高三尖杉酯碱对人眼球后成纤维细胞增殖的影响

为探讨高三尖杉酯碱对人眼球后成纤维细胞增殖的影响,采用体外培养人眼球后成纤维细胞,用ＭＴＴ比色法测定人眼球后成纤维细胞的增殖程度,并观察高三尖杉酯碱对ＨＲＯＦｂ生长和增殖的影响。结果显示：ＭＴＴ比色法能精确反映ＨＲＯＦｂ的增殖程度,所测光吸收值与细胞数目成正相关。高三尖杉酯碱可抑制ＨＯＲＦｂ的增殖,细胞抑制率与高三尖杉酯碱浓度呈显著正相关。     

生长抑素对人球后成纤维细胞增殖的影响

目的　探讨生长抑素 1 4 (SS1 4 )治疗 Graves眼病的机理 ,为临床应用提供实验依据。方法　培养人球后成纤维细胞 (hum an retro- ocular fibroblast,HROFb) ,用 MTT比色法测定细胞增殖状况 ,并观察 SS1 4 对HROFb的生长、增殖的影响。结果　所测光吸收值与成纤维细胞的数目呈正相关 (r=0 .996,P<0 .0 0 1)。SS1 4 在低浓度下 (<0 .2 5 nmol/ L)可促进 HROFb 增殖 ,当浓度 >2 5 nm ol/ L 时则可抑制 HROFb的增殖 ,且具剂量效应关系。HROFb的增殖率与 SS1 4 浓度呈负相关 (r=- 0 .90 5 4,P<0 .0 0 1)。结论　生长抑素对人成纤维细胞增殖有双相作用。     

HHT联合低剂量Ara-c与RNA诱导K562细胞凋亡的研究

目的:探讨高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)联合小剂量阿糖胞苷(arabinsylcytosine,Ara-c)与RNA协同作用对K562细胞凋亡的影响。方法:应用四唑盐(MTT)比色法分析细胞增殖率,倒置显微镜下观察细胞形态学变化、测定细胞蛋白质的含量及碱性磷酸酶(AKP)活性,观察提取的扬子鳄RNA与高三尖杉酯碱联合小剂量阿糖胞苷对K562细胞凋亡的影响。结果:①高三尖杉酯碱联合小剂量阿糖胞苷可协同诱导K562细胞凋亡。②RNA能增强高三尖杉酯碱联合小剂量阿糖胞苷对K562细胞增殖的抑制作用。结论:高三尖杉酯碱联合小剂量阿糖胞苷能有效诱导白血病细胞系K562细胞凋亡,RNA能增强高三尖杉酯碱联合小剂量阿糖胞苷的作用。     

低分子RNA与高三尖杉酯碱联用对白血病细胞系HL-60细胞作用的实验观察

目的:研究低分子RNA与抗白血病药物高三尖杉酯碱联用对HL-60细胞药物敏感性的影响。方法:采用细胞形态学观察、四唑盐(MTT)比色法分析细胞增殖以及应用凯氏定氮法测定细胞蛋白质的含量。结果:①0.05~50μg/ml高三尖杉酯碱对HL-60细胞增殖有抑制作用,并与时间和剂量相关。②低分子RNA与高三尖杉酯碱联用能显著降低HL-60细胞的增殖率,并进一步降低细胞内蛋白质的合成。结论:低分子RNA能提高HL-60细胞对白血病药物高三尖杉酯碱的敏感性,两者联用能有效抑制白血病细胞系HL-60细胞的增殖。     

丝裂霉素C抑制人结膜囊成纤维细胞生长及增殖

目的　观察丝裂霉素 C( MMC)对培养人结膜囊成纤维细胞生长及增殖的作用 .方法　用 MTT比色法、3H- Td R掺入法及流式细胞仪检测细胞增殖周期观察 MMC对培养的人结膜囊成纤维细胞生长及增殖的影响 .结果　 0 .4 g· L- 1MMC作用 5 min后 ,可使成纤维细胞 MTT比色 A570 nm值 7d内无显著变化 ( P>0 .0 5 ) ,3H- Td R掺入实验 CPM第 1日较对照组降低了 72 .5 % ,至第 7日时仍低于对照组 86.2 % ( P<0 .0 1) .细胞增殖周期中 ,MMC组 S期细胞的百分比明显低于对照组 .结论　临床使用剂量 MMC可使结膜囊成纤维细胞增殖能力下降 ,处于增殖抑制状态 ,而不引起明显的细胞死亡 .     

