粉防己碱对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响

应用全细胞记录式膜片钳技术研究了粉防己碱（Ｔｅｔ）对豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙电流（Ｉ（Ｃａ））的影响。Ｔｅｔ１μｍｏｌ／Ｌ使Ｉ（Ｃａ））的电流－电压关系曲线之各电流值均降低。指令电位（ＶＴ）为０ｍＶ，Ｔｅｔ０．１～３．２μｍｏｌ／Ｌ　使Ｉ（Ｃａ）呈浓度依赖性降低，半数抑制浓度（Ｌ（５０））为０．７μｍｏｌ／Ｌ。此外，Ｔｅｔ０．３μｍｏｌ／Ｌ能阻滞异丙基肾上腺素（Ｉ（ｓｐ））０．１μｍｏｌ／Ｌ引起的Ｉ（Ｃａ）的增大。证明Ｔｅｔ可阻滞豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙电流，并提示有增大延迟整流钾电流（Ｉ（ｏｕｔ））的作用。     

莲心碱对豚鼠心室肌细胞动作电位及钠与钙电流的影响

为探讨莲心碱 (liensinine,L ien)对心肌离子流的影响及抗心律失常作用机制。采用全细胞膜片钳技术 ,记录了 L ien对单个豚鼠心肌细胞动作电位 (AP)及纳电流 (INa)与 L -型钙电流 (ICa- L)的影响。 L ien 3～ 30μmol/ L 可剂量依赖性地降低 AP幅度 (APA)、静息电位 (RP) ,延长 AP时程。 L ien10 ,30 μm ol/ L 分别使 INa及 ICa- L从给药前的 (8.6± 2 .3) n A和 (75 8± 177) p A降至 (5 .4± 1.7)、(2 .2± 1.6 ) n A和 (335± 12 2 )、(137±10 0 ) p A。L ine10 μmol/ L 抑制 INa和 ICa- L的 I- V曲线并使后者的峰值电流电位略右移。结果表明 L ien有钠、L -型钙通道阻滞作用 ,这些可部分解释其抗心律失常作用机制     

粉防己碱对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾通道的影响

应用膜片钳全细胞记录技术研究了粉防己碱（ｔｅｔｒａｄｒｉｎｅ,Ｔｅｔ）对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流（Ｉｋ）的影响。结果发现：（１）Ｔｅｔ１０－６ｍｏｌ／Ｌ对心室肌细胞Ｉｋ的外向部分有显著的激活作用。（２）Ｔｅｔ对Ｉｋ外向部分的激活作用呈剂量依赖性。阈浓度为３×１０－８ｍｏｌ／Ｌ,最大有效浓度为３×１０－５ｍｏｌ／Ｌ。（３）Ｔｅｔ使心室肌细胞Ｉｋ的外向部分呈时间依赖性增加。结果提示：Ｔｅｔ对Ｉｋ的外向部分有激活作用,这种激活作用可能是其降低心肌收缩力、抗高血压和抗心律失常的作用机制之一。     

枳实提取液对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的影响

OBJECTIVE: To determine the effect of citrus aurantium extract (CAE) on L-type calcium currents (ICa-L) in ventricular myocytes of guinea pigs. METHODS: Single myocytes were dissociated by enzymatic dissociation method. The whole-cell patch-clamp recording technique was used to record the change of calcium current after the administration of CAE. RESULTS: 1. CAE 4 x 10(-3), 2 x 10(-2), 4 x 10(-2), and 1 x 10(-1) g/ml increased the ICa-L by 15.89%, 29.01%, 52.03% and 59.76% (P < 0.05), respectively. 2. CAE 2 x 10(-1) and 4 x 10(-1) g/ml decreased the ICa-L by 16.61% and 30.87% (P < 0.05), respectively. CAE changed the ICa-L significantly, but did not change the shape of I-V curves. CONCLUSIONS: CAE 4 x 10(-3)-1 x 10(-1) g/ml can increase the L-type calcium current in guinea pig ventricular myocytes significantly in a concentration-dependent manner, and promote the opening of calcium channel. CAE 2 x 10(-1)-4 x 10(-1) g/ml may inhibit the L-type calcium channels of ventricular myocytes, and depress the opening of calcium channel.     

黄连素对培养鸡胚心室肌细胞钙单通道电流的影响

在培养的鸡胚心室肌细胞上，我们采用膜片钳技术的细胞贴附式构型，研究了黄连素（ＢＲ）对细胞膜钙单通道电流的影响。提示：（１）ＢＲ是一种钙通道激活剂；（２）ＢＲ对钙通道的调节作用依赖于β受体介导的磷酸化过程。     

