ELISA法测梅毒抗体假阳性原因分析及对策

酶联免疫吸附试验(ELISA)具有高特异性、高敏感性以及低检测费用等特点,其操作简单,无需特殊设备,适宜大批量检测,已在国内广泛应用。但因为影响因素诸多,难免会造成假阳性,因此了解假阳性出现的原因,避免假阳性结果的产生是极其必要的。     

酶联免疫吸附试验测定乙肝标志物的影响因素

目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）测定乙肝标志物的影响因素。方法用ELISA对乙肝病毒血清标志物进行检测。结果影响因素包括：仪器设备，试剂，标本，操作过程，环境，质量控制等方面的诸多因素。结论在日常检测工作中，只要检验人员具有高度的责任心，对影响检测结果的诸多因素，积极采取全面的质量控制措施，减少或设法消除误差，就可以预防假阴性、假阳性结果的出现，为临床提供准确可靠的检测结果。     

ELISA法与TRUST法检测梅毒结果比较

甲苯胺不加热血清试验（TRUST）法是传统的梅毒检测方法，其操作简便，快速易读。但因其为非特异性血清学实验，手工操作，肉眼判读结果，敏感性及特异性均较差，故常造成假阳性或假阴性。酶联免疫吸附试验（ELISA）法是近年来用于检测梅毒螺旋体抗体的特异性血清学实验。笔者用2种方法对临床1350例患者标本进行了检测比较，现报告如下。     

不同方法检测正常人群血清甲胎蛋白比较

目的：对甲胎蛋白（AFP）酶联免疫吸附试验法与甲胎蛋白化学发光法两种检测方法的敏感性和特异性进行对比,评价两种方法在正常人群中甲胎蛋白检测的应用效果。方法：用酶联免疫吸附试验法与化学发光法同时对2000份体检血清标本甲胎蛋白进行检测。结果：用酶联免疫吸附试验法检测出20例甲胎蛋白阳性标本,用化学发光法检测甲胎蛋白21例高于正常范围,化学发光法检出AFP高于正常范围的21例中,阳性率1．05％,经确证AFP高于正常范围的21例,均为阳性;酶联法检出20例阳性,阳性率1．15％,1例经确证为阴性,特异性为95％。两种方法同为阳性的20例标本,经确证均为阳性。结论：在正常体检甲胎蛋白人群中,酶联免疫吸附试验法与化学发光法检测AFP敏感性差别不大,而特异性差别较大,甲胎蛋白酶联免疫吸附试验法更适合于血液的甲胎蛋白筛查。甲胎蛋白筛查阳性的标本再用化学发光法定量检测AFP,可保证排除AFP假阳性。     

酶联免疫吸附试验监测梅毒的应用评价

目的：评价酶联免疫吸附试验（ELISA）对梅毒病人诊断的敏感性和特异性。方法：使用目前常用的梅毒密螺旋体感染诊断酶联免疫吸附试验（ELISA）对3718例2006-7-1至2007-7-1门诊及住院手术输血病人进行检测。若结果阳性再做梅毒简介血凝试验（TPHA）。结果：ELISA共检阳性37例,其中30例经临床诊断为阳性。结论：该方法灵敏度高,操作方便。     

ELISA试验的质量控制

酶联免疫吸附试验 (EL ISA)是在放射免疫分析理论的基础上发展起来的一种非放射性标记的免疫技术。因其具有操作简单 ,特异性强 ,灵敏度高而被广泛应用于血清学诊断领域。由于 EL ISA试验不象生化反应那么简单 ,试验过程中可受到种因素的影响 ,因而各实验室的检测结果常存在不相符的现象 ,有时甚至出现假阳性或假阴性。如疾病控制中心每年都要对从事饮食食品、化妆品等行业的从业人员血清标本进行乙肝指标检测。若出现假阳性 ,便会造成这些人员无端调离原工作岗位的不良后果 ;若出现假阴性。有可能引起饮食行业乙型肝炎患者的漏检 ,在一…     

酶联免疫吸附试验测定HBsAg弱阳性标本的处理

目的:探讨酶联免疫吸附试验测定HBsAg弱阳性标本的处理。方法:采用酶联免疫吸附测定法和胶体金层析法进行HBsAg弱阳性标本检查。结果:本次研究对66份弱阳性标本用胶体金法进行检查,发现49份标本呈现阳性。再采用酶联免疫吸附测定法进行复查后,有53份标本呈现阳性,弱阳性标本2份,11份假阳性标本。结论:医院在对HBsAg弱阳性标本检验的环节中,可以先采用胶体金层析法进行检查,然后再对阴性患者采用酶联免疫吸附测定法进行复查,可以提升检查的精确性。     

