免疫胶体金层析法快速检测食品中吗啡

食品中罂粟的测定采用液相色谱法,因仪器价格昂贵,不易推广,基层常采用薄层层析法,但该法操作繁杂,而且由于被测样品中往往含有多种香料,对实验造成严重干扰,可能得到不准确结果.本实验采用免疫胶体金层析法进行食品中吗啡分析,该法特异性强、灵敏度高,取得了良好效果.现报告如下.     

沙门菌显色培养基在食品检测中的应用

[目的]了解沙门菌显色培养基检测食品沙门菌分离和初步鉴定的作用。[方法]将100株实验室保存的沙门菌及非沙门菌接种CAS和DHL培养基平板进行对比。同时取178份食品样品增菌后接种CAS和DHL平板做比较试验。[结果]沙门菌在CAS平板上呈现特定而典型的紫红色菌落,非沙门菌呈蓝色或无色菌落,食品样品中沙门菌的检出率为3.37%(CAS)和1.69%(DHL)。[结论]采用CAS选择性平板分离沙门菌具有直观易鉴别、减轻工作量和检出率较高等优点,适用于暴发性沙门菌感染引起的食物中毒检测。     

沙门菌属性食物中毒及其预防

食物中毒屡见报道 ,给广大人民群众造成健康危害 ,食物中毒的产生原因和如何预防一直为卫生监督部门和广大人民所关心。食物中毒是指人摄入了含有生物性、化学性有毒有害物质的食物出现的急性或亚急性食源性疾病。据卫生部 2 0 0 1年食物中毒通报 ,我国全年食物中毒人数约 2万人 ,其中死亡 135人。而据食品卫生专家估计 ,考虑到症状轻未就诊或漏报等因素 ,我国实际食物中毒人数应在 2 0～ 40万人 /年 ,而隐性感染的人数可能更多。在食物中毒中 ,细菌性食物中毒约占 5 0 % ,而沙门菌属食物中毒占细菌性食物中毒的第一位 (据欧洲不完全统计 ,…     

快速检测O9抗原沙门菌免疫金标层析法的建立及其应用研究

目的:建立一种快速检测O9抗原沙门菌的新方法。方法:利用针对沙门菌O9抗原的两株特异性单克隆抗体,建立一种双抗体夹心检测O9抗原沙门菌的胶体金免疫层析试纸条(GICA)。结果:该试纸条对标准肠炎沙门菌LPS的最小检出量为0.15 ng/条,对肠炎沙门菌菌液的最小检出量为2×105cfu/条。蛋品、鸡肉、猪肉的人工污染试验显示,经增菌后免疫层析试纸条可检出1 cfu的肠炎沙门菌,在大肠杆菌与沙门菌比例为1000:1仍不干扰试纸条的检测。共对市场采集的鸡蛋、鸡肉以及猪肉样品577份进行免疫层析试纸的检测,试纸条与经典细菌分离鉴定法相比:敏感度为90.0%,特异性为98.6%。结论:检测O9抗原沙门菌的GICA法快速、特异、灵敏,在重要沙门菌病检测方面有着潜在、广阔的应用前景。     

一起由韦太夫雷登沙门菌引起食物中毒病原学调查

韦太夫雷登沙门菌 (Ｓ .ｗｅｌｔｅｖｅｒｅｄ -ｅｎ)引起食物中毒 ,在国内很少有报道 ,在我市尚未见过报道。现将 1999年 4月 17日发生的一起韦太夫雷登沙门菌引起 48例食物中毒的调查结果报告如下 :1　中毒经过与现场调查本市某厂职工王某 ,于 1999年 4月 17日晚为其女儿举办     

一起阿哥纳沙门菌引起的食物中毒

1997年 6月 15日 ,镇江市某中学 12名学生聚餐 ,发生了一起因食用牛肉引起的食物中毒。从患者的粪便、呕吐物、牛肉、盛放牛肉的用具以及从业人员的粪便中同时分离到阿哥纳沙门菌 ,现将结果报道如下。1　流行病学调查1.1　中毒经过　 1997年 6月 15日 ,某中学 12名学生一起聚餐 ,餐后 4ｈ有 1人发生呕吐 ,随即伴有腹痛、腹泻 ,15ｈ内共有8人出现类似的急性胃肠炎症状 ,发病率高达 66.7%。其中男生 5名 ,女生 3名 ,年龄最大的 17岁 ,最小的 15岁。进食冷盘牛肉者均有症状发生 ,未进食者未发病。1.2　临床表现　本次发病潜伏期为 4～ 5ｈ ,…     

胶体金免疫层析法在霍乱弧菌诊断中的应用初探

胶体金免疫层析法是目前国内外所建立的一种快速诊断方法,在许多项目的应用中取得了较为理想的效果.霍乱弧菌传统诊断方法是细菌培养法.本文用胶体金免疫层析法与细菌培养法相结合的方式对疫区180份标本进行同步试验,比较分析并摸索出一些经验.现报道如下.     

