内质网应激介导棕榈酸诱导的成骨细胞凋亡

目的建立棕榈酸诱导成骨细胞凋亡的模型,探讨内质网应激在棕榈酸诱导成骨细胞凋亡中的作用。方法选取小鼠成骨细胞MC3T3-E1 14为研究对象,分组方法如下:(1)根据棕榈酸(palmitate,PA)作用浓度分为对照组(0μmol/L PA)、100μmol/L PA组、250μmol/L PA组和500μmol/L PA组,分别孵育24 h;随后选择棕榈酸作用敏感浓度500μmol/L,孵育成骨细胞不同时间(0、6、12、24 h)。(2)应用内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)进一步验证棕榈酸对成骨细胞增生和凋亡的影响。选择4-PBA作用敏感浓度5 mmol/L,根据是否经4-PBA预处理分为对照组(0μmol/L PA,0 mmol/L 4-PBA)、4-PBA组(0μmol/L PA,5 mmol/L 4-PBA)、4-PBA+PA组(500μmol/L PA,5 mmol/L 4-PBA)和PA组(0 mmol/L 4-PBA,500μmol/L PA)干预24 h。培养结束后,采用CCK-8法检测细胞增生活力;Annexin V/PI双染色法流式细胞术检测细胞凋亡率;Realtime quantitative PCR检测各组细胞内质网应激相关基因GRP78、CHOP、caspase-12 m RNA的表达。结果与对照组相比,250和500μmol/L棕榈酸干预成骨细胞24 h可明显降低细胞增生活力(A值:1.015±0.068,0.816±0.108,0.479±0.050,P0.05),细胞凋亡率则分别增高了6.70%±1.40%,15.30%±1.28%(P0.05),CHOP和GRP78 m RNA的表达水平呈剂量依赖性增高(均P0.05),而caspase-12 m RNA的表达水平则有所降低(P0.05);100μmol/L PA组增生活力、凋亡率及各基因表达量差异均无统计学意义(P0.05)。与对照组相比,用500μmol/L棕榈酸干预成骨细胞6、12、24 h后,细胞增生活力呈时间依赖性下降(A值:0.952±0.064,0.788±0.043,0.683±0.044,0.482±0.052,P0.05);凋亡率则分别增高3.63%±1.45%,9.0%±2.31%,15.7%±0.61%(均P0.05);CHOP m RNA表达水平呈时间依赖性增高(P0.05),GRP78 m RNA的表达水平在12 h开始升高,24 h达到峰值(P0.05),caspase-12 m RNA表达水平则在12 h达到峰值,24 h后开始下降(P0.05)。与PA组相比,4-PBA+PA组成骨细胞增生活力升高(A值:0.355±0.029 vs.0.451±0.049,P0.05),凋亡率降低8.6%±2.05%(P0.05),GRP78、CHOP和caspase-12m RNA的变化水平则呈现与单纯棕榈酸干预组相反趋势(均P0.05)。结论棕榈酸可能通过内质网应激途径诱导成骨细胞凋亡,4-PBA可以通过抑制内质网应激在一定程度上减少棕榈酸诱导的成骨细胞凋亡。     

内质网应激与肝细胞凋亡

内质网(endoplasmic reticulum,ER)是一种重要的真核细胞器,由于各种原因引起的内质网中出现错误折叠与未折叠蛋白在腔内聚集以及Ca~(2 )平衡紊乱的状态,称为内质网应激(ER stress,ERS).细胞凋亡(apoptosis),又称为程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD),是受细胞外微环境和细胞内基因调控的一种细胞主动性死亡方式,他是机体用来去除衰老、有害、无用及异型细胞的一种重要机制,是确保机体正常发育、维持机体正常生理过程所必须的.肝细胞凋亡是造成肝脏损伤和肝脏疾病最基本的中心环节.既往研究认为肝细胞凋亡主要通过两条信号通路介导,即死亡受体通路和线粒体依赖性的细胞凋亡通路.但近来发现ERS亦介导肝细胞发生凋亡,本文主要讨论ERS途径所致肝细胞凋亡的机制.     

