湖南地区丙型肝炎病毒基因型在肝细胞癌组织中的分布

采用型特异性引物ＰＣＲ分型法对５０例肝细胞癌组织中感染的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）进行基因分型。结果显示：单独ＨＣＶⅡ型感染为６０％（３０／５０）；单独Ⅲ型感染６％（３／５０）；感染为Ⅱ＋Ⅲ型１０％（５／５０），Ⅱ＋Ⅳ型为１６％（８／５０），Ⅱ＋Ⅰ＋Ⅲ型为４％（２／５０）；Ⅰ￣Ⅳ型均阴性的病例４％（２／５０）。表明湖南地区肝细胞癌患者的ＨＣＶ感染以Ⅱ型为主，并存在Ⅱ型与其它型的混合感染；少数病例可能系     

丙型肝炎病毒基因分型

<正> 自1989年Choo等成功地从一只黑猩猩身上分离出HCV cDNA克隆以来,世界各地不断有新的HCV病毒株被发现。HCV的基因变异从5’UT区开始一直延伸到3’末端,贯穿于整个基因组序列。根据其基因的变异程度,可以将HCV分为数个基因型,各型之内尚可分出数个亚型。型间的基因变异程度可达33％。这种程度的基因变异很可能导致病毒     

某地区吸毒人员丙型肝炎病毒的流行病学和基因分型研究

目的：了解吸毒人群中丙型肝炎病毒（HCV）的流行和基因分布现状,探索HCV的传播规律。方法：采集本市强制戒毒所576份吸毒人员和本站体检的从业人员210份血清标本,用ELISA法对所有标本进行抗HCV的检测;检出抗HCV阳性的血清进一步用特异性引物RT－PCR法进行基因分型。结果：576份标本中,经血途径（静脉吸毒、共用注射器）吸毒或有输血史和用血制品史的吸毒者,其抗HCV检出率（13．8％）明显高于经口吸毒者（6．3％）,说明静脉吸毒、共用注射器吸毒、用血制品、输血都是感染HCV的危险因素。经口吸毒者抗HCB检出率明显高于从业人员,提示经口吸毒在传播HCV上具有重要意义。此外,本地籍吸毒者的抗HCV检出率（5．7％）明显低于外省吸毒者（27．7％）、外省有血途径感染机会的吸毒者,83．3％都感染了HCV,本地有同样途径有吸毒者,仅有8．6％感染了HCV;这可能与外省有关城市的高感染率有关。结果还显示,山西省吸毒人群的HCV基因型的分布与从业人员较一致,均以1b型为主（78．9％）,其次为2a型（15．8％）和1b/2a混合型（5．3％）;未检出1b型、2b型和3a型。结论：该吸毒人群中HCV基因以1b型占优势。其分布与南方城市和本省的其他人群相近^[6]。血途径仍是HCV感染的主要途径,但经口吸毒在HCV传播上的重要意义应引起重视。     

不同人群丙型肝炎病毒基因分型

目的 研究不同人群丙型肝炎病毒的基因分型。方法 对141例抗HCV（ ）、60例抗HCV（-）及28例正常献血员的共132份HCV-RNA阳性血清,运用限制性片段长度多态性分析（RFLP）法作酶切分型。结果 3组人群不同基因型检出率分别是1b/Ⅱ型87.18%、100%、100%;2a/Ⅲ1.71%、0、0;两者混合型（1b/2a型）11.11%、0、0。对抗HCV（ ）血清,分为ALT正常组和异常组,2组人群不同基因型检出率分别是1b/Ⅱ型93.33%、83.33%;2a/Ⅲ型0、2.78%;两者混合型7.14%、13.89%。结论 我国不同人群中HCV感染者均以HCV1b/Ⅱ型为主,今后应以HCV1b/Ⅱ型为重点,加强HCV的诊断、治疗和疫苗研制工作。     

丙型肝炎病毒与原发性肝癌的关系——不同人群血清HCV-RNA的调查

国外研究表明丙型肝炎与肝癌的发生密切相关,国内用血清抗-HCV调查也提示存在这种相关性。但是,血清抗-HCV的存在未能反映有无病毒血症,而且对其敏感性和特异性尚存在不少问题,以致难以确切说明HCV感染与我国肝癌的关系。为此,我们以聚合酶链反应对重庆地区182例不同慢性肝病和35例健康献血员血清HCV-RNA进行了调查,同时对其     

