血脉宁颗粒对血管内皮细胞表面p-选择素表达影响

目的：研究血脉宁颗粒对血管内皮细胞(ECV)表面p-选择素表达的影响，以探讨血脉宁保护血管内皮细胞的机理。方法：应用高脂饲料加地塞米松注射方法造成高脂血证大鼠模型，制作高脂血清及血脉宁含药血清；以高脂血清、高脂血清加含药血清培养内皮细胞；流式细胞术检测内皮细胞表面p-选择素表达。结果：造模组大鼠血脂明显高于对照组；造模组血管内皮细胞表面p-选择素表达明显增高，且6h组高于12h组；血脉宁组内皮细胞表面p-选择素表达明显低于造模组。结论：高脂血清可损伤ECV，使ECV表面p-选择素表达增高；血脉宁含药血清可以使损伤的ECV表面p-选择素表达下降；血脉宁具有保护损伤ECV的作用，其机理与其降低ECV表面p-选择素表达有关。     

血脉宁对血管内皮细胞p-选择素表达影响

目的观察血脉宁颗粒对血管内皮细胞（VEC）p-选择素（p—selectin）表达的影响，以探讨血脉宁保护血管内皮细胞的机理。方法以高脂血清、高脂血清加含药血清培养内皮细胞；ELISA法检测培养上清液p—selectin，流式细胞术检测内皮细胞表面p-选择素表达，RT—PCR检测p—selectinmRNA表达，Western—Bloting检测p—selectin蛋白。结果造模组血管内皮细胞表面p-选择素表达明显增高；血脉宁组内皮细胞表面p-选择素表达明显低于造模组。结论高脂血清可损伤ECV，增高ECV表面p-选择素表达；血脉宁含药血清可以使损伤的ECV表面p-选择素表达下降，具有保护损伤ECV的作用，其机理与其降低ECV表面p-选择素表达有关。     

血脉宁对血管内皮细胞的保护及E-选择素的影响

目的:研究血脉宁颗粒对血管内皮细胞(ECV)的保护及E-选择素(E-selectin)表达的影响,以探讨血脉宁保护血管内皮细胞的机理。方法:以高脂血清、高脂血清加含药血清培养内皮细胞;ELISA法检测培养上清液vWF、TXB2、PGI2含量,RT-PCR检测E-Selectin mRNA表达,West-ern-Bloting检测E-Selectin蛋白。结果:造模组ECV vWF、TXB2增加、PGI2下降、E-选择素表达明显增高;血脉宁组vWF、TXB2低于造模组、PGI2高于造模组、E-选择素表达明显低于造模组。结论:血脉宁含药血清可以使高脂血清损伤的ECV vWF、TXB2含量下降、PGI2含量升高、E-选择素表达下降;血脉宁具有保护损伤ECV的作用,其机理与其降低vWF、调整TXB2、PGI2含量、降低ECV E-选择素表达有关。     

血府逐瘀汤促血管新生中VEGF通路的作用研究

目的:探讨VEGF通路在血府逐瘀汤促血管新生中的作用.方法:运用血清药理学方法,以1.25％,2.5％,5％的血府逐瘀汤含药血清和空白血清诱导处理血管内皮细胞ECV304,分别采用MTT比色法,Boyden小室迁移法和体外成血管实验检测内皮细胞增殖、迁移和成血管能力,并通过酶联免疫法、免疫组化和RT-PCR检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR2)分泌和表达的情况.结果:1.25％含药血清除了能提高体外成血管能力外,对其余指标均无影响;2.5％含药血清明显促进内皮细胞增殖、迁移及成血管,并能显著提高VEGF及VEGFR2的表达;5％含药血清仅上调胞内VEGF的表达,进而促进内皮细胞的迁移和黏附.结论:血府逐瘀汤通过上调VEGF-VEGFR2途径,诱导内皮细胞增殖、迁移和血管形成,部分说明了药物促血管新生的作用机制.     

