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相似文献
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1.
王璐  黄新明  章杰  彭成 《蚌埠医学院学报》2022,47(12):1707-1711
目的评估碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶表型的临床应用价值。方法收集六安市人民医院2020-2021年分离自临床标本的耐碳青霉烯、非重复肠杆菌目细菌共227株。采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测菌株携带的碳青霉烯酶,并以PCR试验扩增常见5种碳青霉烯酶基因为金标准,评估碳青霉烯酶抑制剂增强试验对CRE菌株A类和B类碳青霉烯酶的检测价值。结果碳青霉烯酶抑制剂增强试验结果显示,产A类酶菌株有167株,产B类酶菌株有53株,5株肺炎克雷伯菌和1株产气肠杆菌未检出A类或B类酶。与PCR方法比较,碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测单独产A类酶的灵敏度为100.0%(164/164),特异度为95.2%(60/63),对于单独产B类酶的检测,灵敏度和特异度均为100.0%,两种检测方法之间一致性高。结论碳青霉烯酶抑制剂增强试验操作简便、结果易判读,适合临床微生物实验室普遍应用。  相似文献   

2.
目的了解临床分离肠杆菌菌种分布及对碳青霉烯类抗菌药物的耐药现状和分子机制。方法收集四川大学华西医院
2009~2010年分离到的对碳青霉烯类药物敏感性降低的肠杆菌科非重复菌株共45株,测定其对常用抗菌药物的最低抑菌浓度
(MIC)以及产酶表型和PCR检测产酶分子机制。结果对碳青霉烯类药物敏感性降低的45株肠杆菌科细菌中,17株菌对亚胺
培南中介或耐药,21株对美罗培南中介或耐药,36株对厄他培南中介或耐药,绝大多数菌株对头孢菌素类耐药。受试菌株中改
良Hodge试验阳性检出率最高(77.8%),其次为EDTA纸片增效试验(57.8%)和PBA纸片增效试验(22.2%)。blaTEM、blaSHV
和blaCTX-M基因检出率分别为60.0%,53.3%和15.6%,同时携带2 种及以上基因的检出率为44.4%。blaIMP 基因检出率为
48.9%。4株菌(3株产酸克雷伯菌,1株阴沟肠杆菌)为blaKPC基因阳性,检出率为8.9%,且位于质粒上。结论研究发现肠杆菌
科细菌产酶是对碳青霉烯类药物敏感性下降的主要机制,产碳青霉烯酶或合并多种β-内酰胺酶可引起非敏感或耐药的出现。
本研究报道了在西南地区发现在质粒携带的KPC-2型酶,可能引起不同菌种间水平传播,需引起足够重视。
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3.
目的评价免疫层析方法产品用于碳青霉烯耐药肠杆菌(carbapenems resistant enterobacter,CRE)的耐药基因进行快速分型的临床应用价值。方法从住院患者临床标本中分离到非重复的195株耐碳青霉烯的肠杆菌科细菌,采用PCR方法和免疫层析方法分别进行检测,以PCR方法作为金标准,对检测结果采用分析软件进行分析,评价其作为碳青霉烯耐药肠杆菌耐药基因快速分型的性能。结果采用PCR方法检出携带KPC酶(质粒介导的肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶)基因的菌株136株,检出携带NDM酶(产新德里金属-β-内酰胺酶)基因的菌株52株,5种耐药基因均未检出的7株。采用免疫层析法检出产KPC酶菌株136株,产NDM酶菌株52株,产IMP酶菌株1株,产VIM酶菌株2株,其中1株菌产KPC和IMP两种酶,2株菌产NDM和VIM两种酶,以上5种耐药均未检出的7株。采用免疫层析法检测KPC酶、NDM酶的灵敏度为100%,特异性为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为100%,Youden′s指数为1。结论采用免疫层析法产品对于该碳青霉烯耐药肠杆菌是否携带有KPC和NDM酶,能够准确作出诊断,可用于碳青霉烯耐药肠杆菌的主动分型筛查。  相似文献   

