一种快速瑞氏-姬姆萨染色液的配制和应用

<正> 传统的瑞氏染色法染色时间长,胞核着色差,而姬姆萨染色法虽然胞核着色好,但胞浆染色欠佳。本文介绍一种瑞氏-姬姆萨染色液,它具有对胞浆和胞核的染色效果好,结构清晰,染色速度快,简单易行等优点,使染色在30s内一步完成,此染色液尤其适用于临床常规检验。     

一种改良瑞氏-姬姆萨染色液的染色效果评价

目的本文通过对干燥血片或骨髓涂片的细胞进行3种染色法对比,旨在说明以BaSO厂家生产瑞氏-姬姆萨染色液第一液替代传统瑞氏-姬姆萨染色第一液的染色法染色,效果良好,且快速方便,值得推广。方法分别用3种染色法对干燥血片或骨髓涂片进行染色,然后对着色细胞的胞浆、浆中颗粒、核染色质的着色效果及染色时间进行对比。结果传统瑞氏法对胞浆颗粒着色强,但对胞核着色差,染色时间较长,且往往把片子染成偏酸或偏碱;传统瑞氏-姬姆萨染色液染出的细胞颜色偏红,不利于幼稚细胞的鉴别;而以改良BaSO替代液染色法染出来的效果,无论胞浆、浆中颗粒、核染色质着色都能达到满意的效果。结论以BaSO改良瑞-姬染色法的染色效果好,且染色时间短,染液易得到,值得推广。     

改良涂片法和瑞氏-姬姆萨染色法对支气管肺泡灌洗液及痰嗜酸性粒细胞计数检测的比较

目的比较改良涂片法＋瑞氏-姬姆萨染色法与传统涂片法＋瑞氏染色法两种制片染色方案对支气管肺泡灌洗液（BALF）及痰标本嗜酸性粒细胞检出率的差异。方法首先采用瑞氏-姬姆萨染色法和瑞氏染色法分别检测40例嗜酸性粒细胞在5%-15%的的血液标本涂片,镜检嗜酸细胞比例,比较两种染色方法对嗜酸细胞检测准确度的差异。然后对92例本院住院及门诊患者BALF或痰查找嗜酸性粒细胞的病例采用改良涂片法＋瑞氏-姬姆萨染色法进行嗜酸性粒细胞计数,并与传统方法即单纯涂抹制片法和瑞氏染色法相比较,观察改良涂片法＋瑞氏-姬姆萨染色法对肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞的检出效果。结果40例血涂片中,两种染色方案对嗜酸性粒细胞的检出准确度相当。BALF及痰标本涂片染色镜检时,传统涂片方法 ＋瑞氏染色法制作的涂片着色时间长（10-15 min）,部分涂片标本存在脱落,嗜酸性粒细胞阳性检出率39.1%（36/92）。改良涂片法＋瑞氏-姬姆萨染色法,着色时间短（约3 min）,标本未见脱落,嗜酸性粒细胞阳性检出率为60.9%（56/92）。结论采用改良涂片法和瑞氏-姬姆萨染色法能有效缩短涂片染色时间,大大提高了BALF和痰嗜酸性粒细胞的检出率,从而为临床诊断和治疗相关疾病提供更准确的实验室依据。     

5种尿沉渣染色方法的效果比较

目的:探讨5种尿沉渣染色法的最佳染色条件及效果.方法:180例尿沉渣异常标本,分别采用尿沉渣Sternheimer染色法(S染色法)、尿沉渣Sternheimer-Malbin改良染色法(S-M染色法)、Berhe-Muhlberg染色法(B-M染色法)、阿利新兰-中性红染色法(阿-中染色法)及瑞氏-姬姆萨复合染色法(瑞-姬染色法)进行染色,观察5种染色方法最佳效果时的染液与尿液比例及染色时间.结果:尿沉渣S和S-M染色法染液与尿液比例2∶1和1∶1染2～5 min时背景清晰,S染色法有形成分结构清晰易辨别,S-M染色法有形成分结构着色略差,两者比较差别不大(P＞0.05);B-M染色法、阿-中染色法及瑞-姬染色法染色法有形成分的着色与背景相似,结构模糊,细菌不着色,杂质较多,差异无统计学意义(P＞0.05),但与S、S-M染色方法比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:尿沉渣S和S-M染色法染色效果佳,尤以S染色法最佳.     