洛士辛对豚鼠心室心室肌细胞L型钙通道的作用

采用膜片钳技术,研究Ｌｏｔ对单个豚鼠单个腺鼠心室细胞Ｌ型钙通道电流（ＩＣａ－Ｌ）的影响。Ｌｏｔ１～２００μｍｏｌ／Ｌ浓度依赖性地增加Ｉｃａ－Ｌ幅值,ＥＣ５０为３８μｍｏｌ／Ｌ,Ｌｏｔ３０μｍｏｌ／Ｌ使最大峰值电流增加６０％。其促钙作用明显使用依赖性,略促进钙通电流激活,显著地沽产钙电流的稳态失活。表明Ｌｏｔ增加Ｌ型钙电流作用主要与减少钙电流的稳态失活有关。     

卡托普利对豚鼠心室肌细胞跨膜电位及L—型钙电流影响的…

我们采用蛋白酶循环消化的方法获取了７０％－８０％耐钙豚鼠心肌细胞并用膜片钳全细胞式记录方法，初步观察了卡托普利对心室肌细胞跨膜电位上及Ｌ－型钙电流的影响。实验表明，Ｃａｔｐ１０μｍｏｌ／Ｌ显著缩短豚鼠心肌单细胞的动作电位过程，药物作用１０分钟后，ＡＰＤ５０缩短３７．２２％，ＡＰＤ９０缩短３５．３３％，但对静息电位，超射和动作电位幅度无显著影响。     

救心复脉注射液对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的影响

目的：探讨救心复脉注射液(枳实提取液)有效成分辛弗林(311)、N-甲基酪胺(417)对豚鼠心室肌细胞膜L型钙通道电流（ICa-L）的影响。方法：用酶解法分离单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,观察辛弗林、N-甲基酪胺对豚鼠心室肌细胞膜ICa-L的影响。结果：用辛弗林（10,25,50,100 mmol/L)时能增大 ICa-L ,增加率分别为 8.27%,27.29%,41.01% 和 48.74% (P<0.05)。 用N-甲基酪胺（10,25,50,100 mmol/L） 时能增大 ICa-L ,增加率分别为 10.05%, 30.12%,43.05% 和51.90%(P<0.05)。辛弗林和N-甲基酪胺只改变电流幅度,不改变I-V曲线形状。结论：辛弗林和N-甲基酪胺有浓度依赖性的增大豚鼠心室肌细胞ICa-L,促进钙通道开放的作用。     

黄连素对培养鸡胚心室肌细胞钙单通道电流的影响

在培养的鸡胚心室肌细胞上，我们采用膜片钳技术的细胞贴附式构型，研究了黄连素（Ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ，ＢＲ）对细胞膜钙单通道电流的影响。结果表明：ＢＲ可使心室肌细胞膜钙单通道电流明显增加；钙通道可利用率增加１１４．２％（Ｐ＜０．００１）；钙通道开放概率增加７５．３％（Ｐ＜０．０５）。用心得安阻断β受体或用异搏定阻断钙通道，均可逆转ＢＲ的上述作用。以上提示：①ＢＲ是一种钙通道激活剂；②ＢＲ对钙通道的调节作用依赖于β受体介导的磷酸化过程。     

氧化苦参碱对豚鼠心室肌细胞钠电流的影响

目的：观察氧化苦参碱(OMT)对豚鼠心室肌细胞钠电流的影响。方法：采用全细胞膜片钳技术。结果：OMT0．1、0．3和1mmol／L对钠电流均呈现不同程度的抑制作用,且呈现剂量依赖性。结论：OMT对钠通道的阻滞作用可能是其抗心律失常的作用机制之一。     

大鼠心室肌细胞的分离及其钙电流的观察

目的：探讨大鼠心肌细胞酶急性分离的方法，并观察大鼠心室肌细胞膜钙电流。方法：采用Lngendorff灌流装置，用含胶原酶P(0．12g/L)的台式液，经主动脉逆行灌流心脏，分离心肌细胞；采用膜片钳全细胞记录的方法，观察记录大鼠心室肌细胞膜L型钙电流。结果：心肌细胞的存活率约70％-80％，形态呈长杆状，横纹清晰，膜良好。膜片钳全细胞记录出电压依赖性内向电流，其激活电位-30mV，最大激活电位0mV，反转电位50mV，并且此内向电流可被钙通道阻滞剂维拉帕米抑制。结论：用此法可分离出高存活率的心肌细胞，并具有正常的电生理特性。     

卡托普利对豚鼠心室肌细胞跨膜电位及L-型钙电流影响的初步观察

我们采用蛋白酶（０．２ｍｇ／ｍｌ）循环消化的方法获取了７０％～８０％耐钙豚鼠心肌细胞，并用膜片钳全细胞式记录方法，初步观察了卡托普利（Ｃａｐｔ）对心室肌细胞跨膜电位及Ｌ型钙电流的影响。实验表明，Ｃａｐｔ１０μｍｏｌ／Ｌ显著缩短豚鼠心肌单细胞的动作电位时程（ＡＰＤ），药物作用１０分钟后，ＡＰＤ５０缩短３７．２２％，ＡＰＤ９０缩短３５．３３％（ｎ＝３，Ｐ＜０．０５）；但对静息电位（ＲＰ）、超射（ＯＳ）和动作电位幅度（ＡＰＡ）无显著影响。当心肌细胞的保持电压为－４０ｍＶ，除极到０ｍＶ，刺激电压时程为２５０ｍｓ，频率为０．５Ｈｚ时，Ｃａｐｔ１０μｍｏｌ／Ｌ可使Ｌ型钙内向峰电流减少４２．６８％，正常对照组在同一时间内仅下降４．１％（ｎ＝３，Ｐ＜０．０５）。可见，卡托普利具有类似维拉帕米样Ｌ－型钙通道阻断剂作用。     