4.
目的初步探究一株耐碳青霉烯阴沟肠杆菌的耐药机制。方法采用K-B法检测该菌株对碳青霉烯类及其他常用抗菌药物的耐药性,采用改良Hodge实验和EDTA双纸片协同试验对碳青霉烯酶进行初筛,并用4对金属酶基因引物进行PCR扩增,同时进行AmpC酶的检测。结果药敏试验显示,该菌株对碳青霉烯和三代头孢耐药,并不被传统β-内酰胺酶抑制剂所抑制(对阿莫西林-克拉维酸和头孢哌酮-舒巴坦耐药),但对单环类的氨曲南敏感。改良Hodge试验和组合纸片法金属酶的初筛试验均为阳性,PCR检测结果显示该菌株携带Vim-2及Vim-5型金属酶基因。AmpC酶检测结果表明受试菌产诱导型AmpC酶。结论产Vim-2和Vim-5型金属酶是此株阴沟肠杆菌对碳青霉烯类耐药的重要原因,产诱导型AmpC酶可能参与其多重耐药机制,同时提示碳青霉烯类耐药性有向肠杆菌科扩散的趋势。  相似文献   

5.
目的 评估胶体金免疫层析法快速检测血培养肠杆菌目细菌碳青霉烯酶。方法 收集西安交通大学第二附属医院血培养79株肠杆菌目细菌,其中碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌57株和碳青霉烯类敏感肠杆菌目细菌22株,按照NG-Test CARBA 5试剂盒说明书检测待测菌株五种主要碳青霉烯酶[klebsiella pneumoniae carbapenemase(KPC)、new delhi metallo-β-lactamase(NDM)、verona integron-encoded metallo-β-lactamase(VIM)、imipenemase metallo-β-lactamase(IMP)、oxacillinase48(OXA)-48]。碳青霉烯酶基因经PCR测序确认。结果 57株血培养碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌,NG-Test Carba 5在15 min内检测到KPC、NDM、IMP、KPC+NDM和NDM+IMP,其敏感度和特异度分别为100%和100%。金山川碳青霉烯酶耐药检测试剂检测到KPC、NDM、IMP、KPC+NDM和NDM+IMP的敏感度和特异度分别为94.74%和1...  相似文献   

6.
目的:研究碳青霉烯类高水平耐药的阴沟肠杆菌临床分离株对碳青霉烯类耐药主要机制。方法:筛选对碳青霉烯类高水平耐药的阴沟肠杆菌临床分离株21株,同时采用微量肉汤稀释法测定这些细菌对不同抗生素的最小抑菌浓度(minimal in-hibitory concentration,MIC),改良Hodge实验、Carba NP试验检测是否产碳青霉烯酶;PCR检测碳青霉烯酶类型(blaKPC、blaIMP、blaNDM、blaVIM、blaIMI、blaSPM、blaNDMOXA-23、blaNDMOXA-24、blaNDMOXA-48、blaNDMOXA-58)。结果:药敏试验显示碳青霉烯类高水平耐药阴沟肠杆菌具有多重耐药性。改良Hodge实验、Carba NP试验阳性率分别为61.9%(13/21)、90.5%(19/21);PCR扩增碳青霉烯酶基因,21株试验阴沟肠杆菌19株有扩增产物,IMP、KPC、NDM阳性率分别为23.8%(5/21)、9.5%(2/21)、61.9%(13/21),其中一株阴沟肠杆菌既产IMP又产NDM。结论:产碳青霉烯酶是临床分离碳青霉烯类高水平耐药阴沟肠杆菌的主要耐药机制,应当引起院感控制人员的高度重视。  相似文献   

