胃癌单克隆抗体的制备及应用

抗原来自一男性胃癌病人,癌组织经超声破碎,多次离心,制得胃癌粗抗原,免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,取脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合、经HAT培养液选择培养,ELISA检测,4次克隆化培养,得到一株杂交瘤细胞系,再经扩大培养和小鼠腹腔接种,生产出大量单克隆抗体,定名为G8511。     

体外免疫研制甲型肝炎病毒单克隆抗体

在细菌学、病毒学、免疫学及其它领域应用细胞融合法研制单克隆抗体取得许多成果。为建立分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系需要以抗原免疫BALB/c小鼠,而后用免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而获得。本文报告在体外免疫研制单克隆抗体。 作者们认为体外免疫的有用性,以甲型肝炎病毒(HAV)作为抗原,探讨了HAV单克隆抗体的制作法。取小测细胞在体外进行HAV免疫,与小鼠骨髓瘤细胞融合,243个孔有173     

用液氮冻存的脾细胞进行细胞融合

<正> 制备单克隆抗体的细胞杂交技术是建立在骨髓瘤细胞与脾细胞融合的基础上。脾细胞通常来自免疫的或感染病原体的BALB/c小鼠。到达免疫高峰或感染高峰的小鼠需及时应用,否则引起动物死亡或需重新加强免疫,造成研究工作中人力、物力和时间上极大的浪费。如果脾细胞能象骨髓瘤细胞或分泌     

UL-38一种与人类B淋巴细胞系统反应的单克隆抗体

将高度免疫性小鼠的脾细胞与PAI-O小鼠骨髓瘤细胞融合,制成抗CALLA阳性白血症母细胞杂交瘤,结果获得一种有细胞毒作用的ZgM单克隆抗体,即UL-38。通过间接免疫荧     

识别人体结肠癌的单克隆抗体

应用人体结肠癌细胞系CL-187与佐剂相混合,免疫BALB/c小鼠。以聚乙二醇(PEG1000)为促融剂,使被免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。细胞融合之后,经HAT选择性培养液培养,去除自身融合和未融合的细胞。用Vectein ABC试剂和间接免疫荧光法检测杂交瘤细胞上清液中的抗体,筛选出呈阳性反应的杂交瘤细胞。再经甲基纤维素培养     

抗AKP单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

本文采用SP2/0骨髓瘤细胞与碱性磷酸酶(AKP)(美国Sigma公司,批号21F—0270)免疫的小鼠的脾细胞进行细胞融合,建立了分泌抗AKP的单克隆细胞系。 一、小鼠免疫:AKP0.1mg加福氏佐刺0.1ml,腹腔注射0.2ml/只;四周后同剂量腹腔追加一次;再过2周后单纯抗原0.1mg,0.1ml/只,尾静脉注射,三天后取脾细胞融合。     

抗人肝癌单克隆抗体HL2的制备及鉴定

本文以贯序免疫法依次用人肝癌细胞株QGY-7703、BEL-7402、SMMC-7721免疫BACB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合,经检测细胞抗原的EL-ISA方法筛选,连续克隆4次后,获得了1株能稳定分泌肝癌单抗的杂交瘤株HL_2。其     

腹水内高产量单克隆抗体的产生

单克隆抗体作为研究工具和免疫试剂已被广泛应用。致敏脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合而产生的小鼠杂交瘤细胞系,在组织相容性鼠系以腹水瘤形式快速生长,同时分泌特异性单克隆抗体,一只带瘤小鼠能产生10-20mg单克隆抗体。本文报告将杂交瘤细胞注射于BALB/C鼠与SW/HPD鼠杂交产     

胃癌单克隆抗体的研制及其对胃癌活检组织印片细胞的免疫细胞化学反应性

用体外培养的人胃癌细胞脾内免疫BALB/c小鼠,将致敏脾细胞和小鼠SP2/0细胞融合,获得小鼠杂交瘤细胞。用间接免疫荧光法初筛,将初筛克隆扩增后,用正常组织及新鲜肿瘤组织冰冻切片做免疫组化染色,测定其抗体的反应性。然后用有限稀释法克隆3～5     

血红蛋白F的一种单克隆抗体

著者用血红蛋白F的免疫Balb/c小鼠脾细胞和SP-2系小鼠骨髓瘤细胞做细胞融合试验,有65%的杂交瘤细胞生长,10%杂交瘤细胞显示出不同程度的抗HbF抗体活性.对获得的抗体同HbA做交叉反应试验.通过极限稀释法,选出对HbF有强反应但对     

