山沉香中3个新木脂素的提取与结构解析

目的 研究羽叶丁香Syringa pinnatifolia去皮的干燥根和枝干的化学成分。方法 采用硅胶和Sephadex LH-20柱色谱法及HPLC进行分离,运用谱学分析鉴定所得化合物的结构。结果 从山沉香乙醇提取物分离得到了3个木脂素类化合物,分别鉴定为3, 3′, 4-三甲氧基-4′, 8, 9, 9′-四羟基简单木脂素（1）、3, 3′, 4, 9-四甲氧基-4′, 8-二羟基-9′-乙氧基简单木脂素（2）和3, 3′, 4, 9-四甲氧基-4′, 8, 9′-三羟基简单木脂素（3）。结论 化合物1～3为未见文献报道的新化合物,分别命名为山沉香木脂素C、山沉香木脂素D和山沉香木脂素E。     

尖齿臭茉莉的化学成分及其自由基清除活性研究

目的 研究尖齿臭茉莉Clerodendrum lindleyi根和茎的化学成分及其体外自由基清除活性。方法 采用多种柱色谱技术进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据进行结构鉴定;并采用DPPH法对分得的化合物进行体外自由基清除活性测试。结果 从尖齿臭茉莉中分离得到13个化合物,分别鉴定为白桦脂酸（1）、单乙酰马蒂罗苷（2）、4″-O-乙酰马蒂罗苷（3）、赪桐苷A（4）、3″, 4″-O-乙酰马蒂罗苷（5）、洋丁香苷（6）、木栓酮（7）、粘霉烯醇（8）、蒲公英萜醇（9）、钩大青酮（10）、海通酮E（11）、(24S)-乙基胆甾-5, 22, 25-三烯-3β-醇（12）、hedyotol C 4″-O-β-D-glucopyranoside（13）。化合物1～6从根中分离得到,7～13从茎中分离得到。化合物1～12显示了不同程度的DPPH清除活性。结论 化合物1～13均为首次从该植物中分离得到,化合物13为首次从该属植物中分离得到。分离得到的苯乙醇苷类、萜类及甾醇类成分均具有一定的DPPH清除作用,其中苯乙醇苷类成分4″-O-乙酰马蒂罗苷、单乙酰马蒂罗苷和洋丁香苷活性最为显著。     

藿香正气水化学成分研究

目的 对藿香正气水的化学成分进行研究,为其药效研究提供物质基础。方法 运用硅胶柱色谱、制备薄层色谱、重结晶等方法进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据进行结构鉴定。结果 分离得到15个化合物,分别鉴定为甘草苷（1）、甘草素（2）、异甘草素（3）、芒柄花素（4）、水合氧化前胡素（5）、白当归素（6）、橙皮苷（7）、5, 7, 8, 3′, 4′-五甲氧基黄酮（8）、5, 6, 7, 3′, 4′-五甲氧基黄酮（9）、5, 7, 8, 4′-四甲氧基黄酮（10）、川陈皮素（11）、3, 5, 6, 7, 8, 3′, 4′-七甲氧基黄酮（12）、地中海红桔素（13）、和厚朴酚（14）、厚朴酚（15）。结论 以上化合物均为首次从藿香正气水复方中得到,其中化合物1～4可能来源于甘草;化合物5、6可能来源于白芷;化合物7～13可能来源于陈皮;化合物14、15可能来源于厚朴。     

八角莲的化学成分研究

目的 研究八角莲Dysosma versipellis根茎的化学成分。方法 运用硅胶、凝胶及RP-HPLC等多种色谱技术对八角莲根茎的化学成分进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果 从八角莲根茎95%乙醇提取物的醋酸乙酯和正丁醇萃取部位分离并鉴定了14个化合物,其中木脂素类化合物10个,分别为4′,5′-二去甲基鬼臼毒素（4′,5′- didemethylpodophyllotoxin,1）、鬼臼毒素（podophyllotoxin,2）、4′-去甲基鬼臼毒素（4′-demethylpodophyllotoxin,3）、山荷叶素（diphyllin,4）、鬼臼毒酮（podophyllotoxone,5）、苦鬼臼毒素葡萄糖苷（picropodophyllotoxin-4-O-β-D-glucoside,6）、4′-去甲基鬼臼毒素葡萄糖苷（4′-demethylpodophyllotoxin-4-O-β-D-glucoside,7）、山荷叶素葡萄糖苷（diphyllin-4-O-β-D- glucoside,8）、鬼臼毒素葡萄糖苷（podophyllotoxin-4-O-β-D-glucoside,9）、八角莲醇（dysosmarol,10）;黄酮类化合物3个,分别为山柰酚（kaempferol,11）、槲皮素（quercetin,12）、山柰黄素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（kaempferol-3-O-β-D-glucoside,13）;甾醇类化合物1个,为β-谷甾醇（β-sitosterol,14）。结论 化合物1为新天然产物,化合物7和8为首次从该属植物中分离得到。     

