人癌基因c—sis 的RFLP_s在肝癌和正常组织中的分布

作者用人 c-sis 基因1.7kb 探针(BamHⅠ—BamHⅠ)研究了 c-sis 基因的 RFLps在肝癌和正常组织中的分布。并首次报道 c-sis 基因对 HnidⅢ、EcoRⅠ、SacⅠ、PstⅠ、PvuⅡ和 MspⅠ六种限制酶有多态性,其中用 EcoRⅠ、PatⅠ、PvuⅡ、和 MspⅠ四种限制酶、发现的 c-sis 基因 RFLPs 在肝癌和正常组织中无明显差别。本文还对 c-sis 基因甲基化问题进行了讨论,并表明 c-sis 基因的 GGCC 顺序甲基化程度较低且无组织特异性:     

应用6种人癌基因探针进行肝癌胃癌与脑瘤转化基因的RFLPs和扩增及重排的研究(摘要)

本文应用c-Ha-ras-1、N-ras Wigler(左段)和P~(52c-)(右段)、c-sis、erbB、c-myc和V-fos六种癌基因作探针,用瑟慎印迹和斑点杂交两种方法研究了94例胃癌、肝癌和脑瘤DNA的限制性片段长度多态性(RFLPs)、基因扩增和基因重排情况,和85例正常人组织杂交结果相比,发现了国内外未见报道过的癌基因等位片段。在肝癌中用N-ras作探针,ECORI酶解的杂交结果发现4kb、7.8kb、12kb和12.8kb等位片段。     

南方鲇16S rRNA基因扩增片段的RFLP研究

目的分析南方鲇不同地理种群16S rRNA基因扩增片段多态性.方法利用PCR技术扩增获得南方鲇(Silurus meridionalis)线粒体DNA 16S rRNA基因片段,并用10种限制性内切酶酶切.结果 Hind Ⅲ、MspⅠ、DraⅠ、TaqⅠ、Hae Ⅲ在该片段上有限制性位点,但只有Hae Ⅲ在野生种群和养殖品种之间表现限制性片段长度多态性.结论不同野生地理种群间不存在限制性片段长度多态性,养殖品种与各野生种群间在该基因片段上存在一定程度的多态性变异.     

中国昆明(KM)小鼠线粒体DNA限制性内切酶图谱的研究

线粒体DNA的限制性内切酶图谱在不同的种系及亚种间存在多态性。我们分别用五种限制性内切酶BamHⅠ、EcoRⅡ、HidⅢ、PstⅠ、MspⅠ对60只中国KM小鼠(雌雄各半)的线粒体DNA进行了酶切电泳分析,结果未发现多态性,且这五种限制性内切酶图谱均与BALB/c小鼠相同。这表明中国KM小鼠与绝大多数实验小鼠一样,均起源于欧州的野鼠M.m.domesticu。未见到KM小鼠经其它亚种野鼠母系遗传污染的迹象。     

应用6种人癌基因探针进行肝癌、胃癌与脑瘤转化基因的RFLPs和扩增及重排的研究

本文应用c-Ha-ras-1、N-ras wigler(左段)和P~(52-c)(右段)、c-sis、v-erbB、c-myc和v-fos六种癌基因作探针,用瑟慎印迹杂交和斑点杂交两种方法研究了94例胃癌、肝癌和脑瘤DNA的限制性片段长度多态性(RFLPs),基因扩增和基因重组情况。和85例正常人组织DNA的杂交结果相比,发现了一些国内外未曾报道过的癌基因等位片段。其中有些等位片段只在癌组织DNA中富集。两个癌患者家系中病人的一级亲属的RFLPs分析表明,这些成员中罕见的癌基因等位片段明显高于正常人群。同时我们在一些肿瘤中还发现有癌基因扩增和重排现象。     

原发性肝癌转化基因的RFLPs研究(Ⅰ) 中国汉族人基因组癌基因N-ras对限制酶Eco RI的RFLPs

用原发性肝癌患者手术切除的肝癌组织的 DNA 和肝癌患者、肝癌患者一级亲属与对照组个体白血细胞的 DNA 以及人工流产胎儿绒毛的 DNA 分别经限制性核酸内切酶 Eco RI 酶解、琼脂糖凝胶电泳分离、Southern 转移、并用~(32)P-标记的癌基因 N-ras 探针作分子杂交,以观察其 RFLPs。结果在中国汉族人基因组癌基因 N-ras 的左段意外地发现4.0kbp,7.8kbp,12.0kbp 等3个未见报告的特异等位片段,而未发现已见报告的8.8kbp,9.0kbp 或9.2kbp 的片段;在该基因的右段则除已见报告的7.0kbp 片段外还获得1个未见报告的12.8kbp 的等位片段。未探查出这些 RFLPs 与肝癌易感性的相关性。     

