血管内皮细胞生长因子的作用及调节

血管内皮细胞生长因子 (Ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈｆａｃ ｔｏｒ ,ＶＥＧＦ)是 1989年Ｆｅｒｒａｒａ等[1] 在牛垂体星状细胞体外培养分离出的一种糖蛋白 ,其在体内外都表现出特异性地促进血管内皮细胞的生长并诱导血管生成作用 ,故此称为ＶＥＧＦ。目前已知多种生长因子和细胞因子具有促进血管生成的作用 ,然而在众多的血管生成因子中 ,ＶＥＧＦ是最有力的血管生成因子 ,它通过和血管内皮细胞的特异性受体结合 ,具有强大的促内皮增殖、促血管生成作用。其它血管生成因子的血管生成作用是全部或部分通过…     

雷公藤多甙对慢性肾炎肾有效血浆流量的作用

体外研究证明，周期性机械地牵拉体外培养的系膜细胞，系膜细胞能增加Ⅳ型胶原、纤连蛋白等细胞外基质的合成。高肾血流动力学的情况下，系膜细胞受牵拉，产生细胞外基质增加，肾小球肥大失代偿，引起肾小球进行性损伤，最终发展为肾小球硬化。以往，消炎痛为代表的非甾体...     

肾小球细胞与糖尿病肾病

在糖尿病肾病的发生发展过程中，高糖刺激肾小球固有细胞合成和分泌多种生物活性因子，而且肾小球固有细胞可以通过这些因子相互作用，导致肾多种细胞肥大、细胞外基质过度积聚，从而导致尿病肾病的特征性病理改变。联合使用这些生物活性因子的拮抗剂或抗体，将有助于防治糖尿病肾病。     

血管内皮细胞生长因子与大肠癌关系的研究进展

血管内皮细胞生长因子（Ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）是一种特异地作用于内皮细胞的多功能因子，对诱导和调节肿瘤血管形成有重要作用。ＶＥＧＦ最早由Ｓｅｎｇｅｒ等于１９８３年报道，他们在无血清的癌细胞培养介质和癌性腹水中发现一种分子量为３４～４２ｋＤ的肝素结合型蛋白，能使正常豚鼠血管渗透性明显增高，故当时命名为血管渗透因子（Ｖａｓｃｕｌａｒｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙｆａｃｔｏｒ，ＶＰＦ）［１］。此后一些实验室相继从牛垂体滤泡细胞中分离出一种蛋白质，它对培养的内…     

糖尿病肾病与血管内皮细胞生长因子

糖尿病肾病是糖尿病微血管并发症之一 ,其确切的发病机理尚未完全明了 ,各种因素参与了糖尿病肾病的发病过程。近几年的研究表明 ,它的早期阶段就存在着肾小球内皮细胞功能异常。血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)是内皮细胞的特异性有丝分裂原 ,促进内皮细胞增殖、新生血管形成 ,增加血管通透性 ,是导致糖尿病肾病早期微量蛋白尿的主要原因 ,并与其它因素一起参与肾小球硬化。现仅就ＶＥＧＦ在糖尿病肾病发病机制中的作用作一综述。一、ＶＥＧＦ概述ＶＥＧＦ是 1989年Ｆｅｒｒａｒａ等在牛垂体滤泡星状细胞体外培养液中首先纯化出来的蛋白质…     

内皮素在慢性肾疾病进展中作用研究进展

各种慢性肾疾病,无论其原发病如何,其病变常逐渐进展为肾小球硬化和肾小管间质纤维化,导致慢性肾衰竭,多种细胞及细胞因子形成相互作用的复杂调控网络并恶性循环,共同参与这一过程[1]。起始阶段可为肾组织局部炎症,随后出现细胞增殖和细胞外基质沉积,最终导致肾小球硬化和肾间质纤维化。内皮素(endothelin,ET)是Yanagisawa等[2]于1988年从猪动脉内皮细胞培养液中分离出的一种小分子生物活性多肽,它不仅能强有力地收缩血管,而且还是一种强大的炎症因子和促纤维化因子,能促细胞增殖、细胞外基质蓄积及其他炎症介质的释放,导致肾疾病进展和肾…     