7.
目的 研究临床分离的1株肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素敏感性降低的分子机制.方法 对临床分离的1株肺炎克雷伯菌,通过纸片扩散法(KB法)检测其对抗生素的敏感性;利用改良Hodge试验、乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验对此菌株进行碳青霉烯酶表型确证;利用PCR及DNA序列分析,确定其基因型;通过质粒提取、质粒接合试验,对耐药基因进行定位.结果 药敏纸片法显示该菌株对碳青霉烯类抗生素敏感,其抑菌圈直径16~17 cm,提示分离的菌株可能产碳青霉烯酶,改良Hodge试验、EDTA协同试验确证产金属β-内酰胺酶(MBLs),PCR扩增和序列分析发现该菌携带MBLs基因blaIMP,药敏纸片法证实接合子对美罗培南的敏感性降低,IMP-4基因位于接合子约73 000 bp质粒上.结论 肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素敏感性降低的分子机理是携带MBLs基因的blaIMP.  相似文献   

8.
目的评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)直接检测阳性血培养瓶中肠杆菌目细菌碳青霉烯酶活性的可行性。方法收集2012年1月至2018年12月分离自温州市中医院各临床科室的46株肠杆菌目细菌和3株质控菌分别模拟血培养检测,用MALDI-TOFMS直接对阳性血培养液做细菌鉴定及亚胺培南水解试验,从而判断碳青霉烯酶的活性。另收集临床26例阳性血培养标本对该方法进行验证。结果25株产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌(CPE)显示300m/z和489m/z处的质谱峰均消失,21株非产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌(NCPE)的两处质谱峰依然存在。质谱检测46株细菌的碳青霉烯酶结果对比基因表型高度一致(Kappa=1),对血培养液直接鉴定的细菌种水平鉴定率为96.0%。26例临床血培养样本方法验证结果显示,9例耐碳青霉烯酶类肠杆菌目细菌和17例碳青霉烯类药物敏感菌株均被正确识别,灵敏度、特异度均为1.00。结论MALDI-TOFMS碳青霉烯酶测定法是一种直接从血液培养瓶中检测碳青霉烯酶活性的可行、快速的方法,有助于临床更快地调整经验性抗菌药物治疗和实施感染控制措施。  相似文献   

9.
目的 研究鲍曼不动杆菌对碳青霉烯耐药的表型和分子机制.方法 采用KB法及琼脂稀释法从临床分离的84株泛耐药鲍曼不动杆菌中随机选取8株,采用外排泵抑制试验筛查外排泵表型阳性菌株,EDTA协同实验筛选金属β-内酰胺酶表型,改良三维试验检测ESBLs和AmpC酶,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,PCR扩增耐药菌株的KPC酶、碳青霉烯酶和ESBLs基因,并测序分析.提取外膜蛋白行SDS-PAGE.结果 PAβN抑制试验显示亚胺培南MIC值下降均≤4倍,而美罗培南MIC值下降≥4倍者占50%(4/8).EDTA协同试验结果显示阴性.改良Hodge试验检测8株耐药菌结果阳性.耐药基因PCR扩增和测序证实8株耐药菌中7株有blaOXA-23基因,5株含blaTEM-1基因,8株耐药菌均含有KPC-2酶基因;耐药菌株的外膜蛋白电泳条带在25 ku处出现明显缺失.结论 鲍曼不动杆菌对碳青霉烯耐药机制主要是产生KPC-2酶、blaOXA-23酶,外膜蛋白25 ku表达的缺失所致,外排泵过度表达可能参与美罗培南的耐药.  相似文献   

10.
目的探讨一种简便易行,适用于临床微生物实验室常规开展检测AmpCβ内酰胺酶(简称AmpC酶)的方法。方法对临床分离的150株铜绿假单胞菌用表型筛选试验作AmpC酶测定,对AmpC酶阳性菌株同时进行氯唑西林双纸片协同试验、氟氯西林(FCC)双抑制剂扩散协同试验、PCR基因检测。用基因检测来评价比较三种测定方法的检出率及差异。结果表型筛选试验AmpC酶阳性37株同时进行氯唑西林双纸片协同试验、氟氯西林双抑制剂扩散协同试验、基因检测,检测出阳性株分别为15、14、11株,阳性率分别是40.54%(15/37)、37.84%(14/37)、29.73%(11/37)。表型筛选试验与后三种方法比较差异有统计学意义(P〈0.01),后三种方法结果比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论氯唑西林双纸片协同试验、氟氯西林双抑制剂扩散协同试验检测AmpC酶特异性较表型筛选试验高,且操作简便、结果可靠,适合临床实验室常规检测应用。  相似文献   