应用二重PCR对沙门菌属和肠炎沙门菌检测

[目的]建立快速检测肠炎沙门菌的检测方法。[方法]以属特异性引物ST11、ST15和肠炎沙门菌的特异性引物Sefl167、Sef478构建二重PCR反应体系，对样本进行沙门菌属的鉴定同时对肠炎沙门菌进行检测。[结果]实验证明本方法可以准确的对沙门菌属进行鉴定，同时也能比较准确的对肠炎沙门菌进行鉴定。[结论]为沙门菌食物中毒的鉴定提供更加快捷的检测方法。     

建立快速检测鼠疫耶尔森菌的胶体金免疫层析法

〔目的〕　建立检测鼠疫耶尔森菌 (鼠疫杆菌 )的胶体金标记免疫层析方法。〔方法〕　采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,并标记鼠疫杆菌的抗体 ,制成免疫层析检测试纸条 ,进行特异性和敏感性评价 ,并对面粉、土壤、奶粉、淀粉等不同材料进行模拟添加鼠疫菌检测。〔结果〕　用多种不同的常见细菌或近缘细菌进行测试 ,未出现非特异性反应 ,检测鼠疫杆菌的灵敏度为 1× 10 5cfu/ml,对水、土壤、奶粉、面粉、淀粉、酵母粉等不同材料中鼠疫杆菌进行检测也取得同样结果 ,10～ 15min即可得到结果。〔结论〕　建立了 1种可以用于现场快速检测鼠疫杆菌的胶体金免疫层析方法 ,为进一步大规模应用奠定了基础。     

应用API20E检验食物中毒中的沙门菌

2006年8月9日,菏泽市某超市员工先后在一家快餐店进食早餐后,相继出现腹痛、腹泻、呕吐等症状,怀疑食物中毒,根据流行病学调查、实验室病原学诊断,应用API20E肠道菌鉴定生化条及生化分析鉴定系统,成功鉴定引起这次事件的病原菌是巴尔多沙门菌,为事件有效控制及处理提供了科学依     

快速检测日本脑炎病毒胶体金免疫层析试纸条方法的建立

[目的]建立一种能快速区分、简便诊断日本脑炎病毒的胶体金标记免疫层析试纸条方法,并对其进行评价。[方法]采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,并标记日本脑炎病毒的NS1的抗体,制成免疫层析检测试纸条。对试纸条进行特异性和敏感性评价,并对三带喙库蚊进行模拟添加日本脑炎病毒检测。[结果]用三带喙库蚊研磨悬液上清、正常的昆虫细胞液进行测试,呈阴性反应;检测日本脑炎病毒的灵敏度均为1×10^5pfu／ml,对三带喙库蚊添加日本脑炎病毒进行检测也取得同样结果,并在10～15min即可得到结果。[结论]初步建立了一种可以用于现场快速检测日本脑炎病毒的胶体金免疫层析方法,为进一步大规模应用奠定了基础。     

脉冲场凝胶电泳检测一起汤卜逊沙门菌食物中毒

目的:用脉冲场凝胶电泳对一起食物中毒所分离的汤卜逊沙门菌进行同源性分析。方法:对分离的沙门菌进行生化鉴定、血清学分型、药敏试验后,进行PFGE检测并用Bio Numerics软件对PFGE分型图谱进行分析并绘出聚类分析图。结果:此次食物中毒分离到8株沙门菌,其中5株是从病人大便或肛拭分离,1株是从厨房抹布分离,2株是从剩余食物分离。经PFGE分析,病人的5株和剩余羊肉的1株完全相同,牛肉和抹布中的2株有1～2条电泳条带的差异。结论:此次食物中毒是由羊肉携带的汤卜逊沙门菌引起。     

