TLR4在胚胎停育蜕膜组织中的表达及其意义

目的 了解TLR4在人早孕及胚胎停育蜕膜组织中的表达差异.方法 选取64例早孕妇女作为研究对象,健康早孕人工流产32例为对照组(A组),胚胎停育(稽留流产)32例,分别留取其宫蜕膜组织.根据其HE病理切片,将胚胎停育者再分成炎症组(B组)及蜕变组(C组)各16例,应用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)及免疫印记( Western-Blot,WB)检测TLR4蛋白在蜕膜组织中表达部位及定量差异.结果 TLR4在3组绒毛及蜕膜的合体滋养细胞、细胞滋养细胞、毛细血管内皮细胞的胞浆、蜕膜细胞呈不同程度的阳性染色.胚胎停育炎症组的蜕膜组织TLR4表达高于早孕对照组,蜕变组蜕膜组织TLR4表达低于对照组.结论 TLR4表达在稽留流产发病中具重要作用,母体蜕膜组织TLR4蛋白的平衡对早孕妊娠维持起重要作用.     

Survivin在反复自然流产患者妊娠组织中的表达异常

目的 探讨反复性自然流产(RSA)患者绒毛及蜕膜组织中细胞凋亡抑制蛋白survivin的表达异常,及与反复性自然流产的相关性. 方法 应用免疫组化法检测26例RSA患者和20例正常早孕妇女绒毛及蜕膜组织内survivin在蛋白水平上的表达,并进行图像分析、比较、计算其平均阳性单位值(PU). 结果 Survivin在正常早孕及自然流产绒毛、蜕膜中均有表达,正常早孕组绒毛滋养细胞、蜕膜细胞survivin的表达分别为PU=15.12±2.05、PU=10.81±2.02,RSA组绒毛滋养细胞、蜕膜细胞survivin的表达分别为PU=8.86±2.31、PU=6.93±2.15,正常早孕组survivin的表达明显强于RSA组(P＜0.01),有显著性差异. 结论 凋亡抑制蛋白survivin在妊娠绒毛及蜕膜组织中低水平表达,可能是导致反复性自然流产的一个重要原因.     

细胞焦亡因子在稽留流产蜕膜组织中的表达研究

目的 探讨稽留流产妇女蜕膜组织中细胞焦亡因子的表达情况及细胞焦亡对稽留流产的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和免疫组织化学法(IHC)分别检测稽留流产妇女(稽留流产组)和正常早期妊娠、正常人工流产妇女(正常人流组)蜕膜组织中细胞焦亡因子半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)mRNA、白介素-1β(IL-1β)mRNA及其蛋白的表达情况。结果 实时FQ-PCR检测结果显示,稽留流产组蜕膜组织Caspase-1 mRNA、IL-1β mRNA相对表达量明显高于正常人流组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。IHC结果显示,Caspase-1主要表达于细胞质内,IL-1β主要表达于细胞质和胞核内;稽留流产组蜕膜组织中的Caspase-1、IL-1β表达量均高于正常人流组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 细胞焦亡因子Caspase-1和IL-1β在早期稽留流产患者蜕膜组织中的表达上调,细胞焦亡与稽留流产可能存在明显的关联。     

蛋白酶体亚基LMP-2、Survivin、Caspase-3在稽留流产绒毛及蜕膜组织中的表达

目的:检测稽留流产绒毛及蜕膜组织中蛋白酶体亚基低分子质量多肽-2(proteasome subunit low molecu-lar weight polypeptide 2,LMP-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine-containing aspartate specific protease 3,Caspase-3)、生存素(Survivin)的表达,旨在探讨稽留流产的发病机制.方法:采用免疫组织化学染色方法检测30例稽留流产(实验组)患者绒毛及蜕膜组织中LMP-2、Caspase-3、Survivin的表达,并以30例正常早孕人工流产绒毛及蜕膜组织为对照组.结果:稽留流产组绒毛及蜕膜中LMP-2、Survivin的表达均低于正常早孕组,Caspase-3的表达则高于正常早孕组,差异均有统计学意义(P＜0.05).实验组的绒毛及蜕膜Caspase-3与LMP-2及Survivin的表达均呈负相关,LMP-2与Survivin的表达呈正相关(P＜0.05).结论:LMP-2、Survivin及Caspase-3的异常表达在稽留流产的发生中起重要作用.     

稽留流产患者绒毛滋养细胞AAH的表达

目的:研究天冬氨酰-(天冬酰胺酰)β-羟化酶(AAH)在稽留流产患者及正常早孕妇女绒毛组织中的表达定位及差异.方法:选取经B超及β-HCG动态监测证实为稽留流产患者50例作为研究组,其中有已知可能原因者20例为研究组1,未知原因者30例为研究组2.选取同期经B超证实胚胎存活,在门诊要求行人工流产的早孕妇女20例作为对照组.根据稽留宫内时间长短不同将研究组分为≤4周组和>4周组.应用免疫组织化学方法比较各组绒毛滋养细胞中AAH的表达.结果:AAH在稽留流产患者及正常早孕妇女绒毛组织滋养细胞胞浆及胞核表达,稽留流产患者绒毛滋养细胞中AAH表达明显低于正常早孕妇女(P<0.05).有已知原因及未知原因稽留流产患者之间AAH表达无显著差异(P>0.05).稽留流产患者胚胎稽留宫内时间长短不同,AAH表达亦无显著差异(P>0.05).结论:AAH在滋养细胞胞浆及胞核中的低表达可能导致稽留流产的发生.     