11.
泛耐药鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类抗生素机制研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的研究鲍曼不动杆菌对碳青霉烯耐药的表型和分子机制。方法采用KB法及琼脂稀释法从临床分离的84株泛耐药鲍曼不动杆菌中随机选取8株,采用外排泵抑制试验筛查外排泵表型阳性菌株,EDTA协同实验筛选金属β-内酰胺酶表型,改良三维试验检测ESBLs和AmpC酶,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,PCR扩增耐药菌株的KPC酶、碳青霉烯酶和ESBLs基因,并测序分析。提取外膜蛋白行SDS-PAGE。结果 PAβN抑制试验显示亚胺培南MIC值下降均≤4倍,而美罗培南MIC值下降≥4倍者占50%(4/8)。EDTA协同试验结果显示阴性。改良Hodge试验检测8株耐药菌结果阳性。耐药基因PCR扩增和测序证实8株耐药菌中7株有blaOXA-23基因,5株含blaTEM-1基因,8株耐药菌均含有KPC-2酶基因;耐药菌株的外膜蛋白电泳条带在25 ku处出现明显缺失。结论鲍曼不动杆菌对碳青霉烯耐药机制主要是产生KPC-2酶、blaOXA-23酶,外膜蛋白25 ku表达的缺失所致,外排泵过度表达可能参与美罗培南的耐药。  相似文献   

12.
赵赟安  丁卉  胡晓蕾  黄建胜  赵志钢 《浙江医学》2017,39(24):2261-2264
目的明确丽水市中心医院产KPC酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学特征,为临床抗感染治疗提供实验依据。方法收集2011年3月至2015年10月丽水市中心医院分离的碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌(CR-KP)。采用Vitek2-compact系统鉴定菌株并联合纸片扩散法(K-B法)检测其药敏,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;PCR法扩增KPC基因,测序后利用BLAST比对确定基因型;肠杆菌科基因间重复序列分型法(ERIC-PCR)联合多位点序列分型(MLST)鉴定菌种同源性;进而探讨产KPC酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学特征。结果共收集到70株CR-KP,其中68株改良Hodge试验阳性,扩增产物测序结果均为blaKPC-2基因。ERIC-PCR结果显示,70株KPC型肺炎克雷伯菌分为A、B、C、D、E5个克隆群分别为63株(90.0%)、3株、2株、1株、1株;MLST分成6个ST型,其中ST11型63株(90.0%),ST35型2株,ST1型2株,ST592、ST1883、ST494型均1株。结论丽水市中心医院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的主要克隆群为ST11型,是我院流行感染的主要原因。  相似文献   

13.
目的了解昆明地区阴沟肠杆菌的耐药现状及高产AmpC酶的表达对阴沟肠杆菌耐药性的影响.探讨昆明地区阴沟肠杆菌的耐药性与AmpC酶基因的关系.方法运用K—B法(纸片扩散)分析临床分离阴沟肠杆菌的耐药情况;采用头孢西丁三维试验、五种纸片表型筛选试验、氟氯西林双抑制剂扩散协同试验检测高产AmpC酶的表型表达;并通过聚合酶链反应(PCR)法检测结构基因ampC和调节基因ampD,对部分耐药菌株行DNA测序检测基因突变.[第一段]  相似文献   

