乙型肝炎患者乙型肝炎病毒前Ｃ区变异及干扰素抗体对干扰素治疗的影响

目的 探讨干扰素治疗与乙型肝炎病毒（HBV）前C区变异（1896位点G→A点变异）及干扰素抗体的关系,方法 分别以PCR及ELISA方法检测86例慢性HBV前C区变异株及干扰素抗体。结果 ALT＞100IU／L组变异株检出率（40.4%)显著高于ALT≤100IU／L组（8.8％）,两组比较差异有显著性（P＜0.005);CHB重度组检出率明显高于慢性携带者及CHB轻度组（P＜0.005);38例CHB接受干扰素治疗,变异株组和野生株组对干扰素近期应答率相似,但变异株组复发率（70.0%）显著高于野生株组（23.1%);干扰素抗体阳性组的近期应答率（38.5%)显著低于阴性组（72.0％）。结论 变异株感染与肝病严重程度有关,HBV前C区变异和干扰素抗体可影响干扰素的抗病毒疗效。     

乙型肝炎病毒基因组剪接变异体结构分析

目的 了解乙型肝炎病毒(HtBV)基因组剪接变异体的基因结构及特点。方法 从慢性乙型肝炎患者血清中扩增并克隆HBV基因组剪接变异体DNA，测序并比较基因结构特点。结果 共获得10种HBH基因组剪接变异体，基因组大小介于765～2039bp之间。导致剪接变异体产生的5′端供体位点和3′端受体位点各6个。HBVH基因组剪接变异体在C、前-Sl、前-S2及S编码区存在不同程度的缺失，但均保留与致病密切相关的X基因以及病毒复制、包装所必须的DNA序列。结论 HBV基因组剪接变异体在慢性乙型肝炎患者血清中普遍存在。     

乙型肝炎患者乙型肝炎病毒前C区变异 及干扰素抗体对干扰素治疗的影响

目的　探讨干扰素治疗与乙型肝炎病毒(HBV)前C区变异(1896位点G→A点变异)及干扰素抗体的关系。方法　分别以PCR及ELISA方法检测86例慢性HBV感染患者血清中HBV前C区变异株及干扰素抗体。结果　ALT>100IU/L组变异株检出率(40.4%)显著高于ALT≤100IU/L组(8.8%),两组比较差异有显著性(P<0.005);CHB重度组检出率明显高于慢性携带者及CHB轻度组(P<0.005);38例CHB接受干扰素治疗,变异株组和野生株组对干扰素近期应答率相似,但变异株组复发率(70.0%)显著高于野生株组(23.1%);干扰素抗体阳性组的近期应答率(38.5%)显著低于阴性组(72.0%)。结论　变异株感染与肝病严重程度有关,HBV前C区变异和干扰素抗体可影响干扰素的抗病毒疗效。     

不同亚型干扰素抗体对乙型肝炎病毒疗效的影响

本文对 78例接受系统干扰素 (IFN)治疗的患者进行抗体检测 ,并观察其抗病毒的影响。资料与方法一、研究对象78例均为 2 0 0 0～ 2 0 0 2年我科住院患者 ,诊断符合 2 0 0 0年病毒性肝炎防治方案的标准。其中男性 60例 ,女性 18例 ;年龄 17～ 48岁 ;IFN治疗包括IFNα 2a 2 2例 ,IFNα 2b 2 0例 ,IFNα 1b 3 6例。治疗剂量均为 5mn/次 ,肌注连续 14d后改为隔日 1次 ,疗程 6个月 ,随访 3个月。二、观察内容患者分别于治疗前 ,治疗期间每 3个月查HBVDNA定量 ,HBsAg ,抗 HBs ,HBeAg ,抗 HBe。每 1个月查抗 IFN。三、观察方法根据…     

乙型肝炎病毒基因型对干扰素α2b应答的影响

在HBV基因型特异引物下聚合酶链反应(PCR)扩增并检测1020例慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA。其中136例接受干扰素α2b治疗,疗程6个月;观察患者乙型肝炎病毒血清标志物、HBVDNA、丙氨酸转氨酶(ALT)。1020例乙型肝炎患者中966例有基因分型结果;136例接受干扰素α2b治疗综合疗效(HBeAg阴转、HB-VDNA阴转、ALT复常)B型患者为40.9%(18/44),优于C型25.8%(16/62)及B/C混合型16.7%(5/30)(P>0.05)。乙型肝炎病毒不同基因型可以对干扰素α2b应答产生影响。     

兰州地区慢性乙型肝炎病毒基因与干扰素治疗的关系

目的观察兰州地区慢性乙型肝炎病毒基因型与干扰素治疗的关系.方法用套式PCR方法扩增69例经干扰素治疗的慢性乙型肝炎病人的S基因,利用限制性内切酶Sty Ⅰ和Bsr Ⅰ平行酶切鉴别乙型肝炎病毒基因型,并追踪其治疗效果.结果B型19例(27.5%),C型35例(50.7%),D型12例(17.3%).对于干扰素治疗的应答率,B型与C、D型有显著性差异(P＜0.05),C型与D型无显著性差异(P＞0.05).结论B型病人对干扰素治疗有较好的应答,HBV基因型可能是预测干扰素治疗的因素之一.     