当归及阿魏酸钠对内皮细胞中TGFβ_1及bFGF表达的影响

检测高脂血清 (HL S)对内皮细胞 TGFβ1 、b FGF表达的影响 ,并观察当归、阿魏酸钠的作用。采用培养人脐静脉内皮细胞 (ECV30 4) ,以高脂血清损伤 ,扫描电镜观察内皮细胞形态变化 ,免疫细胞化学方法观测 TGFβ1 及b FGF的表达。结果 ,高脂血清明显损害内皮细胞的超微结构 ,TGFβ1 的表达明显降低 ,b FGF的表达明显增高 ;这种作用可以被当归、阿魏酸钠所逆转。当归及其有效成份阿魏酸钠对内皮细胞 TGFβ1 、b FGF表达的影响可能为其抗动脉粥样硬化的机理之一。     

血脉宁对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性及内皮功能的影响

目的:研究具有祛痰化瘀作用的中药复方血脉宁对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性及内皮功能的影响.方法:用高脂饲料喂养,造成大鼠胰岛素抵抗模型,分别于实验前后检测大鼠空腹血糖、血脂、空腹胰岛素浓度及大鼠血液一氧化氮、内皮素的改变.结果:血脉宁组实验前后IRI、ISI差异显著,P＜0.05;血脉宁组TG低于模空组,P＜0.05;ET低于模空组,P＜0.01.NO明显高于模空组,P＜0.01.结论:血脉宁可以降低IR大鼠的高脂血症,改善IR大鼠的胰岛素抵抗现象,并且调整IR大鼠血液ET、NO的变化,进而改善内皮细胞功能.     

尿酸利仙含药血清对TNF-α介导内皮细胞增殖的影响

目的:H-细胞水平探讨尿酸利血含药血清对TNF-α介导的内皮细胞增殖的影响.方法:用MTT法测定不同浓度(0～3000u/ml)的肿瘤坏死因子-α对人血管内皮细胞(Endothelial cell of vessels,ECV)增殖的影响和不同浓度(1%～5%)的尿酸利仙含药血清对中浓度(900u/ml)TNF-α介导ECV增殖的作用.结果:与Ou/ml浓度组相比,浓度为900u/ml TNT-α对ECV增殖有促进作用,浓度为3000u/ml TNF-α对ECV增殖有抑制作用,与同一血清浓度的TNF-α组相比,2%、5%含药血清组对中浓度TNF-α介导ECV增殖有抑制作用.结论:尿酸利仙含药血清能降低TNT-α活性,起保护内皮细胞的作用.     

水蛭素对糖尿病肾病大鼠脂代谢及血液流变学的影响

目的：探讨水蛭素对糖尿病肾病大鼠脂代谢紊乱及血液流变学的影响。方法：选择70只雄性SD大鼠（无特定病原体级）,采用随机法分为空白组（10只）、造模组（60只）。造模组以高糖高脂喂养联合链脲佐菌素建立糖尿病肾病大鼠模型,选取50只造模成功的大鼠随机分为模型组、贝那普利组、水蛭素（低、中、高）组。灌胃给药15周后,收集大鼠血液标本,检测大鼠脂代谢指标（血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白）及血液流变学指标（全血低切黏度、全血高切黏度、血浆黏度、纤维蛋白原）。结果：与空白组相比,模型组大鼠血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白值及血液流变学指标均显著升高（P <0.05）,高密度脂蛋白值显著降低（P <0.05）;与模型组相比,水蛭素中、高剂量组大鼠血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白值及血液流变学指标均显著改善（P <0.05）。结论：水蛭素可以改善糖尿病肾病大鼠模型脂代谢紊乱及血液流变学。     