消癌解毒方通过内质网应激诱导肝癌HepG2细胞凋亡的研究

[目的]探讨内质网应激在消癌解毒方在人肝癌HepG2细胞凋亡中的作用。[方法]CCK-8法检测不同浓度的消癌解毒方处理HepG2细胞12、24、48 h后细胞的增殖情况;采用流式细胞术检测细胞消癌解毒方处理HepG2细胞24 h凋亡情况;应用qRT-PCR检测内质网应激上游分子标记GRP78、PERK、ATF-6、IRE-1的mRNA水平;采用Western blot方法分析消癌解毒方对PERK、ATF4、CHOP和TRB3蛋白的表达情况;并用CCK-8法检测内质网抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)对HepG2细胞凋亡率的影响。[结果]消癌解毒方抑制HepG2细胞的增殖,并且这种效应呈现时间和浓度依赖;ATF-6和IRE-1 mRNA水平无明显变化,GRP78和PERK mRNA水平较阴性对照组均显著增加;消癌解毒方可上调内质网应激通路的标志蛋白质PERK、ATF4、CHOP水平,增加下游TRB3蛋白的表达。4-PBA与消癌解毒方联合作用组的细胞凋亡率显著减少。[结论]消癌解毒方通过内质网应激诱导人肝癌HepG2细胞的凋亡,其可能是通过PERK通路上调内质网应激相关凋亡蛋白CHOP的表达。     

细胞凋亡与肾小管上皮细胞损伤

细胞凋亡与肾小管上皮细胞损伤王金泉综述刘志红审校关键词细胞凋亡肾小管上皮细胞损伤触发因素中图法分类号Ｒ３２９２８随着人们对细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）的发生机理、调节因素及其在胚胎发育、肿瘤、炎症中作用的认识不断深入，在肾脏病研究领域里细胞凋亡的...     

Ac-SDKP通过抑制内质网应激对肺纤维化细胞凋亡的影响

目的探讨体内、外肺间质纤维化模型中Ac-SDKP延缓肺纤维化发展的可能机制。 方法体内实验：将24只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组（8只）、肺纤维化模型组（8只）、肺纤维化+Ac-SDKP治疗组（8只）。采用气管内注入博来霉素（5 mg/kg）法建立小鼠肺纤维化模型,对照组为气管内注入等体积0.9%氯化钠溶液。造模后肺纤维化+Ac-SDKP治疗组小鼠腹腔内埋入Ac-SDKP微量注射泵（Ac-SDKP 800μg·kg^-1·d^-1,冰乙酸0.1 mol/L,卡托普利100 mg·kg^-1·d^-1）,持续干预21 d。对照组及肺纤维化模型组小鼠均于造模完成后第21天处死,肺纤维化+Ac-SDKP治疗组小鼠于干预21 d后处死,取肺组织观察其病理学变化;按试剂盒说明测定羟脯氨酸含量测定;TUNEL法测定肺泡上皮细胞凋亡率;Western-blot、免疫组化法检测GRP78、CHOP蛋白及mRNA的表达水平。体外实验：培养A549细胞,经TGF-β干预24 h后收集细胞,RT-PCR检测GRP78、CHOP mRNA的表达水平。正态分布计量资料多组间比较采用方差分析,两两比较采用SNK-q检验;非正态分布计量资料多组间比较采用kruskal-WallisH检验。 结果（1）一般观察：对照组小鼠双肺表面及切面光滑,未见结节形成;肺纤维化模型组肺组织表面及切面可见散在小结节;肺纤维化+Ac-SDKP治疗组肺组织表面也可见小结节,但较肺纤维化模型组稀少。（2）HE及Masson染色：肺纤维化模型组出现明显的纤维化改变,肺纤维化+Ac-SDKP治疗组肺纤维化程度有所减轻。（3）羟脯氨酸含量：3组间羟脯氨酸含量差异有统计学意义（H=20.490,P<0.01）,其中肺纤维化模型组、肺纤维化+Ac-SDKP治疗组明显高于对照组（q=0.517、0.167,P<0.05）,肺纤维化+Ac-SDKP治疗组明显低于肺纤维化模型组（q=0.351,P<0.05）。（4）肺泡上皮细胞凋亡指数：3组间差异有统计学意义（F=57.720,P<0.01）,其中肺纤维化模型组、肺纤维化+Ac-SDKP组明显高于对照组（q=8.471、3.639,均P<0.01）,肺纤维化+Ac-SDKP组明显低于肺纤维化模型组（q=4.832,P<0.01）。（5）CHOP、GRP78蛋白水平表达：肺纤维化模型组、肺纤维化+Ac-SDKP治疗组较对照组明显下降（q=22.630、8.921,138.812、41.233;P<0.01）,肺纤维化+Ac-SDKP治疗组较肺纤维化组明显升高（q=13.711、97.583,P<0.01）。（6）GRP78、CHOP mRNA表达量：TGF-β干预组较对照组明显升高（q=8.791、7.782,P<0.05）;TGF-β+Ac-SDKP干预组较单纯Ac-SDKP干预组明显升高（q=4.399、5.561,P<0.05)。 结论Ac-SDKP可能通过抑制内质网应激减缓肺泡上皮细胞凋亡,从而发挥其抗肺间质纤维化的作用。     

