放射线对体外细粒棘球蚴原头蚴成囊及Gadd45α基因的影响

目的探讨放射线对体外培养细粒棘球蚴原头蚴成囊过程及凋亡相关基因Gadd45α的影响。方法体外培养自然感染的羊肝中的原头蚴,分别采用0、10、20、30、40、50Gy剂量的6MV-X线照射1次,继续培养14d后在光镜及电镜下观察原头蚴成囊情况并计算成囊率。取原头蚴,分别采用0、30、45、60Gy剂量的6MV-X线照射后继续培养14d,RT-PCR检测包囊细胞Gadd45α基因的表达情况。结果放射线照射后,能发育成囊的原头蚴囊在光镜及电镜下可见明显的放射损伤,对照组成囊发育良好,照射组可见钩突崩解,正常结构消失,且剂量越高,包囊结构异常越明显。0、10、20、30、40、50Gy剂量照射后的成囊率分别为(81.83±0.027)%、(50.62±0.021)%、(33.17±0.014)%、(27.71±0.024)%、(23.06±0.011)%和(20.65±0.009)%,成囊率与放射剂量呈负相关(r=-0.898,P0.01)。RT-PCR检测30、45、60Gy剂量照射后的Gadd45αmRNA相对转录水平分别为1.46±0.190、3.21±0.369和4.26±0.524,与0Gy剂量下的相对表达水平(1±0)比较差异有统计学意义(P0.01),mRNA相对表达水平与放射剂量呈显著正相关(r=0.949,P0.01)。结论放射线照射对原头蚴的成囊有抑制作用,以高剂量组改变和破坏程度更显著。凋亡相关基因Gadd45α可能在放射线抑制原头蚴成囊的机制中发挥重要作用。     

电子线治疗大鼠继发性泡球蚴病的实验研究

目的探讨电子线治疗大鼠继发性泡球蚴病的疗效。方法雌性SD大鼠继发性泡球蚴病动物模型随机分为实验组和对照组,每组5只,实验组给予6-MeV线照射,剂量为20 Gy,共照射2次,每次间隔7 d,对照组不照射。放疗结束后30 d观察各组泡球蚴囊的病理变化。结果实验组泡球蚴呈不同程度的改变和破坏,结构异常,角质层、生发层普遍变性肿胀或分离脱落,育囊和原头节少见;对照组泡球蚴结构基本正常,角质层、生发层清晰,育囊内有数量不等的原头节。结论电子线有抑制泡球蚴生长的作用。     

高强度聚焦超声波辐照细粒棘球蚴包囊的热效应

目的通过检测高强度聚焦超声波(HIFU)照射棘球蚴包囊后囊液、囊壁、包囊周围肝组织温度和原头蚴死亡率,了解HIFU处理后不同部位的升温效应,探索HIFU杀伤棘球蚴的方法和效果。方法采集感染细粒棘球绦虫的新鲜羊肝,选取囊壁较薄,触摸弹性较好,直径介于10mm到45mm之间的包囊42个。采用随机区组设计的方法分组,对照组用普通超声照射,实验组用200W声功率HIFU直线扫描的方法照射,照射时间分别为2min,4min,6min,8min,10min。照射后立即测定囊液、囊壁、距包囊5mm部位肝组织的温度。抽取囊液、涂片,经台盼兰染色后计数原头蚴的死亡率。结果HIFU照射后,棘球蚴囊壁、囊液、包囊周围肝组织的温度均有升高,其中囊壁的温度升高最为明显,且与囊液、包囊周围肝组织之间有显著差异;囊液中的原头蚴死亡率增加。结论HIFU照射使棘球蚴包囊的囊壁产生明显的升温效应,HIFU照射对原头蚴有杀伤作用。     

