大鼠心脏神经节抗氟酸性磷酸酶组织化学观察

采用抗氟酸性磷酸酶（Ｆｌｕｏｒｉｄｅ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔａｃｉｄｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＦＲＡＰ）组织化学技术对大鼠心内神经节细胞进行了观察。结果发现，１０只大鼠中有３只在心房后壁及心房大血管旁有少数神经节细胞呈ＦＲＡＰ反应阳性，该类神经元属小型神经元。其形态类似假单极神经元。对心内这类神经元性质进行了讨论，提示心内该酶阳性的神经元可能为感觉性质的。     

切除卵巢大鼠心内神经NGF表达的变化（英文）

通过建立切除雌性大鼠卵巢、和切除卵巢后雌二醇替代治疗模型与正常雌性大鼠进行对照,采用免疫组织化学方法观察雌激素是否对大鼠心房后壁心内神经节神经生长因子(NGF)的表达有影响。实验结果发现各组大鼠心房后壁心内神经节均存在NGF免疫阳性神经元,但切除卵巢组大鼠心内神经节NGF免疫阳性神经元的数量与其他组相比明显减少,阳性染色明显减弱。实验结果证明心房后壁心内神经节存在NGF,并且受雌二醇影响,提示雌激素可能会影响心内神经节NGF的表达。     

卵巢切除大鼠心内神经节IL-6和NGF表达的变化（英文）

目的观察卵巢切除大鼠心内神经节IL-6和NGF的表达与成年雌性大鼠、卵巢切除后雌二醇替代大鼠是否有变化及其是否受雌激素影响。方法本研究采用免疫组织化学方法。结果各组大鼠心内神经节均存在IL-6阳性神经元和NGF阳性神经元,但卵巢切除组大鼠心内神经节IL-6阳性神经元明显增多,表达明显增强,而卵巢切除组大鼠心内神经节NGF阳性神经元的数量却明显减少,表达明显降低。结论心房后壁心内神经节存在IL-6和NGF,并且受雌激素影响,提示雌二醇可能影响心内神经节IL-6和NGF的表达。     

雌性大鼠心内神经节细胞中ER与ChAT的共存

目的 探讨雌性大鼠心内神经节细胞中ER与ChAT共存的可能性。方法 采用免疫组织化学SABC法双重标记技术，用鼠抗ER血清和羊抗ChAT血清分别孵育切片，葡萄糖氧化酶-硫酸镍胺或DAB／AP-red试剂盒呈色，前者的反应产物呈黑兰色或棕黄色，后者的反应产物呈鲜红色。结果 在ER／ChAT双重免疫组织化学反应下可见两种细胞：①ER／ChAT双标细胞：胞核为ER-IR阳性，反应产物棕黄色，胞浆为ChAT-IR阳性，反应产物鲜红色；②ChAT单标细胞：胞浆为ChAT-IR阳性，反应产物鲜红色，胞核未见着色；在ER和ChAT双重染色的切片上没有发现ER的单标细胞；ER-IR阳性神经元约占ChAT-IR神经元总数的27％。结论 大鼠心内神经节细胞中ER-IR阳性神经元均为胆碱能神经元。     

雌性大鼠心内神经节细胞中ER与NOS1的共存

目的 探讨雌性大鼠心内神经节细胞中ER与NOS1共存的可能性。方法 采用免疫组织化学SABC法双重标记技术，用鼠抗ER血清和兔抗NOS1血清分别孵育切片，葡萄糖氧化酶．硫酸镍胺．DAB／AP-red试剂盒呈色。结果 在ER／NOS1双重免疫组织化学反应下可见三种细胞：①NOS1单标细胞：胞浆为NOS1-IR阳性，反应产物鲜红色，胞核未见着色；②ER单标细胞：胞核为ER-IR阳性，胞浆未见明显染色。③ER／NOS双标细胞：胞核为ER-IR阳性，反应产物黑蓝色，胞浆为NOS1-IR阳性，反应产物鲜红色。ER／NOS1双标细胞约占NOS1-IR阳性神经元总数的19％、占ER-IR阳性神经元总数的34％。结论 雌性大鼠心内神经节细胞中ER与NOS1共存，部分ER-IR阳性神经元为NO能神经元。     

大鼠肠神经系统AChE和FRAP双染法研究

用抗氯化物酸性磷酸酶（ERAP）作为感觉神经元的化学标志物，同时结合胆碱酯酶（ACHE）组织化学方法，对大鼠小肠壁神经结构进行了组织化学观察。结果发现了三种不同染色的神经元：（1）ACHE阳性神经元，（2）ERAP单染神元；（3）ACHE-FRAP双染神经元。这提示大鼠肠神经系统内不仅存有感觉神经元，而且，部分感觉神经元可能是胆碱能性质的。     

