抗肿瘤活性化合物1403C的分离纯化

从海洋红树内生真菌Fusarium proliferatum NO.1403的发酵液中分离纯化抗肿瘤活性产物1403C。发酵液经过滤得到菌丝体,用75%乙醇于70℃、p H 2.0条件下抽提3次,抽提上清液加水稀释至乙醇含量30%。经Amberchrom CG161树脂柱吸附去除弱极性杂质得到纯化液,纯化液浓缩近干后用80℃的75%乙醇结晶,得到红色晶体1403C。采用上述方法共制备6批样品,平均收率35.9%。     

Echinocandin B的分离纯化工艺研究

目的开发echinocandin B的分离纯化工艺。方法采用大孔吸附树脂吸附解吸-溶剂萃取-溶剂结晶的分离纯化方法。结果 HZ830树脂为最佳吸附剂,吸附流速选择为2BV/h,洗脱剂为85%乙醇,结晶溶剂为丙酮。在此实验条件下所得产品纯度≥95%,提取总收率大于60%。结论此方法简单,分离效果好,适于工业化生产。     

柱色谱法分离纯化黄酮类化合物研究进展

目的综述柱色谱法分离纯化黄酮类化合物的研究进展。方法查阅近年来公开发表的论文、专著等资料,对柱色谱法分离纯化黄酮类化合物进行概述。结果与结论柱色谱法是一种简单易行又行之有效的分离纯化黄酮类化合物的方法。     

铁皮石斛内生真菌的鉴定及菌株205509的次级代谢产物研究

摘要：目的 鉴定铁皮石斛内生真菌及从中发现活性菌株,探究菌株205509产生的次级代谢产物。 方法 利用分子生物学方法并结合形态特征,对9株铁皮石斛内生真菌进行鉴定;采用琼脂扩散法和MTT法,筛选出次级代谢产物丰富,且具有抑制病原指示菌和人乳腺癌MCF-7细胞系的活性菌株;利用大米固体培养基对活性菌株进行发酵,乙酸乙酯萃取;采用硅胶、反相硅胶、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20和HPLC色谱技术进行分离纯化,得到化合物;通过质谱(MS)和核磁共振(1H NMR和13C NMR)等波谱技术并结合文献比对,确定化合物结构。结果 9株铁皮石斛内生真菌分属3个科的3个属,初步判定其中1株为枝顶孢霉属(Acremonium)的一个新种,2株为树粉孢属(Oidiodendron)的一个新种,2株为Acremoniopsis属的未确定种;获得抗菌活性和细胞毒活性较好的菌株205509,并从中分离得到了4个化合物,其中化合物HXW-3浓度为3 μg/mL时对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium)和蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)表现出抑制活性。结论 铁皮石斛内生真菌物种较新颖,其次级代谢产物具有较好的生理活性,值得进一步研究。     

一种蛹拟青霉代谢产物中抗肿瘤活性组分的分离纯化

目的对一种蛹拟青霉代谢产物中抗肿瘤活性组分进行分离纯化。方法通过最佳展开剂的选择,找到硅胶柱色谱系统的最佳洗脱条件,粗分离后的供试品通过凝胶柱色谱系统分离纯化得到纯供试品。结果分离纯化得到的供试品纯度均大于95%,通过后期的体外抗肿瘤实验,证明具有良好的肿瘤细胞抑制率。结论硅胶柱色谱和凝胶柱色谱的混合利用可以提高供试品的分离纯化效果。     

红树林耐酸真菌OUCMDZ-4736次生代谢产物研究

目的 探究红树林耐酸真菌OUCMDZ-4736的次生代谢产物及其抗甲型流感病毒H1N1活性。方法 菌株在pH 2.5条件下规模发酵,通过现代色谱学方法（硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、半制备以及制备型HPLC）对发酵产物进行分离,运用现代波谱学技术（紫外、质谱、核磁共振等）鉴定分离获得的化合物结构,采用MTT法评价化合物的抗流感病毒H1N1的活性。 结果 从红树林根部泥土样品来源的真菌OUCMDZ-4736中分离鉴定了10个化合物：asterric acid（1）、questinol（2）、parietinic acid（3）、endocrocin（4）、isorhodoptilometrin（5）、sulochrin（6）、monochlorsulochrin（7）、dihydrogeodin（8）、yicathin C（9）、2, 5-dimethyl-6, 8-dihydroxy-chromone（10）。活性评价结果首次报道化合物1、3、4和7显示有弱的抗甲型流感病毒H1N1活性。结论 红树林耐酸真菌OUCMDZ-4736在酸性调节下能代谢产生具有抗甲型流感H1N1病毒活性的化合物。     

