甲氨喋呤不同用药次数对小细胞肺癌的疗效及毒性观察

小细胞肺癌(SCLC)约占肺癌10％～25％,其生长速度快,恶性程度高,易早期出现转移,但对化疗高度敏感,临床报道有效率可达60％～90％。COME方案是目前国内治疗小细胞肺癌较早、较常用的联合化疗方案之一,其疗效肯定,毒副作用较轻,且费用低廉,但在COME方案中,甲氨喋呤(MTX)所致的口腔炎较常见,影响患者的进食及生活质量。     

Hsp70.1在冬凌草甲素处理的肝癌细胞中的作用研究

目的 研究Hsp70.1在冬凌草甲素处理后的肝癌细胞HepG2中的表达情况及其与冬凌草甲素抗肿瘤活性的关系。方法 采用蛋白印迹法及实时荧光定量PCR技术观察Hsp70.1在冬凌草甲素处理的肝癌细胞HepG2的表达变化,并采用RNA干扰技术观察抑制Hsp70.1表达后对冬凌草甲素抗肝癌效果的影响。结果 冬凌草甲素作用12 h后,HepG2细胞的Hsp70.1蛋白及RNA表达均增加。Hsp70.1 短发夹RNA（shRNA）转染抑制Hsp70.1表达后,与对照组相比,Hsp70.1 shRNA转染组、冬凌草甲素处理组或两者联合应用组的HepG2细胞的存活率均明显降低。 结论Hsp70.1可促进HepG2细胞的生存,对HepG2细胞和冬凌草甲素处理的HepG2细胞具有保护作用。     

不同剂量甲氨喋呤预防儿童髓外白血病的副作用

目的　比较大、中剂量甲氨喋呤疗法预防髓外白血病的副作用。②方法　 10 6例急性淋巴细胞白血病病儿中有 4 6例 (180例次 )接受中剂量甲氨喋呤疗法 ,6 0例 (35 0例次 )接受大剂量疗法 ,观察两组副作用发生情况。③结果　两组均有明显的消化道反应 ,中剂量组消化道黏膜炎发生率明显高于大剂量组 (χ2 =2 6 .71,P <0 .0 0 1)。两组均可出现罕见的中枢神经毒性。大剂量组少数病儿出现一过性肝脏、心脏毒性反应 ,极少数短期内骨髓复发。④结论　大剂量甲氨碟呤预防髓外白血病方法可靠、安全。但应高度重视其副作用 ,不宜作为骨髓的加强治疗药物     

四氢叶酸钙对解救ALL患儿首疗程大剂量甲氨喋呤毒性 …

目的：比较儿童急性淋巴细胞白血病大剂量甲氨喋呤－四氢叶酸钙（ＨＤ＿ＭＴＸ－ＣＦ）地的２种方案的毒副反应。方法：第１组（２４例）四氢叶酸钙（ＣＦ）总量为ＭＴＸ的６．８％,解救时间为静滴ＭＴＸ２５ｈ后开始;第２绷（３０例）ＣＦ剂量为ＭＴＸ的３．４％,解救时间为静滴ＭＴＸ３６ｈ后开始。结果;２组化疗后皮肤损害、ＧＰＴ升高、血小板下降,以及感染发生率,第２组较第１组显著。结论：方案２的毒副反应发生率与方案     

树突状细胞活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞对大鼠原发性肝癌细胞的体外杀伤

目的：研究负载肿瘤抗原的树突状细胞活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞对原发性肝癌细胞的杀伤效应,探讨其用于临床治疗的可行性,并为其应用提供实验依据。方法：联合应用粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子,白细胸介素－4和肿瘤坏死因子－a等,对大鼠骨髓单个核细胞进行体外诱导,同时加入大鼠原发性肝癌细胞株CBRH－7919细胞匀粗提物进行刺激,制备负载肿瘤抗原的树突状细胞后,活化同基因大鼠的 脾脏细胞,制备特异性细胞毒性T淋巴细胞,并采用MTT法检测效应细胞对CBRH－7919的杀伤效果,同时与效应细胞对K562的杀伤率进行比较。结果：大鼠骨髓单个核细胞诱导的负载肿瘤抗原的树突状细胞活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞对CBRH－7919具有较高的特异性杀伤作用。结论：负载肿瘤抗原的树突状细胞对原发性肝癌的治疗有潜在的临床应用前景。     

