用非同位素PCR－SSCP方法检测p53基因第4外显子多态性

本研究通过对比不同凝胶组成成分及电泳条件，建立了非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法以检测ｐ５３基因第４外显子第７２密码子的多态性。对３５例正常组织ＤＮＡ的研究结果显示，ｐ５３基因这位点的杂合率和纯合率分别为４８．６％（ＣＣＣ／ＣＧＣ），４５．７％（ＣＧＣ／ＣＧＣ）和５．７％（ＣＣＣ／ＣＣＣ）．本法简单、快速，能有效地检测基因多态性，并可进一步应用于对肿瘤细胞ｐ５３基因杂合性缺失的分析。     

应用非同位素PCR—SSCP方法检测乳腺癌p53基因点突变

目的 探讨乳腺癌组织中p53基因点突变。方法 应用非同位素PCR－SSCP技术检测48例石蜡包埋乳癌组织中,p53基因点突变。结果 48例乳腺癌中20例出现异常电泳,表明这些病例相应DNA片段中发生了点突变,其中8例位于第5－6外显子,9例位于第7外显子,3例位于第8外显子。免疫组化检测突变p53蛋白的表达25例为阳性（52％）,其中5例SSCP未发现基因突变,突变可能发生在所检测的基因片点以外。结论 非同位素PCR－SSCP是一简便、快速、有效的检测基因点突点的方法,特别适用于大量标本基因点突变的筛选;p53基因点突变与突变型蛋白表达呈相关关系。     

应用非同位素PCR—SSCP方法检测甲状腺癌p53基因的突变

目的 探讨甲状腺癌组织中p53基因点突变。方法 应用非同位素PCR－SSCP技术检测39例不同类型甲状腺癌石蜡包埋组织中p53基因点突变。结果 10例分化甲状腺癌中4例（40％）、9例未分化甲状腺癌中6例（67％）出现异常电泳,表明这些病例相应DNA片段中发生了点突变,而5例乳头状癌和5例滤泡型癌均未见该基因的突变。10例出现异常电泳的甲状腺癌中9例（90％）同时呈现p53蛋白的表达。结论 非同位素PCR－SSCP是一简便、快速、有效的检测基因点突变的方法,p53基因点突变率与蛋白表达率基本相一致,p53基因的突变是分化型癌向间变型癌转化的关键性遗传改变。     

应用PCR—SSCP方法检测肺癌,肠癌中p53基因突变

目的 研究ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测肺癌、肠癌中Ｐ５３基因突变的方法改进及突变率。方法 用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ,银染技术检测４例肺和７例大肠癌组织标本中Ｐ５３基因外显子５－８。结果 肺癌Ｐ５３基因突变率为７５％,肠癌Ｐ５３基因突变率为４２．９％。结论Ｐ５３基因突变与肺癌、肠的发生密切相关,ＰＣＲ－ＳＳＣ 染技术简便快速、灵敏安全的基因突变检测方法,可应用于肿瘤的临床基本诊断 。     

银染PCR—SSCP法检测食管癌P^53基因突变

目的：探索快速、有效、简便的检测食管癌Ｐ＾５３基因突变的方法,以利于食管癌的早期诊断和研究。方法：用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法检测本院６３例食管切除标本的Ｐ＾５３基因突变（选突变多发位点５、６、７、８外显子）。结果：食管癌Ｐ＾５３基因突变发生于第５、６、７、８外显子,总突变率６８％,鳞癌、腺癌、未分化癌中Ｐ＾５３突变率差异不显著;鳞状上皮不典型增生中Ｐ＾５３突变率为６１．８％。结论：Ｐ＾５３基因突变可     

应用非同位素PCR—SSCP检测膀胱癌组织中p53基因变异的初步研究

应用聚合酶链式反应－单链构像多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染色法检测了３９例膀胱移行上皮癌组织中ｐ５３基因的突变率为３０．８％，其中５、６、７、８外显子的突变率分别为７．７％、５．１％、５．１％、１２．８％；病理分级的Ｉ、Ⅱ、Ⅲ级肿瘤组织中ｐ５３基因突变率分别为７．１％、３０．０％、５３．３％（Ｐ〈０．０５）。提示ｐ５３基因突变在膀胱肿瘤的衍变过程中可能起重要作用，可能是致其恶性程度提高的继发事     

银染PCR—SSCP法检测52例白血病患者p53基因点突变

目的 通过检测白血病患者p53基因点突变,了解其与白血病的发展、治疗及预后的关系。方法 用银染PCR－SSCP法检测52例不同类型白血病p53基因第5、6、7、8外显子的点突变。结果 在45例急性白血病患者中有5例发生p53基因突变,其中3例对化疗不敏感;6例慢性粒细胞白血病中1例有p53基因突变,此例患者在住院1个月内死亡,1例毛细胞白血病发生p53基因点突变。结论 p53基因点突变的检测对指导临床治疗及判断预后有一定价值。     