一个CD38单抗的研制

采用B细胞杂交瘤技术,将T细胞系CEM免疫的,BALA/c小鼠脾细胞与小鼠NS1骨髓瘤细胞融合,以间接免疫荧光法筛选,获得一株CD38单抗,命名为HI157。 经琼脂双向免疫扩散方法测定,HI157单抗的Ig亚类为IgG2a。组织分布结果表明,HI157主要分布于胎儿胸腺细胞、脐血单个核细胞和激活的T、B细胞表面。与胎儿     

抗淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒单克隆抗体的制备及其特性的研究

用Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞与淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)免疫小鼠脾细胞融合,HAT培基选择培养,经3次克隆化共筛选出6株分泌LCMV单克隆抗体的杂交瘤胞细系(4A6,4H6,5A4,6F12,     

抗口腔鳞癌单克隆抗体ASC_5的制备与特异性分析

用舌鳞癌Tca8113细胞免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞P_3U_1进行融合,经筛选和克隆化后,获得分泌抗口腔鳞癌单克隆抗体的杂交瘤ASC_5。经ELISA检测,ASC_8单抗与Tea 8113细胞有反应,与Hela细胞有交叉反应,与肺癌、肝癌、胃癌、K_(562)细     

在亲和层析法中应用杂交瘤细胞分泌的单克隆抗HBs/a纯化HBsAg

<正> 1975年Kohler和Milstein应用免疫小鼠的脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合,通过杂交瘤细胞系分泌均一的单克隆抗体。 1979年Parham报告应用单克隆抗体提取HLA抗原,认为此方法是研究HLA的最佳手段。 1981年Stenman应用单克隆抗体提取甲胎蛋白,指出较习惯用的动物抗体所获     

抗血吸虫、肺吸虫、华支睾吸虫共同抗原决定簇的单克隆抗体

<正> 用日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)免疫BALB/c 小鼠,取其脾细胞与 SP2/0骨髓瘤细胞按 Kennett 方法作细胞融合,用有限稀释法克隆化2～3次后,建立一株分泌特异性抗体的杂交瘤细胞(A6-B6),其培养上清经浓缩后作免疫球蛋白亚类签定为 IgM,杂交瘤诱生的小鼠腹水经 SEA 免疫     

天津地区抗霍乱弧菌单克隆抗体(McAb)细胞系的建立及其应用的研究

应用天津市防病中心保存的EL-Tor霍乱弧菌小川型和稻叶型菌体抗原,混合免疫BALB/c小鼠,小鼠免疫脾细胞与骨髓瘤细胞Sp 2/0-Ag 14融合,采用ELISA法筛选抗霍乱弧菌McAb阳性孔,细胞融合率为328/384(85.2％);经过三次克隆化后筛选出9株分泌抗霍乱弧菌菌体抗原的McAb杂交瘤细胞系。取其中两株细胞进行分析研究;培养上清抗体效价在     

Ⅰ型人类乳头瘤病毒的主要外壳多肽特异性单克抗体

经4M尿素裂解的人类乳头瘤病毒(HPV-1),用Plantar Warf纯化的提取物,免疫BALB/c小鼠。末次注射后4天,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,在约400个杂交瘤细胞中经ELISA检测(用纯化HPV-1)出21株阳性,用Plantar Warf切片作间接免疫荧光检测也证     

抗血管紧张素Ⅰ杂交瘤细胞株制备方法的建立

目的 制备抗血管紧张素Ⅰ(angiotensin I,AⅠ)的杂交瘤细胞株,比较不同连接载体产出杂交瘤细胞的效果.方法 通过对载体分别为牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)的AⅠ-BSA和AⅠ-OVA免疫原进行小鼠免疫,将骨髓瘤细胞与免疫合格的小鼠进行脾细胞融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株,经过克隆、扩大培养、腹水诱...     

分泌抗人甲胎蛋白并对肝癌细胞株有特异性亲和力的单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和鉴定

采用杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0与人甲胎蛋白免疫的BALB/c小鼠脾细胞融合,,经3～4次有限稀释法克隆,ELISA法筛选,获得分泌抗人甲胎蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株 其上清和腹水效价分别为10~(-2)和10~(-6～-9)。再经间接荧光法、放射免疫法反复     

一个抗人类补体C_3的单克隆抗体:C_3在体外人细胞的生成

作者将提纯制备的人血清C_3加入弗氏完全佐剂给BALB/c小鼠皮下注射,初次免疫后21天,用C_3从尾静脉加强免疫,4天后制备脾细胞悬液与骨髓瘤细胞P_3-X_(63)-Agδ(x63)进行细胞融合,将融合细胞置于含有20％FCS的RPMI1640培基的24孔培养