参麦注射液对大鼠神经元内质网应激诱导凋亡的影响

目的 探讨参麦注射液对大鼠皮层神经元内质网应激诱导凋亡的保护作用.方法 体外培养SD乳鼠皮层神经元细胞,免疫组织化学、免疫荧光染色鉴定神经元纯度,流式细胞术AnnexinV、PI双标检测凋亡率及活性caspase-3、-9表达,Western印迹免疫分析GRP78、细胞色素C蛋白、Bcl-2蛋白表达,Fura-2/AM法荧光分光光度计检测细胞内钙浓度([Ca~(2+)]i).结果 SD乳鼠皮层神经元可纯化体外培养,2 μmol/L毒胡萝卜素作用神经元24、48 h细胞凋亡率分别是17.88%、21.38%,参麦治疗组分别是7.42%、8.16%,两组差异显著(P<0.05).胡萝卜素诱导神经元糖调节蛋白GRP78表达上调,活化caspase-3、-9,使细胞色素C蛋白表达增加,Bcl-2表达减少.参麦注射液促进细胞Bcl-2表达,抑制细胞色素C释放,减少活性caspase-3、-9含量,降低[Ca~(2+)]i浓度.结论 参麦注射液能抑制体外培养神经元内质网应激所致的凋亡可能与其降低[Ca~(2+)]i浓度有关.     

内质网应激信号在姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡中的作用

目的 观察姜黄素对Jurkat细胞的作用,研究内质网应激信号在姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡中的作用.方法 在体外培养体系中,通过甲基噻唑蓝(MTT)比色法分析姜黄素对Jurkat细胞存活和增殖的作用,流式细胞学分析姜黄素对Jurkat细胞凋亡的作用,Western印迹检测Jurkat细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶...     

银杏叶提取物通过Wnt减轻内质网应激诱导的心肌细胞损伤

目的 探讨银杏叶提取物（EGB）对内质网应激诱导心肌细胞损伤的影响以及Wnt通路在其中的作用。方法 取1d龄乳鼠心肌细胞培养后,应用衣霉素（Tm）构建心肌细胞损伤模型,随机分为对照组、Tm组、Tm＋EGB组、EGB组。噻唑蓝（MTT）比色法检测心肌细胞存活率,双荧光报告系统检测Wnt活性,实时定量PCR检测C-myc、CyclinD1基因水平。结果 Tm降低了心肌细胞存活率,EGB处理改善了心肌细胞存活率;与对照组比较,Tm组Wnt活性显著降低,与Tm组比较,Tm＋EGB组Wnt活性、C-myc、CyclinD1水平明显升高,而应用Wnt抑制剂分泌型卷曲相关蛋白（sFRP）,Wnt活性显著下调,C-myc、CyclinD1水平下调,EGB的保护作用显著下降。结论 EGB可以抑制Tm诱导的大鼠心肌细胞损伤,其机制可能与改善Wnt信号有关。     