稽留流产组织中VEGF与PAPP-A的表达及关系

目的:探讨稽留流产组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达与血清中妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)的关系。方法:选择60例在我院就诊的稽留流产患者为观察组,并选取60例因早孕要求人工流产的健康孕妇为对照组,检测两组患者血清中PAPP-A水平,流产后留取两组患者的绒毛组织及蜕膜组织并行免疫组化测定VEGF的表达,比较分析两组患者VEGF及PAPPA表达的水平及关系。结果:两组患者血清中PAPP-A水平比较发现,观察组患者血清中PAPP-A水平明显低于对照组(P<0.05);两组患者绒毛膜及蜕膜组织VEGF表达比较,正常流产患者绒毛膜及蜕膜组织中VEGF蛋白的阳性表达率及表达强度明显高于稽留流产患者(P<0.05)。结论:稽留流产孕妇的血清VEGF与PAPP-A水平明显低于正常孕妇,有助于诊断稽留流产,临床工作中可作为检测指标。     

自然流产病例的绒毛与蜕膜细胞增殖和细胞凋亡的研究

目的　从细胞增殖与细胞凋亡的角度探讨自然流产的发生机制。方法　对 30例正常早孕吸宫流产病例和 30例自然流产病例的绒毛与蜕膜组织进行研究。常规光镜观察细胞形态学变化 ;免疫组织化学S P法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)在细胞中的表达 ;用DNA缺口原位未端标记技术 (TUNEL)检测细胞凋亡 ;免疫组化S P法检测bcl 2 bax基因蛋白表达率比值。结果　自然流产绒毛组织形态学结构均出现程度不同的退行性改变 ,绒毛的细胞滋养细胞及蜕膜中增殖指数 (PI)较正常早孕时明显减少 (P <0 0 1) ,而合体滋养细胞中从未发生过增殖 ,PI为 0 ;与此相反自然流产绒毛的细胞滋养细胞、合体滋养细胞及蜕膜中凋亡指数 (AI)较正常早孕时明显增多 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,同时 ,早孕流产的绒毛及蜕膜中促 /抑凋亡基因bcl 2 bax表达率的比值也较正常早孕时下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,结果与细胞凋亡的发生一致。结论　细胞增殖和凋亡可能在孕卵发育过程中起着重要作用 ,绒毛和蜕膜组织中大量的细胞凋亡是其形态学退变的根本 ,并进而阻碍了孕卵的发育。     

正常早孕及稽留流产患者NK细胞中整合素αvβ3的表达分析

目的分析正常早孕妇女和稽留流产患者外周血及蜕膜组织中CD56+CD16-和CD56+CD16+自然杀伤(NK)细胞比率以及细胞表面整合素αvβ3的表达。方法分别采集15例正常早孕妇女和7例稽留流产患者外周血和蜕膜组织,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞悬液,流式细胞术检测样本CD56+CD16-和CD56+CD16+NK细胞的比率以及其细胞表面αvβ3表达。结果 与早孕妇女外周血相比,蜕膜组织中CD56+CD16-NK细胞比率增高而CD56+CD16+NK细胞的比率却降低(P<0.01);正常早孕妇女及稽留流产患者外周血和蜕膜组织中CD56+CD16-和CD56+CD16+NK细胞的比率均无差异(P>0.05)。与正常早孕妇女相比,稽留流产患者蜕膜组织CD56+CD16-NK细胞表面αvβ3阳性表达率降低而其平均荧光强度(GM)值却增高(P<0.05)。结论 NK细胞及其所表达的整合素αvβ3在早孕期胚胎植入及胎盘形成过程中发挥重要作用,稽留流产患者NK细胞表面整合素αvβ3的表达异常,可能是稽留流产发生的免疫致病因素。     

妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘组织中细胞凋亡及caspase-3的表达

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)胎盘组织中细胞凋亡及caspase-3的表达情况。方法以临产前行剖宫产术终止妊娠的ICP患者为ICP组(20例),同期因骨盆、胎位、社会因素等原因临产前行剖宫产术终止妊娠的健康孕妇为对照组(20例)。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导、地高辛标记的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测胎盘组织中合体滋养细胞、细胞滋养细胞、蜕膜细胞及绒毛间质细胞的凋亡情况,采用免疫组织化学法检测胎盘组织caspase-3蛋白表达水平。结果 ICP组胎盘组织中各细胞的凋亡率指数、caspase-3蛋白阳性表达率均高于对照组(P<0.05)。结论 ICP胎盘组织存在细胞凋亡以及凋亡相关蛋白表达增多的改变,ICP胎盘功能减退与细胞凋亡密切相关,细胞凋亡在ICP疾病的发生、发展中起重要作用。     

妊娠早期CD56brightCD16- NK细胞CD49d和CD11b的表达分析

目的  探讨早期妊娠和稽留流产患者外周血CD56brightCD16- NK细胞及蜕膜组织子宫自然杀伤(uNK)细胞中整合素α4（CD49d）和αm (CD11b)的表达。方法  采集18例早期妊娠妇女外周血（其中14例另取蜕膜组织）和9例稽留流产妇女外周血,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞悬液,流式细胞术检测样本CD56brightCD16- NK细胞中CD49d和CD11b表达。结果  CD49d和CD11b在早期妊娠蜕膜CD56brightCD16- NK细胞表达显著低于早期妊娠妇女外周血CD56brightCD16-NK细胞(P＜0.01);稽留流产患者外周血CD56brightCD16- NK细胞的表达较早期妊娠妇女显著降低(P＜0.05)。结论  CD49d和CD11b可能在妊娠早期uNK细胞的募集中起重要作用,同时也可能参与了正常妊娠的维持。