大剂量甲氨喋呤对小鼠骨髓基质细胞生物学特性的影响

目的：探讨大剂量甲氨喋呤（MTX）对小鼠骨髓基质细胞（BMSC）生物学特性的影响。方法：BALB／c小鼠按每千克的休重经尾静脉注射MTX0mg(对照组）、10mg（小剂量组）、40mg（大剂量组），化疗后取骨髓细胞进行分离培养，观察BMSC生长，成纤维细胞集落（CFU－F）（、BMSC层粘附率和造血细胞混合集落的变化。结果：小剂量组化疗后不同时间上述指标与对照组无明显差异，而大剂量组化疗后第7天开始出现BMSC层粘附率显著下降，第14天后出现生长减慢，CFU－F形成能力和造血支持功能降低，第35天仍低于正常，结论：大剂量化疗可导致BMSC损伤，且损伤持续时间较长。     

高浓度甲氨喋呤致培养小鼠骨髓基质细胞损伤的初步探讨

目的：探讨不同浓度甲氨喋呤（MTX）对培养小鼠骨髓基质细胞（BMSC）的影响。作用机制及其量效关系。方法：培养的BMSC中加入不同浓度MTX（对照组：0μmol/L；浓度Ⅰ组：0.01μmol/L；浓度Ⅱ组：0.1μmol/L；浓度Ⅲ组：1．0μmol/L），对BMSC形态学及生长情况，、成纤维细胞集落（CFU－F）数目、BMSC层粘附率和造血细胞混合集落生长情况等进行观察比较。结果：浓度Ⅰ组上述指标与对照组无明显差别，而浓度组Ⅱ和浓度Ⅲ组梭形成纤维细胞较对照组明显减少，生长曲线低平（P＜0．05，P＜0．01），CFU－F计数或粘附率均较正常组显著减少或降低（P＜0．01），造血细胞集落生长差，以浓度Ⅲ组改变最明显，结论：高浓度MTX可导致离体小鼠BMSC形态学改变，生长受抑制以及粘附功能和造血支持功能的损伤，其损伤作用在一定范围内呈浓依赖性。     

高强度聚焦超声及其联合甲氨喋呤对人膀胱癌细胞的体外效应

目的　研究高强度聚焦超声 (HIFU)及其联合甲氨喋呤 (MTX)对人膀胱癌细胞株T2 4的体外效应。方法　不同剂量HI FU单独及联合MTX作用T2 4细胞悬液后观察细胞存活率及生长增殖的变化。结果　一定剂量的HIFU可使T2 4细胞存活率直线下降并产生短暂的生长抑制作用 ;低剂量HIFU(11.5W/cm2 × 6秒 )可使MTX对T2 4细胞抑制率增加 ;HIFU(45 0W/cm2 × 6秒 )与MTX联合作用对T2 4细胞生长增殖的抑制作用明显强于单用HIFU及单用MTX。结论　在体外以空化、机械效应为主的HIFU对T2 4细胞具有急性致死及短暂的生长抑制作用 ;对MTX具有增敏作用 ;联合MTX作用具有协同效应。     

大剂量甲氨喋呤治疗急性淋巴细胞白血病主要毒副作用观察

观察大剂量甲氨喋呤（HDMTX）治疗急性淋巴细胞白血病（ALL）的主要毒副反应。治疗前后观察消化道反应，肝肾功能以及心脏，神经系统，血液系统改变，结果未见严重的，致命性的毒副反应。认为大剂量甲氨喋呤一次性全身化疗，只要治疗方案设计合理，很少出现严重的毒副反应。     

大剂量甲氨喋呤治疗急性淋巴细胞性白血病的护理

我科采用大剂量甲氨喋呤（HD-MTX）治疗急性淋巴细胞性白血病（Au）10例20次,取得较好疗效。甲氨喋呤（MTX）是一种叶酸拮抗剂,通过抑制核酸的合成而抑制细胞的增殖和生长。常规剂量的化疗易产生耐药性。使用大剂量化疗时可使血浆中有效浓度维持较长的时间,又可穿透各种生理屏障（血脑、血眼、血睾丸屏障）,从而对防治髓外白血病有明显疗效,并防止或延缓耐药性的发生。但是,随着MTX剂量的提高,其毒性也相应增大,其主要毒性反应为骨髓抑制,消化道黏膜溃疡出血和肝肾功能障碍。     

