原发性肝癌中Survivin mRNA 的定量表达及其临床意义

目的 对原发性肝癌组织、癌旁组织以及正常肝脏组织Survivin mRNA进行定量,分析其表达与临床特征的关系,探讨其临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR检测59例原发性肝癌组织、相对应癌旁组织以及17例正常肝脏组织Survivin mRNA 的表达量,分析其表达量与性别、年龄、血清HbsAg、AFP、分化程度、肿瘤大小、临床分期以及转移状态等临床特征的关系。结果 Survivin mRNA在原发性肝癌组织中的表达高于正常肝脏组织的8倍,差异具有统计学意义（P < 0.05）。Survivin mRNA在低分化患者肝癌组织中的表达明显高于高分化患者组（P < 0.05）;在肿瘤直径≥5cm的肝癌组织中的表达明显高于< 5cm患者组（P < 0.01）;在III~IV期患者肝癌组织中的表达明显高于I~II期患者（P < 0.01）;有淋巴结转移的患者肝癌组织中的表达明显高于未转移组（P < 0.01）。Survivin mRNA表达与患者性别、年龄、血清HbsAg以及AFP水平无相关性（P > 0.05）。结论 Survivin mRNA在原发性肝癌组织中呈高表达,且与肿瘤分化程度、肿瘤大小、临床分期和转移状态等密切相关。     

血清miRNA表达水平检测与原发性肝癌早期诊断的研究

目的 对血清样品miRNA表达水平变化的实时定量PCR检测进行观察,同组织样品的miRNA的变化趋势进行比较,以评价血清miRNA在原发性肝癌早期诊断中的价值.方法 通过荧光定量PCR检测miRNA-125a、-200a、-199a等3个有代表性的miRNA指标在正常和癌变样品中的变化,验证组织及血清两类样品中miRNA的变化趋势,分别取癌旁组织和癌组织以及正常人与癌症患者血清为材料.结果 肝癌患者血清是正常对照血清中miRNA的含量的10%～15%,肝癌组织中的miRNA含量是癌旁组织的10%～20%,而且血清miRNA的变化趋势与组织miRNA较一致.结论 血清miRNA可以反映原发性肝癌的发生,说明血清miRNA非常有可能成为一种新的生物标记物用于原发性肝癌的早期诊断.     

原发性肝癌患者循环肿瘤细胞检测及其与术后复发转移的关系

目的检测外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)在原发性肝癌患者中的表达情况,并探讨CTC动态变化及其相对于甲胎蛋白(Alpha fetoprotein AFP)对原发性癌患者术后复发转移的预测作用。方法收集原发性肝癌患者134例,肝脏良性病变患者72例,检测外周血CTC数目,同时检测AFP的表达水平,分析CTC与AFP的相关性。然后在134名原发性肝癌患者中筛选出成功行肝癌根治术的患者,共86例,检测这86名患者术前、术后外周血CTC和AFP,分析CTC和AFP对原发性肝癌术后复发转移的评估价值。结果原发性肝癌患者外周血CTC阳性率高于肝脏良性病变患者,差异有统计学意义(P <0. 05);原发性肝癌患者CTC水平与AFP水平、淋巴结转移、肿瘤结节多少有关,与年龄、性别、肿瘤直径、分化程度、肝硬化有无、TNM分期无关;原发性肝癌患者CTC和AFP生存分析显示,原发性肝癌根治术后早期复发转移与CTC和AFP密切相关; CTC较阳性对术后复发转移具有更好的诊断价值,二者联合对复发转移预测价值最高。结论 CTC可以做为一个比传统肿瘤标志物更好的对原发...     