一种随机探针人DNA指纹分析法的建立

根据随机探针(Anonymous Probe)检测DNA限制性片段长度多态性(RFLPs)分析原理和人与鼠的髓鞘碱性蛋白(MBP)基因cDNA有90％以上同源序列的事实,选用rMBP-cDNA 3′-端非表达区高度重复序列的0.81千碱基对(kb)片段作探针,检测用HaeⅢ重酶解的人DNA限制性片段,结果可以分辨出22条谱带,受检的30例无血缘关系的个体之间,没有两个人的谱带是完全相同的,显示出此方法的高度特异性。本文还比较了若干DNA片段作探针和几种限制性内切酶水解人DNA后检测DNA指纹的初步结果。     

代谢酶CYP1A1、CYP2D6基因多态性与肺癌易感性的病例对照研究

目的 探讨代谢酶CYP1A1基因MspⅠ位点多态性、CYP2D6*10等位基因C188T位点多态性与人群肺癌遗传易感性之间的相关性.方法 应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测86例广州市肺癌患者和86例对照的CYP1A1、CYP2D6基因多态性分布频率,分析基因多态性与肺癌遗传易感性之间...     

正常人群中HLA-I类基因多态性初步研究

HLA基因簇位于第6号染色体短臂,它至少编码三类抗原。用血清学方法表明编码Ⅰ类细胞表面蛋白有三位点,HLA-A、-B、-C。这些位点具广泛多态性。本文应用Southern技术,以~(32)P标记的HLA-I类cDNA为探针,和纯血清学分型个体的白细胞DNA限制性内切酶酶解片段杂交,从DNA水平对HLA-I类抗原与限制性片段长度多态性(RFLP)相关性进行初     

广东汉族人WT_33cDNA 3'端非翻译区内的Hinf Ⅰ酶切点的遗传多态性

广东汉族人ＷＴ３３ｃＤＮＡ３’端非翻译区内的ＨｉｎｆⅠ酶切点的遗传多态性①郭奕斌②，杜传书（中山医科大学遗传学教研室；广州，５１００８９）主题词基因，肾母细胞瘤，脱氧核糖核酸酶类，限制性片段长度多态性，抗癌基因，聚合酶链反应中图号Ｑ３３；７８Ｗｉｌｍ...     

组织相容性复合体(MHC)的限制性片段长度多态性(RFLP)分型

用DNA限制性内切酶EcoRI处理72株HLA纯合子细胞的DNA,然后与HLA DRα、DRβ、DQα和DQβ分子探针进行分子杂交,测定了DNA限制性片段长度多态性的数值。测定值与文献报道符合。从而在我国具体条件下建立了HLA的DNA限制性片段长度多态性(RFLP)技术及标准数据,文中讨论了此新技术的应用前景。     

肝内胆管结石与Apo AⅠ-CⅢ-AⅣ基因PstⅠ位点多态性的关系研究

目的 探讨载脂蛋白AⅠ-CⅢ-AⅣ(apolipoprotein AⅠ-CⅢ-AⅣ,Apo A Ⅰ-CⅢ-AⅣ)基因PstⅠ位点多态性与肝内胆管结石易感性(the happening of hepatolithiasis)的关系.方法 应用PCR和限制性内切酶技术对64例肝内胆管结石患者和120例正常人Apo A Ⅰ-CⅢ-AⅣ基因Pst Ⅰ位点进行限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphisms,RFLP)分析.结果 肝内胆管结石组中A1A1、A1A2、A2A2基因型频率分别为0、4.7％、95.3％,正常对照组中A1A1、A1A2、A2A2基因型频率分别为0、10.0％、90.0％.肝内胆管结石组和正常对照组各基因型频率的比较(x2=1.599,P=0.206)和等位基因频率的比较(x2=1.531,P=0.216)差异均无统计学意义.结论 Apo A Ⅰ-CⅢ-AⅣ基因Pst Ⅰ位点多态性可能不是肝内胆管结石的危险因素.     

Ha-ras在正常人和胃癌患者DNAs的限制性片段长度多态性研究

以癌基因 Ha-ras 为探针,对10例正常人组织和22例人胃癌组织的 DNA 用限制性内切酶 Bam HI 酶切后,再通过瑟慎印迹法(Southern Blot)杂交,发现正常组织中的 Ha-ras 常见等位片段的出现频率高于胃癌组织,而稀有等位片段的出现频率低于胃癌组织;正常组织中Ha-ras常见等位基因纯合子的出现频率高于胃癌组织,而稀有杂合子的出现频率低于胃癌组织。提示 Ha-ras 限制性片段长度多态性(RFLPs)和胃癌可能存在着连锁关系。     

人DNA指纹检测的初步研究(科研简讯)

1985年,Jeffreys等首次报道用人肌红蛋白基因内含子中一个33bp的重复序列片段探针揭露出人小卫星DNA片段的高度多态性,并称之为DNA“指纹”。此后,若干学者对此进行了研究,并己逐渐应用于法医学亲权鉴定和个体识别的案件,取得了可喜的进展。 目前,国内人基因组DNA重复序列克隆还不易获得,用人工合成还较昂贵。我们根据随机探针检测DNA限制性片段长度多态性时,对探针的选择不在于它的来源或它原来的功能,重要的是能检测出多态性的原则,以及鼠与人的髓鞘碱性蛋白(MBP)基因cDNA有90％以上同源序列的事实,选用rMBP。cDNA3′-端非表达区高度重复序列的0.81Kb片段(从质粒pMBP-1获得),以α_32p-dCTP经随机引物延伸标记法标记后作探针。人白细胞DNA分别用HinfⅠ和HaeⅢ酸消化,经0.8％琼脂糖凝     