三种梅毒血清学检验方法在临床中的应用

目的：筛选有效的检测试剂,提高临床诊断符合率。方法：选取2011年12月-2012年12月的职业健康体检10286例标本,采用对酶联免疫吸附试验（ELISA）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）3种血清学检测方法进行梅毒诊断,并作结果分析。结果：ELISA法检出阳性标本675例中,经TPPA确证阳性657例,阳性符合率97.33%。TRUST法检出阳性424例,均经TPPA确证阳性;而ELISA筛查阳性而TRUST阴性的标本有7.17%的假阳性结果。结论：建议3种检测方法结合应用能更有效提高梅毒临床诊断符合率。     

国产确认试剂用于确认献血者乙型肝炎病毒表面抗原阳性血液的效果分析

目的使用HBsAg确认试剂对国产HBsAg酶联免疫吸附试验试剂盒检测无偿献血者血液的可靠性以及试剂的灵敏度、特异性等进行初步评价,探讨HBsAg确认试剂在献血员传染性指标筛查中的意义。方法对无偿献血者血液样品,使用国产的HBsAg酶联免疫吸附试验试剂盒进行测定。对结果呈阳性反应样品、3种试剂检测结果不一致的部分可疑结果样品、3种试剂检测均为阴性样品,使用HBsAg确认试剂盒(中和试验法)初步进行确认试验。确认试验方法参照说明书进行。结果 132例样品中阳性反应或可疑阳性反应者123例,被确认为阳性者106例,其中有17例可疑结果者常规确认试验结果为"阴性"。经3种试剂再测,结果仍为可疑。9例0.074≤样品A值Cut off的样品和随机抽取的9例阴性样品常规确认试验结果仍为阴性。8例单一试剂呈阳性反应者常规确认为假阳性。结论国产HBsAg ELISA试剂测定结果为阳性、弱阳性和可疑的样品应使用适当方法进行确认,排除假阳性,一方面避免因为假阳性导致的献血员流失,另一方面对选择使用HBsAg筛查试剂有一定的参考价值。血液系统所使用试剂在保证高灵敏度的前提下应该有满意的特异性。以保证结果准确。从实验结果看目前国产HBsAg酶联免疫吸附试验试剂盒有较高的灵敏度(未与进口试剂进行灵敏度比对试验),特异性尚待提高。     

ELISA法检测HIV抗体质控图的应用及其影响因素分析

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体实验的效果及其在外部对照质控图中的变化,分析可能对实验结果造成影响的因素。方法共进行20次ELISA实验,运用外部对照质控图技术,结合Westgard多规则质控法,由HIV抗体阳性和阴性血清制成外部对照血清,用外部对照血清S/CO值绘制质控图。分析实验结果及相关影响因素。结果 S/CO值均在x+2s和x-2s之间进行波动。控制标本的内源性和外源性影响因素、实验反应温度,把检测误差控制在容许限度内,有助于控制监测结果的精密度、准确度和可靠度,使检测数据和结果达到给定置信水平下,进而确保检测工作质量。结论外部对照质控图技术适用于ELISA法检测HIV抗体实验。     

TCT联合HPV在宫颈病变诊断中的价值

目的:探讨液基细胞学检查(TCT)和HPVDNA检测在子宫颈病变的诊断价值。方法:对某医院宫颈门诊1391例患者作TCT检测,所测阳性结果行HPV DNA检测以及阴道镜活检病理组织学检查,并以病理结果为金标准。对218例TCT阳性的患者,比较TCT、HPVDNA两种检测方法的敏感度。结果:TCT检测阳性者218例中,HPVDNA检测的敏感度为87.25%,TCT检测的敏感度为71.56%。两者相比差异有统计学意义(P0.05)。随着TCT及病理级别的升高,HPV阳性率也在升高。结论:对于宫颈癌及其癌前病变的筛查及早期诊断,TCT存在一定的假阳性和假阴性率,结合HPV检测可以提高宫颈异常细胞检出率,降低假阴性。     