Lasp-1蛋白在肝癌组织中表达及临床意义

目的探讨Lasp-1蛋白在肝癌（HCC）中的表达及临床意义。方法采用免疫组化染色法检测42例肝癌癌组织、28例癌旁组织以及15例正常肝组织标本中Lasp-1蛋白表达情况,并探讨其与肝癌临床病理特征的关系。结果Lasp-1蛋白在肝癌组织中的阳性表达率为54.76％,明显高于癌旁（32.14％,P〈O.01）及正常肝组织（6.67％,P〈0.01）,Lasp1表达阳性率在正常肝组织、癌旁、和肝癌中呈递增趋势;Lasp-1在伴发转移的肝癌病例标本中未发生转移者表达阳性率更高（P=o.006）;肝癌组织中Lasp-1的阳性率与患者TNM分期呈正相关（P=0.013）。结论Lasp-1可能在促进HCC的发生和发展过程中发挥了重要的作用,有望成为早期诊断HCC发生以及评估预后的指标。     

IL-18结合蛋白在慢性肝炎及肝癌中的表达意义

目的:检测原发性肝癌(肝癌)、慢性乙型肝炎(慢乙肝)、肝炎后肝硬化(肝硬化)和正常人血清白介素-18结合蛋白(IL-18BP)的浓度,并检测同期肝癌、癌周、慢乙肝、肝硬化和正常肝脏组织中IL-18BP的表达;探讨IL-18BP在慢乙肝、肝硬化及肝癌发病过程中的作用.方法:ELISA法检测肝癌25例、肝硬化20例、慢乙肝20例、正常人15例血清中IL-18BP的浓度.利用sP免疫组化染色法检测同期肝癌患者癌组织、癌周组织各41例;肝硬化组织11例;慢乙肝组织9例;正常5例(肝囊肿患者的正常肝组织)肝脏组织IL-18BP表达.结果:正常组、慢乙肝组、肝硬化组和肝癌组血清中IL-18BP的浓度分别为(3.3±0.5),(6.2±1.5),(14.9±1.4),(20.4±1.9)ug/L,4组间两两比较均有显著的统计学差异(P<0.01).肝癌的癌周组织、癌组织、肝硬化组织和慢乙肝组织阳性表达率分别为97.6%,34.2%,36.4%和22.2%:正常肝组织表达量极少;癌周组织评分值分别与癌组织、慢性肝炎组织、肝硬化组织比较有统计学差异(P<0.01).结论:随着炎症的进展,血清IL-18BP含量逐渐升高,但肝癌患者血清中IL-18BP含量最高.组织学检测结果提示肝癌癌周组织及癌组织中残存的肝细胞大量表达IL-18BP,肝癌组织有一定量的表达.IL-18BP高表达除受炎症因素的调控外,可能还参与调控肿瘤的生成和发展,血清或/和肝组织中IL-18BP水平检测,可能有助于疾病的早期诊断及预后评估.     

高尔基体蛋白73在原发性肝癌中的表达及其临床意义

【目的】研究高尔基蛋白73(GP73)在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义。【方法】采用免疫组织化学法检测47例原发性肝癌、35例癌旁及19例正常肝脏组织中的GP73,同法检测肝癌组织中的AFP。【结果】GP73在原发性肝癌、癌旁及正常肝脏组织中的阳性率分别为80.9%、34.3%、5.3%,肝癌组织中GP73阳性率与其他组织比较,差异有统计学意义(P<0.05);GP73表达与肝癌是否合并有肝硬化及淋巴结转移有关(P<0.05);肝癌组织中GP73阳性率为80.9%,AFP阳性率为59.6%;GP73和AFP两者联检敏感性有显著提高,达95.7%,与单一GP73或AFP相比敏感性有显著差异(P<0.05,P<0.01),而特异性无显著差异(P>0.05)。【结论】肝癌组织中GP73表达增加,GP73可能与肝癌的发生发展有关,GP73和AFP联合检测对肝癌的早期诊断具有良好的临床应用价值。     