高脂饮食联合链脲佐菌素诱导2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠模型的建立

目的:高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠模型。方法:大鼠随机分为正常对照组和造模组,造模组大鼠喂饲高脂高糖饲料诱导4周后,腹腔注射STZ 30 mg·kg-1并继续高脂饮食进行造模。造模8周后,测定大鼠空腹血糖(FBG)及胰岛素含量,并计算胰岛素敏感指数(ISI),同时测定各组大鼠的肝功水平。将造模成功的大鼠根据血糖水平分为模型组、盐酸二甲双胍组。连续给药4周即造模12周后进行大鼠糖耐量试验,测定血清生化指标和肝脏脂质含量;另取部分肝脏组织进行病理学检测。结果:注射STZ后,造模组大鼠出现明显的体重下降、多饮多尿的糖尿病症状。造模8周和12周后,与正常对照组比较,模型组大鼠ISI明显下降;FBG和血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性明显升高。给药4周后,与模型组相比,盐酸二甲双胍组大鼠ISI明显升高,糖耐量(AUCG)、FBG、血清ALT活性以及肝脏中总胆固醇(TC)含量均明显降低。结论:利用高脂高糖饲料喂养配合腹腔注射STZ可以成功建立2型糖尿病与非酒精性脂肪肝大鼠模型。     

加减清营汤对H2O2损伤的血管内皮细胞存活率和SOD活力的影响

目的:观察加减清营汤对H2O2损伤的血管内皮细胞存活率和SOD活力的影响。方法:体外培养内皮细胞ECV304,用380μmol/LH2O2损伤细胞,随机分成正常组、模型组、血清对照组、丹参组、加减清营汤含药血清组。用血清药理学方法给药,继续培养后应用MTT法观察细胞存活率,检测SOD。结果表明:加减清营汤含药血清组MTT的OD值在24h点高于H2O2模型组(P<0.01),与血清对照组无明显差异(P>0.05),36h后与血清对照组有明显差异(P<0.01)。加减清营汤含药血清组SOD值高于模型组、血清对照组(P<0.01)。结论:加减清营汤可降低H2O2对ECV304的损伤程度,其机理可能与抗氧化作用有关。     

祛胰抵方对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠血清瘦素、脂联素的影响

目的:观察祛胰抵方对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠瘦素、脂联素的影响,探究其改善胰岛素抵抗的可能机制。方法:将80只雄性Wistar大鼠随机分为5组,正常组,模型组,阳性对照组,低、中、高剂量祛胰抵方组,采用喂饲高脂饲料及腹腔注射链脲佐菌素复制2型糖尿病胰岛素抵抗模型,分组给药12周。给药前后采用放免法检测血清瘦素(LEP)和脂联素(ADP)水平。结果:与正常组比较,其余各造模组大鼠血清ADP水平明显降低,LEP水平明显升高;祛胰抵方中、高剂量组及阳性组给药后ADP水平明显升高,LEP水平明显降低,与模型组及各组给药前比较差异显著。结论:祛胰抵方可能通过调节LEP、ADP水平改善2型糖尿病胰岛素抵抗。     

加减清营汤对H2O2损伤的人脐静脉内皮细胞ECV304 VEGF表达的影响

目的:观察加减清营汤对H2O2损伤的人脐静脉内皮细胞(ECV304)VEGF表达的影响。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(ECV304),随机分成正常组、模型组、血清对照组、阳性药物对照组、加减清营汤含药血清组。加减清营汤含药血清组用加减清营汤含药血清进行干预。用380μmol/L H2O2损伤细胞,培养24h后收集细胞总蛋白,用Western-blotting法检测VEGF表达水平。结果:氧化应激状态下ECV304 VEGF的表达有所增加,加减清营汤含药血清则能显著提高VEGF的表达以有效应对氧化损伤。结论:加减清营汤能促进H2O2氧化损伤的血管内皮细胞的代偿性修复。     