14.
目的评价纸片耐药表型推断法和双纸片邻氯西林增效试验应用于临床实验室检测肠杆菌属细菌高产AmpC酶的可行性。方法采用头孢西丁三维试验、纸片耐药表型推断法和双纸片邻氯西林增效试验对104株临床分离的肠杆菌属细菌进行高产AmpC酶检测,以头孢西丁三维试验为标准,与后两种方法进行比较,计算两种方法的灵敏度和特异性。结果经头孢西丁三维试验检测,104株肠杆菌属细菌中高产AmpC酶有15株,其中阴沟肠杆菌11株,产气肠杆菌3株,河生肠杆菌1株,总检出率为14.4%。纸片耐药表型推断法的符合率为91.3%,灵敏度为86.7%,特异性为92.1%。双纸片邻氯西林增效试验的符合率95.1%,灵敏度为93.3%,特异性为95.5%。结论纸片耐药表型推断法和双纸片邻氯西林增效试验与三维试验相比有较高的符合率,且操作简便,适合在临床实验室检测肠杆菌属细菌高产AmpC酶中应用。  相似文献   

15.
目的:探讨临床分离的耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌的耐药基因和分子流行病学情况。方法:收集2018年1月—2019年3月临床分离的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE),采用VITEK-2 compact微生物鉴定仪进行菌种鉴定和药敏检测;改良Hodge和碳青霉烯酶灭活(m CIM)试验对菌株进行碳青霉烯酶表型检测;PCR检测β内酰类胺类(碳青霉烯酶、ESBL、Amp C酶)和喹诺酮类(PMQR)共19种耐药基因;多位点序列分析(MLST)对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)进行分子分型及同源性分析。结果:共收集CRE 134株,其中肺炎克雷伯菌125株,阴沟肠杆菌4株,大肠埃希菌3株,普罗威登菌2株;改良Hodge试验示114株阳性,碳青霉烯酶灭活(m CIM)试验示125株阳性;所有检测菌株均携带碳青霉烯类耐药基因;125株肺炎克雷伯菌中有118株携带blaKPC-2基因,另有5株携带blaNDM基因(4株携带blaNDM-1、1株携带blaNDM-5)和4株携带blaIMP-4基因,4株阴沟肠杆菌中3株携带blaNDM基因(2株携blaNDM-1、1株携带blaNDM-5),1株...  相似文献   

16.
目的分析胶体金免疫层析法对碳青霉烯酶耐药肠杆菌科细菌(CRE)产碳青霉烯酶快速检测的有效性。方法收集蚌埠医学院第一附属医院临床分离的CRE 80株和对碳青霉烯类抗生素敏感肠杆菌科细菌21株,PCR法检测blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaVIM、blaOXA-48耐药基因作为金标准,采用胶体金免疫层析法进行CRE产碳青霉烯酶检测,并与PCR结果进行一致性分析和效能评价。结果80株CRE中,表达碳青霉烯酶类基因为79株,该79株经胶体金免疫层析法检测碳青霉烯酶结果均为阳性,包括61株产KPC酶、10株产NDM酶、6株产IMP酶及2株产VIM酶;21株敏感菌胶体金检测结果均为阴性;与PCR结果相比,胶体金免疫层析法对四种酶的检测敏感性与特异性均为100%,与PCR结果一致性kappa值均为1。结论胶体金免疫层析法可快速区分CRE碳青霉烯酶类型,操作简便,具有很高的敏感度和特异性,对临床抗生素合理化用药具有重要意义。  相似文献   