一株海南三亚红树林真菌Alternaria alternate次级代谢产物的研究

目的 对1株来源于海南三亚红树林淤泥中的链格孢霉属真菌Alternaria alternate SY5-1-1次级代谢产物进行研究。方法 通过减压硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、反相中压以及半制备HPLC等色谱技术对其次级代谢产物进行分离纯化。通过MS和NMR等波谱方法以及对比文献,确定化合物的结构。结果 从真菌Alternaria alternate SY5-1-1乙酸乙酯提取物中分离得到11个化合物分别为secalonic acid A（1）、altertoxin I（2）、N-[(Z)-2-(4-hydroxyphenyl) ethenyl]-formamide（3）、5-hydroxymethyl-2-furoic acid（4）、dibutyl phthalate（5）、cyclotryprostatin A（6）、dihydrovermistatin（7）、verruculogen TR-2（8）、cyclo-(L-4-OH-Pro-L-Leu)（9）、cyclo-(trans-4-OH-D-Pro-D-Phe)（10）和cyclo-(D-Pro-D-Phe)（11）。结论 化合物secalonic acid A（1）、N-[(Z)-2-(4-hydroxyphenyl) ethenyl]-formamide（3）、5-hydroxymethyl-2-furoic acid（4）、cyclotryprostatin A（6）、dihydrovermistatin（7）、verruculogen TR-2（8）均首次在链格孢霉属真菌中发现。     

滑桃树内生真菌Fusarium sp.2TnP1-2次生代谢产物研究

目的对滑桃树内生真菌Fusariumsp.2TnP1-2的抗菌活性次生代谢产物进行研究。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、制备性薄层色谱等对次生代谢产物进行分离纯化。根据理化性质和波谱分析进行结构鉴定。利用纸片扩散法对这些化合物的抗真菌及抗细菌活性进行测试。结果从该菌株PDA培养基发酵产物中分离得到3个化合物,分别鉴定为：trichosetin（-Ndemethyl equisetin,1）,lateritin（4-methyl-6-（1-methylethyl）-3-phenylmethyl-1,4-perhydrooxazine-2,5-dione,2）,5α,6-αepoxy-24（R）-methylcholesta-7,22-dien-3-βol（3）。结论3个化合物均为首次从该真菌的代谢物中分离得到,trichosetin和lateritin具有抗金黄色葡萄球菌活性。     

大孔吸附树脂分离纯化技术及应用

大孔吸附树脂是一类有机高聚物吸附剂,大孔树脂分离纯化技术是20世纪60年代末发展起来的一项分离纯化技术。本文就大孔树脂分离纯化技术以及近年来在医药工业多领域的应用研究情况进行综述。     

海洋青霉属真菌菌株XGH2321抑菌活性代谢产物的分离与鉴定

目的从青霉属真菌XGH2321的发酵液中分离抑菌活性次级代谢产物。方法发酵液经乙酸乙酯萃取、正相硅胶柱层析、C18柱制备色谱分离获得单体,并对化合物进行结构鉴定及活性测试。结果从菌株XGH2321的乙酸乙酯提取物中分离得到3个己酮烯类化合物及1个酯类化合物,根据化合物的光谱特征(ESI-MS、1H-NMR和13C-NMR)和理化性质分别鉴定为sorbicillin(1),2’,3’-dihydrosorbicillin(2),2,3-Dihydro-7-hydroxy-6,8-dimethyl-2-[(E)-prop-l-enyl]chromen-4-one(3)和dibutylphthalate(4),其中化合物3和4对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的生长具有明显的抑菌活性,化合物1、2、3对白色念珠菌(Candida albicans)的生长具有明显的抑菌活性,化合物1和2对烟曲霉(Aspergillus fumigatus)对的生长具有明显的抑菌活性。结论化合物2和3的抗MRSA作用,化合物1和3的抗白色念珠菌作用及化合物1、2和3的抗烟曲霉作用属首次报道。     

制备型高效液相色谱在手性分离中的应用研究

目的：考察制备型高效液相色谱在分离手性药物中的实际应用及影响因素。方法采用大赛璐手性色谱柱,以正己烷－异丙醇－冰乙酸溶液（100∶1∶0．1％）为流动相,流速70mL? min －1,检测波长240nm,考察了制备型高效液相色谱的放大以及影响因素。结果布洛芬对映异构体在分析条件下实现了良好的分离,将该方法线性放大到制备分离中,根据硬件设备及样品分离度等具体情况优化各项色谱参数,轻松实现了布洛芬原料1日55 g的分离效果,产品回收率达到90％,光学纯度达到98．5％以上。结论结果表明,制备型高效液相色谱应用于布洛芬对映体分离中,简便、可靠、高效、易于放大,可广泛用于手性药物规模化分离。     

pH区带精制逆流色谱在分离生物碱类物质的应用

pH区带精制逆流色谱法是在普通制备型高速逆流色谱分离纯化生物碱类成分的应用基础上发展起来的一种特殊逆流色谱分离制备技术。pH区带精制逆流色谱法由于具备进样量高、分离效率高、分离效果好、杂质易收集、可实现pH监控、待分离组分被高度浓缩等优点,目前已被广泛应用于研究领域与实践中。生物碱类物质是重要的天然产物成分,具有很强的生物活性,对很多疾病有良好的治疗作用。本文介绍了pH区带精制逆流色谱法及其在分离生物碱类天然产物中的应用。     

高速逆流色谱法分离制备红霉素中的红霉素A及红霉素B

应用高速逆流色谱法,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5:5:5:5)为两相溶剂系统,从红霉素中分离制得红霉素A和红霉素B,纯度分别为98.18%和99.05%。     

高速逆流色谱在天然产物分离中的应用

综述了高速逆流色谱在天然产物有效成分分离中的新应用.     