瑞氏-姬姆萨与巴氏染色法对精子形态染色效果比较

目的 比较瑞氏-姬姆萨染色法和巴氏染色法对精子形态染色的效果,寻找可替代巴氏染色法的简单、有效的精子形态染色方法.方法 随机选取21份精液标本,每份标本同时采用瑞氏姬姆萨染色法和巴氏染色法对精液涂片进行染色,分析两种染色方法的结果.结果 两种染色方法对精子形态的评估结果无显著性差异(P>0.05);且对正常形态精子和异常形态精子的评估分别具有正相关性,r值为0.984、0.986(P均<0.01).结论 瑞氏-姬姆萨染色法是一种简单有效的精子形态染色方法,可替代巴氏染色法.     

不同染色法对精子顶体染色效果及适用性的比较

目的:通过比较瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、Diff-Quik法及吉-姆萨染色法对精子顶体染色的效果,寻找有效、更易于判读精子顶体的染色方法.方法:100份精液标本同时采用瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、Diff-Quik法及吉-姆萨染色法对精液涂片进行染色,分析四种染色方法的结果.结果:四种染色方法对Ⅰ型、Ⅳ型精子顶体的评估结果无显著性差异(P＞0.05);改良巴氏染色法相对其他三种染色法对精子顶体染色效果稳定.结论:改良巴氏染色法相对其他三种染色法在精子顶体完整率的判读上具有染色效果稳定的优势,且染液价格经济,适于精子顶体完整率的判读.     

血涂片标本瑞氏-姬姆萨混合染色方法的探讨

为了使学员在组织学实验教学中观察到效果好、结构清晰的各种血细胞 ,选择良好的血涂片标本染色方法是十分重要的。以往临床上常用瑞氏或姬姆萨两种染色方法 ,其主要特点为操作比较简单、染色时间也较短 ,但易受其ｐＨ、温度、时间等影响 ,往往达不到理想的教学要求。笔者结合教学实践 ,经过反复实验认为 ,应用瑞氏 姬姆萨混合染色法制作教学血涂片标本 ,较单用一种染色方法效果好。1　材料与方法1.1　材　料染液配制 :瑞氏染液 5 .0ｍｌ,姬姆萨原液1.0ｍｌ,加磷酸盐缓冲液 6 .0ｍｌ(ｐＨ 6 .4～ 6 .9)混合 ,如有沉淀生成 ,则应重新配制。1…     

改良瑞氏染色法

血片常规染色一般都采用传统的瑞氏单一染色，这种染色法总觉不太理想，染色时间较长，且不易掌握，尤其是冬季室温偏低，往往把血片染成偏酸或偏碱，致使血片细胞不易辨认。瑞氏染色只对细胞颗粒着色强，而对细胞核的染色较差，每次配制的瑞氏染波要放置较长时间才能使用。作者参考有关文献，将瑞氏单一染色液中加入适量的对细胞核着色较好的姬姆萨染色粉，克服了瑞氏单一染色法存在的问题。现将改良的瑞氏染色液的配制方法介绍如下，以供参考。试剂与方法1．染液配制：取瑞氏染色粉06克，姬姆萨染色粉1克，一同放入乳钵内，加进甘油10毫升…     

介绍一种血片染色法

介绍一种血片染色法西南兵工成都医院（６１００６１）李碧华罗曼诺夫斯基染色法已广泛用于血片染色。利什曼、姬姆萨和瑞特氏染色法均是罗氏染色法的改良。由于在配制过程中染料和溶剂在乳钵中研磨时会吸收水分而影响染色效果，因此笔者在罗曼诺夫斯基改良法的基础上进行...     