甲酰四氢叶酸增强氟尿嘧啶对人食管癌细胞的细胞毒效应

采用ＭＴＴ比色法检测了甲酰四氢 叶酸增强５－氟 尿嘧对人食管癌ｅＣＡ－１０９细胞的细胞毒效应。结果表明，５－Ｆｕ联用ＬＶ时，５－ｆＵ与ＬＶ同时约药的细胞毒效应比单用５－Ｆｕ提高４－７％，这种效应可能与５－Ｆｕ的浓度及ＬＶ的给药时机有关。ＸＬＥＱ     

CIK与DC细胞联合治疗145例晚期恶性实体瘤

目的 研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)和树突状细胞(DC)联合治疗晚期肿瘤. 方法 从外周血分离单个核细胞,体外经GM-CSF和白细胞介素4(IL-4)诱导产生DC细胞,淋巴细胞经干扰素γ(IFN-γ)、IL-2、CD3单抗和IL-1α体外诱导产生CIK细胞,采用流式细胞术检测CIK的表型,并回输患者进行治疗,至少接受3次治疗. 结果 82例可评价病灶的患者中,3例完全缓解(CR),7例部分缓解(PR);31例不可评价病灶的患者中,7例患者胸腹水消失,与治疗前相比,治疗后患者CD3 和 CD8 明显升高(P＜0.05). 结论 CIK细胞治疗晚期恶性实体瘤有一定的临床疗效,为该类患者的治疗提供一种有效的免疫治疗手段.     

茶多酚对体外培养人胚肝细胞生存率的影响

目的 探讨不同浓度茶多酚对体外培养人胚肝细胞(L-02细胞)生存率的影响.方法 体外培养L-02细胞,采用50、100、250、500、1 000 mg/L浓度的茶多酚分别干预12、24、36、48 h,倒置显微镜观察各组细胞形态学的变化,用噻唑蓝法测定细胞的存活率.结果 与对照组比较,250 mg/L及以上浓度茶多酚组干预12 h后细胞形态即发生变化,初期表现为细胞皱缩、体积变小,而后细胞固缩变为圆形,出现大量漂浮细胞及细胞碎片,形态学变化的程度与茶多酚浓度及作用时间有关.50 mg/L、100 mg/L茶多酚组作用48 h时L-02细胞存活率均高于对照组(P＜0.05);250 mg/L及以上浓度茶多酚组干预后L-02细胞存活率均低于对照组(P＜0.05),并且随着作用时间的延长和茶多酚浓度的增加,L-02细胞存活率减少(P＜0.01).结论 低剂量(≤100 mg/L)茶多酚可能具有促进肝细胞生长、保护肝细胞的作用,较大剂量(≥250 mg/L)则有细胞毒性和抑制细胞生长的作用.     

干扰ETNPPL表达对肝细胞癌增殖的影响

目的:研究ETNPPL是否能够影响肝细胞癌细胞系的增殖表型如细胞活性和克隆形成。方法:Western blot检测ETNPPL在不同肝细胞癌细胞系中的基础表达量后,设计并构建ETNPPL的靶向siRNA,验证敲低效果,采用CCK-8实验和平板克隆形成实验,观察细胞的增殖能力。结果:与对照组相比,干扰ETNPPL的表达可以显著抑制肝细胞癌细胞系97H和LM3的增殖能力(P<0.05)和克隆形成能力(P<0.05)。结论:ETNPPL具有调控肝细胞癌细胞增殖和克隆形成能力的功能;ETNPPL可能是治疗肝细胞癌的一个潜在靶点。     

维生素A酸对体外培养小鼠囊胚细胞毒性的研究

目的观察维生素A酸（RA）对体外培养小鼠囊胚细胞毒性作用。方法获取妊娠3．5d小鼠囊胚,分别在含0、1和10μmol／LRA的M199培养液中培养24h,用荧光染料Propidium（PI）和Bisbenzimide（Hoechst33258）特异性染色,分别计数囊胚内细胞总数以及内细胞群（ICM）和滋养层（TE）细胞数。结果RA可导致小鼠囊胚内细胞总数以及ICM和TE细胞数减少。结论RA对小鼠早期胚胎的发育具有细胞毒性作用,从而影响早期胚胎的生长发育。     

Local Immune Response in Hepatocellular Carcinoma and Its Clinical Significance

In 78 cases of hepatocellular carcinoma(HCC),the local immuneresponse in cancerous tissue was investigated with immunofluorescenttechnique.In addition,analyses of clinical and postoperative follow-up data were also done to explore its clinical significance.The resultsindicate that intensity of local immune response is closely correlatedwith the clinical staging of HCC,tumour size,hepatic metastasisand cancerous thrombosis.The local immune response can representthe host immune function against HCC and directly influence theprognosis.It can provide a valuable reference for predicting prog-nosis and selecting general immunotherapy after operation.     