泡球蚴长期保存后生物活性的研究

目的继发性泡球蚴经液氮冻存后传代健康小鼠,观察其体内泡球蚴的生长情况并判定其生物活性,以探讨泡球蚴保种传代的新方法。方法将继发性感染泡球蚴的小鼠,液氮冻存7d后,常规复苏剖取包囊接种健康小鼠,生长两个月后颈椎脱臼处死,剖检并与常规接种方法相比较,从以下方面评价冻存效果:(1)大体观察及测量包囊湿重;(2)普通光学显微镜及透射电子显微镜观察组织学结构及超微结构;(3)检测包囊囊液中总蛋白含量、血清中特异性免疫球蛋白活动状态等免疫学指标;(4)检测血清碱性磷酸酶及囊液中钙离子含量等生化指标。结果液氮低温冻存后泡球蚴所接种试验组小鼠与常规接种组小鼠体内泡球蚴在包囊湿重、包囊组织结构、囊液蛋白及钙离子含量、血清碱性磷酸酶及特异性免疫球蛋白活动状态等方面均无显著差异(P>0.05)。结论液氮冻存后泡球蚴仍具有感染小鼠的能力,且接种后所生长泡球蚴组织与常规接种泡球蚴组织生物活性无显著差异。液氮冻存可以长期保存泡球蚴组织的活性。     

高强度聚焦超声辐照小鼠体内棘球蚴的形态变化

目的探索高强度聚焦超声波(highintensity focused ultrasound,HIFU)对动物体内细粒棘球绦虫棘球蚴的杀伤作用。方法用采自感染包虫病羊肝内棘球蚴的原头节接种小鼠腹腔,建立小鼠棘球蚴病模型。用HIFU照射小鼠腹腔棘球蚴,以肉眼、光镜及电镜观察HIFU杀伤棘球蚴的破坏作用,对照组予以普通超声照射。结果HIFU对棘球蚴有明显的破坏作用,随着HIFU照射时间延长,肉眼观察见棘球蚴囊塌陷变瘪。光镜观察见囊壁撕裂、生发层细胞脱落、细胞层变薄甚至消失,角皮层变薄,但层状结构未中断。扫描电镜显示生发层细胞脱落明显,角皮层板状结构疏松;透射电镜显示生发层细胞脱落、细胞间隙增宽,角皮层未见明显破坏;对照组棘球蚴囊壁结构完整。结论高强度聚焦超声能破坏小鼠体内棘球蚴,使棘球蚴的生发层损伤,但角皮层仍然完整。     

放射治疗对子午沙鼠骨棘球蚴囊病理改变的影响

目的 观察骨棘球蚴病在放射治疗后棘球蚴囊的病理改变,探讨放射治疗骨棘球蚴病的临床效果.方法 从自然感染细粒棘球蚴的羊肝脏中无菌取出子囊,剪碎、去除囊皮,用0.9％无菌生理盐水冲洗、沉淀,反复3次,HE染色计数,制成含头节为12×106个/L的混悬液20ml.健康子午沙鼠(简称沙鼠)140只,雌雄各半,鼠龄2～3个月,体质量(38±6)g.将含棘球蚴头节悬液按每只0.2 ml注入沙鼠后腿胫骨骨膜下,12个月后拍摄X光片.根据接种部位骨骼破坏情况,以沙鼠后腿胫骨有明确锯齿状骨质破坏为纳入标准,选取沙鼠骨细粒棘球蚴病动物模型72只,雌雄各半.将72只沙鼠按体质量随机分成4组:对照组、40贝可勒尔放射(Gy)组、50 Gy组、60Gy组,每组18只,雌雄各半.采用分次放疗法,分5次进行,每次放疗间隔2d,照射剂量率为300 cGy/min.放疗后处死各组沙鼠,无菌条件下取出放疗区骨内细粒棘球蚴囊,用于光镜和电镜下观察.抽取囊内囊液,将囊液用0.9％的无菌生理盐水反复冲洗、沉淀,取最后沉渣,HE染色,光镜下观察头节形态及活动情况.结果 对照组囊液中细粒棘球蚴头节形态、活动正常;40 Gy组细粒棘球蚴头节形态尚正常,活动较对照组差,但未被红染;50 Gy组细粒棘球蚴头节形态异常、变形萎缩、红染;60 Gy组细粒棘球蚴头节红染、变形,且有碎裂迹象,周围有不明颗粒包绕.光镜下,对照组照射区细粒棘球蚴囊角质层、生发层育囊及原头节组织学结构基本正常;40Gy组以细粒棘球蚴囊变性为主,结构失常,角质层广泛水肿,生发层变薄,育囊少见;50 Gy组角质层广泛断裂,且生发层部分出现水肿,屈曲皱褶明显,细胞减少,少见育囊及头节;60Gy组以细粒棘球蚴囊坏死为主,角质层广泛断裂,角质层与生发层分离,生发层萎缩、紊乱,未见育囊及头节.电镜下,对照组细粒棘球蚴囊角质层结构清晰,微绒毛排列整齐,生发层细胞及细胞器结构、形态正常;40 Gy组细粒棘球蚴囊生发层内可见大量炎性细胞浸润,微绒毛内微丝及内容物减少;50 Gy组细粒棘球蚴囊微绒毛基本消失,核膜模糊不清,内质网、线粒体扩张,淋巴细胞核染色质结块边集,呈环状排列;60Gy组微绒毛基本消失,核膜界限不清破裂,部分核仁碎裂、边集,内质网广泛扩张,线粒体固缩及明显空泡变,淋巴细胞核染色质结块边集,溶酶体及巨噬细胞出现.结论 放射治疗可破坏骨棘球蚴囊的形态与结构,放射活度在50 Gy时对棘球蚴具有致死作用,放射方法治疗骨棘球蚴病具有良好的临床效果.     