巴氏染色法的简化

临床上对脱落细胞学检验的染色方法绝大多数是用巴氏染色法。巴氏染色法虽胞核、胞浆着色鲜明,区分性好,但由于染色时间长,操作繁琐,不易掌握,常给基层医疗单位工作带来困难。为此,笔者对《临床肿瘤细胞学图谱》人民卫生出版社,1976:45～46提供的染色方法进行了简化。通过     

疟原虫感染组织切片吉姆萨染色法的建立及优化

目的探讨使用吉姆萨(Giemsa)染色法对伯氏疟原虫(Plasmodium berghei,P.b.)ANKA株感染小鼠肝、脾组织标本进行染色的可行性及效果。方法小鼠肝、脾组织用10%福尔马林固定后石蜡包埋,4μm厚切片,60℃烤箱30min烘烤,二甲苯脱蜡,常规乙醇水化至水,用2、3、4倍稀释的吉姆萨工作液分别染色3min、5min、10min;同时做常规苏木精-伊红(Haematoxylin-eosin,HE)染色。结果 3倍稀释Giemsa工作液染色5min的染色效果最佳。镜下观察,疟原虫染色鲜明、虫体胞浆蓝色,胞核粉红、疟色素染为棕褐色,清晰易辨,明显优于HE染色法。结论使用Giemsa染色法对P.b.感染小鼠肝、脾组织标本的染色简单易行,需时短,效果良好,在临床及科研领域中具有应用价值。     

大鼠肺泡巨噬细胞原代培养技术的改良措施

目的改良原代肺泡巨噬细胞（alveolar macrophage,AM）培养技术,提高AM培养效果。方法SD大鼠,在体支气管灌洗肺获取AM,通过预先注射空气、14号注射器针头回收灌洗液、低速离心、种板前多次吹打等改良措施分离和培养AM。倒置显微镜连续观察AM的形态变化,台盼蓝拒染实验鉴定AM存活率,瑞氏-姬姆萨染色鉴定AM纯度。结果AM体外培养后40 min即见细胞贴壁;2～3天时,细胞形态多样,呈圆形、不规则形、梭形等形态,胞体变大,胞质丰富。台盼蓝拒染实验示AM存活率≥95%,瑞氏-姬姆萨染色示AM纯度≥95%。结论本实验改良了原代AM培养的技术方法,提高了原代AM培养效果。     

人芽囊原虫病病原学诊断不同染色方法的比较研究

目的:探索人芽囊原虫病较好的病原学诊断染色方法.方法:用直接涂片法、碘染色法、三色染色法和吉氏染色法对人芽囊原虫病人粪便进行观察,同时在吉氏染色法基础上,用0.25%盐酸水溶液分色,进行对比观察.结果:改良吉氏染色法背景为淡红色,可见颗粒型和空泡型虫体.虫体着色较深,边缘整齐,细胞壁较厚.细胞核着色较深、呈月芽状或块状,虫体结构清晰.结论:较之其它几种方法,改良吉氏染色法方法简单实用,容易掌握,染色效果最好,便于在临床上推广应用.     

改良痰结核分枝杆菌L型涂片检测方法的建立和应用

目的建立一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分枝杆菌L型的涂片染色检测方法。方法对常规的抗酸染色法进行方法学改良,以特异性基因扩增诊断法为标准,分析评价改良方法的灵敏度、特异性和总有效检出率等统计学指标;分别采用本改良抗酸染色法(以下简称本改良法)、常规抗酸染色法和改良IK抗酸染色法检测468例临床标本,对三种方法的阳性检出率进行统计学比较。结果本改良法阳性检出率与特异性基因扩增诊断法、改良IK抗酸染色法比较均无明显差异(χ2=0.25,P=0.6171;U=0.155,P=0.4404),但明显高于常规抗酸染色法(U=3.713,P<0.0010);本改良法灵敏度、特异性和总有效检出率与改良IK抗酸染色法相似,但高于常规抗酸染色法。同时,本改良法所需时间少于改良IK抗酸染色法(5minvs24h)。结论成功建立了一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分支杆菌L型的涂片染色检测方法,适合临床推广应用。     