斑点免疫金渗滤法检测沙门菌的研究与应用

〔目的〕研究一种特异性强,灵敏度高,且操作简便,快速的沙门菌检测方法,以用于临床样品中沙门菌的快速检测,并能在基层推广应用。〔方法〕应用胶体金标记纯化的兔抗沙门菌抗体-1,SPA(金黄色葡萄球菌A蛋白)包被硝酸纤维素膜作对照点,建立直接检测沙门菌的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)检测试纸盒。〔结果〕通过胶体金标记兔抗沙门菌抗体直接显色,阳性者出现红色斑点,结果易于判断。整个试验过程仅需10￣15min即可判断结果,操作简单,与大肠埃希菌、枸橼酸杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌等不发生交叉反应。沙门菌的最低检测量为4.5×106cfu/ml。同时将该法与国标法检测效果比较,符合率达100%。将胶体金标记的兔抗沙门菌抗体冻干粉4℃存放12个月,检测结果无差异。〔结论〕研究结果表明该法具有微量、特异、敏感、快速可靠,效果直观,判断容易,无需特殊仪器设备,非常适用于沙门菌的快速检测,值得推广应用。     

一起沙门氏菌引起的自助餐食物中毒案例分析

目的 对一起食物中毒事件进行流行病学调查分析和病原菌检验以确定引起本次食物中毒的原因,为今后预防食物中毒事件的发生提供数据参考。方法 采用现场流行病学调查和实验室检验相结合的方法。结果 共同就餐者216人,发病者26人,发病率为9.96%,根据患者临床表现、潜伏期、现场卫生状况、流行病学特点及实验室检验结果,确定此次食物中毒病原体为沙门氏菌,中毒原因是食用了被沙门氏菌污染的食物。结论 引起本次食物中毒的原因是多方面的,今后应加强食品卫生管理和宣传教育,提高对食源性疾病的监控能力,广泛宣传食物中毒的危害和预防知识,避免类似事件再次发生。     

胶体金免疫层析法检测水产品中O1群霍乱弧菌方法的建立与优化

〔目的〕研究了O1群霍乱弧菌免疫层析试纸的制备方法,通过对试纸材料的处理达到优化胶体金免疫层析体系的目的。〔方法〕建立了快速检测食品中O1群霍乱弧菌的胶体金免疫层析方法,并应用该方法对弧菌属、假单胞菌属及其他常见肠道致病菌,共29株进行检测,同时对180份水产品进行了样品添加试验,并用《出口食品中霍乱弧菌检验方法》(SN/T1022-2001)进行确证,全面评估了该方法的灵敏度、特异性、准确性等。〔结果〕该方法检测食品中O1群霍乱弧菌的灵敏度为105cfu/ml,与食品中常见的致病菌无交叉反应。该方法检测水产品中O1群霍乱弧菌的假阳性率为6.25%。〔结论〕该方法操作简便,灵敏度高,特异性强,准确性高,适用于食品的快速检测。     

武汉市2006年食品中沙门菌污染状况监测

目的:了解武汉市2006年食品中沙门菌的污染状况,为国家食品安全监测网提供数据。方法:随机从武汉超市和集贸市场采取生畜肉、生禽肉、熟肉制品、水产品、生食蔬菜、蔬菜沙拉样品共172份,经过两步增菌后,用HE和科玛嘉沙门菌选择性平板分离,可疑菌株再进行API生化条和血清学鉴定。结果:从31份样品中分离出沙门菌,检出率18.02%,其中以生牲畜肉最高(37.14%),熟肉制品次之(21.21%)。结论:武汉市2006年食品沙门菌污染严重,应加强食品安全监督。     

一起布利丹沙门菌食物中毒的调查

目的 查明导致本次食物中毒事件的食物种类、致病因子及传染源.方法 在临床诊断病例中,随机抽取50例作为病例组,随机选择参加宴席且无任何临床症状的50人作为对照组,开展病例对照研究,并分析导致本次事件的危险食物.结果 本次食物中毒的罹患率为43.4%(132/304),86.0%(43/50)的病例和34.0%(17/50)的对照食用过猪头肉凉拌粉条(OR=12.0,95%CI:4.4～32),进一步对食用过猪头肉凉拌粉条者分析其剂量反应关系,趋势x2=21.06,P=0.00.94.0%(47/50)的病例和68.0%(34/50)的对照食用过蘑菇炖鸡(OR=7.4,95%CI:2.0～27),不存在剂量反应关系.病例组和对照组食用其余食物的差异无统计学意义(P>0.05).对猪头肉凉拌粉条和蘑菇炖鸡与发病之间的关系进行叉生分析,以两种食物均未食用者作为参照,结果 表明,单食用两种食物之一者发病危险度的点值估计均升高,但差异均无统计学意义;而两种食物均食用者发病风险大大增加(OR=38,95%CI:4.5～320),差异有统计学意义.19份标本检测肠道致病菌中3份病例肛拭子和1份猪头肉凉拌粉条检出布利丹沙门菌.结论 该事件是因参加宴席的人食用被布利丹沙门菌污染的猪头肉凉拌粉条或蘑菇炖鸡引起的细菌性食物中毒,其原因可能为食品加工过程不规范所致.