脂质体干扰素的体外抗乙型肝炎病毒效应

本文采用２．２．１５细胞进行脂质体干扰素与干扰素的体外抗乙型肝炎病毒实验，用ＥＬＩＳＡ法测ＨＢｅＡｇ，用反向血凝法及ＥＬＩＳＡ法测ＨＢｓＡｇ，用斑 交法测ＨＢＶ ＤＮＡ，结果证实，脂质体ＩＦＮ体外对ＨＢｅＡｇ的抑制率较ＩＦＮ高，能较好地抑制ＨＢＶ ＤＮＡ，但与ＩＦＮ一样，对ＨＢｓＡｇ无抑制作用。     

乙型肝炎病毒变异与干扰素治疗的关系

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因组变异的生物学意义较多,如逃避宿主的兔疫监视,使变异的病毒更具生存优势,改变对抗病毒药物的敏感性及改变病毒的致病特性等。本文首先介绍与干扰素（ＩＦＮ）治疗反应性有关的前两个问题,然后再探讨ＨＢＶ变异与ＩＦＮ治疗之间的相互关系。一、ＨＢＶ变异的生物学意义（一）免疫逃避对ＨＢＶ感染的孕妇所生的新生儿应用乙型肝炎疫苗［１］和对肝移植患者应用高效价乙型病毒性肝炎免疫球蛋白（ＨＢＩｇ）［２］进行主、被动免疫后,在部分受试者可以产生相应的累及“ａ”决定簇主要结构域的氨基酸替换,而未…     

乙型肝炎病毒耐药变异的研究近况

变异是生物适应环境谋求生存的重要方式。乙型肝炎病毒（HBV）是嗜肝DNA病毒的原型。在慢性感染过程中,为适应生存环境,HBV发生基因变异是较为常见的现象。     

乙型肝炎病毒多聚酶变异与拉米夫定治疗反应

目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）多聚酶酪氨酸－蛋氨酸－天氧氨酸－天冬氨酸（YMDD）基序变异对拉米夫定抗病毒疗效的影响。方法 对19例拉米夫定治疗（100mg/d）48周时血清病毒核酸阳性的慢性乙型肝炎患者,采用聚合酶链反应（ PCR）产物直接测序技术,检测其血清中HBV多取和酶（YMDD）变异情况,并观察其血清HBV DNA和丙氨酸转氨酶（ALT）水平。结果 在检出YMDD变异株的10 例患者（4例为YV^550DD型,均伴L^526→M突变,6例为YI^550DD型）,至52周为止,共5例出现HBV DNA突发（分枝DNA信号扩增法）,其中2例伴ALT再高。追踪其治疗前血清均未发生上述变异。而在未检出YMDD变异的9例患者中,1例出现DNA突发后又阴转,而另1例治疗过程中HBV DNA未阴转、ALT始终波动于正常值上下的患者,发现多聚酶其他部位的变异^473→R,D^477→N,D^480→N,L^491→M)治疗前后相同。结论 乙型肝炎病毒多聚酶（ YMDD）变异与药物诱导相关,发生变异者较无变异者疗效降低;在拉米夫定治疗过程中,该变异的检测将有助于其疗效监测。     

拉米夫定治疗前后乙型肝炎病毒P区基因的动态变化

目的研究拉米夫定治疗前后慢性乙型肝炎患者体内乙型肝炎病毒P基因区的变异情况。方法从5例慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗前和治疗12个月的血清标本中，扩增目的片段，阳性结果双酶切后克隆至JM105感受态细胞。每份标本随机挑取20个阳性克隆，以错配聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析法检测YMDD基因序列，出现变异者进行双向测序。结果5例慢性乙型肝炎患者在拉米夫定治疗12个月后，其中2例HBVDNA为阴性，2例HBVDNA转阴后又转阳，测序结果提示出现M5521变异；1例HBVDNA始终阳性，和治疗前一样存在D553G的变异。结论D553G变异可能是慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗无效的原因之一，拉米夫定治疗后出现的乙型肝炎病毒基因组P区YMDD变异是抗病毒药物诱导的结果。     

表达乙型肝炎核心抗原、干扰素γ重组质粒免疫小鼠诱导的免疫应答

本研究通过HBV核心基因DNA重组质粒联合干扰素(IFN)γ基因表达质粒同时免疫动物,了解经联合细胞因子DNA免疫后,免疫小鼠T细胞增殖、自然杀伤(NK)细胞杀伤活性及细胞因子释放等免疫效应.探讨联合IFN γ基因表达质粒用于DNA免疫的应用价值.     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎中变异病毒株的动态变化