丙型肝炎病毒基因分型及其临床意义

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)是单股正链RNA病毒，属黄病毒科丙型肝炎病毒属。全长约9．4kb，其序列为：341b的5’非编码区(5’URT)，编码3011个氨基酸的长开放读框，约27b的3’非编码区(3’URT)。在病毒复制中，氨基端有三个蛋白(C、E1、E2／NSl)，羧基端有四个蛋白(NS2、NS3、NS4、NS5)。由于RNA复制酶的低保真性及缺乏校正功能，HCV呈高度异质性；不同地区，不同患者，甚至同一患者在不同病程中HCV分离株，无论是核苷酸序列，还是氨基酸序列均有显著差异^[1][2][3]。本文就丙型肝炎病毒基因分型及其临床意义作一综述。     

湖南地区丙型肝炎病毒基因型在肝细胞癌组织中的分布

采用型特异性引物ＰＣＲ分型法对５０例肝细胞癌组织中感染的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）进行基因分型。结果显示：单独ＨＣＶⅡ型感染为６０％（３０／５０）；单独Ⅲ型感染６％（３／５０）；感染为Ⅱ＋Ⅲ型１０％（５／５０），Ⅱ＋Ⅳ型为１６％（８／５０），Ⅱ＋Ⅰ＋Ⅲ型为４％（２／５０）；Ⅰ～Ⅳ型均阴性的病例４％（２／５０）。表明湖南地区肝细胞癌患者的ＨＣＶ感染以Ⅱ型为主，并存在Ⅱ型与其它型的混合感染；少数病例可能系单独Ⅲ型感染所致     

用套式RT-PCR法检测肝细胞癌中丙型肝炎病毒基因型

目的　检测人肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型。方法　用ＲＴＰＣＲ法常规检测ＨＣＣ组织和部分患者血清ＨＣＶ,再以巢式ＲＴＰＣＲ法对ＨＣＶ阳性标本中５种ＨＣＶ基因型进行鉴别。对多数标本中ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ也进行了免疫组化和原位杂交检测。结果　ＨＣＣ组织中ＨＣＶ阳性率为５０％（３９／７８）,与ＨＢＶ者（６４．４％）差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）,两者重叠感染率３４％（２０／５９）。在１０例血清ＨＣＶ阴性ＨＣＣ患者中,３例ＨＣＣ冰冻组织检出ＨＣＶＲＮＡ。在ＨＣＣ组织中共检出３种ＨＣＶ基因型,其中２ａ、１ｂ、３ａ和混合型分别为１７例（４３．６％）、９例（２３．１％）、４例（１０．３％）和２例（５．１％）,各基因型间差异有极显著性意义（Ｐ＜０．０１）,但２ａ型与１ｂ型间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）,２ａ型与ＨＢＶ的重叠感染明显较其他ＨＣＶ基因型者常见（Ｐ＜０．０５）。结论　２ａ型ＨＣＶ是ＨＣＣ组织中最常见的基因型并易与ＨＢＶ重叠感染率,ＨＣＣ患者血清ＨＣＶ检测不一定能准确反映ＨＣＣ组织中的ＨＣＶ感染率,其所示基因型也有所不同。     

乙肝病毒基因分型及其临床意义

目的:探讨南通地区乙肝病毒(HBV)基因型分布状况及其临床相关性。方法:选择南通地区HBV-DNA阳性者200例,其中乙肝表面抗原携带者(ASC)28例,慢性乙型肝炎(CHB)89例,重型肝炎(FHF)26例,肝硬化(LH)30例,肝细胞癌(HCC)27例,采用多对型特异性引物巢式PCR法检测HBV基因型。结果:200例中B型51例(25.5%),C型141例(70.5%),BC混合型8例(4.0%);C基因型在FHF组、LC组、HCC组中的比例显著高于ASC组(P<0.05)。B型、C型、BC混合型HBeAg阳性率分别为49.0%、53.2%和37.5%,无统计学意义(P>0.05)。C型和BC混合型HBV-DNA载量显著高于B型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:南通地区HBV基因型以B、C型为主,C型为优势基因型,并与重型肝炎、肝硬化、肝癌的发生及血清HBV-DNA高载量相关。     

Genotyping of hepatitis C virus in patients with hepatocellular carcino Ma

ＧｅｎｏｔｙｐｉｎｇｏｆｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏＭａ￥ＣｕｉＸｉａｏｈｏｎｇ（崔晓红）；ＰａｎＷｅｉ（潘卫）；ＱｉＺｈｏｎｇｔｉａｎ（戚中田）；ＳｏｎｇＹａｎｂｉｎ（宋燕斌）...     