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在原发性肝癌组织中表达的初步研究

目的 以原发性肝癌患者 （未发生临床远处转移）为研究对象,对半胱氨酸蛋白酶抑制剂C （cystatin C）在原发性肝癌组织中的表达做初步研究。方法 建立原发性肝癌组(n=41)、肝硬化组(n=24)和正常健康对照组(n=40)。比较肝癌组 （癌组织、癌旁组织、远癌组织）与肝硬化组肝组织中cystatin C的表达,比较各组外周血中cystatin C的水平,并同时进一步就癌组织cystatin C表达强度与肿瘤大小、肝内转移情况,及血清甲胎蛋白(AFP)水平做相关性分析。结果 原发性肝癌所有癌组织切片中cystatin C表达均呈阳性反应。部分癌旁组织、远癌组织和肝硬化组织切片中有不同程度cystatin C表达。秩和检验结果显示,肝组织中各组cystatin C表达差异具有统计学意义 （P<0.01）,cystatin C在肝组织中阳性细胞比例、染色强度和以上两者乘积的表达均为:肝癌组织＞癌旁组织＞肝硬化组织＞远癌组织。血清cystatin C水平比较显示,原发性肝癌组与肝硬化组均高于正常健康对照组,差异具有统计学意义 （P<0.001）,而肝癌组与肝硬化组之间差异无统计学意义 （P=0.769）。相关性分析显示,肝癌组织中cystatin C表达程度 （阳性细胞比例分值,染色强度分值）同血清AFP水平、肿瘤大小、肝内转移情况无特殊相关。结论 在未发生远处转移的原发性肝癌患者,癌组织中cystatin C表达增强,高于癌旁组织、肝硬化组织及远癌组织,同时血清中cystatin C水平也高于正常健康对照。因此检测组织或血中cystatin C表达水平对判断原发性肝癌不同的疾病阶段具有一定意义。     

AFU与AFP联合检测在肝脏疾病中的应用价值

目的:分析血清甲胎蛋白(AFP)与a-L-岩藻苷酶(AFU)在诊断及治疗原发性肝癌中的价值。方法:分别检测原发性肝癌、乙肝病毒携带者(大三阳)及正常组患者的血清标本中的AFU与AFP,并进行比较。结果:肝癌患者中AFP与AFU的表达率明显高于肝炎患者,病毒携带者中两项指标高于正常组,联合检测率高于单一检测。结论:AFU与AFP对原发性肝癌诊断具有重要价值,联合检测优于单一检测。     

原发性肝癌患者血清胆碱酯酶活性的临床意义

目的：探讨血清胆碱酯酶活性在原发性肝癌诊断和预后中的价值。方法：比较15例原发性肝癌患者首次检出时、手术后、转移后及和15例对照组血清胆碱酯酶(CHE)活性水平；并对原发性肝癌患者在不同时期的CHE活力和AFP含量作相关回归分析。结果：原发性肝癌患者CHE活力水平：转移后＜手术前＜手术后，且均小于正常对照组(P＜0．01)。15例原发性肝癌患者不同时期的CHE活性水平与AFP含量均呈负相关(P＜0．01)。结论：CHE活性可作为原发性肝癌诊断和预后的一个敏感指标，对估计肝脏的储备功能。了解病情变化及预后判定具有一定的临床价值。     

原发性肝癌组织中LASP-1 mRNA和HPA-1 mRNA表达水平及其临床意义

目的定量检测LIM和SH3蛋白1（LASP-1）mRNA和乙酰肝素酶-1（HPA-1）mRNA在原发性肝癌组织中的表达水平,探讨二者与肝癌发生、侵袭和转移的关系。方法利用实时荧光定量PCR检测法分别检测62例原发性肝癌癌组织、配对癌旁组织（距癌2cm）和正常肝脏组织（距癌大于5cm）中LASP-1mRNA和HPA．1mRNA的表达水平,并分析二者与肝癌临床病理特征的关系。结果肝癌组织、癌旁组织、正常肝组织中HPA-1mRNA表达水平分别为47．25±16．65、23．15±14．89、7．56±5．15,LASP-1mRNA的表达水平分别为51．66±20．12、35．73±15．07、10．17±8．29。HPA-1mRNA及LASP-1mRNA在癌组织中的表达高于癌旁组织和正常组织（P均〈0．05）。HPA-1及LASP-1的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期密切相关（P〈0．05,P〈0．01）,与患者年龄、性别及肿瘤大小无关（P均〉0．05）。Spearman等级相关分析显示LASP-1mRNA和HPA-1mRNA的表达呈正相关（OR=0．421,P〈0．05）。结论肝癌组织中LASP-1mRNA与HPA-1mRNA的表达与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移及TNM分期等密切相关。二者联合表达水平的增加可能促进肝癌的侵袭转移。     

