骨髓干细胞在抗肝纤维化治疗中的应用研究

肝细胞再生是肝纤维化逆转的重要因素，而近年来多项研究表明骨髓干细胞可以向肝细胞转化，促进肝组织再生，同时可以表达基质金属蛋白酶，促进细胞外基质的降解，逆转肝纤维化。本文就骨髓干细胞在肝纤维化治疗中的研究作一综述。     

骨髓干细胞治疗肝病的研究进展

骨髓干细胞是一类具有自我增殖和分化潜能的细胞,主要包括造血干细胞和间充质干细胞。体外通过生长因子,体内利用特定的微环境均可诱导骨髓干细胞分化为肝前体细胞和成熟肝细胞,并明显改善肝功能。其有望成为肝细胞移植或生物人工肝支持系统的新型种子细胞。此文就骨髓干细胞分化为肝样细胞及其临床治疗肝病的研究进展作一综述。     

骨髓干细胞在大鼠肝再生环境中的分化

研究大鼠骨髓干细胞在部分肝切除后肝再生环境中的分化。从部分肝切除模型大鼠的胫骨中提取骨髓细胞,应用流式细胞仪富集骨髓干细胞,以PKH26-GL体外标记后通过门静脉进行自体移植,2周后行白蛋白和角蛋白8免疫组化检查。结果肝板肝细胞间PKH26-GL标记骨髓干细胞表达白蛋白、角蛋白8。提示骨髓干细胞在部分肝切除后肝再生环境中能分化为肝细胞,骨髓干细胞可能参与部分肝切除后的肝再生过程。     

骨髓源性肝干细胞和肝病

近年来，随着干细胞研究的热潮，肝干细胞也已成为消化领域中的一个热门课题。肝干细胞可界定为与肝脏胚胎发育和再生有关的各种具有干细胞特性的细胞总称，而并非指某一特定种类的细胞，可分化为具有肝细胞部分或全部表型及功能的细胞是肝干细胞的共同特点。自1999年Petersen等证明骨髓中某些干细胞具有向肝细胞分化的潜能．于是出现了“骨髓源性肝干细胞”（bone marrow derived hepatic stem cells，BDHSCs）这一概念。其后有关骨髓源性肝干细胞的分离、鉴定以及分化的多项可重复性研究成果的取得，为肝脏疾病的治疗提供了新的契机。     

脐血干细胞与骨髓干细胞联合移植治疗大鼠急性肝衰竭实验研究

目的：观察脐血干细胞和自体骨髓干细胞共同移植治疗D-半乳糖苷所致急性肝衰竭大鼠的疗效。方法采集大鼠脐血和骨髓中单个核细胞,以促肝细胞生长因子和干细胞因子培养3w,采用免疫细胞化学法检测白蛋白和甲胎蛋白表达情况;以D-半乳糖苷腹腔注射法建立大鼠急性肝衰竭模型,24 h后每日经鼠尾静脉分别注入脐血干细胞,或骨髓干细胞,或混合的脐血干细胞和骨髓干细胞,对照组注射等量生理盐水,治疗7d,观察4组大鼠存活率、肝功能和肝组织病理学变化。结果在促肝细胞生长因子及干细胞因子的诱导下,脐血干细胞和骨髓干细胞可以在体外扩增并分化为肝细胞;脐血干细胞移植、骨髓干细胞移植和联合细胞移植组大鼠9d 存活率分别为55.6%、50.0%和77.8%,均明显高于生理盐水对照组（16.7%,P〈0.01）;联合移植组存活率高于任何一种单纯干细胞移植（P〈0.01）。结论脐血干细胞和骨髓干细胞移植对大鼠急性肝损伤有一定的保护作用,两者联合移植有协同作用。     

骨髓干细胞移植治疗急性肝衰竭的实验研究

目的探讨骨髓干细胞移植治疗实验性肝衰竭大鼠的效率及可行性。方法以D-氨基半乳糖及内毒素制备雌性大鼠肝衰竭模型,然后动员和富集雄性大鼠骨髓干细胞,并经门静脉移植至雌性大鼠肝脏;移植后观察受体雌鼠临床表现、生化改变、肝脏病变及肝组织Y染色体阳性率。结果受体肝衰竭雌鼠在细胞移植后,精神、食欲逐渐好转,生化异常及肝脏病变得以恢复,肝脏可检出Y染色体阳性的供体源性肝细胞;未接受骨髓干细胞移植的对照组雌鼠则全部死亡。结论骨髓干细胞移植对实验性肝衰竭大鼠具有明确治疗作用。     

骨髓间充质干细胞逆转肝纤维化的研究进展

骨髓间充质干细胞是一种来源于骨髓基质的具有多向分化能力的干细胞,在特定条件下,可以分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、神经元样细胞及肝细胞等.近年研究表明,骨髓间充质干细胞能抑制和减轻肝纤维化,并且具有免疫抑制和诱导免疫耐受的作用.因此,在细胞移植治疗终末期肝病方面具有广阔的临床应用前景.     