HCV慢性患者干扰素治疗前后血清HCV RNA水平的变化

目的 探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因含量与干扰素疗效的关系。方法 采用“ＥＬＩＳＡ模式”化的ＨＣＶ－ＲＮＡ聚合酶链反应－杂交定量（ＰＣＲ－Ｈｙｂ）检测了１９例慢性丙型肝炎患者α－干扰素治疗前后的血清中的ＨＣＶ－ＲＮＡ的水平。结果 ３ＭＵ、６ＭＵα－干扰素治疗,分别是１１例、８例,完全反应者分别占７２．５％、７５％,部分及无效反应者分别占２７．５％、２５％（Ｐ〉０．０５）。两种剂量的完全反应者治疗前     

乙型肝炎患者治疗后血清中e抗原与病毒DNA水平的关系

目的 通过对乙型肝炎病毒血清学标志物(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBcIgG)的检测及内标、外标两种聚合酶链反应(PCR)方法 检测乙型肝炎病毒载量的比对,更好地了解人体内乙型肝炎病毒携带情况,指导临床诊治.方法对经治疗后丙氨酸氨基转移酶(ALT)/天冬氨酸氨基转移酶(AST)正常、COBAS AMPLICOR定量PCR(内标法)检测不到乙肝病毒DNA(HBV-DNA)、用Abbott AxSYM微粒子酶免分析法(MEIA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性、表面抗体(抗-HBs)阴性、e抗原(HBeAg)阳性(HBeAg＞4 S/CO)、抗-HBe阴性、抗-HBcIgG阳性的42例血清,再用上海复星长征医学科学有限公司提供的HBV-PCR外标法荧光定量检测试剂盒,Light Cycler实时荧光定量PCR仪检测.结果 42例ALT/AST正常,HBeAg阳性(HBeAg＞4 S/CO以上),HBeAg的平均值42.26 S/CO.COBAS AMPLICOR定量PCR(内标法)未检测到HBV-DNA(＜300拷贝/ml)的血清;用Light Cycler定量PCR仪(外标法)检测HBV-DNA,有7例为阳性,7例HBV-DNA的平均含量3.1×105拷贝/ml,,阳性率17%.结论 乙型肝炎病毒e抗原阳性并不说明体内病毒复制一定活跃.经治疗后,病毒复制下降,部分患者e抗原仍阳性,e抗原何时消失有待进一步研究.血清学标志与HBV复制状态存在不一致性,兼顾内、外标两种PCR方法检测HBV-DNA更客观.     

肝癌患者外周血中白蛋白mRNA检测的意义

目的:探讨肝癌患者外周血中白蛋白mRNA在血行播散中的意义。方法:抽取30例肝癌患者外周静脉血5ml,应用RT-PCR技术对血中白蛋白mRNA进行扩增检测。结果:敏感性实验中,健康人血中存在102以上个肝癌细胞时可测出。30例HCC患者中,白蛋白mRNA的阳性率为60%(18/30);白蛋白mRNA的检出率与肝癌的TNM分期、肿瘤大小、有无门脉癌栓及有无肝外转移有显著的相关性(P<0.05),而与血清AFP值无关(P>0.75)。结论:白蛋白mRNA是反映原发性肝癌患者血中是否存在肝癌细胞的灵敏指标。     

七株急性散发性戊型肝炎病毒部分核苷酸序列分析

比较我国流行性和散发性戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）的部分核苷酸和氨基酸序列及其与戊型肝炎流行的关系。方法应用逆转录套式聚合酶链反应法（ＲＴ－ｎＰＣＲ）从急性散发性戊型肝炎病人血清中扩增ＨＥＶ开放读码框架２（ＯＲＦ２）ｃＤＮＡ，并用ＳｅｑｕｅｎａｓｅＶｅｒｓｉｏｎ２．０ＤＮＡ序列分析试剂盒，经双脱氧核苷酸ＤＮＡ链末端终止直接测序法测定ＲＴ－ｎＰＣＲ扩增产物的核苷酸序列。结果从深圳、长春、杭州、西安、北京５个城市４１份急性散发性戊型肝炎病人血清中获得２８株ＨＥＶＯＲＦ２ｃＤＮＡ，对其中７株进行了核苷酸序列分析，表明它们与ＨＥＶ墨西哥株（Ｍ）的同源性为７８．９％～８０．２％；与ＨＥＶ缅甸（Ｂ）流行株（Ｅｐ）的同源性为９３．１％～９５．１％；与ＨＥＶ缅甸（Ｂ）散发株（Ｓｐ）的同源性为９２．３％～９４．２％；与ＨＥＶ中国新疆流行株ＣＨ１．１同源性为９６．５％～９８．９％；７株散发性ＨＥＶ间核苷酸序列的同源性为９５．７％～１００％。结论该７株散发性ＨＥＶ与ＨＥＶ（Ｂ）和ＨＥＶＣＨ１．１核苷酸序列的同源性较高，均属同一亚型。     