血管内皮生长因子C的研究进展

血管内皮生长因子 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ ,ＶＥＧＦ)是 1989年由Ｆｅｒｒａｒａ等在牛垂体滤泡星状细胞体外培养液中首先提纯得到的一种特异性作用于血管内皮细胞的细胞因子 ,它有促进血管内皮细胞增殖、迁移、增加血管通透性、改变细胞外基质、促进血管生成等作用 ,在胚胎发育、创伤愈合、炎症反应、肿瘤生长与转移等生理、病理过程中起重要作用。近年来 ,随着对ＶＥＧＦ研究的深入 ,发现了ＶＥＧＦ家族的新成员ＶＥＧＦ Ｂ、ＶＥＧＦ Ｃ、ＶＥＧＦ Ｄ。由于ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ Ｂ、ＶＥＧＦ …     

诱发兔肾动脉炎后肾脏改变的观察及机理研究

目的：探讨肿瘤坏死因子(TNF—α)注入兔左肾动脉壁内引起动脉炎后，左肾脏形态学改变及其机理的研究。方法：用光镜、免疫组化、电镜观察肾脏的变化。结果：肾小球系膜细胞轻度增生，毛细血管基底膜增厚，系膜基质增多。肾小球基底膜及肾小管基底膜增厚。增殖细胞核抗原(PCNA)于左肾脏髓质集合管上皮细胞核呈阳性反应。电镜：肾小球的内皮细胞、足细胞、肾小球系膜细胞及系膜区基质均处于增生状态。肾髓质成纤维样细胞和Bohman I型细胞轻度增生，近曲小管上皮胞浆空泡变。结论：少量TNF—α可以引起肾脏增生样改变，TNF—α的拮抗剂可能对肾脏有保护和治疗的作用。     

Pellet体外三维培养模型种子细胞优化的实验研究

目的:研究构建牛角膜基质细胞体外三维培养模型Pellet中种子细胞的选择.方法:分离原代牛角膜基质细胞,分别选取p0、p1牛角膜基质细胞作为种子细胞,分为两组(p0组、p1组)进行Pellet模型的构建,以含10%FBS(fatal bovine serum)的DMEM培养基培养2周,大体观察培养模型生长趋势;培养3周行HE及MASSON染色,观察细胞活性及细胞外基质的形成情况.结果:p0组Pellet模型构建不成功,2周后观察细胞未见明显抱团生长,震荡易松散,无法进行HE及MASSON染色.p1组Pellet模型构建成功,培养2周后大体观显示,细胞明显抱团生长,呈粒状,震荡不散开.培养3周后HE染色显示,细胞密集生长,细胞团中坏死细胞极少;MASSON染色显示可以形成细胞外基质.结论:第一代牛角膜基质细胞可以作为种子细胞成功构建Pellet体外三维培养模型.     

国外学医

肾脏病研究进展 肾小球肾炎 肾小球肾炎的基本病变为肾小球膜细胞和基质的增殖,其增殖稚度越强则肾功损坏程度愈重。最近多着重肾小球膜细胞之细胞外物质(基质)方面进行研究。巳搞清了细胞的增殖刺激因子有①白细胞介素(Interleukin),②血管收缩物质,③血小板因子,④细胞成长因子等。在这些因子中白细胞介素1(IL-1)、血小板增殖因子(PDGF)、     

胎儿骨髓来源的Flk1+CD34-细胞的血液血管干细胞特性

目的研究骨髓基质中是否具有血液血管干细胞的特征。方法分离并培养人胎儿骨髓基质细胞(hfMSCs),FACS检测细胞的免疫表型。将此细胞接种在基底膜胶中,由血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导,免疫组化和透射电镜检测血管和造血的分化形成。结果此细胞群体的典型特征是CD34阴性的成纤维样细胞99%表达Flk1(即血管内皮细胞生长因子受体2),并能形成血管样结构,而在管样结构形成的过程中诱导出CD34阳性的圆形细胞。结论Flk1 CD34-的hfMSC能向血管内皮细胞和造血细胞分化,提示其具有血液血管干细胞的特征表型。     