细粒棘球蚴和多房泡球蚴在人体内蛋白质表达谱初步分析

目的 初步掌握流行于青海省细粒棘球绦虫幼虫棘球蚴(原头节、囊壁、囊液)和多房棘球绦虫幼虫泡球蚴在中间宿主人体内蛋白质表达情况。方法 利用SDS-PAGE和 Western-blot分析棘球蚴原头节、囊壁、囊液蛋白质和泡球蚴总蛋白表达谱。结果 细粒棘球蚴原头节的蛋白质浓集在分子量72 kDa处,囊壁的蛋白质浓集在72 kDa、26 kDa和17 kDa 处,囊液的蛋白浓集在72 kDa、43~55 kDa、26 kDa和17 kDa;泡球蚴总蛋白质浓集在分子量72 kDa、55~72 kDa和26 kDa处。结论 不同地区细粒棘球蚴在人体内蛋白的表达存在差异;不同亚种泡球蚴原头节蛋白的表达存在差异。     

X线照射泡球蚴原头节的体外实验研究

目的探讨X线对体外培养的泡球蚴原头节的杀伤作用。方法无菌采集子午沙鼠体内的泡球蚴中含原头节的囊液,将其加入RPMI 1640培养液中培养。原头节体外培养3 d后分装至培养瓶中,每组10瓶,每瓶约含10 000个原头节,设空白对照组、低剂量组(15 Gy和30 Gy)、中剂量组(45 Gy和60 Gy)、高剂量组(75 Gy和90 Gy)、阿苯达唑组(2 500 ng/ml)、45 Gy X线+2 500 ng/ml阿苯达唑组和75 Gy X线+2 500 ng/ml阿苯达唑组。X线照射剂量率为200 cGy/min,源皮距为100 cm。体外培养第4天开始照射,每组共照射3次,每次间隔1 d。首次照射后第1天开始每天取原头节培养液,0.1%伊红染色,光镜下计数每100个原头节中着色原头节数目,每组计算300个原头节的平均死亡率,直至实验组原头节全部死亡为止。同时光镜下观察经X线照射后原头节的变化。结果不同放射剂量组的原头节死亡率与空白对照组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。阿苯达唑组原头节死亡率与放射线联合阿苯达唑组间的差异均有统计学意义(P<0.05),且显著高于空白对照组(P<0.05)。其中,X线...     

藏药治疗小鼠继发性棘球蚴超微结构的观察

目的通过应用藏药25味铜灰散治疗小鼠继发性棘球蚴病的疗效观察,探讨藏药治疗棘球蚴病的免疫机理及为临床更好的应用药物治疗棘球蚴病奠定一个良好基础。方法给予药物治疗90d后,解剖小鼠,检测各小鼠棘球蚴囊的湿重,对棘球蚴囊进行超微结构的观察。结果治疗90d后,棘球蚴囊病理及超微结构都有明显的变化。结论藏药25味铜灰散对小鼠棘球蚴有比较好的治疗作用,这将为棘球蚴病的临床治疗提供一个新的前景与思路。     