索拉非尼对顺铂诱导肝癌HepG2细胞凋亡的影响

目的 探讨索拉非尼对顺铂抑制肝癌细胞HepG2增殖的影响及其可能机制.方法 分别及联合应用两药后以MTT法检测HepG2细胞的增殖抑制,用流式细胞术检测细胞凋亡,用RT-PCR检测MDR-1的mRNA表达.结果 索拉非尼及DDP单药对HepG2均有抑制作用,两药联合具有协同或相加作用.联合用药细胞凋亡率明显高于单药组(P＜0.05).单药顺铂组与联合组MDR-1的mRNA表达高于对照组及索拉非尼单药组,其中单药顺铂组表达最高(P＜0.05).结论 索拉非尼联合顺铂对肝癌HepG2细胞有更强的抑制及促凋亡作用,其机制可能与增加HepG2细胞的凋亡,索拉非尼下调MDR-1,增强顺铂对HepG2细胞的诱导凋亡作用有关.     

壳聚糖基因纳米粒子对L02细胞的作用

目的研究壳聚糖基因纳米粒子(CNP)、精氨酸化壳聚糖基因纳米粒子(ANP)和十六烷基化壳聚糖基因纳米粒子(HNP)对人正常肝细胞系L02细胞的作用。方法采用复凝聚方法制备CNP、ANP和HNP,粒度及zeta电位分析仪进行纳米粒子表征。将浓度分别为5、10、30、50μg/ml(以DNA含量计)的各种纳米粒子与L02细胞共育,采用MTT法进行细胞毒性评价,流式细胞分析技术进行细胞凋亡检测。结果CNP、ANP和HNP的zeta电位为12.10～14.63mV,粒径约为148.07～179.47nm。当各基因纳米粒子浓度为30μg/ml时,细胞存活率开始降低;达到50μg/ml时,存活率降至最低。当各基因纳米粒子浓度为30μg/ml时,可以诱导L02细胞发生凋亡,随纳米粒子浓度的升高,凋亡率升高。结论当达到一定浓度时,CNP、ANP和HNP对L02具有一定细胞毒性,可诱导细胞产生凋亡。     

L-精氨酸在人肝癌细胞生长增殖中的作用

目的 :探讨L 精氨酸在人肝癌细胞生长增殖中的作用。方法 :采用噻唑蓝 (MTT)比色法和流式细胞仪 ,检测和分析不同浓度L 精氨酸作用下体外培养人肝癌细胞株QGY 770 3的生长、增殖和凋亡情况。结果 :(1)浓度在4mmol/L以下的L 精氨酸 ,轻度促进肝癌细胞的生长 ;4mmol/L以上浓度的L 精氨酸 ,则抑制肝癌细胞的生长增殖 ,且具有浓度和时间依赖性。 (2 )高浓度L 精氨酸 (16mmol/L和 6 4mmol/L)可诱导肝癌细胞凋亡 ,凋亡率较对照组显著升高 (P <0 .0 5 ) ,并且使肝癌细胞增殖指数较对照组显著降低 (P <0 .0 5 )。结论 :低浓度L 精氨酸促进肝癌细胞的生长 ;高浓度抑制肝癌细胞的生长增殖 ,并可诱导肝癌细胞凋亡。     

树突状细胞活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞对大鼠原发性肝癌细胞的体外杀伤作用研究

目的　研究负载肿瘤抗原的树突状细胞活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞对原发性肝癌细胞的杀伤效应，探讨其用于临床治疗的可行性，并为其应用提供实验依据。方法　联合应用粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素-4和肿瘤坏死因子－α等，对大鼠骨髓单个核细胞进行体外诱导，同时加入大鼠原发性肝癌细胞株CBRH-7919细胞匀浆粗提物进行刺激，制备负载肿瘤抗原的树突状细胞后，活化同基因大鼠的脾脏细胞，制备特异性细胞毒性T淋巴细胞，并采用MTT法检测效应细胞对CBRH-7919的杀伤效果，同时与效应细胞对K562的杀伤率进行比较。结果　大鼠骨髓单个核细胞诱导的负载肿瘤抗原的树突状细胞活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞对CBRH-7919具有较高的特异性杀伤作用。