地塞米松、氨甲喋呤对人眼球后成纤维细胞增殖的影响

目的：探讨地塞米松、氨甲喋呤对人眼球后成纤维细胞增殖的影响。方法：采用体外培养人眼球后成纤维细胞（ＨＲＯＦｂ）,用ＭＴＴ比色法测定ＨＲＯＦｂ增殖程度,并观察了不同浓度地塞米松、氨甲喋呤单独及联合使用对ＨＲＯＦｂ生长、增殖的影响。结果和结论：ＭＴＴ比色法能精确反映ＨＲＯＦｂ的增殖程度,所测定吸收值与细胞数目成正相关（ｒ＝０．９９６,Ｐ＜０．００１）,地塞米松、氨甲喋呤均可抑制ＨＲＯＦｂ的增殖,且随剂     

Survivin反义核酸影响A549肺癌细胞增殖和凋亡的研究

目的 研究Survivin反义寡核苷酸对A549细胞增殖和凋亡的影响.方法 针对Survivin mRNA序列设计了反义寡核甘酸,转染A549细胞,PT-PCR检测细胞中survivin基因的mRNA含量;Western印迹显示Survivin蛋白水平;以MTT法检测细胞增殖,TUNEL法检测细胞凋亡.结果 Survivin反义寡核苷酸可明显降低A549细胞中survivin的mRNA和蛋白水平.MTT比色法结果说明人Survivin反义寡核苷酸抑制A549细胞增殖,抑制率远高于无义寡核苷酸组和空白对照组.TUNEL法检测结果显示,反义寡核苷酸还显著增强A549细胞对抗肿瘤药高三尖杉酯碱的敏感性,在较低高三尖杉酯碱浓度下,反义寡核苷酸转染细胞的凋亡率明显高于其它对照组.结论 sur-vivin反义寡核苷酸有望应用于肿瘤的辅助治疗之中.     

MTT法探讨改良五黄油对人皮肤成纤维细胞增殖的抑制作用

目的 MTT法探讨改良五黄油对人皮肤成纤维细胞增殖的抑制作用,为烧伤创面外用药物五黄油的改良目的之一--抑制瘢痕增生,寻求确切有效的实验依据.方法 倒置显微镜下观察细胞形态学变化.MTT比色法检测不同终浓度(0.10、0.15、0.20、0.25、0.30g/ml)改良五黄油作用下增殖状态下成纤维细胞72h后对细胞增殖的抑制程度,主要指标,细胞形态,吸光度(A)值.结果 倒置显微镜下可见空白对照组成纤维细胞大小均匀,生长密集,改良五黄油实验组和五黄油对照组细胞生长及形态明显改变,增殖缓慢,生长差,贴壁能力减弱.MTT比色法结果表示:0.10～0.30g/ml浓度药物作用人成纤维细胞,其增殖抑制程度与改良五黄油的浓度存在正相关性;与五黄油相对照,改良五黄油增殖抑制率以0.30g/ml浓度最显著(P＜0.01).结论 体外抑制人成纤维细胞增殖,改良五黄油比五黄油更有效.     

高三尖杉酯碱对急性白血病NB4细胞凋亡机制的影响

目的 观察高三尖杉酯碱(HHT)对急性早幼粒细胞白血病(APL)NB4细胞凋亡的作用及对PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达的影响,探讨其可能的作用机制.方法 将不同浓度(5、10、50、100、500 μg/L)HHT作用于NB4细胞,采用流式细胞术检测细胞凋亡,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞生长的抑制作用,...     