水栀子化学成分的研究

目的 对水栀子Gardenia jasminoides var. radicans的化学成分进行研究。方法 采用色谱技术进行分离,通过NMR等波谱方法鉴定化合物结构。结果 分离并鉴定了12个化合物,其中3个为环烯醚萜苷类化合物,分别为京尼平苷（1）、去乙酰车叶草苷酸甲酯（2）、6′-O-sinapoylgeniposide（3）;4个为二萜类化合物,分别为西红花苷-1（4）、西红花酸（5）、西红花苷-2（6）、西红花苷-3（7）;4个为黄酮类化合物,分别为芦丁（8）、5, 7, 3′, 5′-四羟基-6, 4′-二甲氧基黄酮（9）、5-羟基-7, 3′, 4′, 5′-四甲氧基黄酮（10）、麦黄酮（11）;1个三萜类化合物为熊果酸（12）。结论 化合物2、3、5～12为首次从该植物中分离得到;化合物9和11为首次从该属植物中分离得到。     

柳叶白前中非C21甾体类化学成分

采用硅胶、凝胶及反相柱色谱等技术,对鹅绒藤属植物柳叶白前Cynanchum stauntonii干燥根茎80%乙醇提取物乙酸乙酯部位的非C₂₁甾体类成分进行分离,得到12个化合物,利用波谱学方法和理化性质鉴定它们的结构为:丁香脂素(1)、(-)-(7R,7′R,7″R,8S,8′S,8″S)-4′,4″-二羟基-3,3′,3″,5-甲氧基-7,9′∶7′,9-环氧-4,8″-O-8,8′-倍半木质素-7″,9″-二醇(2)、8,8′-二羟基松脂素(3)、对羟基苯乙酮(4)、白首乌二苯酮(5)、2,4-二羟基苯乙酮(6)、苯甲酸(7)、对羟基苯酚(8)、6-O-［E］-芥子酰-α-D-吡喃葡萄糖苷(9a)、6-O-［E］-芥子酰-β-D-吡喃葡萄糖苷(9b)、1-O-甲基-α-D-吡喃加拿大麻糖甲苷(10)、β-胡萝卜苷(11)、β-谷甾醇(12)。其中化合物1~ 3,5,7~ 11为首次从该植物中分离得到。     

刺五加的化学成分研究

目的 对刺五加Acanthopanax senticosus的化学成分进行研究。方法 刺五加药材用75%乙醇提取，依次用石油醚、醋酸乙酯萃取，对醋酸乙酯部分采用硅胶柱色谱、反相制备色谱等技术进行分离，根据波谱学数据（MS、¹H-NMR、¹³C-NMR）进行化合物的结构鉴定。结果 从醋酸乙酯部分分离得到19个化合物，分别鉴定为槲皮素（1）、槲皮苷（2）、山柰酚（3）、金丝桃苷（4）、芦丁（5）、金合欢素（6）、大豆苷（7）、3′-甲氧基大豆苷（8）、葛根素（9）、3′-甲氧基葛根素（10）、4′-甲氧基葛根素（11）、丁香醛（12）、丁香酸（13）、紫丁香酸葡萄糖苷（14）、异嗪皮啶（15）、2, 3-二 (3′, 4′-二甲氧基苄基)-2-丁烯-4-内酯（16）、l-芝麻酯素（17）、methylpluviatolide（18）、4′-羟基-2′-甲氧基肉桂醛（19）。结论 化合物6～11、14、16、18、19为首次从该属植物中分离得到。     

晶帽石斛化学成分研究

目的 进一步对兰科石斛属植物晶帽石斛Dendrobium crystallinum的化学成分进行研究。方法 应用硅胶、Sephadex LH-20、ODS、MCI柱色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果 从晶帽石斛醋酸乙酯和正丁醇部分共分离并鉴定了10个化合物,分别为4′-羟基-3,3′,5-三甲氧基联苄（1）、5′-羟基-3,3′,4-三甲氧基联苄（2）、3,3′-二羟基-5-甲氧基联苄（即山药素Ⅲ）（3）、3,4′-二羟基-5-甲氧基联苄（4）、山柰酚（5）、6″-O-(3′′′-羟基-3′′′-甲基戊二酰) 牡荆苷（6）、乌苏酸（7）、麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇（8）、尿苷（9）、丁香脂素（10）。结论 所有化合物均为首次从该植物中分离得到,其中化合物6、9为首次从兰科植物中分离得到,化合物2、8为首次从石斛属植物中分离得到。     