反相高效液相色谱法测定广西血竭中龙血素B的含量

本文采用反相高效液相色谱法测定广西血竭中龙血素Ｂ的含量。以炔诺酮作内标，乙腈－冰酯酸溶液（１→９０）（３０：６１）为流动相，ＵＶ检测波长为２６０ｎｍ，龙血素Ｂ浓度在１０－１２０μｇ／ｍｌ与峰面积呈线性相关。加样回收率为９７．５％，相对标准偏差为１．８％。     

pH梯度洗脱高速逆流色谱制备性分离决明子中的橙黄决明素和大黄酸

目的建立一种从决明子提取物中分离特征性成分橙黄决明素的高效制备性分离方法。方法采用高速逆流色谱技术,针对目的化合物选择合适的两相溶剂体系,水相为流动相并采用pH梯度洗脱。结果采用制备性高速逆流色谱技术一次性从150mg决明子提取物中分离得到了28mg橙黄决明素以及30mg大黄酸,其纯度分别为98.7%和95.5%。结论采用pH梯度洗脱的方法能快速的分离得到中草药中的蒽醌类化合物。     

蛋白A亲和层析法纯化抗乙肝核心抗原单克隆抗体

建立从小鼠腹水中纯化抗乙肝核心抗原(HBcAg)单克隆抗体的一步层析法。将含抗HBcAg单克隆抗体的腹水经离心、过滤和缓冲溶液变换预处理后,采用HiTrap rProtein A FF亲和层析柱纯化,并探讨了上样缓冲液的pH值和NaCl浓度,洗脱液的种类、pH值以及体积流量对抗体纯度及回收率的影响,纯化后的单克隆抗体的生物学活性用间接ELISA法测定。结果显示,以pH7.0,20mmol/LPB+3.0mol/LNaCl为上样缓冲液,0.1mol/LGly-HCl为洗脱液,体积流量为5.0ml/min时,抗HBcAg单抗的纯度大于95%,回收率达75%,纯化后的单克隆抗体的生物学活性没有下降。本研究建立了蛋白A亲和层析法纯化抗HBcAg单克隆抗体的方法,其操作简便、快速而且效果良好。     

Enantiomeric Resolution of Drug Compounds by Liquid Chromatography

Novel techniques have recently emerged to separate chiral drug compounds into pure enantiomers. The mechanism, experimental difficulties, and applicability of these methods can vary greatly, and the choices involved are not straightforward. The most significant new advances in the field of chiral separations have come from work done with liquid chromatographic systems and chiral stationary-phase columns. This review describes several commonly used approaches to chiral separation, diastereomeric derivatization, chiral mobile-phase additives, and three major types of chiral stationary phases. Although no single method can be judged superior for every drug application, it appears that chiral stationary phases have received the most attention recently and they are emphasized here.     

高效液相色谱法同时测定5种抗乙肝药物的研究

目的建立高效液相色谱法同时测定五种抗乙肝药物。方法采用水-乙腈-三氟乙酸在Waters Xbridge C 18柱(4.6×250mm,5μm)上进行梯度洗脱,流速为1.0mL·min^-1,检测波长为260nm,柱温35℃。结果5种药物在35min内均能达到基线分离,线性范围良好,相关系数均大于0.999;平均回收率n=3为99.4~101.7%(RSD:0.1~1.7%),精密度和稳定性试验的RSD分别为0.6%~0.8%,0.4%~0.5%,检测限0.1~0.2μg·mL^-1。在恩替卡韦制剂样品中检出假阳性样品,检出物为阿德福韦酯。结论该方法适用于五种抗乙肝药物同时测定,并且能准确筛查出高仿假药。     

离子对色谱法测定复方叶酸片中维生素B6、B12及叶酸的含量

目的:建立同时测定复方叶酸片中维生素B_6、B_(12)和叶酸含量的离子对色谱法。方法:色谱柱为日本TOSHO公司的ODS-80TS色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.05 mol·L~(-1)磷酸二氢钾缓冲液(12:88,含3.88 mmol·L~(-1)四甲基溴化铵,pH 7.2),流速0.8 mL·min~(-1);检测波长为360 nm;进样量为20μL。结果:维生素B_6、B_(12)和叶酸分别在30.4～274.3 μg·mL~(-1)、0.87～2.6 μg·ml~(-1)和4.87～19.4μg·mL~(-1)范围内呈线性关系;相关系数分别为0.999 4,0.999 4,1.00O。平均回收率分别为99.6％(RSD=0.45％),99.7％(RSD=0.84％),99.5％(RSD=0.46％)。结论:本法可同时测定复方叶酸片中维生素B_6、B_(12)和叶酸的含量,方法简便、准确。