庆大霉素耐药基因探针的构建

本文从致痛性大肠杆菌的pEFM2质粒出发,克隆获得重组质粒pBY101,绘制了pBY101的PstⅠ、EcoRⅠ及PvuⅡ的限制性酶切物理图谱,确定Gm耐药基因在8.9kb的pstⅠ—1片段上。用EcoRⅠ酶解pBY101,再连接,次级克隆获得重组质粒pBY102。确证pBY102的4.9kb PstⅠ—EcoRⅠ片段含有编码Gm耐药基因。采用低熔点琉脂糖挖块法回收4.9kb片段,以生物素-7-dAT标记之,并作为探针,以菌落原位杂交珐检测106株Gm耐药性细菌,而且证明本研究构建的Gm—DNA探针与国外引进的ANT(2″)基因探针不同源。     

应用pAW101 DNA探针作人流胚胎组织的亲权鉴定

用pAW1015kb的DNA片段为探针检测人流胚胎与其亲代的DNA限制性片段长度多态性(RFLPs)的遗传关系。同时测定他们的某些同工酶(葡萄糖磷酸变位酶、酯酶D、乙二醛酶Ⅰ)型。在不违反孟德尔遗传规律的前提下,按M(?)ller-Essen公式计算,其父权概率都已达到或超过可以确认亲生关系的标准。这一方法的建立,使过去棘手的早期妊娠的亲权鉴定之难题获得圆满解决。此外,本文还对这一方法的优越性进行了讨论。     

原发性肝癌转化基因的RFLPs研究(Ⅱ)中国汉族人癌基因N—ras对限制酶Hind Ⅲ的RFLPs

用~(32)p 标记的人癌基因 N-ras 探针 p52C-分别与经限制性核酸内切酶 Hind Ⅲ消化的原发性肝癌患者手术切除的肝癌组织 DNA 以及作为对照的人工流产胎儿绒毛的DNA 进行分子杂交以观察其 RFLPs。结果发现有8.6kb、5.2kb 和6.5kb 三种首报的等位片段,它们在全部标本中出现的频率分别为100%、53.8%和23%。就基因型而言,8.6kb 纯合子占23%,8.6kb/5.2kb 杂合子占54%,8.6kb/6.5kb 杂合子占23%。在首报的三种等位片段中,6.5kb 的片段仅出现于肝癌组织 DNA。     

细胞色素P450IA1基因多态性与结直肠癌易感性的关系

目的 探讨细胞色素P450IA1(CYPIA1)基因Msp Ⅰ多态性与结直肠癌易感性的关系.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分别对75例结育肠癌患者、80例结肠息肉患者和100例健康对照者的CYPIA1基因3'端限制性内切酶Msp Ⅰ多态性进行检测,分别计算其三种基因型(A、B和C型)的频率,并进行统计学分析.结果 CYPIA1 Msp Ⅰ多态位点各基因型的分布频率在结直肠癌患者、结肠息肉患者和健康对照者中分别为:基因型A 50.2%、57.5%和65.0%;基因型B 26.2%、21.3%和21.0%;基因型C 23.6%、21.2%和14.0%,三者各基因型分布的差异无统计学意义(P>0.05).结论 CYPIA1 Msp Ⅰ位点多态性与结直肠癌易感性无显著相关性.     

细胞色素P450IA1基因多态性与结直肠癌易感性的关系

目的 探讨细胞色素P450IA1(CYPIA1)基因Msp Ⅰ多态性与结直肠癌易感性的关系.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分别对75例结育肠癌患者、80例结肠息肉患者和100例健康对照者的CYPIA1基因3'端限制性内切酶Msp Ⅰ多态性进行检测,分别计算其三种基因型(A、B和C型)的频率,并进行统计学分析.结果 CYPIA1 Msp Ⅰ多态位点各基因型的分布频率在结直肠癌患者、结肠息肉患者和健康对照者中分别为:基因型A 50.2%、57.5%和65.0%;基因型B 26.2%、21.3%和21.0%;基因型C 23.6%、21.2%和14.0%,三者各基因型分布的差异无统计学意义(P>0.05).结论 CYPIA1 Msp Ⅰ位点多态性与结直肠癌易感性无显著相关性.     

动脉硬化性脑梗塞遗传因素载脂蛋白AI基因DNA多态性分析

应用限制性片段长度多态性方法分析了52例动脉硬化性脑梗塞患者及60例健康对照ApoAⅠ基因,并应用酶学方法测定了二种基因型患者血清高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇及甘油三脂水平。结果表明载脂蛋白AⅠ基因PstⅠRFLP由2.2kb和3.3kb组成,3.3kb片段频率在二组间分别为0.16、0.02,二组间具有极显著性差异(P<0.o1),提示多态片段3.3 kb与动脉硬化性脑梗塞相关,是HDL-L水平下降的遗传因素之一。