洛土辛对豚鼠心室肌细胞动作电位及L型钙电流的作用

采用膜片钳技术全细胞记录方式,研究洛土辛（Ｌｏｔ）对单个豚鼠心室肌细胞动作电位（ＡＰ）和Ｌ型钙通道电流（ＩＣａ－Ｌ）的影响。结果表明,Ｌｏｔ３０μｍｏｌ／Ｌ明显延长ＡＰ时程,介不影响静息电位和ＡＰ幅度,由增加全细胞ＩＣａ－Ｌ。贴附式单通道记录表明,Ｌｏｔ １００μｍｏｌ／Ｌ不改变斜率电导,对Ｌ型钙通道的门控过程也无明显影响,但显著提高单通道的平均电流,使非空白记录从２５％增至４１％。提示,Ｌｏｔ增     

洛土辛对豚鼠心室肌细胞动作电位及L型钙电流的作用

采用膜片钳技术全细胞记录方式,研究洛土辛（Ｌｏｔ）对单个豚鼠心室肌细胞动作电位（ＡＰ）和Ｌ型钙通道电流（Ｉ_（Ｃａ－Ｌ））的影响。结果表明,Ｌｏｔ ３０ μｍｏｌ／Ｌ明显延长 ＡＰ时程,但不影响静息电位和 ＡＰ幅度,另增加全细胞Ｉ_（Ｃｃ－Ｌ）。贴附式单通道记录表明,Ｌｏｔ １００ μｍｏｌ／Ｌ不改变斜率电导,对Ｌ型钙通道的门控过程也无明显影响,但显著提高单通道的平均电流,使非空白记录从 ２５％增至 ４１％。提示,Ｌｏｔ增加 Ｌ型钙通道的可利用度可能是其促钙内流的主要作用机制。     

洛士辛对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的作用

采用膜片钳技术 ,研究Lot对单个豚鼠心室细胞L型钙通道电流 (ICa -L)的影响。Lot1～ 2 0 0 μmol/L浓度依赖性地增加ICa -L幅值 ,EC50 为 38μmol/L ,Lot30 μmol/L使最大峰值电流增加 6 0 %。其促钙作用无明显使用依赖性 ,略促进钙通道电流激活 ,显著地减少钙电流的稳态失活。表明Lot增加L型钙电流作用主要与减少钙电流的稳态失活有关。     

粉防己碱对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响

应用全细胞记录式膜片钳技术研究了粉防己碱（Ｔｅｔ）对豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙电流（Ｉ（Ｃａ））的影响。Ｔｅｔ１μｍｏｌ／Ｌ使Ｉ（Ｃａ））的电流－电压关系曲线之各电流值均降低。指令电位（ＶＴ）为０ｍＶ，Ｔｅｔ０．１～３．２μｍｏｌ／Ｌ　使Ｉ（Ｃａ）呈浓度依赖性降低，半数抑制浓度（Ｌ（５０））为０．７μｍｏｌ／Ｌ。此外，Ｔｅｔ０．３μｍｏｌ／Ｌ能阻滞异丙基肾上腺素（Ｉ（ｓｐ））０．１μｍｏｌ／Ｌ引起的Ｉ（Ｃａ）的增大。证明Ｔｅｔ可阻滞豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙电流，并提示有增大延迟整流钾电流（Ｉ（ｏｕｔ））的作用。     

粉防己碱对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响

应用全细胞记录式膜片技术研究了粉防己碱（Ｔｅｔ）对豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙电流（Ｉｃａ）的影响，Ｔｅｔ１μｍｏｌ／Ｌ使Ｉｃａ的电流－电压关系曲线之各电流值为均降低，指令电位（ＶＴ）为０ｍＶ，Ｔｅｔ０．１～３．２μｍｏｌ／Ｌ使Ｌｃａ呈浓度依赖性降低，半数抑制浓度（ＩＣ５０）为０．７μｍｏｌ／Ｌ，此外Ｔｅｔ０．３μｍｏｌ／Ｌ能阻滞异丙基肾上腺素（Ｉａｐ）０．１μｍｏｌ／Ｌ引起的Ｉｃａ的增大，证明了Ｔｅｔ可     