17.
目的了解海南地区泌尿系感染多重耐药肠杆菌科细菌的流行特点及耐药机制。方法收集海南地区4家三级综合医院(海南省人民医院、海口市人民医院、海南农垦总局医院和三亚市人民医院)2012年1月—2013年8月门诊和住院泌尿系感染患者清洁中段尿分离的多重耐药肠杆菌科细菌225株,采用VITEK 2 compact微生物分析仪进行细菌鉴定和药敏试验,采用确证试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),采用改良Hodge试验(MHT)和金属酶筛选(MBL)试验对碳青霉烯类不敏感菌株进行碳青霉烯酶表型确认,对于阳性菌株采用PCR扩增分别进行ESBLs、KPC酶、IPM酶和NDM-1基因型检测,并对扩增产物进行测序。结果 225株多重耐药肠杆菌科细菌中产ESBLs的细菌203株(90.2%),其中大肠埃希菌163株、肺炎克雷伯菌32株、产酸克雷伯菌4株、奇异变形杆菌4株;其他多重耐药肠杆菌科细菌22株(9.8%)。药敏试验发现对碳青霉烯类不敏感的细菌有26株,行MHT有11株阳性,MBL试验有8株阳性。经PCR扩增对阳性菌株进行基因检测,结果 3株携带KPC-2基因,5株携带NDM-1基因,1株携带IPM-4基因。ESBLs基因型中TEM型占60.1%(122/203)、CTX-M型占46.3%(94/203)、SHV型占15.8%(32/203),有39株细菌同时扩增出2种及以上基因型。结论海南地区泌尿系感染多重耐药肠杆菌科细菌主要以产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主,流行的基因型以TEM型多见,其次是CTX-M型和SHV型;已发现少量对碳青霉烯类不敏感菌株,其主要耐药机制为产生NDM-1、KPC-2、IPM-4基因,临床上应引起重视,严格做好预防和控制工作。  相似文献   

18.
目的:探讨天津医科大学第二医院分离得到的碳青霉烯耐药克雷伯菌的耐药机制。方法:2013-2014年度临床微生物实验室分离到36株碳青霉烯耐药克雷伯菌,改良Hodge试验、EDTA协同试验及 PCR法检测碳青霉烯酶耐药基因,PCR法检测ESBLs及Ampc酶耐药基因,PCR、实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测外膜蛋白基因Ompk35及Ompk36存在及表达情况。结果:9株改良Hodge试验阳性,EDTA协同试验均阴性,碳青霉烯酶耐药基因均阴性;36株碳青霉烯耐药克雷伯菌至少存在1种β内酰胺酶耐药基因;外膜蛋白基因无缺失,33株存在外膜蛋白表达量下降。结论: 分离的碳青霉烯耐药克雷伯菌耐药机制可能为ESBLs及Ampc酶表达合并外膜蛋白表达下降。  相似文献   

19.
朱建峰  张雪松 《医学理论与实践》2013,26(8):1004-1005,1009
目的:以三维实验结果为标准,比较表型筛选法和双抑制剂扩散协同法试验检测产AmpC酶阴沟肠杆菌的可靠性。方法:收集2011年2月-2012年12月我院临床分离的阴沟肠杆菌39例,分别用三维实验、表型筛选法、双抑制剂扩散协同法试验检测产AmpC酶阴沟肠杆菌。结果:39株阴沟肠杆菌经三维试验检测出高产AmpC酶的阴沟肠杆菌10株,检出率为25.6%。表型筛选法特异性为69.0%,灵敏度为90.0%,检出效率为76.9%。双纸片协同试验特异性为93.1%,灵敏度为80.0%,检出效率为89.7%。结论:双抑制剂扩散协同法具有较高的灵敏度和特异性,且与三维试验阳性检出率相当,是一种可靠的方法。  相似文献   

20.
蒋英杰  张倩春 《吉林医学》2012,(35):7734-7735
目的:了解临床分离的大肠、肺炎菌的产KPC酶和MBL酶的情况及耐药原因分析,为控制院内感染,合理使用碳青霉烯类抗生素提供实验依据。方法:收集多种耐药的肺炎克雷伯菌39株,大肠埃希菌11株,采用K-B法进行药敏试验,用改良Hodeg实验进行KPC酶表型检测,Etest试验进行MBL酶检测,并分析其结果。结果:50株病原菌MBL检测全阴性。Hodge实验28株病原菌阳性,其中大肠埃希菌10株,肺炎克雷伯菌18株。结论:耐碳青霉素烯类药物的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药机制复杂,存在一种以上耐药机制。为避免耐药菌在院内引起流行,临床应根据药敏结果合理使用抗生素,实验室应加强耐药菌检测。  相似文献   

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