大鼠骨髓源性肝干细胞肝内移植后定居状况

目的 探索大鼠骨髓源性肝干细胞同种异体移植后在受体大鼠模型肝内定居情况.方法 采用全骨髓培养法体外培养细胞,贴壁筛选纯化骨髓间充质干细胞并进行体外培养、扩增,应用肝细胞生长因子(HGF)诱导分化出肝干细胞,鉴定后,经肝脏中叶注射入同种异体正常组和暴发性肝衰竭组大鼠体内,于移植后的第1、2、4周取受体肝脏移植原位(注射部位)、邻位(距注射部位0.5 cm)组织,应用PCR技术检测性别决定因子基因片段,研究肝干细胞在大鼠肝脏内定居情况.结果 经肝脏注射移植的肝干细胞在正常组和肝损伤组的肝脏内均能定居,且定居的细胞数量上肝损伤组明显多于正常组.结论 经肝脏注射移植的骨髓源性肝干细胞可以定居于肝脏内,且定于肝脏的干细胞数量与肝脏是否损伤密切相关.     

骨髓干细胞定向分化为肝样细胞的研究进展

近年来研究表明,在适宜的微环境下,骨髓干细胞不但可以分化为骨、软骨、脂肪、肌细胞和各种血细胞,而且还可以跨越胚层向外胚层起源的神经元细胞及内胚层起源的肝细胞、胰岛细胞等分化,称为"可塑性(plasticity)"或"横向分化(transdifferentiation)".本文就骨髓干细胞分化为肝样细胞及其临床治疗肝系疾病做一综述.     

骨髓间充质干细胞治疗肝纤维化的研究进展

骨髓间充质干细胞是一种多能干细胞,具有分化成肝细胞的潜力.近年研究表明,骨髓间充质干细胞还具有很强的抗肝纤维化的作用,并且不发生同种异体移植排斥反应,这为肝纤维化、肝硬化的治疗带来了新的策略.     

骨髓干细胞移植与肝纤维化

近年来,骨髓干细胞移植被认为是治疗各种肝脏疾病最具潜力的措施之一,其在肝纤维化中的应用研究也日益增多.但肝纤维化本身的慢性病程及病理特征使骨髓干细胞移植的应用具有一定的特殊性.此文针对应用于肝纤维化的骨髓干细胞的移植优势、移植部位、输注途径、种植分化、治疗效果及作用机制作一阐述,为从事骨髓干细胞移植治疗肝纤维化的研究者提供借鉴和指导.     

骨髓间充质干细胞在小鼠肝脏局部分化为肝细胞的实验研究

目的 探讨小鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）在肝内分化为肝细胞的可行性。方法腹腔注射丙烯醇致雌性C57BL／6小鼠全肝损伤后局部接受雄性同品系绿色荧光蛋白（green fluorescence protein，GFP）转基因小鼠骨髓间充质干细胞移植。移植后3周取骨髓嵌合小鼠肝脏做冰冻切片，荧光显微镜下观察GFP阳性细胞在肝内分布，石蜡切片行GFP抗体和白蛋白（albumin，Alb）抗体免疫组化双标法检测GFP阳性细胞在受体小鼠肝内的分化情况。结果移植后3周小鼠肝内可见GFP阳性细胞，并可见GFP和Alb双阳性细胞。结论异体骨髓间充质干细胞可在小鼠肝内分化为表达Alb的肝细胞，为肝组织的再生和修复提供了新思路，显示了其在肝病治疗中的应用潜力。     

干细胞治疗肝脏疾病的新进展

干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的原始细胞,根据其生存阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞虽具有全能性,可分化为体内所有组织细胞,因伦理问题应用受到限制。成体干细胞具有多能性,它包括造血干细胞、间充质干细胞、神经干细胞、肝干细胞等。不同来源的干细胞均可定向诱导分化为肝细胞样细胞,具有正常肝细胞功能,如分泌尿素和白蛋白等,目前研究较多的是自体骨髓干细胞,但细胞采集数量较少,需行骨髓穿刺术。     

骨髓基质干细胞对H_2O_2诱导的肝细胞损伤保护作用的研究

背景:骨髓基质干细胞是一种多能干细胞,不但可分化为肝细胞,并且可通过旁分泌的方式分泌细胞因子,从而促进肝再生。目的:探讨骨髓基质干细胞对H_2O_2诱导的肝细胞损伤的保护作用。方法:以500μmol/L H_2O_2诱导人肝细胞株THLE-3损伤模型,24h后与骨髓基质干细胞共培养。倒置相差显微镜下观察细胞形态改变,检测细胞毒性、caspase-3/7活性以及YO-PRO-1阳性细胞率。结果:与骨髓基质干细胞共培养后,H_2O_2损伤的THLE-3细胞形态明显改善,细胞毒性显著减少(P0.05),caspase-3/7活性显著下降(P0.05),YO-PRO-1阳性细胞率显著降低(P0.05)。结论:骨髓基质干细胞通过降低细胞毒性、caspase-3/7活性和细胞凋亡而对H_2O_2诱导的THLE-3细胞损伤起保护作用。     