大鼠心内一氧化氮能神经结构的研究

以还原型尼可酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸硫辛酰胺脱氢酶（NADPHd）组织化学技术系统观察了大鼠心房壁与心室壁各层、冠状动脉、主动脉与肺动脉根部、窦房结、房室结及Purkinje细胞的一氧化氮（NO）能神经构造。证实心脏各部均接受NO能神经支配，传导系与冠状动脉壁的神经纤维最为丰富；心内神经节中25.8％为NO阳性神经细胞，部分NO强阳性神经细胞突起穿过神经节进入心房肌层，终于心肌细胞表面。     

大鼠心内一氧化氮能神经结构的研究

以还原型尼可酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸硫辛酰胺脱氢酶（ＮＡＤＰＨｄ）组织化学技术系统观察了大鼠心房壁与心室壁各层、冠状动脉、主动脉与肺动脉根部、窦房结、房室结及Ｐｕｒｋｉｎｊｅ细胞的一氧化氮（ＮＯ）能神经构造。证实心脏各部均接受ＮＯ能神经支配，传导系与冠状动脉壁的神经纤维最为丰富；心内神经节中２５．８％为ＮＯ阳性神经细胞，部分ＮＯ强阳性神经细胞突起穿过神经节进入心房肌层，终于心肌细胞表面。     

大鼠心脏神经与内关穴区正中神经投射同源关系及其递质属性的实验研究

目的：观察内关穴区正中神经终末支和心脏神经的投射定位及神经递质属性。方法：本实验采用酶标示踪、免疫组化和非荧光双标方法，观察酶标阳性细胞，以确定大鼠心脏与内关穴区的神经投射定位，并检测神经元的肽类性质。结果：在C5～C7脊神经节和迷走神经节中出现辣根过氧化物酶(HRP)和类霍乱原β亚单位(CB)均为阳性的双标阳性神经元；脊神经节中有P物质(SP)、神经肽Y(NPY)、降钙素基因相关肽(CGRP)免疫组化阳性的双标细胞，迷走神经节中有SP和NPY免疫组化阳性的双标细胞。结论：心脏和内关穴区的神经纤维有一部分来自脊神经节和迷走神经节中的同一个神经元。     

大鼠延髓后角NKR样阳性神经元与伤害性信息感受神经元关系的光镜观察

目的：研究神经激肽B受体（NKP）样阳性神经元与伤害性刺激诱发的有c-fos原癌基因蛋白表达的阳性神经元及C纤维之间的关系。方法：采用免疫荧光双重标遍法和相邻切片法分别用Avidin-Texas Red或FITC标记神经激肽B受体＊NKP样阳性神经元与c-fos阳性神经元，Banderiraea Simplicifolia Isolection-B4(BSI-B4)标记C纤维，并在BX－60荧光显微镜下进行观察，结果：再次于形态学上证实了NKR样阳性结构及初级传入C纤维在大鼠延髓内的分布；发现大鼠延髓后角浅层密集分布NKR样阳性结构或BSI－B4标记的C纤维阳性纤维及终末，I，II层内可见NKR样阳性神经元，深层偶见NKR样阳性神经元，但其中极少数是c-fos阳性神经元，未发现典型的NKR／FOS双标细胞，BSI－B4标记的C纤维分布范围与NKR样阳性结构有重叠。结论：以上观察提示，NKR样阳性神经元及纤维与BSI－B4标记的C纤维可能有密切关系；但NKR样阳性神经元极少呈FOS阳性，推测是一群非特异性伤害感受神经元的中间神经元。     

新生大鼠大脑皮质神经干细胞的分离培养与胆碱能神经元的鉴定

目的:体外分离和培养新生大鼠大脑皮质神经干细胞并进行鉴定,为用于脑梗死动物模型梗死区移植细胞作准备.方法:分离新生大鼠皮质神经干细胞,进行体外培养,使用免疫细胞荧光染色技术对细胞的特性进行鉴定,并对细胞的胆碱能特征进行鉴定.结果:获得了Nestin阳性的神经干细胞,其分化后可获得MAP-2、GFAP和 CNPase阳性的神经元、星形胶质细胞和寡突胶质细胞;通过胆碱能鉴定发现大脑皮质干细胞可分化为胆碱能神经元. 结论:体外分离和培养的大脑皮质神经干细胞具有增殖分化的能力,并可以分化为胆碱能神经元,有望应用于皮质损伤后认知障碍及运动障碍的细胞移植治疗.     