The role of FB21 as a marker of glomerular endothelial cell injury

FB21 was reactive with the glomerular endothelial cells and distal tubules of the human kidney and was bound to a sialic-acid-dependent cell surface antigen. We evaluated the FB21 staining in fetal kidneys, and the kidneys of children and adults with normal kidneys and glomerulonephritis and investigated whether FB21 can be used as a marker for endothelial cell injury. FB21 was reactive with the endothelial cells of normal kidneys and was detected on the surface of endothelial cells by immunoelectron microscopy. FB21 was reactive with endothelial cells in the kidneys of over 32-week fetuses. The endothelial cell FB21 staining scores in the first renal biopsy specimens of patients with hemolytic uremic syndrome (HUS) were lower than in the kidneys of children with normal kidneys and was negatively correlated with their serum E-selectin concentrations. The FB21 staining of glomerular endothelial cells was similar to the staining for the other endothelial markers, CD34 and von Willebrand factor (vWF). However, FB21 staining of interstitial blood vessels was very weak and was distinct from that of other endothelial markers. These results suggest that FB21 can be used as a specific marker for glomerular endothelial cell injury in various types of glomerulonephritis.     

Upregulation of sFlt-1 by trophoblasts induces the barrier dysfunction of glomerular endothelial cells

This study examined the effect of over-expression of sFlt-1 by trophoblasts on the barrier function of glomerular endothelial cells and the role of VEGF in this process in order to explore the pathogen...     

肺纤方提取物对肺间质纤维化大鼠肺微血管VEGF、VEGFR2、PAI-1、VCAM-1mRNA表达的影响

目的通过观察肺纤方提取物干预体外培养肺微血管的血管内皮细胞生长因子(VEGF)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR 2)、纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)、血管细胞黏附因子1(VCAM-1)基因表达的影响,探讨肺纤方干预肺纤维化微血管生成的机制。方法从肺纤维化模型大鼠分离培养肺微血管内皮细胞,将其等量分为模型组,氯沙坦组,泼尼松组,肺纤方大、中、小剂量组。模型组加入含20%胎牛血清的DMEM培养基,氯沙坦组加入含20%胎牛血清及10 mg/L氯沙坦的DMEM培养基,泼尼松组加入含20%胎牛血清及5 mg/L泼尼松的DMEM培养基,肺纤方大、中、小剂量组分别加入含20%胎牛血清及100、60、20 mg/L肺纤方提取物的DMEM培养基,分别作用24 h。双链嵌合荧光染料SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法检测VEGF、VEGFR 2、PAI-1与VCAM-1的mRNA转录水平。结果与模型组比较,肺纤方大、中、小剂量组VEGF基因表达水平均显著降低,而VEGFR2无显著差异;肺纤方大剂量组PAI-1 mRNA表达显著降低;肺纤方大、中剂量组VCAM-1 mRNA表达显著降低(P0.05)。结论肺纤方可通过抑制肺微血管VEGF、PAI-1及VCAM-1的表达改善血凝及纤溶,抑制血管形成而发挥抗肺纤维化作用。     

Role of testosterone in NO/EDRF-induced relaxation of the rabbit aorta

ＲｏｌｅｏｆｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅｉｎＮＯ／ＥＤＲＦ－ｉｎｄｕｃｅｄｒｅｌａｘａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｒａｂｂｉｔａｏｒｔａＺｈｏｕＫｅｘｉａｎｇ（周可祥）；ＷｕＳａｉｚｈｕ（吴赛珠）；ＳｈｅｎＪｉｅ（沈洁）；ＷｅｎｇＸｉｎｚｈｉ（翁心植）（Ｄｅｐａｒ...     

人肾小球系膜细胞原代培养及鉴定方法的研究

目的：建立一种重复性好、传代次数多的人肾小球系膜细胞培养方法。方法：取肾脏肿瘤手术切除后远离患病部位的正常肾脏组织、水囊引产的胎儿肾,三层筛网滤过分离,取最下层筛网上组织,用胶原酶消化,培养正常人肾小球系膜细胞。同时采用形态学观察和免疫荧光技术,对鼠抗人结蛋白,鼠抗人角蛋白进行鉴定,采用MTT、 流式细胞仪技术对不同来源肾脏的系膜细胞生长状况进行比较。结果：形态学、免疫荧光法鉴定表明培养细胞为肾小球系膜细胞,胎肾原代培养后8～10d即可传代,而成年肾脏原代培养后需15～16d方可传代。成年肾脏培养细胞至第4代细胞生长缓慢,贴壁能力减弱,出现死亡。而胎肾培养细胞则可继续培养至第7～10代。结论:三层滤网法分离人肾小球系膜细胞, 方法简单、高效,培养的原代肾小球系膜细胞符合肾小球系膜细胞的生物学特性,且进一步证明胚胎组织比成年个体肾脏原代细胞培养容易成功。     