目的:建立定量检测及监测乙肝病毒DNA的rtM204I/V(YMDD)及rtL180M变异的方法.方法:以克隆、测序鉴定及构建乙肝病毒DNA YMDD及变异(YIDD和YVDD)质粒作为标准,4例接受拉米夫定治疗(100 mg/d,疗程48 wk以上)的慢性乙型肝炎患者血清标本为对象,用焦磷酸测序的方法检测变异位点核苷酸的频率,并计算变异株的含量比例,通过检测不同变异株类型的标准质粒,确定测序峰图的背景信号.结果:通过检测标准质粒后,确定背景信号为5%,变异位点调整后的核苷酸频率转化为变异病毒株的比例后,4例患者治疗前均检测出变异的病毒株(4.5%-33%),并且随治疗时间延长呈增多的趋势.病毒载量及ALT分析提示基因型耐药发生后,将发生病毒学反跳及临床耐药.结论:焦磷酸测序可以定量检测及动态监测变异病毒株的含量.拉米夫定耐药突变株在拉米夫定治疗前已存在,并随治疗时间的增加而增长,出现病毒学反弹及临床耐药.     

In vitro resistance to interferon of hepatitis B virus with precore mutation

AIM: Chronic hepatitis B virus (HBV) infection is predominantly treated with interferon alpha (IFN-α), which results in an efficient reduction of the viral load only in 20-40% of treated patients. Mutations at HBV precore prevail in different clinical status of HBV infection. The roles of precore mutation in the progression of chronic hepatitis and interferon sensitivity are still unknown. The aim of this study was to explore if there was any relationship between HBV precore mutation and sensitivity to interferon in vitro. METHODS: HBV replication-competent recombinant constructs with different patterns of precore mutations were developed. Then the recombinants were transiently transfected into hepatoma cell line (Huh7) by calcium phosphate transfection method. With or without IFN, viral products in culture medium were collected and quantified 3 d after transfection. RESULTS: We obtained 4 recombinant constructs by orientation-cloning 1.2-fold-overlength HBV genome into pUC18 vector via the EcoRI and Hind lll and PCR mediated site-directed mutagenesis method. All the recombinants contained mutations within precore region. Huh7 cells transfected with recombinants secreted HBsAg and HBV particles into the cell culture medium, indicating that all the recombinants were replication-competent. By comparing the amount of HBV DNA in the medium, we found that HBV DNA in medium reflecting HBV replication efficiency was different in different recombinants. Recombinants containing precore mutation had fewer HBV DNAs in culture medium than wild type. This result: showed that recombinants containing precore mutation had lower replication efficiency than wild type. HBV DNA was decreased in pUC18-HBV1.2-WT recombinants after IFN was added while others with precore mutations were not, indicating that HBV harboring precore mutation was less sensitive to IFN in cell culture system. CONCLUSION: These data indicate that HBV harboring precore mutation may be resistant to IFN in vitro.     

乙型肝炎病毒基因型与干扰素α1b疗效关系的研究

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)基因型与干扰素α1b治疗慢性乙型肝炎疗效的关系。方法　采用PCR、核酸杂交和酶联显色技术对慢性乙型肝炎患者进行HBV基因分型 ,随机观察 10 5例 (B型 5 3例和C型 5 2例 )慢性乙型肝炎患者干扰素α1b治疗 6个月和随访半年后肝功能和病毒学指标的变化。结果　干扰素α1b治疗 6个月和随访半年后 ,B基因型患者的HBeAg阴转率、HBVDNA阴转率和HBeAg/抗 HBe的血清转换率均显著高于C基因型 (P <0 . 0 1) ,B基因型患者的有效应答率为 5 2 . 83 %,显著高于C基因型的 2 5 . 0 0 %(P <0 . 0 1)。B基因型的持续应答率高于C型 ,复发率低于C型 ,但两组差异无显著性 (P >0 . 0 5 )。结论　B基因型对干扰素α1b的抗病毒疗效显著高于C型 ,HBV基因型是影响干扰素α1b疗效的重要因素之一。     