高三尖杉酯碱和异三尖杉酯碱对人急性早幼粒白血病细胞凋亡 …

目的 研究高三尖杉酯碱和异三尖酯碱对人早幼粒白血病细胞ＨＬ－６０凋亡的影响。方法采用流式细胞术、ＤＮＡ凝胶电泳、光镜及透电镜等方法。结果 证明高三尖杉酯碱及异三尖杉酯碱能快速、显著地诱导ＨＬ－６０细胞的凋亡,其作用有明显的浓度及时间依赖性。高三尖酯碱的活性明显高于异三尖杉酯碱。结论 高三尖杉酯碱及三尖杉酯碱皆可诱导ＨＬ－６０细胞凋亡,但高三尖杉酯碱的生物活性明显高于异三尖杉酯碱。     

生长抑素对人球后成纤维细胞增殖的影响

OBJECTIVE: To elucidate the possible mechanism of Somatostatin 14 in the treatment of Graves' ophthalmopathy, thus providing laboratory data with the intent to underpin therapeutic developments. METHODS: The human retro-ocular fibroblasts (HROFb) was cultured and MTT colorimetry assay was used to determine the proliferation of HROFb. RESULTS: MTT colorimetry assay could precisely reflect the proliferation of HROFb. The absorbance was directly proportional to the numbers of the cells (r = 0.996, P < 0.001). Somatostatin 14 could enhance the cell proliferation percentage at lower levels (< 25 nmol/L) and inhibit that at higher levels (> 25 nmol/L). The cell proliferation correlated positively to Somatostatin 14 levels significantly (r = -0.9054, P < 0.001). CONCLUSION: Somatostatin 14 has a dual effect on HROFb.     

TIMP-3对前列腺癌PC-3M细胞株增殖和侵袭能力的影响

目的：观察TIMP-3对前列腺癌细胞PC-3M增殖和侵袭能力的影响。 方法：实验分为前列腺癌细胞PC-3M组、转染空质粒PCDNA3.1的PCDNA-PC-3M组和转染 TIMP-3的PCDNA-TIMP-3-PC-3M组。采用黏附实验、MTT比色法对比观察稳定转染的PCDN A-TIMP-3-PC-3M与PCDNA-PC-3M的黏附能力和增殖活力。采用单层细胞侵袭和Boyden 小室侵袭实验,对比观察TIMP-3对PC-3M细胞体外侵袭能力的影响。 结果：稳定转染TIMP-3的PC-3M细胞的黏附率和细胞增殖速度明显低于空质粒组和未 转染 组(P<0.05),稳定转染TIMP-3的PC-3M细胞的侵袭指数明显低于空质粒组和未转染 组（P<0.05）,空质粒组和未转染组间细胞增殖速度和细胞侵袭指数比较差异无显著 性（P>0.05）。 结论：TIMP-3对前列腺癌PC-3M细胞增殖和侵袭能力具有抑制作用。     

全反式维甲酸对人视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用

目的：研究全反式维甲酸（ATRA）对体外培养人视网膜色素上皮（RPE）细胞增生的抑制作用及机制。 方法：采用传代培养的人RPE细胞,分成不同浓度（10^-9、10^-8、10^-7、10^-6和10^-5 mol•L ^-1的ATRA）和不同时间点（6、12、24、48、72和96 h）给药组,通过活细胞计数法、MTT比色法和流式细胞术分别检测ATRA对人RPE细胞增生的影响。 结果：ATRA给药组细胞生存率低于非给药组（P<0.01）。细胞增生的抑制率与药物剂量及时间呈正相关 (r₁=0.9926,P<0.05; r₂=0.9647,P<0.05)。与非给药组比较,ATRA给药组 RPE细胞周期中G₁期细胞增加（P<0.05),而G₀/G₁期细胞数明显减少(P<0.05）。结论：ATRA可能通过阻滞人RPE细胞周期对RPE细胞增生具有剂量依赖和时间依赖的抑制作用。     