大鼠坐骨神经缺损的神经移植对脊神经节的P物质阳性神？…

目的：研究大鼠坐骨神经缺损的神经移植对脊神经节的Ｐ物质阳性神经元的影响。方法：ＳＤ大鼠１５只,切除右侧坐骨神经１ｃｍ,在手术显微镜下将异体或自体右侧坐骨神经１ｃｍ移植于神经缺损处。对照组只切除右侧坐骨神经１ｃｍ,不进行神经移植。术后１２周取两侧脊神经节,冰冻切片,免疫细胞化学染色显示Ｐ物质（ＳＰ）,对ＳＰ阳性神经元进行图像分析。结果：ＳＰ阳性神经元为中、小型细胞,分散于大的脊神经节细胞中。手术侧与     

龟板含药血清体外诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元

【目的】观察龟板含药血清体外诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元的能力。【方法】采用龟板含药血清体外定向诱导第五代骨髓间充质干细胞，免疫组化鉴定神经丝蛋白(NFP)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。【结果】成年大鼠骨髓间充质干细胞受龟板血清诱导后神经元样细胞NF表达阳性，诱导后12h，神经元样细胞NF阳性表达达到高峰。【结论】龟板含药血清可以在体外诱导成年大鼠骨髓间充质分化为神经元。     

前庭代偿过程中脑干相关c-Fos/NADPH-d的表达

目的通过研究大鼠前庭神经损伤后,分别在静止、角加速度刺激状态下,c-Fos/NADPH-d阳性神经元在脑干的前庭神经内核、舌下神经前置核分布的改变,探讨前庭代偿机制。方法将60只SD大鼠分为无手术组、单耳前庭神经切断手术组和双耳前庭神经切断手术组3组,每组20只。每组一半在静止状态,另一半接受角加速度刺激。用NADPH-d组织化学和c-Fos免疫组织化学双染法观察c-Fos/NADPH-d阳性神经元分别在前庭神经核、舌下神经前置核区分布的改变。结果静止状态下的无手术组、双耳前庭神经切断手术组鼠和旋转刺激后的双耳前庭神经切断手术组鼠在双侧前庭神经内核、舌下神经前置核无c-Fos/NADPH-d阳性神经元。单耳前庭神经切断手术组鼠在同侧前庭神经内核、对侧舌下神经前置核有c-Fos/NADPH-d阳性神经元分布。旋转刺激后的无手术组鼠和单耳前庭神经切断手术组鼠在双侧前庭神经内核、舌下神经前置核有大量的c-Fos/NADPH-d阳性神经元。结论一侧前庭损伤后,同侧前庭神经内核、对侧舌下神经前置核内c-Fos阳性神经元在前庭代偿早期可能起启动作用,一氧化氮为关键神经递质。     

大鼠回肠肌间神经丛胆碱酯酶组织化学与脑啡肽免疫组织化学双染法研究

本文就用酶组织化学与免疫组织化学双染法，对大鼠回肠肌间神经丛乙酰胆碱酯酶（ACbE）阳性和亮氨酸脑啡肽（LENK）神经元进行了研究，在同一张标本上同时显示AChE阳性神经元LENK神经元，LENK神经元用二盐酸朕苯胺（BDHC）作显色剂。结果发现有三种不同标记神经元：①AChE阳性神经元；②BDHC单染神经元；③双标记神经元。同时，统计了30个肌间神经节，发现平均每个肌间神经节含这三种神经元的数目分别为8.33,0.07和2.40。以上结果表明；LENK不仅可以同Acb共存于经典的胆碱能神经元，而且在大鼠回肠间神经丛内。LENK主要以一种与Ach共存的形式存在。本研究为说明LENK神经元与胆碱神经元之间的调节关系提供了形态学资料。     

