rhKD/APP对实验性大鼠急性胰腺炎合并肺损伤的影响

目的 观察rhKD/APP对实验性大鼠急性胰腺炎合并肺损伤的影响.方法 采用3.5 %的牛磺胆酸钠0.1 ml/100 g逆行注入大鼠胰胆管内诱导急性胰腺炎合并肺损伤模型,观察rhKD/APP治疗急性胰腺炎合并肺损伤大鼠肺干湿重比值、支气管肺泡灌洗液蛋白含量(BLAF)、大鼠肺组织髓过氧化物酶(MPO)以及肺组织匀浆肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化.结果 rhKD/APP治疗组可明显降低大鼠肺干湿重比值、BLAF、MPO以及 TNF-α的含量.结论 rhKD/APP可显著减轻胰腺炎症反应,对大鼠急性胰腺炎合并肺损伤具有治疗作用.     

大鼠急性坏死性胰腺炎肺组织中Toll样受体2、4的表达

目的研究急性坏死性胰腺炎（ANP）肺组织中Toll样受体2、4（TLR2、4）mRNA的表达及其意义。方法采用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠（TAC）诱导ANP肺损伤动物模型，并分为假手术组、胰腺炎组和氯喹阻断组。计算肺组织学分值和肺损伤指数以评价肺损伤程度，荧光实时定量-PCR方法检测不同组不同时间点肺组织TLR2和TLR4 mRNA表达变化。结果与假手术组比较，胰腺炎组大鼠3h时肺组织TLR2、4mRNA表达开始增高，12h时达到峰值（P〈0.05），同时，肺损伤加重，肺组织TNF -α浓度升高，NO浓度逐渐降低；给予氯喹治疗后，TLR2、4mRNA表达降低，肺损伤程度减轻，肺组织TNF-α浓度降低，NO浓度显著升高。结论ANP时，肺组织内TLR2和TLR4的基因表达上调，其升高同肺组织损伤呈正相关，在ANP肺损伤的发生、发展中起一定作用。     

大鼠急性坏死性胰腺炎肺组织中Toll样受体2、4的表达

目的研究急性坏死性胰腺炎(ANP)肺组织中Toll样受体2、4(TLR2、4)mRNA的表达及其意义.方法采用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠(TAC)诱导ANP肺损伤动物模型,并分为假手术组、胰腺炎组和氯喹阻断组.计算肺组织学分值和肺损伤指数以评价肺损伤程度,荧光实时定量-PCR方法检测不同组不同时间点肺组织TLR2和TLR4 mRNA表达变化.结果与假手术组比较,胰腺炎组大鼠3 h时肺组织TLR2、4 mRNA表达开始增高,12 h时达到峰值(P < 0.05),同时,肺损伤加重,肺组织TNF-α浓度升高,NO浓度逐渐降低;给予氯喹治疗后,TLR2、4 mRNA表达降低,肺损伤程度减轻,肺组织TNF-α浓度降低,NO浓度显著升高.结论 ANP时,肺组织内TLR2和TLR4的基因表达上调,其升高同肺组织损伤呈正相关,在ANP肺损伤的发生、发展中起一定作用.     

急性胰腺炎大鼠肺内TNF-α基因表达与肺损伤的关系

肿瘤坏死因子(TNF)在多种病因导致急性肺损伤(ALI)或ARDS的进程中发挥着重要作用,但在急性坏死性胰腺炎(ANP)时肺内TNF-α基因的过度表达与并发肺损伤的关系尚未获确切证据。我们拟从分子水平探讨急性胰腺炎时肺内TNF-α基因转录与蛋白表达状况在肺损伤发病机制中的意义。 1 材料和方法 SD大鼠90只随机分为A,B,C三组,A组以5g/L牛磺胆酸钠胰胆管内逆行注射制成急性水肿性胰腺炎(AEP)模型,B组同法以50g/L牛磺胆酸钠制成ANP模型,C组为假手术对照组。各组动物分别于预定时点处死,测定血淀粉酶、内毒素(ET)及TNF-α水平;以半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肺组织中TNF-α mRNA含量了解基因转录水平,以免     