丙型肝炎病毒负荷和基因型与干扰素治疗应答关系的研究

目的　研究丙型肝炎 (简称丙肝 )病毒基因分型和病毒负荷与干扰素抗病毒治疗的应答关系。方法　用特异性引物PCR的改良法检测基因型 ,用荧光PCR方法检测病毒负荷 ,接受干扰素治疗的慢性丙肝患者根据不同的基因型及病毒负荷进行应答分组比较。结果　治疗前HCV -RNA负荷小于 10 9eq·L-1患者经干扰素治疗后表现为持续应答状态占总人数的 4 2 9% ,HCV -RNA负荷大于 10 9eq·L-1患者经干扰素治疗后呈部分应答(2 8 6 % )或无应答状态 (2 8 6 % )。统计学上差异非常显著 (P <0 0 0 1)。 2a型和 1b +2a型 (共 11例 )疗效明显优于 1b型 (2 2例 ) ,差异非常显著 (P <0 0 0 1)。结论　对HCV -RNA负荷小于 10 9eq·L-1及 2a +1b、2a型患者干扰素治疗效果较好。HCV病毒负荷及基因分型可能影响对干扰素治疗的应答。     

Hepatitis B genotypes and the response to interferon therapy

BACKGROUND/AIMS: Possible pathogenic differences among hepatitis B virus (HBV) genotypes have been observed; however, the response to interferon therapy among HBV genotypes remains unknown. We therefore analyzed the efficacy of interferon alfa in the treatment of chronic hepatitis B patients with different HBV genotypes. METHODS: Fifty-eight genotype B or C infected chronic hepatitis B patients who had been treated with interferon alfa-2b were retrospectively studied. The response to interferon was defined as normalization of serum aminotransferase level, loss of hepatitis B e antigen and HBV DNA 48 weeks post-treatment. RESULTS: Baseline data of both groups of patients were comparable; however, genotype C patients had a higher serum aminotransferase level and a higher frequency of core promoter mutation. The response rate was 41% and 15% in genotype B and C patients, respectively (p=0.045). In those with higher serum aminotransferase levels, the response rate was 50% and 17%, respectively (p=0.025). Additionally, younger age and genotype B infection may predict a better response to interferon alfa. CONCLUSIONS: HBV genotype C, compared to genotype B, is associated with a higher frequency of core promoter mutation, and a lower response rate to interferon alfa therapy.     

慢乙肝患者基因变异位点检测及阿德福韦酯疗效观察

目的探讨乙型肝炎病毒基因突变的类型及位点,观察阿德福韦酯的临床疗效。方法 43例慢性乙型肝炎位点变异患者服用阿德福韦酯10mg/d,48周,观察治疗前后临床指标的变化。结果变异位点为rtL180M/M204V、rtM204I、rtL180M/M204I28例,单独与联合变异并存;G1896A变异7例,V214A、V173L变异4例,G1896A、L180M、M204I、M204V联合变异4例。阿德福韦酯对HBV变异株有明显的抑制作用,HBVDNA由治疗前与治疗后24周、48周HBVDNA、ALT复常率显著改善（P值均〈0.01）。药物安全性良好。结论阿德福韦酯对位点变异慢乙肝患者有一定疗效。     

丙型肝炎病毒NS5b区酶切基因分型及其在干扰素治疗中的应用

探讨丙型肝炎病毒 (HCV)感染的基因型及其与干扰素应答效果的关系。应用逆转录 -聚合酶链反应(RT -PCR)技术对 2 6 9例肝炎患者血清进行HCVNS5b区基因片段扩增 ,并对 5 6例阳性PCR产物进行酶切分型 ,同时观察干扰素α - 2b对其中 48例慢性丙型肝炎的疗效。HCV单纯 1b型感染、1b基因变异及 2a型感染对干扰素的应答率分别为 70 % (14/ 2 0 )、9 5 % (2 / 2 1)、71 4% (5 / 7) ;其中完全应答分别为 45 % (9/ 2 0 )、4 8% (1/ 2 1)、5 7 1% (4/ 7) ;部分应答分别为 2 5 % (5 / 2 0 )、4 8% (1/ 2 1)、14 3 % (1/ 7)。 1b基因变异组同单纯 1b型及 2a型感染组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ,而单纯 1b型感染组与 2a型感染组比较无明显差异 (P >0 0 5 )。HCV单纯 1b型感染或 2a型感染者对干扰素敏感 ,而 1b基因变异者干扰素治疗效果极差 ,可作为预测干扰素疗效的一项新的重要指标。     

Modification of the immune response against hepatitis B virus by the human immunodeficiency virus

Summary Hepatitis B virus and the human immunodeficiency virus are similarly transmitted. Individuals with preexisting HIV infection have a higher chance to become HBsAg carriers than do anti-HIV negative persons. Cytotoxic T cells with specificity for HBcAg, that are under the control of HBcAg-specific helper T cells, are responsible for liver injury. There is good evidence that HIV infection lowers inflammatory activity, is associated with milder liver histology, high levels of viral replication and low seroconversion rates. In addition interferon alpha therapy is less effective in anti-HIV positive subjects. The immune response against HBsAg is helper T-cell dependent and vaccination against hepatitis B is of low effectiveness. In addition, vaccination against hepatitis B may activate the HIV disease and is, therefore, presently not to be recommended.