乙氧异黄酮二酸钠对豚鼠单个心室肌细胞钙电流的影响

应用全细胞膜片钳技术，研究乙氧异黄酮二酸钠（ｅｔｈｏｘｙ－ｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ２－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃａｃｉｄ，ＥＩＣＡ）对豚鼠心室肌细胞上慢钙电流（Ｉｃａ）的影响。结果发现ＥＩＣＡ能使心室肌细胞Ｉｃａ呈剂量依赖性降低，阈浓度为１０－８ｍｏｌ／Ｌ，最大有效浓度为３×１０－５ｍｏｌ／Ｌ；１０－６ｍｏｌ／ＬＥＩＣＡ可明显阻断异丙肾上腺素（Ｉｓｏｐｒｅｎａｌｉｎｅ，Ｉｓｏ）和钙通道激动剂ＢａｙＫ８６４４所致的Ｉｃａ增加（Ｐ＜０．０１）。ＥＩＣＡ能增加外向电流（Ｌｏｕｔ），并被四乙基胺（Ｔｅｔｒａｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ，ＴＥＡ，１０－６ｍｏｌ／Ｌ）所拮抗。结果提示：ＥＩＣＡ的降压、减慢心率、抗心律失常作用机制主要与阻断Ｃａ２＋通道（Ｌ型）有关。     

人参皂甙单体Rb1对豚鼠心肌细胞ICa^2＋电流阻滞作用的研究

研究人参单体Ｒｂ１对ＩＣａ＾２＋电流的影响。采用全细胞电压钳技术记录了豚鼠心室肌细胞ＩＣａ＾２＋电流，给出了电流－电压关系曲线。在保持电压－５０ｍＶ时，阶跃命令在－５０－＋６０ｍＶ，０ｍＶ时电流最大，并发现Ｒｂ１时ＩＣａ＾２＋电流有明显的阻滞作用。而且在１００μｍｏｌ／Ｌ，２００μｍｏｌ／Ｌ，３００μｍｏｌ／Ｌ，４００μｍｏｌ／Ｌ范围时有剂量依赖关系。     

苦参碱对豚鼠心室肌细胞胞浆〔Ca~(2 )〕_i的影响

目的　研究中药苦参碱对豚鼠心室肌细胞胞浆钙的影响。方法应用激光扫描共聚焦显微技术动态测量单个豚鼠心室肌细胞胞浆钙的浓度。结果在细胞外钙浓度为１．８ｍｍｏｌ／Ｌ时,１～１００μｍｏｌ／Ｌ苦参碱可使细胞内钙离子浓度（〔Ｃａ２＋〕ｉ）呈剂量依赖性增高后下降;而在细胞外无钙的情况下细胞内钙不增高,且低于空白对照组的细胞内钙浓度（Ｐ＜０．０１）。结论苦参碱剂量依赖性促进外钙内流,但不具有促进内钙释放的作用,同时当细胞内钙增高后又可以使〔Ｃａ２＋〕ｉ下降。     

汉防己碱对大鼠皮层神经元钙通道的阻滞作用

在急性分离的大鼠大脑皮层神经元上,用膜片钳单通道记录技术研究汉防己碱（Ｔｅｔ）对电压依赖性钙通道的影响。结果表明,Ｔｅｔ７．５μｍｏｌ／Ｌ、１５μｍｏｌ／Ｌ和３０μｍｏｌ／Ｌ可浓度依赖性抑制大鼠皮层神经元膜Ｌ－和Ｎ－型电压依赖性钙通道,使其开放时间缩短,关闭时间延长,开放概率降低,从而降低钙内流,其对Ｌ－型钙通道的作用与钙通道阻滞剂Ｖｅｒａｐａｍｉｌ相似但较弱。Ｔｅｔ的多种药理作用可能与其阻滞通道     

川芎嗪对单个心室肌细胞电生理的影响

采用全细胞膜片钳（Ｗｈｏｌｅｃｅｌｌｐａｔｃｈ ｃｌａｍｐ） 技术研究川芎嗪（ 四甲基吡嗪,ｔｒｔｒａｍｅｔｈｙｌｐｙｒａｚｉｎｅ,ＴＭＰ） 对豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙通道电流（Ｌ ＩＣａ）的浓度依赖性影响。当维持电位为－ ４０ ｍ Ｖ,刺激频率为０－５ Ｈｚ,钳制时间为４００ ｍｓ,步进电压为１０ ｍ Ｖ,去极到６０ ｍＶ,发现３ μｍｏｌ／ＬＴＭＰ对Ｌ ＩＣａ无影响（Ｐ＞ ０－０５） ;１０ ,３０ 和１００ μｍｏｌ／ＬＴＭＰ对Ｌ ＩＣａ的抑制为３６－３４ ％ ,５８－９４ ％ 和７４－２４％ （Ｐ均＜ ０－０１） ,且浓度愈大,其抑制作用愈强,但都不使Ｉ Ｖ曲线的峰值发生偏移。提示ＴＭＰ具有阻断Ｌ ＩＣａ的作用,且呈浓度依赖性阻滞效应。     