GP73与AFP-L3联合检测在原发性肝癌诊断中的临床价值

目的：探讨高尔基体蛋白73（GP73）和甲胎蛋白异质体3（AFP-L3）联合检测在原发性肝癌诊断中的临床价值。方法：采用免疫组化法和酶联免疫法检测原发性肝癌组（PHC组,n=45例）、肝硬化组（LC组,n=35例）和病毒性肝炎组（VH组,n=36例）患者肝组织和血清GP73、AFP-L3和AFP的表达水平,选择同期40例门诊正常体检者作为对照组。观察各组肝组织和血清GP73、AFP-L3和AFP的表达水平,并比较GP73、AFP-L3、AFP单一检测和GP73联合AFP-L3检测原发性肝癌的阳性率。结果：PHC组肝组织和血清GP73、AFP-L3和AFP表达水平明显高于LC组和VH组（P〈0.05）;PHC组AFP-L3和GP73单项检测阳性率（分别为68.9%、77.8%）均明显高于AFP检测阳性率（62.2%）（P〈0.05）,两指标联合血清检测可提高阳性率（86.7%）（P〈0.05）。结论：GP73和AFP-L3联合血清检测可提高原发性肝癌诊断阳性率,对原发性肝癌的早期诊断具有重要的临床意义。     

AFP、AFU、CA19-9和GGT在原发性肝癌诊断中的临床价值

目的探讨甲胎蛋白(AFP)、α-L岩藻糖苷酶(AFU)、糖类抗原19-9(CA19-9)和γ-谷氨酰转肽酶(GGT)在原发性肝癌诊断中的临床价值。方法对我院就诊的30例原发性肝癌患者、40例肝炎、肝硬化、40例健康对照组血清AFP、AFU、CA19-9和GGT的浓度及阳性率进行检测,并对比分析。结果 AFP、AFU、CA19-9和GGT在原发性肝癌的浓度均明显高于肝炎、肝硬化组及正常对照组(P<0.01)。而AFP、AFU、CA19-9和GGT在肝炎、肝硬化组的浓度也明显高于正常对照组(P<0.05)。AFP、AFU、CA19-9和GGT在原发性肝癌组织中的阳性率明显高于肝炎、肝硬化组的阳性率(P<0.05)。但在正常组织中的阳性率均为0。且AFP、AFU、CA19-9和GGT四项指标联合检测阳性率明显高于任意指标单独检测的阳性率(P<0.05)。AFP阳性率随着肿瘤组织的直径增大,其阳性率明显增加,其他未见明显差异。结论 AFP、AFU、CA19-9和GGT联合检测可提高原发性肝癌诊断的阳性率,对原发性肝癌的早期诊断治疗和预后均有重要的临床应用价值。     