改良Golgi-Cox染色法在显示小鼠海马区神经元树突棘的应用

目的:通过改变传统的Golgi-Cox染色方法,探究一种在海马区神经元形态与结构的研究中更加稳定和有效的Golgi-Cox染色法。方法:本实验将昆明小鼠随机分为两组,一组采用传统的Golgi-Cox染色法,另一组采用本研究中改良的Golgi-Cox染色法。改良方法在传统方法的基础上,改变了以下几个关键环节,包括固定、切片、脱水和显色等,然后对两种方法的结果进行差异比较;为减少资料分析上的偏差,由资料分析人员对实验结果进行统计学分析。结果:改良法比较传统法,通过在离心管内悬空固定组织,切片时用琼脂包埋,延长低浓度乙醇脱水及二甲苯透明时间,并缩短高浓度乙醇脱水时间,改善显色环境的方法,可以在更好地保持组织切片的完整性,减少脱片的情况下,有效减少背景染色,增强显色效果。稳定地显示出更多的胞体(增加50%)、树突分支(增加79%)和树突棘(增加42%)。结论:改良的Golgi-Cox染色方法比传统的Golgi-Cox染色方法更加稳定和敏感,在海马区神经元树突和树突棘形态与结构研究中是一种可靠的技术方法。     

组织染色剂伊红Y的化学性质及改良配制法探讨

组织切片最常规的染色方法是苏木精-伊红染色法,简称HE染色法.对胞核染色剂苏木精的探讨有许多文献报道过,但对胞质染色剂伊红化学性质探讨的文献,目前不多.其实,在切片染色中,伊红染液的质量好坏和苏木精染液一样重要,直接关系到切片染色的成败.掌握了它们的化学性质,在配制染液过程中有很大的发挥空间.配制优质苏木精、伊红染液是组织、病理切片制作人员的愿望.为此,笔者就伊红Y染料的化学性质在此进行了一些探讨,并将伊红染液的配制改良法作一介绍,以供参考.     

血涂片的双重染色法的改良

掌握血涂片地混合染色法是用瑞氏-姬姆萨混合进行染色。两种染料混合极易产生沉淀，染液表面易形成一层氧化膜，沉淀物质沉积于血涂片上，不易冲洗干净，影响观察。而且混合液相互反应，红细胞不易着色，影响染色效果。我们经过一段时间代反复摸索和实验，对血涂片地混合染色进行改良，采用瑞氏与姬姆萨双重染色，取得了满意的效果，达到教学的要求。1方法门）新鲜血涂片自然晾干，（）瑞氏染液染色5min，蒸馏水冲洗数逾；门儿05％乙酸分色2～3S，蒸馏水冲洗两遍，（）稀释了的垃姆萨染色液染色10min，蒸馏水冲洗数逾，吹干，（5）无水酒精…     

对火棉胶切片尼氏染色方法的体会

尼氏(NiSSL)染色法是应用碱性染料显示神经元胞体的一种常规方法,广泛应用于脑内核团的定位、核团内神经元的类型、分布和计量学分析。尼氏染色多采用冰冻或石蜡切片,但上述切片法由于组织收缩较剧、难以制作大块组织切片、以及切片易破损、切片厚度不匀等缺点。而火棉胶包埋可改善上述不足,得到质量较高的切片,其缺点是不易制作连续切片。我们在人类脑干核团的计量学研究中,在以往染色程序的基础上,制作了脑干连续火棉胶切片,并对染色程序进行了相应的改变,得到了较理想的染色效果,现将我们的方法介绍如下,以供参考。(一)连续切片的制作:我们采用两人切片法,     

荚膜染色法的改良

目的 对传统荚膜染色法进行改良以增强荚膜辩认效果。方法 将鞭毛染色法与荚膜染色法相结合,同时适当延长染色时间。结果 菌体呈紫红色,荚膜呈淡蓝色,而无假荚膜现象。结论 改良的荚膜染色法具有更强的实用价值和更佳的染色效果。     

Diff-Quik与改良巴氏染色法对精子形态染色效果比较

目的:比较Diff-Quik染色法与改良巴氏染色法对精子形态染色效果,寻找简单、快速、准确的精子形态染色方法,替代传统的改良巴氏染色法。方法:选取83份精液标本,每份标本同时采用上述两种染色法对精液图片进行染色,分析两种染色方法的结果。结果:两种染色方法对精子形态评估结果差异无统计学意义(P>0.05);且两种方法对精子正常形态率的评估具有显著正相关性(r=0.926,P<0.01)。结论:Diff-Quik染色法是一种简单、快速、准确的精子形态染色方法,可以替代改良巴氏染色法。