心肌梗死后抑郁大鼠心室肌细胞L型钙电流的动力学改变

目的:观察心肌梗死后抑郁大鼠心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)的动力学特性。方法:将60只SD大鼠随机分为4组:正常对照组(n=10),心梗组(n=20),抑郁组(n=10),心梗后抑郁组(n=20)。通过结扎冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,予慢性不可预见性温和刺激建立抑郁模型,利用酶解法分离梗死周边区心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录L型钙电流的变化,研究抑郁对心肌梗死后大鼠心室肌细胞ICa-L的动力学影响。结果:与心梗组比较,心梗后抑郁组的I-V曲线上移,激活曲线右移,并延长失活后恢复时间。结论:抑郁可能通过改变心肌梗死后心室肌细胞L型钙通道的动力学来诱发室性心律失常。     

氧化苦参碱对豚鼠心室肌细胞钠电流的影响

目的 :观察氧化苦参碱 (OMT)对豚鼠心室肌细胞钠电流的影响。方法 :采用全细胞膜片钳技术。结果 :OMT 0 .1、0 .3和 1mmol/ L对钠电流均呈现不同程度的抑制作用 ,且呈现剂量依赖性。结论 :OMT对钠通道的阻滞作用可能是其抗心律失常的作用机制之一。     

洛士辛对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的作用

采用膜片钳技术 ,研究Lot对单个豚鼠心室细胞L型钙通道电流 (ICa -L)的影响。Lot1～ 2 0 0 μmol/L浓度依赖性地增加ICa -L幅值 ,EC50 为 38μmol/L ,Lot30 μmol/L使最大峰值电流增加 6 0 %。其促钙作用无明显使用依赖性 ,略促进钙通道电流激活 ,显著地减少钙电流的稳态失活。表明Lot增加L型钙电流作用主要与减少钙电流的稳态失活有关。     

淫羊藿苷对兔心室肌细胞L-型钙电流的影响

目的:利用膜片钳技术研究淫羊藿苷(ICA)对兔单个心室肌细胞L-型钙电流(ICa,L)的影响。方法:采用酶解法分离兔单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术观察10,20,40μmol/L的ICA对心室肌细胞ICa,L的作用。结果:①10,20,40μmol/L的ICA使兔心室肌细胞ICa,L最大峰电流密度从(15.81±1.23)pA/pF分别降至(11.27±0.89)pA/pF,(9.48±0.85)pA/pF和(6.87±0.81)pA/pF(n=6,P<0.05),抑制率分别为28.7%,40.0%和56.5%;ICA使ICa,L的电流-电压曲线上移,但不改变其基本形状;②20μmol/L ICA可以使钙通道稳态失活曲线左移并可减慢L-型钙通道失活后的恢复过程。结论:ICA对ICa,L具有浓度依赖性阻滞作用,这可能是其抗心律失常的重要机制之一。     

壬基苯酚对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响

 目的观察环境激素壬基苯酚(NP)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)的影响。方法应用酶机械法分离豚鼠单个心室肌细胞;应用膜片钳全细胞方法观察NP对单个心室肌细胞ICa-L的影响。结果NP可抑制不同膜电位下的ICa-L,NP(10-6mol·L-1、10-5mol·L-1)使ICa-L峰值电流密度从(-3.2±1.5)pA.pF-1减少到(-1.6±0.8)pA·pF-1(P<0.01)和(-1.4±0.7)pA·pF-1(P<0.01);但对ICa-L激活动力学曲线无明显影响。结论NP可剂量依赖性抑制豚鼠心室肌细胞ICa-L。     

莲心碱对大鼠心室肌细胞I_(Na)、I_(Ca-L)及稳态外向K~ 电流的影响

采用膜片钳技术,研究了莲心碱（Liensinine,Lien）对大鼠心室肌细胞动作电位及钠电流（INa）、L-型钙电流（ICa－L）及稳态外向K＋电流的影响,Lien30μmol／L可显著地降低动作电位幅度、静息膜电位,延长动作电位时程。Lien10,30μmol／L分别使INa及ICa－L从给药前的（7．9±2．2）nA和（699±175）pA降至（4．3±1．7）、（1．8±1．6）nA和（203±132）、（147±121）pA。Lien10μmol／L还抑制INa、稳态外向K＋电流和ICa－L的I－V曲线并使后者的峰值电流电位略右移。提示Lien有钠、L型钙通道阻滞作用并抑制稳态外向K＋电流,这些可解释Lien广泛的抗心律失常作用机制。