肿瘤坏死因子-α基因表达、细胞凋亡与急性胰腺炎肺损伤关系的实验研究

目的 观察急性胰腺炎时肺内肿瘤坏死因子-α（TNF-α）基因表达及细胞凋亡的状况，并探讨其与肺损伤的关系。方法 以不同浓度牛磺胆酸钠液逆行胰胆管注射造成大鼠急性水肿性胰腺炎（AEP）与急性坏死性胰腺炎（ANP）两种模型，测定血浆TNF－α水平；半定量RT－PCR及免疫组化检测肺组织内TNF－α基因表达水平；TUNEL法结合激光扫描共聚焦显微镜检测肺内细胞凋亡的情况。结果 诱导AEP后肺内TNF－αmRNA及其蛋白的表达呈短暂的一过性增强，这种表达在ANP组则更为强烈与持久，与ANP组发生明显肺损伤相关（P＜0．05）。肺内细胞凋亡指数（‰）在AEP组呈一过性下降，在ANP组呈持续下降，其变化与肺损伤程度及肺内TNF－α mRNA水平呈负相关（P＜0．05）。结论 ANP时肺内TNF－α基因转录表达过度上调，代表一种超强的全身炎症反应即全身炎症反应综合征（SIRS),民肺损伤的发生有关。同时，肺内浸润的炎细胞（主要是中性粒细胞）发生延迟凋亡，可能在肺损伤进程中起作用，而TNF－α的过度生成是中性粒细胞延迟凋亡的部分原因。     

SOCS3在重症急性胰腺炎大鼠胰腺中的表达和作用

目的:探讨细胞因子信号转导抑制子3(SOCS3)在实验生重症急性胰腺炎(SAP)中的表达和作用.方法:32只♂ Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组(NC组)和3组SAP 6 h、12 h、18h组,每组8只.以4％牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射诱导SAP模型,动态测定各组血清淀粉酶(AMY)水平;光镜下观察胰腺大...     

盐酸戊乙奎醚对大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤MIF和AQP-5表达的影响

目的:探讨盐酸戊乙奎醚对大鼠急性坏死性胰腺炎(acute necrotic pancreatitis,ANP)并发急性肺损伤(acute lung injury,ALI)血清巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)和肺泡灌洗液水通道蛋白-5(aquaporin-5,AQP-5)表达的影响.方法:采用经胰胆管内逆行注射4%牛磺胆酸钠构建大鼠ANP并发ALI模型,100只SD大鼠以是否接受盐酸戊乙奎醚(penehyclidine hydrochloride,PHCD)腹腔注射干预治疗随机分为治疗组和非治疗组,每组再以6h、12h、24h、36h、48h五个取材时间点继续随机分组,共10组,每组10只动物.采用ELISA法测定血清中MIF的浓度和肺泡灌洗液中AQP-5的浓度,同时进行胰腺和肺组织病理形态学观察,肺组织湿/干重比检测,动脉血气分析.结果:相同时间点PHCD治疗组与非治疗组比较显示,血清MIF浓度降低(χ2=20.52,P=0.042),肺泡灌洗液AQ P-5浓度增高(χ2=17.22,P=0.044),胰腺和肺组织病理学损伤减轻,肺组...     