参芪方血清对慢性肾衰大鼠肾脏细胞增殖的影响

目的　观察参芪方对大鼠肾小球系膜细胞和肾间质成纤维细胞增殖的影响。方法　应用血清药理实验方法 ,采用MTT比色法观察正常和肾衰大鼠血清对体外培养的肾小球系膜细胞和肾间质成纤维细胞增殖的影响。结果　与正常空白大鼠血清相比较 ,参芪方含药血清非常明显抑制两种细胞的增殖 (P <0 .0 0 1) ;与肾衰大鼠模型组血清相比 ,该方含药血清能够抑制两种细胞的增殖 (P <0 .0 0 1)。结论　参芪方能通过这种作用机制延缓实验性大鼠慢性肾功能衰竭的病程进展     

氟伐他汀对大鼠肺成纤维细胞增殖的抑制作用

目的:观察氟伐他汀(fluvastatin, Flu)对体外培养的大鼠肺成纤维细胞(fibroblast, Fb)增殖的抑制作用.方法:在体外培养的大鼠肺Fb中,加入Flu,用计数法和MTT比色法观察并比较不同浓度的Flu对培养细胞增殖的抑制作用、对大鼠肺Fb分裂指数及分泌胶原的影响.结果:计数法和MTT比色法均显示,Flu对体外培养的大鼠肺Fb的增殖具有明显的抑制作用(P<0.01),并呈剂量依赖效应,10-4 mol/L的Flu已可使培养细胞的增殖受到完全抑制.培养的大鼠肺Fb细胞分裂指数及胶原分泌量在Flu的作用下也有明显降低(P<0.01).结论:Flu对体外培养的大鼠肺Fb的增殖及其胶原分泌具有明显的抑制作用,为肺纤维化的治疗提供了一种新的方法.     

Caveolin-1与绒毛膜癌侵袭力之间的关系

目的:探讨小窝蛋白-1(caveolin-1,CAV-1)的表达与绒毛膜癌高侵袭力之间的相关性,并了解RNA干扰沉默CAV-1基因对高侵袭力绒毛膜癌JEG-3细胞侵袭力的抑制作用.方法:(1)应用Matrigel体外侵袭试验和噻唑盐比色实验[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumro-mide,MTT]检测绒毛膜癌JEG-3细胞和JAR细胞之间侵袭能力和增殖能力的差异;(2)应用半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transeriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测CAV-1 mRNA在人正常早孕绒毛组织、不同侵袭力人绒毛膜癌细胞株JEG-3及JAR表达的差异;(3)将CAV-1小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染至高侵袭力绒毛膜癌JEG-3细胞后,采用RT-PCR检测转染后JEG-3细胞CAV-1 mRNA表达的变化,并应用Matrigel体外侵袭试验和MTT法检测JEG-3细胞侵袭和增殖能力的变化.结果:(1)JEG-3细胞的侵袭能力显著高于JAR细胞(P<0.05),但JEG-3和JAR细胞之间增殖能力的差异无统计学意义(P>0.05);(2)RT-PCR结果显示在人正常早孕绒毛组织、高侵袭性JEG-3细胞以及低侵袭性JAR细胞中均可检测到GAV-1 mRNA,将上述三者中CAV-1 mRNA的表达量进行两两比较,发现人绒毛膜癌细胞株中CAV-1 mRNA的表达明显高于人正常早孕绒毛组织,而具有高侵袭性JEG-3细胞中CAV-1 mRNA的表达明显高于JAR细胞,差异具有统计学意义(P<0.05),相关性分析显示CAV-1表达水平与绒毛膜癌细胞侵袭力呈正相关(r=0.86,P<0.05);(3)CAV-1 siRNA可有效抑制CAV-1 mRNA的表达,并削弱绒毛膜癌细胞的侵袭和增殖能力.结论:CAV-1基因表达可显著增强绒毛膜癌细胞的侵袭潜能,CAV-1 siRNA可抑制绒毛膜癌细胞的侵袭和增殖能力.