Urisys2400尿液干化学分析仪应用的影响因素

目的分析Urisys2400尿液干化学分析仪检测结果的影响因素。方法对800份尿标本采用仪器干化学分析法和光学显微镜检查法检测白细胞、红细胞2项指标,并进行对比分析,讨论造成尿分析仪测定各项指标的假阳性、假阴性结果的原因。结果干化学分析法红细胞假阳性率为13．0％,假阴性率为1．1％;白细胞假阳性率为9．9％,假阴性率为0．8％。结论在尿液的常规检验中,需要干化学法和光学显微镜镜检相结合,防止产生漏诊和误诊,要重视尿的实验室的质控工作,定期作好仪器的维修保养工作,保证检验结果的准确性。     

UF-500i型全自动尿沉渣分析仪临床应用价值分析

目的:探讨UF-500i型尿沉渣分析仪与干化学、显微镜检查联合检测尿液的应用价值.方法:随机选择965份本院住院患者尿液,同时用显微镜检测、尿干化学分析仪和UF-500i型全自动尿沉渣分析仪检测,比较其多个参数结果.结果:该方法测红细胞、管型和上皮细胞假阳性率较高,分别是19.6%、81.4%、15.6%,白细胞假阳性率较低,为2.52%.结论:UF-500i型尿沉渣分析仪与干化学法联合过筛并结合常规镜检复查可疑标本,可以排除假阳性结果,使尿液分析准确化,可极大提高其检测效果,为临床提供可靠依据     

新生儿疾病筛查临界值选取与筛查效率

目的:探讨武汉市新生儿疾病筛查临界值选取方法和运用此临界值的筛查效果,总结经验、提高筛查效率,降低漏诊率。方法:新生儿出生后72 h,采足跟末稍血制成滤纸干血片,用FEIA法检测血片中TSH和Phe含量,根据季节和标本采集时间选择不同临界值,并将初筛阳性新生儿召回确诊。结果;5年来,共筛查新生儿137826例,使用新临界值后,CH和PKU初筛阳性率由7.14‰和1.27‰增加到9.98‰和1.99‰,同时,CH和PKU发病率分别由0.49‰和0.60万/提高到0.78‰和1.05万/。结论:新生儿疾病筛查实验室应根据自身实际情况,制定适合本地区临界值,最大限度地减少漏诊,同时,避免过高假阳性给社会带来的负担,实验室要加强全面质量控制,推动新生儿疾病筛查工作向深层次发展。     

全国新生儿疾病筛查实验室室间质量评价5年回顾

目的:回顾分析5年来参加卫生部新生儿疾病筛查实验室室间质量评价的反馈结果,总结实验过程中的问题。方法:分别采用荧光法和时间分辨荧光免疫分析法(DELFIA)对卫生部临检中心分发的各批次质评样本的苯丙氨酸(Phe)和促甲状腺激素(TSH)值进行检测,对反馈结果进行总结分析。结果:5年来共接受卫生部临检中心分发的15批次共计75份质评样本,Phe测定结果偏倚分布范围在-30.0%~33.33%之间,相对偏倚平均值为11.99%;TSH测定结果偏倚分布范围在-61.11%~105.56%之间,相对偏倚平均值为17.09%;75份质评样本中,2份Phe测定结果和9份TSH测定结果失控(偏倚≥30%或≤-30%),失控率分别为2.7%(2/75)和12.0%(9/75);75份Phe质评样本中,阴性19份,阳性56份,定性判断结果符合率为100%(75/75);75份TSH质评样本中,阴性38份,阳性37份,定性判断结果出现1例假阳性,符合率为98.67%(74/75);每一批次项目评分结果均≥80%,室间质量评价合格。结论:参加全国新生儿疾病筛查实验室苯丙氨酸和促甲状腺激素检测室间质量评价,有助于评估实验室的检测能力,及时发现和解决筛查实验过程中存在的问题,从而提高检测质量,减小实验误差,保证筛查结果的准确性。     

ELISA检测中全自动加样引起拖带假阳性现象的分析

目的：探讨ELISA检测中全自动加样引起拖带假阳性现象的原因以及所要采取的对策。方法别使用试剂检测筛查血液标本，然后根据检测试剂说明书的要求，在全自动样本处理系统控制微机上编辑程序，程序包括初检和复检。使用一次性探针和永久性探针的污染情况对比，再使用2种标本进行3孔复检，在进行判断是否为强阳性所引起的拖带污染现象。结果整个检测过程中，以HIV检测为例所检测的7324份血液检测中出现拖带假阳性现象的为2例，而2013年1月-2014年5月间共检测血液标本66085份，没有出现拖带假阳性现象。结论一次性加样探针的使用能够很好的减少甚至杜绝拖带假阳性污染现象的发生，在检测过程中由于不同的厂家的试剂有所区别，在设计加样参数时应该遵循科学合理的原则，检测仪器要定期进行检验维修，校准，同时对于血液标本要严格质量控制，提高检测的准确性和安全性，使得全自动检测设备的优势充分。     