核因子—κB在重症急性胰腺炎肺损伤发病机制中的作用

目的：探讨核因子－κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）在重症急性胰腺炎（SAP）肺损伤发病机制中的作用。方法：66只雌性Wistar大鼠随机分为正常组、SAP组、PDTC（二硫代氨基甲酸吡喀烷）预处理组三组。SAP模型采用5％的牛磺胆酸钠1ml/kg胰胆管内逆行注射方法建立。PDTC预处理组在建立SAP模型前1h腹腔内注射PDTC100ml/kg。后两组分别在3、6、12h三个时相点将动物处死后（各10只）,留取肺组织。应用SP免疫组化方法检测SAP肺组织NF－κB表达情况,运用RT－PCR的方法检测肺组织TNFα、IL-6、ICAM-1 mRNA的表达,并测定肺组织湿／干比值作为肺损伤的指标。结果：SAP组肺组织湿／干比值除3h与正常组相比无关差异外,其余各组与正常对照组之间有显性差异（P＜0．05）,肺组织内可见NF－κB活化的中性粒细胞浸润,且肺组织TNFα、IL-6、ICAM-1 mRNA表达增加。PDTC预处理组肺组织湿／干比值明显降低,NF－κB活化的中性粒细胞明显减少,TNFα、IL-6、ICAM-1 mRNA表达水平显降低。结论：SAP时存在肺损伤,肺组织NF－κB活化并通过促进TNFα、IL-6、ICAM-1 mRNA的表达而参与肺损伤。     

核因子-κB在重症急性胰腺炎肺损伤发病机制中的作用

目的探讨核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤发病机制中的作用.方法66只雌性Wistar大鼠随机分为正常组、SAP组、PDTC(二硫代氨基甲酸吡咯烷)预处理组三组.SAP模型采用5%的牛磺胆酸钠1 ml/kg胰胆管内逆行注射方法建立.PDTC预处理组在建立SAP模型前1 h腹腔内注射PDTC100ml/kg.后两组分别在3、6、12 h三个时相点将动物处死后(各10只),留取肺组织.应用SP免疫组化方法检测SAP肺组织NF-κB表达情况,运用RT-PCR的方法检测肺组织TNFα、IL-6、ICAM-1 mRNA的表达,并测定肺组织湿/干比值作为肺损伤的指标.结果SAP组肺组织湿/干比值除3 h与正常组相比无差异外,其余各组与正常对照组之间有显著性差异(P＜0.05),肺组织内可见NF-κB活化的中性粒细胞浸润,且肺组织TNFα、IL-6、ICAM-1mRNA表达增加.PDTC预处理组肺组织湿/干比值明显降低,NF-κB活化的中性粒细胞明显减少,TNFa、IL-6、ICAM-1 mRNA表达水平显著降低.结论SAP时存在肺损伤,肺组织NF-κB活化并通过促进TNFa、IL-6、ICAM-1 mRNA的表达而参与肺损伤.     

Celecoxib对急性胰腺炎相关性肺损伤ICAM-1表达的影响

目的探讨Celecoxib对急性胰腺炎相关性肺损伤细胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响。方法逆行胰胆管注射4%牛磺胆酸钠诱导SD大鼠急性出血坏死性胰腺炎模型（AHNP）。实验随机分为假手术组、AHNP组及Celecoxib预处理组,动态观察3、6和12 h肺组织中丙二醛（MDA）和髓过氧化物酶（MPO）含量,免疫组化检测ICAM-1蛋白表达。结果AHNP组肺组织MDA和MPO含量进行性增加,Celecoxib在各时间点均显著降低了AH-NP大鼠肺组织MPO活性及MDA水平（P〈0.05）;AHNP组ICAM-1表达上调,主要表达于血管内皮细胞,Celecoxib处理后表达显著下调（P〈0.05）。结论Celecoxib抑制ICAM-1的表达,可能是其减轻AHNP大鼠肺组织炎性损伤的重要环节之一。     