高强度聚焦超声辐照后细粒棘球蚴囊壁的病理变化

目的 观察细粒棘球蚴囊壁在高强度聚焦超声（HIFU）辐照后的病理改变。方法 采集感染细粒棘球蚴的新鲜羊肝，选取囊壁较薄、触摸弹性较好的细粒棘球蚴30个。采用随机抽样方法等分为3组，每组10个包囊。对照组，用普通诊断超声照射2 min。处理组1和处理组2分别用150 W和250 W声功率对细粒棘球蚴包囊进行沿囊壁多层面的环形扫描，层面间距为5 mm，扫描速度为3 mm/s，照射时间2～10 min（根据包囊大小）。取出照射后先肉眼观察细粒棘球蚴包囊大体改变，后取囊壁组织分别制作病理切片和透射电镜切片，观察其病理改变。 结果 HIFU（250 W）辐照后，细粒棘球蚴包囊剪开处内囊壁立即发生卷曲，剥离出的内囊颜色变白、变硬、透光度降低。病理切片显示，HIFU辐照后细粒棘球蚴的内囊壁上角皮层与生发层大部分发生分离。电镜观察结果显示，HIFU辐照后细粒棘球蚴的角皮层纤维纹理明显改变，生发层细胞发生裂解性破坏。 结论 HIFU沿细粒棘球蚴囊壁的多层面的环形照射可明显损害细粒棘球蚴囊壁。     

阿苯达唑脂质体对小鼠细粒棘球蚴囊超微结构的影响

目的:探讨阿苯达唑脂质体(liposom alalbendazole,L-ABZ)及其联合西咪替丁(cim etidine,CTD)治疗小鼠细粒棘球蚴病的病理形态变化。方法:将阿苯达唑脂质体及西咪替丁(1.5% 乳液阿苯达唑200 m g/kg,西咪替丁100 m g/kg),经口灌喂感染小鼠3个月后,用光镜和电镜观察小鼠肝、腹细粒棘球蚴囊结构的病理改变。结果:以阿苯达唑脂质体联合西咪替丁治疗组细粒棘球蚴囊组织变性坏死改变最为显著,与对照组有显著性差异(P< 0.01)。结论:脂质体包封阿苯达唑,可提高阿苯达唑的抗细粒棘球蚴作用,西咪替丁具有明显的协同作用     

青海高原不同宿主源细粒棘球蚴的病原生物学考察

本文对我国青海高原牦牛和绵羊体内原发性细粒棘球蚴的病原生物学进行了考察。结果表明牦牛细粒棘球蚴的感染率和钙化率显著高于绵羊源(P<0.01);牦牛肝脏感染和肺脏感染无明显差异(各占34.14％和31.20％),绵羊则绝大多数寄生于肝脏(50.76％),肺脏较少(13.40％),肝、肺均感染者与牦牛相近(34.26％和32.58)。牦牛肝脏棘球蚴的钙化率高(73.00％),育囊率低(69.51％),但肺脏棘球蚴与绵羊肝、肺脏棘球蚴的钙化率相近(分别为20.15％、28.00％和18.04％),育囊率均高(分别为94.58％、91.76％和90.00％)。人体棘球蚴的育囊率达100.00％。对各源棘球蚴内的原头节测量结果表明不论原头节寄生在何种宿主,其肺脏原头节总是大于肝脏原头节(P<0.01);同源肝、肺脏原头节的吻钩大小无显著差异(P>0.05)。牦牛棘球蚴体积较绵羊的大,但原头节却小的多(P<0.01),且二者原头节吻钩的多项测量指标之间存在显著的差异(P<0.01或P<0.05)。上述结果提示对这种差异不应仅以棘球蚴寄生在不同宿主来解释,还应考虑到该地区是否存在不同宿主的细粒棘球绦虫虫株。     

Chemotherapy of experimental echinococcosis in mice

Mebendazole and flubendazole, administered in food at 500 ppm for 14 consecutive days, had a marked effect on one-year-old hydatid cysts of Echinococcus granulosus in mice infected with protoscolices of human origin. In both treated groups most of the cysts were collapsed compared with none in the controls. A small number of apparently viable cysts was observed in both mebendazole and flubendazole treated mice. Histological examination of collapsed cysts revealed necrosis and limited inflammatory infiltration, but in one intact cyst a normal germinal layer was present. The body weight decrease of the treated mice, as the cysts collapsed, was interpreted as an excellent indicator of drug efficacy. Drug-related side effects were not observed.     