血清GGT、AFU、ALP及AFP检测对肝癌的临床价值

目的：探讨谷氨酰氨基转移酶（GGT）、α-L-岩藻糖苷酶（AFU）、碱性磷酸酶（ALP）以及甲胎蛋白（AFP）对肝癌的诊断价值。方法：GGT采用速率法,AFU、ALP采用酶法,AFP用酶联免疫法,分别测定原发性肝癌组56例、转移性肝癌组64例、其他肝病组50例与正常对照组77例血清标本中GGT、AFU、ALP及AFP含量,结果均采用统计学方法分析。结果：原发性肝癌组、转移性肝癌组中GGT、AFU、ALP、AFP含量显著高于其他肝病组和正常对照组（P〈0.01）;其诊断肝癌（包括原发与转移）的阳性率分别为87.7％、78.9％、85.6％、65.3％和70.3％、45.4％、80.3％、57.3％,与其他肝病组和正常对照组阳性率比较,差异有高度统计学意义（P＜0.01）。四个指标联合应用对原发性肝癌和转移性肝癌的阳性率分别为97.2%和82.6%,与其他肝病组和正常对照组阳性率比较,差异有高度统计学意义（P＜0.01）。结论：GGT、AFU、ALP及AFP联合检测可以明显提高肝癌诊断的准确性。     

肝细胞性肝癌中Caspase-3和PCNA的表达

目的探讨Caspase-3和PCNA在肝细胞肝癌的表达及其在肝细胞肝癌发生、发展中的作用。方法应用组织芯片技术和免疫组化方法（sP法）检测95例肝细胞肝癌组织、68例癌旁组织和19例正常肝组织中Caspase-3和PCNA的表达。结果Caspase-3在肝细胞肝癌中表达阳性率（34．7％）显著低于癌旁组织（79．4％，P〈0．01）和正常肝组织（84．2％，P〈0．01）；Caspase-3的表达与肝细胞肝癌的组织分级和HBsAg有关（P〈0．01，P〈0．05），与患者年龄、性别、肿瘤大小和转移无关（P〉0．05）。PCNA在肝细胞肝癌中的表达阳性率（68．4％）显著高于癌旁组织（26．5％，P〈0．01）和正常肝组织（15．8％，P〈0．01）；PCNA的表达与患者组织分级、转移有关（P〈0．01，P〈0．05），与年龄、性别、肿瘤大小、和HBsAg无关（P〉0．05）。在肝癌组织中Caspase-3与PCNA的表达呈显著负相关（r=-0．598，P〈0．001）。结论肝细胞肝癌中Caspase-3的低表达与PCNA的高表达在肿瘤的发生、发展过程中可能起重要作用。     

原位移植人肝癌裸鼠模型AFP基因甲基化状态与其表达的关系

【目的】探讨原位移植人肝癌模型肝癌组织中，AFP基因启动子区的甲基化状态同其异常表达的关系。【方法】采用甲基化特异性PCR（MSP）和亚硫酸氢盐测序法（BSP）分析模型肝癌组织中AFP基因启动子区甲基化状态；RT-PCR及Western Blotting两种方法检测AFP基因在转录水平和翻译水平的表达情况。【结果】10例肝癌模型的肝癌组织均有AFP基因mRNA和蛋白的表达（100％），AFP基因启动子区部分CG位点发生异常甲基化，其中－2431、－2494两个位点低于正常对照（P〈0．01）。【结论】AFP基因启动子区甲基化程度与其表达成负相关（P〈0．01）。     

TYMS基因在64例肝癌患者中的表达

目的分析胸苷酸合成酶(Thymidylate synthetase,TYMS)基因在原发性肝癌中的表达及其临床意义。方法应用荧光定量PCR技术,对64例原发性肝癌TYMS基因进行扩增,免疫组化对照。结果在64例肝癌中有28例表达TYMS,占43.8%,拷贝数中位数M=3.55×104copies/mL,TYMS基因拷贝数对数(Log copies)与免疫组化分值有相关性,r=0.97,其中高拷贝(1.0×105)表达有7例(10.9%),中拷贝((1.0~10)×104)表达有10例(15.6%),低拷贝(10×103)表达有11例(17.2%),TYMS的表达与肿瘤大小、生存期(术后1年)、是否癌旁组织差异有统计学意义(P0.05),而与病理类型、AFP水平、HBV-DNA差异无统计学意义(P0.05)。结论荧光定量PCR技术可替代免疫组化方法检测TYMS基因的表达,TYMS基因在原发性肝癌有表达,对肿瘤生长和转移中有促进作用,可作为原发性肝癌的靶向治疗证据。     