虾青素对碘海醇诱导的大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的观察虾青素(AST)对碘海醇(I)诱导的大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法大鼠肾小管上皮细胞株(NRK-52E)正常培养生长80%后,随机分为空白对照(Control)组、溶剂对照(DMSO)组、I组、AST预处理(AST+I)组、AST预处理+沉默信息调节因子2相关酶(SIRT)1抑制剂烟酰胺(AST+I+NA)组,I+SIRT1抑制剂(I+NA)组。不同因素干预细胞后,采用4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色检测细胞凋亡的形态学变化;膜联蛋白(Annexin)-V-FITC/碘化丙啶(PI)双标流式细胞仪检测细胞凋亡率;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)荧光探针检测线粒体膜电位;Western印迹检测SIRT1、P53、Bax和Bcl-2蛋白表达。结果 AST能显著减轻I诱导的大鼠肾小管上皮细胞凋亡,稳定线粒体膜电位,显著上调SIRT1蛋白表达,显著减少线粒体凋亡相关蛋白P53、Bax表达,显著增加Bcl-2表达(均P0.05)。结论 AST可能通过上调SIRT1蛋白表达,稳定线粒体膜电位,调控细胞凋亡相关蛋白表达对I诱导的大鼠肾小管上皮损伤发挥保护作用。     

膜性肾病尿蛋白对人肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨膜性肾病尿蛋白对人肾小管上皮细胞凋亡存在剂量依赖关系。方法提取膜性肾病患者尿蛋白,进行蛋白成分分析、细菌内毒素试验、蛋白溶液的肌酐水平等质量鉴定后,试验组分别按1.0、2.0、4.0、8.0 mg/ml蛋白浓度刺激人肾小管上皮细胞48 h,空白组无蛋白,Ho-echst33258染色法观察人肾小管上皮细胞凋亡情况。结果膜性肾病尿蛋白由56.4%白蛋白、34.6%转铁蛋白、6.9%IgG组成。肌酐水平、内毒素均低于人体正常范围的下限。Hoechst33258染色法分析发现试验组与空白组之间,较大浓度尿蛋白组与较小浓度尿蛋白组之间人肾小管上皮细胞凋亡指数有显著差异(P<0.05)。结论肾小管上皮细胞凋亡程度与膜性肾病尿蛋白存在浓度依赖关系。     

京尼平抑制饱和脂肪酸诱导的HepG2细胞凋亡和内质网应激

目的 探讨京尼平减轻棕榈酸对HepG2细胞毒性的作用及机制.方法 将HepG2细胞分为4组,分别用牛血清白蛋白、棕榈酸(1 mmol/L)、京尼平(20 μmol/L)或京尼平(20 μmol/L)预处理30 min后棕榈酸(1 mmol/L)孵育24 h,检测细胞活力及乳酸脱氧酶(LDH)释放;孵育16 h后经流式细...     

内质网应激在PM2.5诱导大鼠肺泡巨噬细胞凋亡中的作用

目的 本研究通过用PM2.5干预传代培养的大鼠肺泡巨噬细胞,检测细胞存活率、凋亡率,及内质网应激信号分子C/EBP同源蛋白(C/EBP honologus protein,CHOP)、葡萄糖调节蛋白78 (glucoser regulated ptotein 78,GRP78)的mRNA相对表达量,探讨内质网应激在PM2.5诱导肺泡巨噬细胞凋亡过程中的作用.方法 用不同浓度的PM2.5干预传代培养的肺泡巨噬细胞(NR8383细胞),分6个浓度组(分别为H0:0 mg/L,空白对照组,加等体积的PBS液;H1:40 mg/L;H2:80 mg/L;H3:160 mg/L;H4:320 mg/L;H5:640 mg/L),经12h、24 h、48h3个时间后,用MTT法检测NR8383细胞的存活率,选择最佳的干预时间.将传代的NR8383细胞接种于6孔板,浓度组设置同MTT,每组设3个复孔(n=3),经最佳干预时间后,采用流式细胞术检测各浓度组细胞的早期凋亡率及总凋亡率,用RT-PCR法检测各浓度组CHOP mRNA、GRP78 mRNA的相对表达量.结果 PM2.5干预12 h后,H1组与H0组、H2组与H1组细胞存活率间的差异无统计学意义(P＞0.05),余组间差异有统计学意义(P＜0.05),且随干预浓度的增加,细胞存活率下降.干预24 h后,除H5组与H4组差异无统计学意义(P＞0.05),余各组细胞存活率的组间差异有统计学意义(P ＜0.05).干预48 h后,H4组与H3组及H5组与H4组差异无统计学意义(P＞0.05),余各组细胞存活率的组间差异有统计学意义(P ＜0.05).各浓度组在PM2.5环境中分别暴露12 h、24 h、48 h后,以暴露24 h后各浓度组间差异较12h、48 h明显,确定24h为最佳的干预时间.经不同浓度的PM2.5干预24 h后,H1组较H0组、H5组较H4组的细胞早期凋亡率无明显增加,差异无统计学意义(P＞0.05),余各组与H0组比较,细胞早期凋亡率明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).干预24 h后,各浓度组的细胞总凋亡率较H0组均增加明显,且随干预浓度的增加,细胞凋亡率相应增加,组间差异有统计学意义(P ＜0.05).不同浓度PM2.5干预24 h后,H1组较H0组、H4组较H3组的GRP78 mRNA的相对表达量无明显增加,差异无统计学意义(P＞0.05),余各组与H0组比较,GRP78 mRNA的相对表达量均增加,组间差异有统计学意义(P＜0.05).干预24 h后,各浓度组的细胞CHOP mRNA的相对表达量较H0组增加明显,随干预浓度的增加,其相对表达量相应增加,组间差异有统计学意义(P ＜0.05).结论 PM2.5诱导NR8383细胞凋亡,内质网应激参与PM2.5诱导NR8383细胞凋亡的过程.     