肝再生大鼠血清诱导骨髓干细胞向肝细胞分化的实验研究

目的观察肝大部切除大鼠再生血清和肝细胞生长因子(HGF)诱导骨髓干细胞向肝实质细胞分化的作用；探讨骨髓干细胞向肝细胞分化和增殖的体外培养条件和方法，为患者应用自身骨髓细胞修复损伤肝脏提供实验依据。方法制作肝大部切除大鼠肝再生动物模型，收集术后24h血清；分别应用鼠肝再生血清和HGF对大鼠骨髓细胞进行定向诱导分化培养；以免疫组化、RTPCR和western blot等方法对分化不同阶段细胞进行检测。将分化细胞经尾静脉输入同系大鼠，观察输注细胞在肝、脾内的生长情况。结果活体移植分化细胞能定向迁移至肝和脾；体外及体内分化细胞在mRNA水平和蛋白质水平均表达白蛋白，并在一定时期内表达甲胎蛋白。结论大鼠骨髓干细胞在肝大部切除再生血清或HGF的诱导下能横向分化为肝实质样细胞。     

骨髓干细胞在大鼠肝纤维化形成环境中的分化

目的 研究骨髓干细胞在肝纤维化形成环境中向肝细胞定向分化。 方法 采用四氯化碳皮下注射法诱导大鼠肝纤维化,应用流式细胞仪分选富集Thy+CD3-CD45RA-的骨髓干细胞,采用红色荧光染料PKH26-GL对其标记后进行自体移植,6周后通过免疫组织化学方法检测大鼠肝组织白蛋白、ck 8、α-平滑肌肌动蛋白表达。 结果 PKH 26-GL标记的细胞在纤维化肝脏中表达白蛋白和ck8,占肝细胞总数的(0.17±0.02)％;未见表达α-平滑肌肌动蛋白。 结论 骨髓干细胞在肝纤维化形成环境中可以向肝细胞定向分化,不向肌成纤维样细胞分化。     

肝干细胞的研究进展

肝干细胞是成体千细胞的一种，由于其具有强大的增殖能力，并能分化为具有功能的成熟肝细胞，为肝病的细胞治疗和组织工程提供了重要的细胞来源。现就肝干细胞的来源、标志物、诱导与示踪、体外培养与扩增、分化及其与肝细胞癌的关系作一综述。     

骨髓干细胞移植治疗急性肝损伤大鼠的实验研究

目的评价骨髓干细胞移植治疗急性肝损伤大鼠的治疗作用。方法采用2-乙酰氨基芴造成急性化学性肝损伤及2/3肝脏切除造成急性物理性肝损伤两种大鼠肝损伤模型,观察门静脉和肝实质内两种移植方式移植骨髓干细胞对以上两种急性肝损伤大鼠的治疗作用。结果在化学性肝损伤大鼠,细胞移植后3周,肝内注射组血清白蛋白明显高于门静脉移植组(P=0.03);在物理性肝损伤大鼠,移植后48h,门静脉移植组和肝内注射组血清谷丙转氨酶均明显升高,且肝内注射组明显高于门静脉移植组(P=0.0009),而谷草转氨酶和血清白蛋白均无明显异常(P0.05);移植后3周,两组各项肝功指标均无明显异常。结论骨髓干细胞移植可以促进化学性肝损伤大鼠血清白蛋白恢复,肝内注射方式较门静脉移植疗效更好,肝实质内移植骨髓干细胞易引起谷丙转氨酶升高。     

骨髓干细胞转分化为肝细胞的研究进展

目前，有关骨髓干细胞的转分化现象已成为国际上干细胞的研究热点之一。1997年，Eglitis等发现供体来源的骨髓干细胞能分化为神经胶质细胞，表明骨髓干细胞在一定条件下可以跨胚层分化成其他类型的细胞，这种现象被称为转分化／横向分化（transdifferentiation）。1999年，Petersen等首次报道骨髓干细胞可以转分化为肝脏细胞后，人们希望骨髓干细胞能成为治疗急、慢性肝衰竭的一个新方法。但是目前对于骨髓干细胞转化为肝细胞的研究仍存在许多谜团和争议。因此，本文着重对近年来骨髓来源的肝细胞的研究进行综述。     

骨髓干细胞在肝纤维化治疗中的作用机制

近年来,骨髓干细胞(bone marrow stem cell,BMSC)在肝纤维化中的应用研究日益增多,显示出一定的抗肝纤维化作用,但具体机制尚不明确.众多研究结果显示,BMSC可能主要从两方面发挥抗肝纤维化作用,一是通过分化为功能性肝细胞、分泌生长因子和增强内源性肝细胞增殖来促进肝再生,二是通过分泌抗纤维化细胞因子、影响肝星状细胞和表达基质金属蛋白酶-9来抑制肝组织纤维化的形成.本文对骨髓干细胞在肝纤维化治疗中可能的作用机制作一系统阐述,为从事骨髓干细胞移植治疗肝纤维化的研究者提供借鉴和指导.