四妙勇安汤抑制中性粒细胞-内皮细胞黏附的实验研究

目的： 探讨四妙勇安汤对于凝血酶处理的内皮细胞与中性粒细胞黏附及内皮细胞P-选择素表达的影响。方法： MTT法检测四妙勇安汤以生药22.5 g·kg^-1·d^-1,ig 7 d制备含药血清对于内皮细胞活力的影响,EA.hy926细胞加入0.2 U·mL^-1凝血酶、中性粒细胞作为模型组,2.5%,5%,10%,20%四妙勇安汤含药血清预处理内皮细胞24 h后造模为干预组。虎红法检测细胞黏附率,流式细胞术、ELISA检测内皮细胞P-选择素的表达。结果： 空白组与空白对照组在各项检测中均无显著性差异;10%,20%含药血清组对黏附率有抑制作用,10%组效果较好;ELISA结果显示10%含药血清组预处理组能抑制P-选择素的表达,其他3个干预组则无差异;流式细胞术检测10%,20%含药血清组对于细胞表面P-选择素有抑制作用,10%含药血清组效果最好。结论： 四妙勇安汤能抑制中性粒细胞、内皮细胞的黏附,这一作用可能是通过抑制内皮细胞P-选择素的表达来实现的。     

复方首乌颗粒对高脂血症大鼠肠系膜微循环的影响

目的 探讨中药复方首乌颗粒对髙脂血症大鼠血脂及肠系膜微循环的影响,为临床用药提供科学依据.方法 将60只Wistar大鼠随机分为正常对照组10只,造模组50只.造模组给予高脂饲料30 d,造模成功后,随机分为高脂模型组和复方首乌颗粒高、中、低剂量组,阳性药物对照组.分别给予生理盐水、复方首乌颗粒高、中、低剂量和绞股蓝总苷片灌胃4周,观察用药后实验动物的血脂各项指标和肠系膜微循环的改变.结果 模型组大鼠血清TC,TG,LDL-C均显著高于正常组,HDL-C显著低于正常组;肠系膜微循环观察发现治疗组血管口径、血流速度较高脂血组明显提高,毛细血管开放数明显增加.结论 复方首乌颗粒能明显降低髙脂血症大鼠血脂,改善其肠系膜微循环障碍.     

中药糖心宁口服液对血管平滑肌细胞原癌基因C-myc和C-fos表达的影响

目的:从分子生物学水平探讨中药糖心宁口服液防止糖尿病源性动脉粥样硬化(AS)发生以及对糖尿病性冠心病的防治机理.方法:将高糖培养的兔血管平滑肌细胞(VSMC)分别加入含糖心宁药物血清(分高、中、低剂量)及含鲁南欣康药物血清,并以不含药血清作为对照,采用Northern印记杂交技术观测各组不同药物血清对原癌基因C-myc和C-fos表达的影响.结果:高糖持续刺激平滑肌细胞一定时间后,C-myc和C-fos基因表达量分别较正常对照组明显增强;在含药血清组中,不同剂量组糖心宁药物血清可呈剂量依赖性地抑制平滑肌细胞C-myc和C-fos的表达;与含鲁南欣康药物血清的西药对照组相比,中剂量组糖心宁药物血清即可达到西药对照组对C-myc和C-fos基因表达的抑制作用.结论:提示高糖可促进血管平滑肌细胞原癌基因C-myc和C-fos的表达,而糖心宁药物血清可呈剂量依赖性地抑制高糖促C-myc和C-fos基因表达的作用,从而抑制血管平滑肌细胞增殖,这是糖心宁防治糖尿病源性动脉粥样硬化以及糖尿病性冠心病的重要机制之一.     