人参皂甙单体Rb_1对豚鼠心肌细胞ICa~(2+)电流阻滞作用的研究

研究人参单体Ｒｂ１对ＩＣａ２＋电流的影响。采用全细胞电压钳技术记录了豚鼠心室肌细胞ＩＣａ２＋电流，绘出了电流—电压关系曲线。在保持电压－５０ｍＶ时，阶跃命令在一５０～＋６０ｍＶ，０ｍＶ时电流最大。并发现Ｒｂ１对ＩＣａ２＋电流有明显的阻滞作用。而且在１００μｍｏｌ／Ｌ，２００μｍｏｌ／Ｌ，３００μｍｏｌ／Ｌ，４００μｍｏｌ／Ｌ范围时有剂量依赖关系。     

外源性神经节苷脂GM_3对Ca~（2＋）－ATP酶及红细胞胞浆Ca~（2＋）－浓度的影响

研究神经节苷脂ＧＭ３（简称ＧＭ３）对部分纯化的人红细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶的作用和对完整兔红细胞浆［Ｃａ２＋］的影响。结果表明：外源性ＧＭ３对Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶的作用呈浓度依赖性双相调节即浓度为１～６．５μｍｏｌ／Ｌ时抑制酶活性，浓度大于６．５μｍｏｌ／Ｌ时激活酶活性；ＧＭ３不影响钙调素（ＣａＭ）对酶的激活；ＣＭ３对兔红细胞浆［Ｃａ２＋］也呈浓度依赖性双相调节即在ＧＭ３浓度低于６９μｍｏｌ／Ｌ时［Ｃａ２＋］有不同程度升高，浓度大于６０μｍｏｌ／Ｌ时则降低［Ｃａ２＋］。     

酸枣仁皂苷A对大鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响

目的:研究酸枣仁皂苷A对大鼠单个心室肌细胞膜L-型钙电流(ICa-L)通道的影响。方法:采用全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的酸枣仁皂苷A对ICa-L的作用。结果:①酸枣仁皂苷A对ICa-L呈浓度依赖性抑制。②100 mg/L酸枣仁皂苷A能使ICa-LI-V曲线明显上移。③100 mg/L酸枣仁皂苷A能使ICa-L稳态激活曲线右移,稳态失活曲线左移,还能增加失活后恢复的τ值。结论:提示酸枣仁皂苷A能够影响ICa-L通道的激活态和失活态抑制ICa-L。     

呼吸中枢M受体亚型与细胞内钙

目的探讨呼吸中枢Ｍ受体亚型与细胞内钙的关系。方法采用Ｆｕｒａ－２双波长荧光法测定Ｍ１和Ｍ２受体激动剂和拮抗剂对胎鼠桥脑和延脑神经细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的影响。结果在静息状态下，其［Ｃａ２＋］ｉ为７２±６ｎｍｏｌ／Ｌ，加入２００μｍｏｌ／ＬＡｃｈ，［Ｃａ２＋］ｉ升高３８％，匹鲁卡品（Ｐｉｌ）０．４～２００μｍｏｌ／Ｌ无明显的升高细胞内钙的作用，而Ｍ２受体激动剂６β－乙酰氧基去甲托烷（６β－ＡＮ）１～１０μｍｏｌ／Ｌ。对神经细胞内的游离钙均无明显影响。Ｍ１－Ｒ拮抗剂哌仑西平（Ｐｉ）６０μｍｏｌ／Ｌ能拮抗Ａｃｈ升高细胞内钙的作用，Ｍ２－Ｒ拮抗剂ＡＦ－ＤＸ１１６２０μｍｏｌ／Ｌ不能拮抗。结论Ｍ１－Ｒ兴奋与细胞内钙升高有关。     

维那利酮对培养鸡胚心室肌细胞L－型钙通道电流的影响

采用细胞贴附式膜片钳技术，观察不同浓度维那利酮对培养鸡胚心室肌细胞Ｌ－型单个钙通道电流的影响，并比较了维那利酮与米力农二者对该电流作用的异同。结果显示：不同浓度的维那利酮可增加通道的可利用率２～３倍（Ｐ＜０．００１），并使通道的开放慨率分别增加２．２５（１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ）、３．０（２×１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ）和４．３（１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ）倍；通道的平均开放时间常数和关闭时间常数在１０￣（－５）ｓｍｏ／Ｌ和２×１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ时无显著改变，而在１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ组可稍延长其平均开放时间常数，缩短其平均关闭时间常数。维那利酮与同等浓度的米力农相比，二者对通道可利用率的增加程度一致，但对开放概率的增加前者比后者高出２倍。     