葡萄球菌凝固酶试验玻片法结果最佳判读标准的探讨

目的探讨葡萄球菌凝固酶试验玻片法结果的最佳判读标准。方法对临床标本分离的70株葡萄球菌属细菌,以聚合酶链反应（PCR）法检测葡萄球菌凝固酶基因（金标准）,同时以乳胶凝集法快速检测金黄色葡萄球菌(Slidex Staph Plus),试管法、玻片法检测葡萄球菌凝固酶。经VITEK Ⅱ全自动分析仪鉴定细菌到种。结果70株葡萄球菌属细菌中,PCR法检测葡萄球菌凝固酶基因56株为阳性;Slidex Staph Plus与PCR法相对应的56株为阳性;试管法检测与前2种方法相对应的54株为阳性,2株为假阴性;玻片法为强阳性;VITEK Ⅱ全自动分析仪鉴定56株为金黄色葡萄球菌（与PCR法同）。另14株菌经鉴定为溶血性葡萄球菌。玻片法以粗大颗粒状或明显大絮片状凝集为血浆凝固酶试验阳性的判断,其准确度为80.00%,假阳性率为20.00%。结论葡萄球菌凝固酶试验玻片法结果最佳判读标准：以10 s内血浆中呈不可磨散的明显团块状凝集,液面清亮,在无菌生理盐水中不凝集为阳性。     

临床免疫检验质量控制相关措施探讨

目的：探讨对临床免疫检验质量有影响的因素及与其相关的控制措施。方法：选取在本院行免疫检验的样本15 600份,从样本的采集到保存,均有可能对检测结果造成影响,对影响临床免疫检验质量的相关因素进行分析,制定出相关的控制措施。结果：实验室的湿度、温度、实验员操作水平、洗液更换情况、标本质量、试剂平衡试剂均会影响临床免疫检验的质量（P〈0.05）。结论：临床免疫检验结果的影响因素较多,可从内源性以及外源性干扰因素着手,采取针对性质量控制措施,提升临床免疫检验结果质量。     

新生儿先天性甲状腺功能减低症筛查10年回顾

目的了解武汉市CH发病率及10年筛查情况,总结经验、查找不足以指导今后筛查工作。方法CH筛查方法为新生儿出生后72h、采足跟末梢血制成干血滤纸片,用EIA法或ELISA法检测血片中TSH含量,将EIA法TSH值≥10mIU/L或ELISA法≥20mIU/L的新生儿判为筛查阳性,并召回确诊。结果武汉市10年来,共筛查新生儿271221例,确诊CH患儿125例,CH发病率为0.461‰,男、女之比为1∶1.23,10年CH发病率无显著上升或下降趋势;用ELISA法和用EIA法检测的CH发病率之间无显著差异。结论武汉市是CH高发地区,各级政府部门和妇幼保健机构应加强新生儿疾病筛查网络建设及管理,进一步提高筛查覆盖率;业务技术指导部门应加强标本采集和实验人员的培训;选择适当的筛查、实验方法,完善质控机制;降低CH患儿发生率,提高武汉市出生人口素质。     

全自动血细胞分析血涂片复检规则应用分析

目的：分析自动血细胞分析血涂片复检规则应用。方法：采取2012年10月-2013年10月本院收集的680份血标本,采取自动血细胞进行分析,同时进行显微镜检查,观察细胞形态、人工白细胞分类等,遵循国际血细胞复检规则进行评估。结果：采取仪器检测和血涂片镜检680份血标本,指标结果显示,其中真阳性率为15.00%、假阳性率为7.35%、真阴性率为76.92%、假阴性率为0.73%,病情诊断意义的重要参数无假阴性,涂片复检率为22.35%,血液病细胞准确率为100%,无漏检现象。结论：采取合理的血细胞计数、白细胞分类的血涂片复检规则具有重要的意义,可确保检测报告的准确性,提高科室工作效率。