PPARα激动剂对高糖刺激的肾系膜细胞PEDF和VEGF mRNA表达的影响

目的:研究色素上皮细胞衍生因子(PEDF)和血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病肾病中的作用以及PPARα激动剂与糖尿病肾病的关系。方法:将培养的大鼠HBZY-1肾小球系膜细胞株分为6组,高糖作为刺激因子,PPARα激动剂WY14643作为干预因素。分别设正常组,高糖组,高糖加WY14643治疗组(包括不同的WY14643浓度)以及高糖加WY14643溶剂对照组。用实时定量PCR法测定各组系膜细胞PEDF以及VEGF mRNA表达。结果:(1)与正常组相比较,高糖组肾系膜细胞PEDF mRNA的表达明显降低,而WY14643可逆转高糖导致的肾系膜细胞PEDF mRNA表达的降低。(2)高糖组肾系膜细胞VEGF mRNA的表达较正常组明显增加,而WY14643可减少高糖导致的肾系膜细胞VEGF mRNA表达的增加。结论:高糖可抑制大鼠肾系膜细胞PEDF并增加VEGF的表达,而PPARα激动剂可在一定程度上逆转高糖导致的这种改变。     

胎鼠嗅球分离培养出神经干细胞的研究

目的研究胎鼠嗅球中分离培养产生神经千细胞(NSCs)的情况。方法取孕16～18d的孕鼠。取胎鼠的嗅球,用含10％FCS的培养基培养传代分离出的细胞。免疫细胞化学方法鉴定培养和传代出的细胞,对染色阳性的细胞计数检测纯度。结果P^75染色阳性证明分离培养的细胞为嗅鞘细胞(OECs)；来源于嗅球的细胞培养出的神经球行NeS血染色阳性证明为NSCs；传代OECs纯度为95%-98％。结论胎鼠嗅球中可分离培养出NSCs,OECs可稳定传代。可以作为移植用的种子细胞。     

VIP促进人脐静脉血管内皮细胞增殖及合成VEGF的初步研究

目的 通过观察血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)促进人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein vessel endothelial cells,HUVECs)的增殖以及刺激VEGF的合成情况,探讨VIP在创伤组织修复过程中的生物学效应.方法 体外培养HUVECs细胞系,分为有血清培养组和无血清培养组,这两组分别加入VIP和PBS进行干预,应用MTT法测定HUVECs的增殖情况,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血管内皮细胞生长因子(VEGF165)在HUVECs的合成.结果 VIP能促进血管内皮细胞的增殖,且两组都有VEGF生成,但VIP组VEGF的量显著高于PBS组.结论 VIP能促进HUVECs的增殖以及增强血管内皮细胞内VEGF的合成和分泌,在创伤组织修复过程中可能发挥促新生血管形成的作用.     

细胞间直接接触对骨髓间充质干细胞分化为血管内皮细胞的作用

目的 探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)直接接触共培养诱导MSCs向血管内皮细胞分化的作用.方法 将MSCs和HUVECs按一定比例混合直接共培养,48 h后用ELISA检测其共培养细胞培养液(实验组)及MSCs与HUVECs各自单独培养48 h后再混合的培养液(对照组)中VEGF含量;5 d后用免疫荧光细胞化学法观察和分析诱导后MSCs的胎肝激酶-1 ( fetal liver kinase-1, Flk-1) 和血管性血友病因子( von Willebrand factor, vWF)的表达以及其Dil-ac-LDL吞噬能力;并用透射电镜观察MSCs超微结构改变.结果 VEGF在实验组中的含量显著高于对照组;直接接触共培养诱导MSCs表达Flk-1蛋白,且部分Flk-1阳性MSCs同时表达vWF蛋白;部分MSCs具有吞噬Dil-ac-LDL功能;电镜下见MSCs出现分化特征,核质比缩小,细胞器较为丰富,并可见细胞融合现象.结论 HUVECs可以通过细胞间直接接触诱导共培养的MSCs开始向内皮分化;其机制可能与细胞间直接接触促进细胞分泌VEGF以及细胞融合密切相关.