川芎嗪对心室肌细胞异常自律性的作用及利多卡因的对…

目的：探讨川芎嗪（ＴＭＰ）对Ｂａ＾２＋诱发的心室肌细胞异常自律性的影响。方法：采用常规微电极技术。结果：ＴＭＰ５０－２００μｍｏｌ／Ｌ 依从性使最大舒张电位（ＭＤＰ）减小和自动节律（ＳＲ）增快。利多卡因２μｍｏｌ／Ｌ可完全拮抗ＴＭＰ的上述作用。异搏定０．６μｍｏｌ／Ｌ显著抑制ＳＲ，对ＭＤＰ无影响。结论：ＴＭＰ可阻滞心肌细胞外向Ｋ电流，其药物效应与异搏定不同。     

槲皮素对血小板激活时胞浆游离钙的影响

采用钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２定量测试法观察了槲皮素对血小板胞浆内游离钙浓度的影响。结果发现，槲皮素２５￣４００μｍｏｌ／Ｌ能剂量依赖性地抑制凝血酶引起的血小板胞浆游离钙［Ｃａ＾２＋］ｉ的升高（ＩＣ５０和９５％可信区间为７８．５（４９．５￣１２４．４）μｍｏｌ／Ｌ）；但不能抑制同等剂量凝血酶所引起的胞内贮存钙的释放；抑制钙内流可能是槲皮素抑制血小板聚集和［Ｃａ＾２＋］ｉ升高的机制。     

粉防己碱对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾通道的影响

应用膜片钳全细胞记录技术研究了粉防己碱（ｔｅｔｒａｄｒｉｎｅ,Ｔｅｔ）对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流（Ｉｋ）的影响。结果发现：（１）Ｔｅｔ１０－６ｍｏｌ／Ｌ对心室肌细胞Ｉｋ的外向部分有显著的激活作用。（２）Ｔｅｔ对Ｉｋ外向部分的激活作用呈剂量依赖性。阈浓度为３×１０－８ｍｏｌ／Ｌ,最大有效浓度为３×１０－５ｍｏｌ／Ｌ。（３）Ｔｅｔ使心室肌细胞Ｉｋ的外向部分呈时间依赖性增加。结果提示：Ｔｅｔ对Ｉｋ的外向部分有激活作用,这种激活作用可能是其降低心肌收缩力、抗高血压和抗心律失常的作用机制之一。     

甲基黄酮醇胺对家兔主动脉条~（45）Ca跨膜流动的影响

本文应用４５Ｃａ流动法研究甲基黄酮醇胺（Ｍｅｔｈｙｌｌａｖｏｎｌａｍｉｎｅ，ＭＦＡ）对兔主动脉条４５Ｃａ跨膜流动的影响。发现：ＭＦＡ（０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）时间依赖性抑制氯化钾（８０ｍｍｏｌ／Ｌ）诱导的４５Ｃａ内流及净摄取的增加，并能抑制静息状态的４５Ｃａ外流，取消并翻转去甲肾上腺素（ＮＡ，１μｍｏｌ／Ｌ）降低兔主动脉条４５Ｃａ外流作用。提示：ＭＦＡ对经ＰＤＣ的钙内流有抑制作用，并有一定的抑制钙泵及阻断α－受体作用。     

两面针碱对钙调蛋白依赖环核苷酸磷酸二酯酶的抑制作用

以钙调蛋白依赖环核苷酸磷酸二酯酶（ＣａＭ－ＰＤＥ）为分子模型，应用正文试验证实两面针碱（Ｎｉ－ｔｉｄｉｎｅ，Ｎｉｔ）是一种新的ＣａＭ拮抗剂。实验结果表明：①：Ｎｉｔ抑制ＣａＭ－ＰＤＥ活性ＩＣ５０为８６μｍｏｌ／Ｌ。②７５μｍｏｌ／ＬＮｉｔ对０～８０ｎｇ／ｍｌＣａＭ存在下，ＣａＭ－ＰＤＥＶｍａｘ基本不变，半激活浓度（ＡＣ５０）增大，抑制常数（Ｋｉ）为６６μｍｏｌ／Ｌ。提示Ｎｉｔ以竞争方式拮抗ＣａＭ对其靶酶（ＰＤＥ）的活化。③７５μｍｏｌ／ＬＮｉｔ对ＣａＭ－ＰＤＥ抑制动力学研究：改变底物（ｃＡＭＦ）浓度，ＣａＭ－ＰＤＥ的Ｖｍａｘ减少，米氏常数（Ｋｍ）值增大，Ｋｉ为６４μｍｏｌ／Ｌ，α＞１。提示Ｎｉｔ对ＣａＭ－ＰＤＥ的抑制作用是非竞争一竞争性混合型抑制。由此推测Ｎｉｔ可能通过与ＣａＭ竞争酶分子上的ＣａＭ结合位点从而抑制ＣａＭ－ＰＤＥ的激活活性。