中药含药血清对尿酸盐诱导的人血管内皮细胞ICAM-1表达的影响

目的观察中药尿酸利仙(含药血清)对尿酸盐诱导的人血管内皮细胞(endothelial cell of vessels, ECV)细胞间黏附分子-1(intercelluar adhesion molecule,ICAM-1)基因和蛋白表达的影响.方法1070μmol/L尿酸盐溶液刺激血管内皮细胞,同时用含不同浓度(2.5%、5.0%、10.0%)中药含药血清的培养液进行干预,分别用流式细胞术(FCM)、逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术测定细胞ICAM-1的表达.结果①血管内皮细胞在尿酸盐刺激下,ICAM-1基因和蛋白表达均较空白对照组显著上调.② 5.0%浓度中药尿酸利仙含药血清可显著抑制尿酸盐诱导的血管内皮细胞ICAM-1基因表达(P＜0.01);2.5%、10.0%浓度的尿酸利仙含药血清均可显著抑制ICAM-1蛋白表达(P＜0.01).结论中药尿酸利仙含药血清抑制ICAM-1表达的作用是减轻尿酸盐诱导的人血管内皮细胞炎症损伤的机制之一.     

清络通痹颗粒对胶原性关节炎大鼠以及血管内皮细胞增殖的影响

目的 观察清络通痹颗粒(QLT)时胶原性关节炎大鼠血液流变学,外周血IL-1表达的影响以及对血管内皮细胞增殖的影响.方法 制备胶原性关节炎大鼠模型(CIA),检测QLT对胶原性大鼠血液流变学和外周血IL-1的影响,MTT比色法检测QLT含药血清对血管内皮细胞增殖的影响.结果 QLT 7.2,14.4g/kg剂量组全血粘度及血浆黏度、外周血IL-1表达水平与模型组相比有明显降低,并且可显著抑制ECV304细胞的增殖.结论 QLT3个剂量组可不同程度降低全血黏度和血浆黏度,从而达到活血化淤的作用;抑制血管内皮细胞的增殖,从而达到抑制血管增生和血管生成,这可能是清络通痹颗粒治疗RA的重要机制.     

电针结合莫沙必利对糖尿病胃轻瘫大鼠胃动力的影响

目的:观察电针"足三里"结合莫沙必利灌胃对糖尿病胃轻瘫(DGP)模型大鼠胃排空率及胃运动的影响.方法:采用随机数字表法将68只雄性SD大鼠分为空白组(12只)和造模组(56只),造模组大鼠采用腹腔注射链脲佐菌素配合高脂高糖饮食制备DGP模型.6周后,将造模成功的造模组大鼠随机分为模型组、电针组、莫沙必利组、针药结合组,...     

四妙勇安汤对人脐静脉血管内皮细胞ECV304的增殖作用

目的:以血清药理学的方法观察血四妙勇安汤对于培养人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响,为治疗性血管新生的靶基因选择提供线索。方法:取对数生长期的内皮细胞,同步化于G0期,ELISA法检测BrdU的掺入;用流式细胞仪分析细胞周期各时相分布。结果:与空白血清对照组相比,10%的四妙勇安汤含药血清体积添加分数可显著提高BrdU的掺入量,促进DNA合成,提高ECV304细胞周期S期所占比例。结论:10%的四妙勇安汤含药血清能促进内皮细胞ECV304DNA合成,加快细胞周期进程,从而对其增殖具有促进的作用,可能具有血管生成的作用。     

高脂血清对血管内皮细胞的损伤及E选择素的影响

目的：研究高脂血清对血管内皮细胞（VEC）的损伤以及对E选择素（E-Selectin，Es）的影响，探讨体外VEC损伤模型的方法，为进一步开展防治动脉粥样硬化（AS）的研究奠定基础。方法：以高脂饲料加地塞米松注射的方法，复制高脂血症大鼠；以此高脂血清培养VEC，酶联免疫法（ELISA）检测培养上清液的血管性血友病因子（von Willebrand Factor，vWF）含量；观察普通光镜、透射电镜下内皮细胞形态；RT-PCR检测Es mRNA表达；Western-Bloting检测Es蛋白的表达。结果：高脂血清致VEC形态损伤，VEC培养上清液vWF含量增加，Es mRNA表达及蛋白表达增加。结论：血管内皮细胞Es表达增加是VEC损伤机理之一。