变性梯度凝胶电泳和单链构象多态性分析检测肺癌p53基因8号外显子突变

目的：检测ｐ５３基因８号外显子突变。方法：分别采用变性梯度凝胶电泳（ＤＧＧＥ）和单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ），对３５例肺癌病人手术切除组织的ｐ５３基因８号外显子（Ｅｘｏｎ８）进行突变检测。结果：采用ＤＧＧＥ检测的突变率为２０％，而ＳＳＣＰ检测的突变率为１１％。ｐ５３基因Ｅｘｏｎ８的总突变率为２３％。结论：ＤＧＧＥ检测ｐ５３基因突变的敏感性高于ＳＳＣＰ。     

应用非同位素PCR-SSCP方法检测乳腺癌p53基因点突变

目的　探讨乳腺癌组织中p53基因点突变。方法应用非同位素PCR -SSCP技术检测 4 8例石蜡包埋乳癌组织中p53基因点突变。结果　 4 8例乳腺癌中 2 0例出现异常电泳 ,表明这些病例相应DNA片段中发生了点突变 ,其中 8例位于第 5- 6外显子 ,9例位于第 7外显子 ,3例位于第 8外显子。免疫组化检测突变p53蛋白的表达 2 5例为阳性 ( 52 % ) ,其中 5例SSCP未发现基因突变 ,突变可能发生在所检测的基因片点以外。结论　非同位素PCR -SSCP是一简便、快速、有效的检测基因点突变的方法 ,特别适用于大量标本基因点突变的筛选 ;p53基因点突变与突变型蛋白表达呈相关关系     

应用PCR－SSCP银染法检测结肠癌组织中p53基因突变

应用ＰＣＲ－单链构象多态分析（ＳＳＣＰ）银染技术分析了２１例结肠癌和正常结肠粘膜组织ｐ５３基因第五～第八外显子。发现了９例（４３％）的结肠癌组织出现了反映ｐ５３基因突变的异常条带。结果显示ｐ５３基因的突变与结肠癌的发生和发展有关。应用非同位素的银染方法，能简单、快速检测基因多态性，并避免同位素的危害，对结肠癌的基因诊断有潜在性应用价值     

PCR—SSCP法检测CETP第15外显子基因突变

目的：检测胆固醇脂转移蛋白第15外显子基因突变及其性质。方法：利用PCR－SSCP方法检测CETP第15外显子的基因突变。根据双脱氧DNA链合成终止法对PCR产物直接测序,确定基因突变的性质。结果：16例高HDL－C个体中发现了2例杂合子突变,经测序证实为第1506位核苷酸A→G突变。结论：在高HDL－C个体中存在较高的CETP第15外显子基因突变,PCR－SSCP和DNA测序技术是确定基因突变存在和性质的简便易行的技术和方法。     

毛细管电泳技术快速检测p53基因点突变

目的：探讨利用毛细管电泳技术快速检测p53基因点突变的临床应用价值。方法：采用毛细管电泳作SSCP分析，检测20例结肠癌肿瘤标本p53基因第7外显子PCR扩增产物，并与传统的聚丙烯酰胺凝胶电泳结果进行比较，最后用DNA序列测定判断其准确性。结果：20例结肠癌标本中，毛细管电泳技术检测出5例标本(Ca4，Ca6，Ca7，Ca8，Ca14)有突变，而凝胶电泳结合银染技术仅检出4例标本(Ca4，Ca6，Ca7，Cal4)有突变，测序证实经毛细管电泳所检出的5例标本均存在点突变。结论：对于PCR产物的单链构象多态性分析，毛细管电泳技术是一种更加快速、简便、敏感的方法，可应用于临床筛查基因点突变。     

应用PCR-SSCP银染法检测肺癌p53基因的突变

目的：探索并建立一套适用于临床检测的ｐ５３基因突变的分析方法，探讨肺癌发生发展与ｐ５３基因突变的关系，为临床诊断和治疗提供分子依据。方法：采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法对２２例肺癌患者ｐ５３基因的第６、第７外显子进行分析。结果：全部患者组织标本经ＰＣＲ扩增，均获得特异的ｐ５３基因扩增产物，进一步对第６第７外显子应用ＳＳＣＰ进行突变分析，不同组织类型肺癌的ｐ５３基因突变率各不相同，第７外显子的突变率（２７．３％）高于第６外显子（９．１％）。结论：ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法是适于肺癌患者ｐ５３基因突变分析的简捷、快速而可靠的检测方法，通过进一步研究，将为肺癌的早期诊断、鉴别诊断和预后判断提供有价值的分子指标。     