慢性内质网应激诱导的凋亡在动脉粥样硬化斑块形成中的作用

内质网应激(ERS)与促进动脉粥样硬化(As)的非动脉壁系统和动脉壁系统因素均密切相关。未折叠蛋白反应(UPR)作为ERS长期激活的标志,可导致细胞的病理状态及组织功能受损。已有大量研究表明As斑块内的细胞,尤其是易损斑块区域的内皮细胞和巨噬细胞均表现有UPR被慢性激活。病理性的慢性ERS通过诱导细胞(内皮细胞、巨噬细胞及平滑肌细胞)凋亡而促进坏死核形成,激活炎症信号通路,影响易损斑块的形成与稳定性,有重要的促As效应。造成慢性ERS的应激源:氧化应激、氧化型胆固醇、细胞内高水平胆固醇及饱和脂肪酸等在As病程中表现明显,且在肥胖、胰岛素抵抗及糖尿病等促进As临床病程的因素中更为突出。近年研究已经部分揭示了ERS促As易损斑块形成的机制及体内的相关性,为ERS药物靶向性治疗途径提供了思路,但仍需大量深入的研究才能转化为具有临床意义的防治方法。     

急性肾功能衰竭肾小管上皮细胞凋亡机制

急性肾功能衰竭(ARF)是临床常见的综合征,其死亡率一直居高不下.目前认为,对ARF分子发病机制的认识不清是ARF缺乏有效治疗的重要原因.各种病因导致的ARF都具有肾小管上皮细胞严重受损或死亡的显著特点.细胞死亡有凋亡和坏死两种表现形式,生理性细胞凋亡在维持正常的生命活动中具有重要作用,而疾病状态可诱导病理性凋亡,但在病理生理特点上和细胞坏死不同[1].随着研究的深入,越来越多的资料表明,肾小管上皮细胞过度凋亡在ARF中具有重要作用.有研究认为,细胞损伤的严重程度决定了细胞的主要死亡方式.当损伤较轻时,凋亡占死亡方式的主体;损伤较重时,则主要表现为细胞坏死(图1).     

内质网应激、凋亡及心血管疾病△

内质网是真核细胞中一个参与蛋白质合成、加工与修饰的重要细胞器,它对维持细胞内环境的稳定具有重要意义。内质网应激是一种因各种生理或病理因素诱发内质网紊乱而导致非折叠蛋白堆积所造成的一种状态。内质网应激能激发非折叠蛋白反应以恢复细胞内稳态或者细胞凋亡。这篇综述重点阐述内质网应激参与心血管疾病发生、发展的分子机制及治疗。     

粗糠柴霉素抑制碘帕醇诱导的大鼠肾小管上皮细胞凋亡

目的研究粗糠柴霉素（Rottlerin）对碘帕醇诱导的大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法体外培养的大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）分别用0．5～2μmol／L的Rottlerin与100mgI／ml碘帕醇共同处理2h,或在碘帕醇处理的同时加入2μmol／LRottlerin处理不同时间,或以2μmol／LRottlerin预处理1h后再用碘帕醇处理2h。以相同渗透浓度的甘露醇处理2h的细胞作为对照。Hoechst33342染色观察凋亡细胞核形态并计算凋亡细胞百分比;以DEVD—AFC为荧光底物测量caspase酶活性;用DCFH—DA荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）水平;Westernblot检测PKC-8蛋白表达。结果碘帕醇可诱导NRK-52E细胞PKC-8蛋白表达、细胞内ROS生成、caspase酶激活及细胞凋亡。Rottlerin可抑制以上变化,呈剂量依赖性抑制细胞凋亡,但Rottlerin预处理不能减少细胞凋亡。结论Rottlerin可抑制碘帕醇诱导的NRK-52E细胞凋亡,为造影剂肾病的治疗提供了新药物。     

