p5 3突变蛋白阳性率比较为 :P <0 .0 1,P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 )。③随着端粒酶活性增高 ,p5 3突变蛋白阳性率、Apo、SPF均显著增加 (P均 <0 .0 1)。④p5 3突变蛋白阳性率与Apo无明显相关性 (r =0 .2 7,P >0 .0 5 ) ,与SPF轻度相关 (r =0 .38,P <0 .0 1)。结论　端粒酶和p5 3突变都可通过调节细胞凋亡与增殖来调控卵巢癌的恶性行为及转移潜能。卵巢癌早期 ,二者都促使细胞增殖失控导致肿瘤发生 ;随着肿瘤进展 ,p5 3调节凋亡与增殖的作用减弱 ,而端粒酶的作用渐强。联合检测可从不同的分子生物学角度评价卵巢癌的恶性行为及转移潜     

胃癌组织P53、PCNA蛋白表达及细胞凋亡的研究

目的探讨P53、PCNA蛋白表达和胃癌细胞凋亡关系及其它们在胃癌发生发展中的可能作用。方法采用TUNEL及流式细胞术分别检测60份胃癌、癌旁正常黏膜组织细胞凋亡和P53、PCNA蛋白表达。结果胃癌组织细胞凋亡率明显低于癌旁正常组织（〈0.01）;P53、PCNA蛋白在胃癌组织中的表达率明显高于癌旁正常组织（〈0.01）。胃癌P53阳性组细胞凋亡率低于P53阴性组,而PCNA平均荧光强度高于P53阴性组。低分化胃癌病例其P53、PCNA蛋白高于高中分化的病例。有淋巴结转移的胃癌病例其P53、PCNA蛋白高于无淋巴结转移的病例。结论胃癌组织中癌细胞凋亡明显受到抑制,胃癌组织中P53高表达及细胞增殖活跃状态在胃癌的发生发展过程中起重要作用。     

贲门癌与食管癌组织p53蛋白表达和基因突变分析

目的：探讨河南食管癌高发区人群贲门癌和食管癌组织p53基因突变和蛋白聚集的变化规律，进一步深人了解食管癌癌变机制。方法：采用PCR—SSCP、DNA测序分析和免疫组织化学染色方法对19例贲门腺癌手术切除标本和50例食管鳞癌手术切除标本的p53基因突变和蛋白聚集的变化进行检测。结果：①食管鳞癌和贲门腺癌组织中p53蛋白过度表达的阳性率分别为70％和68％，p53基因突变率分别为58％和53％，p53基因突变和蛋白过度表达的一致率分别为64％和42％；②食管鳞癌组织p53基因突变在第5—8外显子中均有分布，而在贲门腺癌组织集中分布于第5和第7外显子；③对p53基因突变谱分析显示，在食管鳞癌和贲门腺癌组织中，G：C→A：T是最常见的碱基突变类型(48％和30％)，碱基的插入和缺失在贲门腺癌中也较为常见。结论：p53基因在食管鳞癌和贲门腺癌组织中的相似变化提示林州地区贲门和食管癌可能存在共同的致病危险因素；对p53蛋白检测能从一定程度上反映P53基因的变化特点。     

Study on the p53 Protein Expression in Gastric Cancer and Precancerous Lesions by Flow Cytometry

Ｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｐ５３ＰｒｏｔｅｉｎＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＧａｓｔｒｉｃＣａｎｃｅｒａｎｄＰｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓＬｅｓｉｏｎｓｂｙＦｌｏｗＣｙｔｏｍｅｔｒｙＨＡＯＹｉｎｇ（郝莹）；ＺＨＡＮＧＪｉｎｋｕｎ（张锦坤）ＹＩＣｕｉｑｉｏｎｇ（易粹琼）...     

突变型p53和凋亡抑制蛋白Livin在胃癌组织中的表达及其相关分析

目的:探讨突变型p53蛋白和凋亡抑制蛋白Livin在胃癌组织中的表达和临床意义以及二者的相互关系。方法:收集48例胃癌石蜡标本及20例癌旁正常组织标本,采用免疫组化法检测p53与Livin蛋白的表达,并分析不同临床、病理因素(性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、分化程度、淋巴结有无转移、临床分期)患者p53与Livin蛋白的阳性表达率。结果:胃癌组织中p53、Livin蛋白阳性表达率分别为50.0%、37.5%,两者在20例正常胃组织中无1例阳性表达,差异均有统计学意义(P<0.05);≥60岁、<60岁患者Livin蛋白阳性表达率分别为54.2%、20.8%,差异有统计学意义(P=0.017)。除此之外,其他各临床、病理因素患者胃癌组织中Livin、p53蛋白表达差异均无统计学意义(P均>0.05);p53和Livin蛋白在胃癌组织中的表达存在正相关(χ2=8.888,P<0.05,r=0.395)。结论:p53和Livin蛋白在胃癌组织中特异性高表达,可作为诊断指标和治疗靶点,二者在胃癌发生、发展中相互影响。≥60岁胃癌患者Livin表达明显升高,提示凋亡抑制是老年胃癌患者重要的发病原因。     

p14~(ARF)、mdm2、p53基因蛋白表达与胃癌相关性及联合诊断价值分析

目的分析p14^(ARF)、mdm2、p53基因异常表达与胃癌相关性以及联合评定价值。方法基于S-P法(免疫组织化学染色法)检测18例正常胃黏膜组织(健康对照组)、24例胃黏膜增生组织(增生组)、50例胃黏膜癌变组织(癌变组)标本中p14(ARF)、mdm2、p53基因异常表达与胃癌相关性以及联合评定价值。方法基于S-P法(免疫组织化学染色法)检测18例正常胃黏膜组织(健康对照组)、24例胃黏膜增生组织(增生组)、50例胃黏膜癌变组织(癌变组)标本中p14^(ARF)、mdm2、p53基因表达水平,分析其与胃癌的相关性及用于诊断胃癌的准确度、敏感度、特异度。结果癌变组、增生组、健康对照组p14(ARF)(88.0%、75.0%、22.2%)、mdm2(88.0%、70.8%、27.8%)、p53表达(48.0%、41.7%、11.1%)阳性率均呈下降趋势(P均<0.05);三者表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.05);p14(ARF)、mdm2、p53基因表达水平,分析其与胃癌的相关性及用于诊断胃癌的准确度、敏感度、特异度。结果癌变组、增生组、健康对照组p14(ARF)(88.0%、75.0%、22.2%)、mdm2(88.0%、70.8%、27.8%)、p53表达(48.0%、41.7%、11.1%)阳性率均呈下降趋势(P均<0.05);三者表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.05);p14^(ARF)、mdm2、p53联合用于胃癌诊断的准确度为93.4%,敏感度为96.0%,特异度为95.2%,均显著高于三者单独诊断的性能。结论 p14(ARF)、mdm2、p53联合用于胃癌诊断的准确度为93.4%,敏感度为96.0%,特异度为95.2%,均显著高于三者单独诊断的性能。结论 p14^(ARF)、mdm2、p53基因异常表达与胃癌发病和病情发展密切关联,联合检测三者的表达水平对胃癌的诊断及病情评定具较高临床价值。