环氧化酶-2在急性胰腺炎大鼠肺组织中的表达

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)在大鼠急性胰腺炎肺损伤中的作用.方法大鼠胰胆管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠,制作大鼠重症急性胰腺炎并发肺损伤模型.将实验大鼠分为正常对照组、胰腺炎1、4、8、12、24小时组.分别对胰腺损伤、肺损伤程度进行病理评分,酶显色法测定血清脂肪酶水平,并测定肺组织湿/干比;逆转录聚合酶链反应技术检测各组鼠肺组织COX-2的表达.结果造模后1小时,大鼠即出现较明显的胰腺损伤,伴有血清脂肪酶升高,随着时间的延长,胰腺损伤逐渐加重,以12小时为重.造模后1小时,肺损伤评分即有升高,但肺组织湿/于比无明显变化,此后,肺损伤程度逐渐增加,以24小时为重,光镜下主要表现为肺组织炎性细胞浸润、肺泡间隔增宽、肺泡腔内渗出液、肺泡腔塌陷等.正常大鼠肺组织内COX-2 mRNA呈低水平表达,造模4小时后,大鼠肺组织内COX-2 mRNA表达明显增加,至24小时达最高水平;大鼠肺组织内COX-2 mRNA表达与胰腺损伤程度、肺损伤程度成正相关.结论大鼠肺组织内COX-2参与了胰腺炎肺损伤的过程,抑制肺组织内COX-2的表达可能有助于胰腺炎和胰腺炎肺损伤的治疗.     

重症急性胰腺炎肺损伤大鼠sICAM-1水平变化及其意义

目的:探讨血清可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)水平变化与重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤的关系.方法:SD大鼠采用逆行胰胆管注射30 g/L牛磺胆酸钠方法制作SAP模型取0,3,6,12,24 h不同时点血清进行sICAM-1检测,同时检测肺组织髓过氧化物酶活性.结果:制模3h后,血清sICAM-1水平开始持续上升(34.90-38.99μmol/L),肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性在6 h后明显增强(P<0.05),血清sICAM-1水平与肺组织MPO活性呈正相关(r =0.897).结论:重症急性胰腺炎时血清sICAM-1水平的变化可能与肺部损伤程度密切相关.     

中性粒细胞趋化因子在急性胰腺炎相关急性肺损害中的作用

目的:探讨中性粒细胞趋化因子(CINC)在急性胰腺炎相关的急性肺损害(ALI)中的作用.方法:分别采用ip雨蛙肽和胰胆管逆行注射50g/L牛磺胆酸钠建立大鼠轻症、重症急性胰腺炎模型.84只SD大鼠随机分为雨蛙肽组、生理盐水组、牛磺胆酸钠组和手术对照组.分别检测各组不同时间点血清淀粉酶、肺干湿重比和肺组织病理学改变,用免疫组织化学法和半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织中CINC蛋白和CINCmRNA表达的变化情况.结果:雨蛙肽组各时间点CINC蛋白和CINCmRNA的表达与生理盐水组无明显差异(P>0.05);牛磺胆酸钠组与手术对照组相比,血清淀粉酶、肺干湿重比显著升高(P<0.05),术后1h肺组织CINCmRNA的表达开始升高(1h:0.23±0.07vs0.07±0.04,P<0.05;3h:0.36±0.07vs0.06±0.04,P<0.05;6h:0.56±0.07vs0.09±0.05,P<0.01;12h:0.49±0.09vs0.11±0.03,P<0.01),术后3h开始有CINC蛋白的表达,随着时间的延长表达逐渐增强,且与肺组织的病理改变呈正相关.结论:CINC可能在胰腺炎相关的急性肺损害中起了重要的作用.     