Abstract：

objective To identify the bacterial pathogen in food and the source of infection that might be responsible for a food poisoning outbreak.Methods All the probable cases that had attended the banquet in a villige of Sichuan province who had developed fever(≥37.5℃),diarrhea (≥3 times/dav)and vomiting since August 1,2009,were identified.A case-control study was conducted to identify the foods that might be responsible for this food poisoning event.50 cases were randomly selected from the probable cases and 50 controls were randomly selected from those without the symptoms.Results The attack rate of this food poisoning event was 43.4%(132/304).86.0%(43/50)of the cases and 34.0%(17/50)of the controls had eaten pork-mixed-vermicelli(OR=12.0,95%CI:4.4-32).Data from further tests showed that dose-effect relation existing between eating pork mixing vermicelli behavior and the incidence rates(Chi-square trend:x2=21.06,P=0.00)of the disease.94.0%(47/50)of the cases and 68.0%(34/50)of the controls had eaten mushroom braising chicken(OR=7.4.95%CI:2.0-27).Data from the crossover analysis showed that there appeared an effect modification between behaviors of eating pork-mixed-vermicelli and eating mushroom braising chicken.Three cases were detected carrying Salmonella blegdam from their anus swabs and the same bacteria type was also detected in the pork-mixed-vermicelli. Conclusion This outbreak of salmonellosis was caused by Salmonella blegdam contaminated pork-mixed-vermicelli or mushroom braising chicken during food processing.     

胶体金免疫层析法检测弓形虫循环抗原的研究

目的：建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法（GICA）用于检测血清中弓形虫循环抗原（CAg）。方法：用胶体金颗粒标记弓形虫单克隆抗体，制成免疫层析测试条。血清中的弓形虫循环抗原与测试条上的金标记单克隆抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动，与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果：用GICA与ELISA比较检测105份小鼠血清中循环抗原，两法符合率为95％（P〉0．05）。结论：GICA检测血清中的弓形虫循环抗原特异性强、灵敏度高、简便快速，无需特殊仪器设备，有广泛应用价值。     

食品中沙门菌实时荧光PCR快速检测方法的研究

目的利用荧光定量PCR技术，建立食品中沙门菌污染的快速敏感特异的检测方法。方法以沙门菌的fimY基因作为靶序列，设计一对引物和探针，以沙门菌菌株提取核酸DNA作为模板，优化引物和探针的浓度比和Mg^2＋浓度，以沙门菌和10种相关细菌考核检测体系的灵敏性、稳定性和特异性，并初步应用于样品的检测。结果本研究建立的反应体系在引物和探针的浓度为0．8μmol／L，1．0μmol／L，Mg^2＋浓度为3mmol／L时，具有良好的特异性和敏感性。在10株相关菌株的检测中，除沙门菌出现很好的阳性外，其余菌株均为阴性。在纯菌条件下，定量检测低限33cfu／ml。稳定性分析表明：同一样品重复检测3次Ct值的变异系数均小于5％。检测样品结果显示实时PCR方法较传统方法敏感、快捷、简便。结论该方法特异性强，稳定性高，操作简便快捷，适应食品微生物检验发展需要，具有较大的推广及应用价值。     

科玛嘉显色培养基和XLD、SS、HE分离食品中沙门菌效果比较

目的比较沙门菌科玛嘉显色培养基（简称CAS,下同）、XLD、SS和HE培养基在分离食品中沙门菌的效果。方法使用73株沙门菌分别接种CAS、XLD、SS和HE培养基,观察生长和显色情况。同时使用上述4种培养基对153份食品进行沙门菌的分离鉴定,比较其分离效果。结果所有接种的沙门菌在CAS上均生长,并具有典型的菌落特征。从153份食品标本中共分离出26株沙门菌。CAS分离沙门菌的敏感性为84．62％,特异性为94．49％,与SS和HE比较有非常显著性差异（P〈0、005）。在CAS上生长的非沙门菌可疑菌落主要有气单胞菌属和变形杆菌。结论CAS分离食品中沙门菌具有高敏感性和特异性,是理想的沙门菌选择性培养基。推荐使用CAS和XLD同时作为食品中沙门菌的分离培养基。