HCV NS5b1b与1b混合感染指标在干扰素治疗中的应用

目的 :探讨丙型肝炎病毒 (HCV)感染的基因型及其与干扰素应答效果的关系。方法 :应用逆转录—聚合酶链反应 (RT PGR)技术对 2 69例肝炎病人血清进行HCVNS5b区基因片段扩增 ,并对 5 6例阳性PCR产物进行酶切分型 ,同时观察干扰素α 2b对其中 48例慢性丙型肝炎的疗效。结果 :HCV单纯 1b型感染、1b与 1b混合感染及 2a型感染对干扰素的应答率分别为 70 % (14 /2 0 )、9 5 % (2 /2 1)、71 4% (5 /7) ;其中完全应答分别为 45 % (9/2 0 )、4 8% (1/2 1)、5 7 1% (4 /7) ;部分应答分别为 2 5 % (5 /2 0 )、4 8% (1/2 1)、14 3 % (1/7)。 1b与 1b混合感染组同单纯 1b型及 2a型感染组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ,而单纯 1b型感染组与 2a型感染组比较无明显差异 (P >0 0 5 )。结论 :HCV单纯 1b型感染或 2a型感染者对干扰素敏感 ,而 1b与 1b混合感染者干扰素治疗效果极差 ,可作为预测干扰素疗效的一项新的重要指标     

丙型肝炎抗原在肝炎、肝癌组织中的表达

肝细胞癌手术标本３０例及肝炎肝穿刺标本１５例，作丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）免疫组化研究。第一抗体为ＨＣＶ核心抗原单克隆抗体；检测系统为ＡＢＰＡＰ法。结果肝癌组５例（１７％）、肝炎组３例（２０％）阳性；总阳性率１８％。阳性信号为散在性，胞浆型。肝癌组阳性的５例均见癌旁组织阳性，其中３例同时有散在性癌细胞表达。     

肝癌组织中丙型肝炎病毒RNA的研究

对３０例原发性肝癌患者手术切除的癌及癌旁组织（共３８份标本）用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５＇端非编码区（５＇－ＮＣ区）ＲＮＡ。结果，１０例（３３．３％）肝癌患者被ＨＣＶ感染，２３例（７６．７％）患者被乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染。用酶切分析可见，肝癌组织中的ＨＣＶ是ＩＩ、ＩＩＩ型。对部分标本用ＰＣＲ直接测定核苷酸序列，ＨＣＶ５＇－ＮＣ区相当保守，差异无显著意义。因１０例ＨＣＶ感染的肝癌患者中８例同时有ＨＢＶ感染，因此可能ＨＣＶ及ＨＢＶ构成的双重慢性感染是导致肝癌发生的因素之一。     

血液透析患者丙型肝炎病毒感染的研究

作者用ＥＬＩＳＡ法和聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对４５例血液透析（ＨＤ）患者的血清丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）和丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＲＮＡ）进行了检测，发现１３例抗－ＨＣＶ阳性，１５例ＨＣＶＲＮＡ阳性，共１７例患者（３７．８％）ＨＣＶ标志物（抗－ＨＣＶ和／或ＨＣＶＲＮＡ）阳性。将这１７例ＨＣＶ标志物阳性患者与２８倒闭性患者作了比较，结果表明，ＨＣＶ标志物阳性患者的透析时间、输血次数和输血量均明显高于阴性患者（Ｐ＜０．０１）。对１５例ＨＣＶＲＮＡ阳性患者的ＨＣＶ基因型的分析表明，１３例为Ⅱ型，Ⅲ例为Ⅲ型。本研究表明，ＨＤ患者丙型肝炎的感染率很高，这与血液透析时多次接触血液、血液透析器具以及输血次数和输血量密切相关。