NGF诱导大鼠胚脑皮层和隔区神经干细胞向神经元和AChE阳性神经元分化的作用

目的:探讨大鼠胚脑皮层和隔区神经干细胞在NGF的诱导下分化为神经元和AChE阳性神经元的情况。方法:应用无血清培养技术,分别从SD大鼠胚脑皮层和隔区分离克隆神经干细胞,然后在含或不含NGF的培养液中分化14d。用MAP-2免疫荧光和AChE组化技术检测神经干细胞分化为神经元和AChE阳性神经元的情况。并对MAP-2阳性神经元的分化率、AChE阳性神经元数及其它们的细胞面积和周长进行图像处理;用STATA7.0统计软件进行方差分析和两两比较。结果:隔区和皮层NGF组MAP-2阳性神经元分化率高于隔区和皮层对照组;其细胞面积除隔区NGF组与皮层NGF组之外,其它各组间差异均有统计学意义;而其周长各组之间差异均有统计学意义。AChE阳性神经元的数量及细胞面积和周长,隔区NGF组最佳,皮层NGF组次之,隔区对照组再次之,皮层对照组较差。三项指标各组间差异有统计学意义。结论:NGF可诱导大鼠胚脑皮层和隔区神经干细胞向神经元分化;隔区神经干细胞较皮层神经干细胞更易于向AChE阳性神经元分化;这种区域特异性可在NGF诱导下发生改变。     

大鼠坐骨神经缺损的神经移植对脊神经节的P物质阳性神经元的影响

目的:研究大鼠坐骨神经缺损的神经移植对脊神经节的P物质阳性神经元的影响.方法:SD大鼠15只,切除右侧坐骨神经1 cm,在手术显微镜下将异体或自体右侧坐骨神经1 cm移植于神经缺损处.对照组只切除右侧坐骨神经1 cm,不进行神经移植.术后12周取两侧脊神经节,冰冻切片,免疫细胞化学染色显示P物质(SP),对SP阳性神经元进行图像分析.结果:SP阳性神经元为中、小型细胞,分散于大的脊神经节细胞中.手术侧与自身对照侧及神经移植组与对照组术侧阳性细胞的直径无显著差异.对照组术侧SP阳性神经元体积积分光密度(VIOD)值明显低于自身对照侧,自体组术侧VIOD值与自身对照侧无显著性差异,异体组术侧VIOD值比自身对照侧稍低.结论:结果表明神经移植修复坐骨神经缺损对脊神经节SP阳性神经元的形态恢复无明显影响,但对其功能恢复有一定作用.     

植物凝集素B4在小鼠肠神经系统初级传入的化学标记

目的探讨小鼠肠神经系统中内脏初级感觉神经元初级感受神经递质化学标志物的分类与分型。方法用植物凝集素B4的免疫荧光标记来寻找小鼠肠神经系统伤害性刺激感受器初级传入的化学标志物。每项指标选取3只同种不同的小鼠,在共聚焦显微镜下每帧图像选取50个神经元进行观察。结果被IB4阻断的阳性神经元发生在小肠和结肠内脏神经丛的神经元。IB4的免疫阳性标记揭示了大的和卵圆形神经元（Ⅱ型神经元）和Ⅰ型神经元。Ⅰ型神经元是位于肌间神经丛的小型神经元和与Ⅱ型神经元显著不同的有一个板状的突起。Ⅱ型神经元Calretinin免疫反应阳性,Ⅰ型神经元NOS免疫反应阳性。黏膜下神经丛大多数神经元被IB4阻断,他们中的有些神经元发生VIP免疫反应阳性。结论IB4对小鼠内脏感觉神经元特异性的阻断,这组神经元包括内脏初级传入神经元,但也有其他的类型,包括分泌运动神经元。结果表明：IB4对内脏伤害性神经元不是一个特定的标志物,还包括其他类型的神经元。     

胶质源性神经营养因子在成年大鼠中枢神经系统中的表达

为探讨胶质源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）在中枢神经系统中的表达，采用免疫组化法检测该因子在成年大鼠枢神经系统部分区域的分布。结果发现大脑皮质各层有极弱阳性的神经元；小脑皮质分子层及蒲肯野细胞呈强阳性反应；脊髓灰质中阳性神经元广为分布，尤以前角、后角Ⅰ、Ⅱ板层及Ｃｌａｒｋ核明显。此外，脊髓胶质细胞和中央管室管膜上皮均有ＧＤＮＦ阳性信号表达，表明ＧＤＮＦ对成年大鼠中枢神经系统内的多种神经元群均有功能作用     

胶质源性神经营养因子在成年大鼠中枢神经系统中的表达

为探讨胶质源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）在中枢神经系统中的表达，采用免疫组化法检测该因子在成年大鼠中枢神经系统部分区域的分布。结果发现大脑皮质各层有极弱阳性的神经元；小脑皮质分子层及蒲肯野细胞呈强阳性反应；脊髓灰质中阳性神经元广为分布，尤以前角、后角Ⅰ、Ⅱ板层及Ｃｌａｒｋ核明显。此外，脊髓胶质细胞和中央管室管膜上皮均有ＧＤＮＦ阳性信号表达，表明ＧＤＮＦ对成年大鼠中枢神经系统内的多种神经元群均有功能作用。