AFP联合三项血清酶对原发性肝癌的诊断评价

目的探讨甲胎蛋白（AFP）联合γ-谷氨酰转肽酶（GGT）、碱性磷酸酶（ALP）、乳酸脱氢酶（LDH）对原发性肝癌的诊断价值。方法分别测定原发性肝癌患者和肝硬化患者各200例AFP、GGT、ALP、LDH血清含量,比较两组血清酶学指标水平差异,分析单项检测AFP及联合检测对原发性肝癌的诊断价值。结果原发性肝癌血清AFP、GGT、ALP、LDH水平与肝硬化组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）,AFP、GGT、ALP、LDH单项检测在原发性肝癌患者中的阳性率分别为81%、67.5%、60%、35.5%,四项指标联合检测原发性肝癌阳性率达93%,明显高于单项检测（P〈0.05）。结论AFP、GGT、ALP、LDH联合检测可提高原发性肝癌的诊断阳性率。     

GDF15在前列腺癌及其癌前病变中的表达和意义

目的探讨前列腺癌及癌前病变组织中GDFl5基因的表达情况及临床意义。方法运用组织芯片技术及免疫组化SP法检测72例前列腺癌组织（PCa组,其中Gleason评分5～7分42例,〉7分30例）、22例高级别前列腺上皮内瘤组织（PIN组）、23例良性前列腺增生组织（BPH组）中GDFl5蛋白的表达和分布情况。结果GDFl5在PCa、PIN、BPH组中的阳性表达率分别为95．8％、727％、87％;其在PCa及PIN组织中的阳性表达率均明显高于BPH组织（均P〈0．05）,而且在PCa组织中的阳性表达率也明显高于PIN组织（P〈0．05）。中分化PCa组织中GDFl5阳性表达率为92．9％（39／42）,低分化PCa组织中为100．0％（30／30）,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论GDFl5在前列腺癌中高表达,对前列腺癌的发生、发展可能起到重要作用。检测GDFl5在正常前列腺组织、高级别PIN、前列腺癌组织中的表达情况。有助于病理学上早期诊断前列腺癌。     

多肿瘤标志物蛋白芯片检测对原发性肝癌的诊断价值

【目的】探讨12种肿瘤标志物（testingmulti—tumor，TM）联合检测对原发性肝癌的诊断价值。【方法】应用蛋白芯片技术（C-12）定量测定62例原发性肝癌患者、53例良性肝病患者血清中糖类抗原-199（CA199）、神经原特异性烯醇化酶（NSE）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原-242（CA242）、铁蛋白（SF）、β-绒毛膜促性腺激素（β-HCG）、甲胎蛋白（AVP）、游离前列腺特异性抗原（Free—PSA）、前列腺特异性抗原（PSA）、糖类抗原125（CA125）、人生长激素（HGH）、糖类抗原-153（CA153）等12种TM的浓度。【结果】通过12种TM联合检测将原发性肝癌组阳性检出率提高到了100％；良性肝病组阳性检出率为22．6％；原发性肝癌组的TM测定值明显高于良性肝病组，有显著性差异，其中AFP最为显著（P〈0．001），其次为CA199、CEA、CA125（P〈0．01）；CA242、SF、β—HCG（P〈0．05）。两组比较无统计学意义为NSE、Free—PSA、PSA、HGH、CA15—3（P〉0．05）。原发性肝癌组TM阳性检出率由高到低依次为：AFP〉CA199〉SF〉CA125〉CEA〉CA242〉β—HCG〉CA153。【结论】应用12种TM联合检测原发性肝癌、良性肝病，可以为临床诊断提供更多的指标，提高辅助诊断的准确性，弥补单一TM特异性不强和敏感性较低的不足，有效地筛选出肿瘤高危人群，对原发性肝癌的早期发现、早期诊断具有重要意义。