白藜芦醇对高糖诱导肾小管上皮细胞凋亡的保护作用及机制

目的探讨白藜芦醇抑制高糖诱导人近端肾小管上皮细胞株(HK-2)的凋亡及可能机制。方法 MTT检测HK-2细胞活力;Hoechst染色法、caspase-3活性检测细胞凋亡;DCFH-DA检测细胞内活性氧水平;Real-time PCR检测Nrf2 mRNA表达;Western印迹法检测Nrf2蛋白表达。结果30 mmol/L葡萄糖能显著降低HK-2细胞活力,诱导细胞凋亡,上调细胞内活性氧的水平,并下调Nrf2 mRNA和蛋白表达。10μmol/L白藜芦醇预处理能部分逆转高糖的作用。结论白藜芦醇对高糖诱导的HK-2凋亡的保护机制可能与抑制活性氧的生成和上调Nrf-2的表达有关。     

人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导人肺上皮细胞凋亡

目的　探讨人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导体外培养的人肺上皮细胞A549凋亡,以及提取物浓度和作用时间与细胞凋亡的相互关系。　方法　根据四氮唑盐酶还原法(MTT)结果,选用5种不同浓度的提取物诱导人肺上皮细胞凋亡。分别在诱导后的5个时间段,采用苏木素伊红(HE)染色盲法计数和二苯胺法检测DNA断裂率,观察肺上皮细胞凋亡情况。同时对某个时间和浓度组的样本,用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡。　结果不同浓度人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导A549细胞凋亡,在5h之内细胞凋亡率随提取物浓度增加而增加,两者呈正相关关系,且细胞凋亡率显著高于对照组(P<005),5h细胞凋亡率达高峰(652%)。　结论　人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物可诱导人肺上皮细胞凋亡,细胞凋亡与其提取物浓度呈明显的相关关系。在时间上表现为双向变化关系,其变化程度同时受提取物浓度的影响     

Cyr 61基因过表达对人肾小管上皮细胞凋亡的影响

摘　要　目的:观察Cyr61基因过表达对人肾小管上皮细胞 (HKC)凋亡的影响,探讨Cyr61在常染色体显性多囊肾病(ADPKD)发病中的作用及机制。　方法:RT PCR扩增Cyr61基因全长,构建pcDNA3. 1 Cyr61重组质粒,转染并筛选获得稳定转染pcDNA3. 1 Cyr61的HKC细胞。经RT PCR、Northern、Westernblot鉴定转染细胞系基因的整合及表达。对空白HKC、空质粒pcDNA3. 1转染的HKC、Cyr61转染的HKC和囊肿衬里上皮细胞去血清培养 72h后,流式细胞仪检测细胞凋亡指数,Westernblot检测磷酸化Akt和Bad含量。　结果:构建了pcDNA3. 1 Cyr61重组质粒并获得稳定转染该质粒的HKC细胞。空白HKC与质粒pcDNA3. 1转染组之间上述指标无显著差异(P>0 05),Cyr61基因转染组与空白组、pcDNA3. 1转染组相比,凋亡指数显著降低 (P<0. 01),磷酸化Akt和磷酸化Bad含量显著增高 (P<0 .01 ),Cyr61基因转染组与囊肿衬里上皮细胞之间上述指标无显著差异 (P>0. 05);在Cyr61抗体存在下,Cyr61基因转染组的上述指标与空白组无显著差异 (P>0 .05 )。　结论:过表达Cyr61的HKC对去血清诱导的凋亡特性与囊肿衬里上皮细胞相似,过表达的Cyr61可能通过自分泌途径,促进Akt和Bad磷酸化,抑制细胞凋亡,参与ADPKD囊肿形成和发展。