p53基因第72密码子基因多态性和蒙古族妇女宫颈癌的相关性分析

目的探讨p53基因第72密码子基因多态性与蒙古族妇女宫颈癌的关系。方法在内蒙古自治区呼和浩特市蒙古族妇女中,同期选择宫颈癌患者53例,健康对照者65例进行病例——对照研究,采用连接酶检测反应技术分别对入选样本进行基因分型,分析两者之间的相关性。结果在蒙古族妇女中,p53基因第72密码子Arg和Pro等位基因频率在宫颈癌组中分别为51.9%和48.1%,在对照组中分别为50.8%和49.2%,两组等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05);两组间基因型频率分布差异无统计学意义(P>0.05);p53基因第72密码子多态性和蒙古族妇女宫颈癌无明显相关性。结论 p53基因第72密码子基因多态性和蒙古族妇女宫颈癌无明显相关性,并非是蒙古族妇女宫颈癌的主要因素。     

p53基因PCR—SSCP银染检查痰标本诊断肺癌

目的 了解痰标本检测肺癌患Ｐ５３基因突变的可行性及其对临床诊断的意义。方法 采用改良Ｓａｃｃｏｍａｎｎｏ法浓缩及保存痰标本，部分涂片找癌细胞，其余标本进行痰细胞ＤＮＡ提取及多聚酶链反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ）。共检测箬诊肺癌患１５例（涂片或活检找到癌细胞），临床高度怀疑肺癌患５例（涂片或活检均阴性），２例非肿瘤患（１例为结节病，另为右中叶肺炎），同时采用正常肿组织标本作对     

应用PCR—SSCP技术检测妊娠滋养细胞肿瘤p53基因突变

应用聚合酶链式反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）溴乙锭染色技术检测２０例葡萄胎及４例绒毛膜癌组织石腊标本Ｐ５３基因经５和８外显子基因突变。结果显示：正常绒毛０／０，葡萄胎６－２０（３０％），绒毛膜癌３／４发生Ｐ５３基因突变。提示Ｐ５３基因突变是滋养细胞肿瘤形成和演进过程听一个重要事件，葡萄胎应属于生滋养细胞肿瘤 。     

应用非同位素 PCR-SSCP 检测膀胱癌组织中 p53 基因变异的初步研究

应用聚合酶链式反应—单链构像多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染色法检测了３９例膀胱移行上皮癌组织中ｐ５３基因的突变率为３０．８％，其中５、６、７、８外显子的突变率分别为７．７％、５．１％、５．１％、１２．８％；病理分级的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级肿瘤组织中ｐ５３基因突变率分别为７．１％、３０．０％、５３．３％（Ｐ＜０．０５）。提示ｐ５３基因突变在膀胱肿瘤的衍变过程中可能起重要作用，可能是致其恶性程度提高的继发事件；ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法是一种快速、简单且安全的检测基因突变的方法，具有推广应用价值。     

食管癌高发区p53基因第五外显子突变分析

目的 :探讨高发区食管癌标本中p5 3基因的突变状况及其与危险因素的关系 .方法 :采用PCR扩增产物纯化后直接DNA序列测定技术对河南省林州市 4 0例食管癌标本p5 3基因第五外显子突变情况进行检测 .结果 :4 0例食管癌标本中 ,有 8例标本 10个位点发生突变 ,突变率为 2 0 % (8/4 0 ) .10个突变中 9个为点突变 ,1个为插入突变 .突变大多发生在G :C碱基对 ,G :C→A :T的置换最多 ,占 5 / 9,A :T→T :A的颠换占 3/ 9,G :C→C :G的颠换占 1/ 9.p5 3基因第五外显子突变与性别、年龄、食管癌家族史和吸烟无显著联系 (P >0 .0 5 ) ,但与食用酸菜有密切联系 (P <0 .0 5 ) ,其OR值为 5 .95(1.13～ 31.2 6 ) .结论 :高发区食管癌标本中 p5 3基因第五外显子突变位点较为分散 ,经常食用酸菜可引起 p5 3基因突变     

用PCR—SSCP方法探讨ras基因,p53基因突变与喉癌的关系

目的：研究ｒａｓ基因、ｐ５３基因突变与喉鳞状细胞癌发病的关系。方法：应用多聚酶链反应－单链构像多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法分析４０例喉鳞状细胞癌Ｈ－ｒａｓ,Ｋ－ｒａｓ,和Ｎ－ｒａｓ基因的第１２密码子,ｐ５３基因第５,７外显子中点突变的情况。结果：Ｈ－ｒａｓ基因突变９例,突变率为２２．５％（９／４０）;Ｋ－ｒａｓ基因突变８例,突变率为２０％（８／４０）,Ｎ－ｒａｓ基因突变５例,突变率为１２．５