绣球防风化学成分的研究

目的 对绣球防风Leucas ciliata的化学成分进行研究。方法 利用正相硅胶、RP-18柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20等方法进行分离纯化,根据波谱数据鉴定化合物的结构。结果 从绣球防风乙醇提取物中分离得到12个化合物,通过光谱数据分析,分别鉴定为苜蓿素（1）、crisilineol（2）、胡萝卜苷（3）、stigmast-5-ene-11-ol-3-O-β-glucoside（4）、5, 7-dimethoxy-2-methyl-4-chromanone（5）、3′, 5′, 5, 7-tetramethoxy-4′-O-β-glucoside flavone（6）、5-hydroxy-3′, 4′-dimethoxy-7-O- β-glucoside flavone（7）、acteoside（8）、3, 4-dihydroxy-β-phenylethoxy-O-α-L-arabinopyranosyl-(1′′′′→2″)-α-L-rhamnopyranosyl- (1′′′→3″)-4″-O-caffeoyl-β-D-glucopyranoside（9）、3-hydroxy-4-methoxy-β-phenylethoxy-O-α-L-arabino- pyranosyl-(1′′′′→6″)-α-L- rhamnopyranosyl-(1′″→3″)-4″-O-caffeoyl-β-D-glucopyranoside（10）、leucasin A（11A）和leucasin B（11B）。结论 化合物11A和11B为一对差向异构体,并且为新化合物,其余10个化合物均为首次从该属植物中分离得到。     

大花紫玉盘的化学成分

通过正相硅胶、反相硅胶、大孔吸附树脂、Sephadex LH-20和高效液相色谱等多种现代色谱技术对番荔枝科紫玉盘属植物大花紫玉盘(Uvaria grandiflora)干燥根的化学成分进行系统地分离纯化,得到12个化合物,用现代波谱技术确定化合物的结构分别为:epicatechin-(4β→1′,2→O→2′)-phloroglucinol(1),proanthocyanidin A-1(2),proanthocyanidin A-2(3),表儿茶素(epicatechin)(4),phlorizin(5),圣草酚(eriodictyol)(6),erythro-guaiacylglycerol-8-O-4′-(coniferyl alcohol)ether(7),threo-guaiacylglycerol-8-O-4′-(coniferyl alcohol)ether(8),erythro-guaiacylglycerol-8-O-4′-(sinapyl alcohol)ether(9),threo-syringylglycerol-8-O-4′-(sinapyl alcohol)ether(10),burselignan(11),icariol A₂(12)。化合物1~12均为首次从该植物中分离得到,其中化合物1为新天然化合物。     

转双价抗虫基因 Bt-CpTI 提高四倍体菘蓝对小菜蛾抗性

目的 将外源苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因 CryIA(c) 和豇豆胰蛋白酶抑制剂基因 CpTI 共同转入四倍体菘蓝以获得鳞翅目昆虫小菜蛾抗性。方法 构建了以 CaMV 35S 为启动子,新霉素磷酸转移酶 (Npt-Ⅱ) 为选择标记,带有 CryIA(c) 基因和 CpTI 基因的植物表达载体 pGBI121S4ABC 并转入根癌农杆菌 LBA4404。采用叶盘法遗传转化四倍体菘蓝。转基因再生植株经 PCR 和 Southern 杂交检测,并进行抗小菜蛾实验。结果 T₀ 代转化四倍体菘蓝的双基因阳性转化率达到 16.67%。Southern 杂交检测结果表明外源 CryIA(c) 基因和 CpTI 基因均已经随机整合到转基因菘蓝的基因组中。与野生对照相比,转基因四倍体菘蓝对小菜蛾显示出明显抗性。结论 转双价抗虫基因 Bt-CpTI 是提高四倍体菘蓝对小菜蛾抗性的有效手段。     