An improvement in a new method for the surgical treatment of echinococcosis

Parasitic cysts were intraoperatively treated with glycerol in 179 patients with echinococcosis at various sites and 3% hydrogen peroxide in 165 patients with hepatic echinococcosis. Experiments on 60 cotton rats experimentally infected with Echinococcus alveolaris and 156 albino mice with E. granulosus provided evidence for the surgical use of 80-100% glycerol or 3% hydrogen peroxide to treat the cysts. Intraoperative glycerol treatment of cysts in patients with complicated hepatic echinococcosis fails to normalize amino acid metabolism, as well as immunity even a year postoperatively. The glycerol method has no contraindications for pulmonary and hepatic echinococcosis. Hydrogen peroxide has a damaging effect on all germinal elements of both E. alveolaris and E. granulosus. The authors recommend that 3% hydrogen peroxide should be intraoperatively used for treatment of cysts. After surgery, there is a tendency for amino acid metabolism to become normal in such patients.     

Long term follow-up of human hydatid disease (Echinococcus granulosus) treated with a high-dose mebendazole regimen

Fifteen patients with inoperable hydatid disease (Echinococcus granulosus) were treated with an initial 6-week high-dose mebendazole regimen with a follow-up ranging from 3-7 years. Ten of 15 patients showed both objective and clinical improvement, although two of these 10 relapsed 1-6 years after completing therapy. Simple, single cysts in the lung and liver showed the best response. Multiple, complex cysts and bone cysts showed little or no objective improvement. One patient developed reversible neutropenia. Overall results were no better than those obtained by others with smaller doses.     

阿苯达唑脂质体生发层单抗复合物治疗小鼠细粒棘球蚴病效果观察

目的　评价阿苯达唑免疫脂质体 (IL - Alb)治疗小鼠细粒棘球蚴病的效果。　方法　每只小鼠感染约 10 0 0个细粒棘球绦虫原头蚴 ,80天后随机分为 5组 ,4个治疗组分别给予阿苯达唑 (Alb)、阿苯达唑脂质体 (L-Alb)、阿苯达唑亚砜脂质体 (L - Albso)及 IL - Alb,按原药 10 0 m g/ (kg.d)× 5 d ip,连续 3个疗程 ,另 1组为对照组。治疗效果按囊重抑制率、常规病理切片、超微结构及高效液相色谱法测定囊药含量 4个指标综合评价。　结果　L - Alb治疗组 ,囊重抑制率为 80 .3% ,囊药含量为 2 .18μg/ g,优于 Alb组囊重抑制率为 6 1.2 % ,囊药含量为 0 .76μg/ g;而 IL- Alb组的囊重抑制率为 91.45 % ,囊药含量为 5 .15 μg/ g。组织病理损伤以 IL- Alb组较重。　结论　免疫脂质体作为 Alb载体 ,可增加药物的靶特异性 ,提高 Alb治疗细粒棘球蚴的疗效。     

新疆北部双峰驼细粒棘球蚴感染调查

目的：确定我国双峰驼中细粒球蚴的感染状况和寄生特征。方法：在屠宰场检查来自新疆北部各地骆驼体内的感染情况。测量棘球蚴囊的大小，检查内容物的性质并镜检有无原头节。结果：在３７５只骆驼中检出细粒棘球蚴感染者１８５只，感染率４９．３％。主要寄生在肝和肺，肝内较多，肝∶肺＝１∶０．６４。育囊携带率３４．８％，育囊率３９．２％， 囊指数７．５３。棘球蚴囊位于肝表面，单个存在，囊壁较薄，内无子囊。育囊平均直径在肝为５．６±２．５６ｃｍ，在肺为４．８±２．０３ｃｍ，钙化率高，单纯携带钙化病灶的骆驼占感染骆驼的６４．３％。结论：新疆北部双峰驼细粒棘球蚴的感染率很高。其寄生特征与本地区牛、羊中的细粒棘球蚴有明显区别，与非洲单峰驼亦有不同，应进一步深入研究。     

吡喹酮、阿苯达唑和甲苯达唑对小鼠细粒棘球蚴生发膜超微结构的影响

小鼠感染的细粒棘球蚴囊经吡喹酮、阿苯达唑和甲苯达唑治疗后,其生发膜的超微结构均示有广泛的变化,主要是皮层基质变性、溶解和空泡变化;皮层细胞核周胞质的溶解、空泡形成,线粒体密集、变性、肿大,间质及肌束的广泛或局灶性溶解,以及囊腔面的溶解和脱落。甲苯达唑和阿苯达唑尚可引起角质层的损害及核染色质减少等。