KPC-2基因在克雷伯菌属中传播机制研究

目的 研究克雷伯菌属对亚胺培南耐药机制以及KPC-2基因在克雷伯菌属中传播机制。方法 收集四川大学华西医院两个阶段（2009～2010年和2012～2013年）分离的对亚胺培南耐药的克雷伯菌属细菌。琼脂稀释法测定亚胺培南最低抑菌浓度(MIC),CARB ChromID平板和改良Hodges试验检测碳青霉烯耐药表型,PCR检测细菌的KPC-2基因表达。质粒接合试验检测质粒传播性。随机引物扩增多态性DNA（RAPD）方法和肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应（ERIC-PCR）技术分别用于分析质粒和菌株的同源性。结果 第一阶段筛选并确证耐亚胺培南的3株产酸克雷伯菌首先获得碳青酶烯类抗生素耐药性,第二阶段筛选并确证耐亚胺培南的7株肺炎克雷伯菌出现相同的获得性耐药。PCR显示10株细菌均携带KPC-2型基因。质粒接合试验显示产酸克雷伯菌中携带KPC-2基因的质粒可以传递到受体菌,且与KPC-2基因阳性的肺炎克雷伯菌中携带的质粒具有同源性。ERIC-PCR结果显示7株KPC-2基因阳性的肺炎克雷伯菌具有同源性。结论 四川大学华西医院分离的对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌主要耐药机制是产生KPC-2型碳青霉烯酶。产酸克雷伯菌中携带KPC-2基因质粒,该质粒具有传递性且与肺炎克雷伯菌携带质粒相同。肺炎克雷伯菌中耐药株的传播形式为同一克隆传播,而在克雷伯菌属中不同菌种间耐药传播途径为同一质粒的水平传播。     

金钗石斛茎的化学成分研究

目的 对金钗石斛Dendrobium nobile茎的化学成分进行研究。方法 采用正相及反相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱及制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,根据波谱数据进行结构鉴定。结果 分离得到11个化合物,分别鉴定为石斛碱（1）、石斛醚碱（2）、邻苯二甲酸丁酯（3）、松脂素（4）、N-反式桂皮酸酰对羟基苯乙胺（5）、N-反式阿魏酸酰对羟基苯乙胺（穆坪马兜铃酰胺,6）、N-顺式阿魏酸酰对羟基苯乙胺（7）、N-反式香豆酰酪胺（8）、N-顺式香豆酰酪胺（9）、山药素III（10）、二氢松柏醇二氢对羟基桂皮酸酯（11）。结论 化合物3、5～9均为首次从该植物中分离获得,其中化合物9为首次从石斛属植物中分离获得。     

羊耳菊花的化学成分研究

目的 研究羊耳菊花Inula cappa的化学成分。方法 采用系统溶剂提取法结合各种色谱分离技术、理化性质和光谱数据鉴定结构。结果 从羊耳菊花中共分离得到10个化合物,分别鉴定为木栓酮（1）、乙酸羽扇豆醇酯（2）、豆甾醇（3）、ineupatorolide B（4）、cleomiscosin C（5）、木犀草素（6）、3, 4-二羟基苯甲酸（7）、芹菜素（8）、fortuneletin（9）、luteolin 4′-methyl ether（10）。结论 化合物2、4、5、7、9、10为首次从该植物中得到。     

长药隔重楼化学成分研究

目的 研究长药隔重楼Paris polyphylla var. pseudothibetica根茎中的化学成分,为阐明其有效成分及扩大重楼属植物的药用资源提供科学依据。方法 利用正相硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、正反相制备色谱等手段进行分离纯化,并通过¹H-NMR、¹³C-NMR、ESI-MS等波谱技术进行结构鉴定。结果 从长药隔重楼中分离得到了12个化合物,分别鉴定为：薯蓣皂苷元（1）、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷（2）、偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）、偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、β-谷甾醇（6）、豆甾醇（7）、胡萝卜苷（8）、豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（9）、山柰酚（10）、β-蜕皮激素（11）、蔗糖（12）。结论 化合物1～9为首次从该植物中分离得到。     

青枯菌诱导广藿香防御相关酶同工酶分析

目的 研究青枯菌诱导广藿香的致病过程及防御相关酶同工酶的动态变化。方法 利用青枯菌粗毒素诱导广藿香试管苗,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对诱导植株中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）同工酶谱带的变化进行分析。结果 青枯菌诱导1～7 d后的广藿香植株,表现渐进的发病过程,开始时,植株失绿、少数叶片萎垂;逐渐植株茎杆弯曲、整株叶片萎蔫。同工酶电泳分析表明,SOD同工酶在第1、3天时分别出现了新谱带,与对照共有的谱带,强度先增后减;CAT同工酶在第3、5天时分别出现新谱带,第6天时强度达到最大;POD同工酶在第1、4天时分别出现了新谱带,强度先增后减,第7天时所有谱带消失。结论 青枯病的发生呈现渐进的过程。青枯菌诱导1～7 d,广藿香SOD、CAT和POD同工酶谱带在数目和强度上均有所不同,呈动态变化,表明SOD、CAT和POD在广藿香抵抗青枯菌入侵时可能起到较为重要的作用。     

单叶蔓荆种子休眠特性研究

目的 研究单叶蔓荆种子休眠的原因及解除休眠的方法。方法 以单叶蔓荆的果实（蔓荆子）为材料,用石蜡切片法研究单叶蔓荆种子形态解剖学特点,通过种子吸胀和抑制物测试研究其休眠原因,采用浓硫酸和赤霉素（GA₃）处理打破种子休眠。结果 打破单叶蔓荆种子休眠的方法为GA₃处理,解除休眠的最佳方法为浓硫酸处理15 min,1.0 mg/mL GA₃浸种18 h,蛭石培养床30 ℃恒温培养能够达到发芽率78.7%。结论 蔓荆具有坚硬厚实的果皮,机械束缚是休眠的主要原因;果皮中含有萌发抑制物质,GA₃处理可有效解除单叶蔓荆种子的生理休眠。     

嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌协同抑制痢疾杆菌的活性研究

以嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌为研究对象,用琼脂扩散法检测其纯培养和共培养后的发酵液对福氏痢疾杆菌的体外抑菌活性。结果表明,嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌共培养液对福氏痢疾杆菌具有良好的协同抑制作用,其共培养液抑菌作用较嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌纯培养,其抑菌作用分别增强了17.2%和22.4%。同时,嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌存在共生关系,共培养后生物量可达4.27 g/L(干重),较嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌纯培养生物量分别提高6.0%和30.6%,且共生可使产酸增多,从而达到协同抑菌效果。对福氏痢疾杆菌黏附人结肠腺癌Caco-2细胞的研究表明,嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌能协同抑制福氏痢疾杆菌对Caco-2细胞的黏附,Caco-2与混合益生菌、嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌共孵育的组别,其福氏痢疾杆菌的相对黏附率分别降低了84.2%,81.2%和75.8%,相对应的Caco-2细胞的活力分别提高了22.9%,12.5%和11.5%。本研究首次发现两种益生菌嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌具有共生关系,并且在体外能够协同抑制肠道致病菌福氏痢疾杆菌的生长和黏附,对于由福氏痢疾杆菌引起的细菌性痢疾治疗具有临床应用前景。     

斑马鱼sat1.a突变体的鉴定

目的 在我们的前期研究工作中，通过Tol2转座子介导的插入突变，筛选到了一批组织特异性表达绿色荧光蛋白GFP的斑马鱼品系。其中一个品系Tol2：20141221t的GFP在神经系统中表达，但还没有鉴定到Tol2转座子插入到基因组什么位置，造成了哪个基因的突变。本文的主要研究目标就是对这一由Tol2转座子插入诱导的斑马鱼突变品系进行鉴定。方法 使用交错式热不对称PCR（thermal asymmetric interlaced PCR，TAIL-PCR）鉴定Tol2转座子插入的基因组位置；利用原位杂交检测被突变的基因的时空表达是否与该品系GFP表达具有一致性；筛选鉴定纯合体突变体，并进一步分析该基因突变造成的发育缺陷。结果 在该品系中，Tol2转座子插入到了亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶1a（spermidine/spermine N1-acetyltransferase 1a，sat1.a）的第八个内含子区域，致使sat1.a基因转录提前终止。我们筛选到了sat1.a纯合突变体，但是没有检测到明显的发育缺陷。结论 筛选鉴定的Tol2转座子介导的斑马鱼sat1.a突变体没有明显的发育缺陷，但可以作为研究神经系统发育的有力工具。     

杭白菊、当归、丹参提取液抑制黄褐斑形成及机制研究

目的 观察杭白菊、当归、丹参提取液对im黄体酮及紫外（UV）照射导致的黄褐斑小鼠模型的抗氧化与抗黄褐斑形成作用。方法 将小鼠随机分成对照组、模型组、维生素C组、杭白菊组、当归组、丹参组共6组。采用im黄体酮及辅助UV照射方法建立黄褐斑小鼠模型。测定各组肝脏及皮肤组织中的谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、酪氨酸酶（TYR）活性与总抗氧化能力（T-AOC）,以及丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、肝脏脂褐质水平,并测定血液流变学指标,进行皮肤病理学检查。结果 杭白菊、当归、丹参提取液显著增强黄褐斑小鼠肝脏和皮肤中GSH-Px、SOD活性,降低MDA水平,抑制TYR增加,使黑素细胞（MC）生成减少,抑制黑色素合成,从而减轻皮肤色素沉着。结论 杭白菊、当归、丹参提取液有一定的防治黄褐斑的功效,其作用与提高机体抗氧化能力,抑制TYR活性,减少黑色素的合成以及改善机体的血液流变学有关。