白细胞介素－18在实验性重症急性胰腺炎肺损伤中的作用

背景白细胞介素(interleukin,IL)-18是一种新近发现的促炎症细胞因子,其血清水平与急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)严重程度及合并胰外脏器损伤方面存在相关性,但有关IL-18在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)合并肺损伤中的作用却鲜有报道.目的观察IL-18在SAP大鼠肺组织中的表达,探讨IL-18在SAP合并肺损伤中的作用.方法 采用4%牛磺胆酸钠逆行注人胰胆管诱发SAP模型.Sprague-Dawley大鼠32只,随机分为对照组(health control,HC)和SAP6h、12 h、18 h组.动态监测血清淀粉酶(AMS)、肺湿干重比率,留取标本在光镜下观察胰腺及肺组织病理学改变,采用免疫组化方法检测IL-18在肺脏中的表达和定位,并用Western blotting方法检测肺内IL-18蛋白的表达.结果 SAP组各时间点血清淀粉酶、肺湿干重比率均显著高于对照组(P＜0.01);SAP各组胰腺和肺组织病理损伤程度随时间明显加重.免疫组化结果显示,SAP组中IL-18在肺泡巨噬细胞胞浆中的表达较HC组明显增多.Westernblotting结果显示,SAP组各时间点IL-18表达明显升高,与HC组相比均具有显著性差异(P＜0.01).结论 SAP时肺组织中IL-18主要由肺巨噬细胞生成,IL-18可能在SAP合并肺损伤中发挥重要作用.     

急性坏死性胰腺炎大鼠肺泡巨噬细胞中TNFα的表达及意义

目的探讨肿瘤坏死因子α（TNFα）在急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及意义。方法将72只SD大鼠随机分为Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组。Ⅰ、Ⅱ组逆行性胰胆管注射5％牛磺酸钠建立ANP模型。支气管肺泡灌洗获取各组肺泡巨噬细胞，检测TNFα水平；检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶（MPO）水平；以逆转录聚合酶链反应法测定肺泡巨噬细胞TNFαmRNA表达情况；行肺组织病理学检查。结果ANP发生后，肺泡巨噬细胞TNFαmRNA的表达逐渐增强，6h最显著，12h表达减弱，Ⅰ、Ⅱ组TNFα水平随时间变化趋势与TNFαmRNA相符。ANP大鼠肺损伤随病情进展而逐渐加重，肺组织MPO及BALF蛋白含量随时间延长而逐渐升高，Ⅰ组各指标与Ⅲ组相比，P均〈0．05。Ⅱ组各指标与Ⅲ组相比仍然升高（P均〈0．05），但与Ⅰ组比较明显降低（P均〈0．05）。肺泡巨噬细胞分泌TNFα水平与肺组织MPO及BALF蛋白含量密切相关。结论ANP发生后，肺泡巨噬细胞分泌的TNFα过度表达，并导致肺损伤。     

急性胰腺炎肺组织中性粒细胞趋化因子的表达及清胰汤的保护作用

[目的]观察中性粒细胞趋化因子(CINC)在重症急性胰腺炎(SAP)早期肺组织中表达的动态变化,探讨清胰汤(QYT)对SAP肺损伤(ALI)的保护作用及其机制.[方法]采用大鼠胰腺被膜下均匀注射5%牛磺胆酸钠0.4 ml/100 g制作SAP模型,随机分为假手术(SO)组,SAP组和QYT组.SAP模型制作后立即给予QYT 1 ml/kg灌胃,每8 h重复1次.后2组又各分为6、12、24 h 3小组,总计7组,每组8只.观察肺组织病理学改变,肺湿重(W)/干重(D)比率,髓过氧化酶(MPO)活性,肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度和CINC mRNA的表达.[结果]SO组肺组织CINCmRNA有轻度表达;SAP6、12、24 h各组CINC mRNA表达明显高于SO组,24 h组达高峰(P<0.01),与肺W/D比率、MPO活性、TNF-α浓度及肺组织病理变化相关(P<0.05).与SAP组比较,QYT组肺W/D比率、MPO活性和TNF-α浓度明显下降,CINC mRNA表达降低(P<0.05),肺组织病理学损害减轻,QYT24 h组肺组织病理学损害减轻显著(P<0.05).[结论]CINC是大鼠SAP早期ALI重要的炎症递质,QYT能抑制大鼠SAP肺组织中CINC的表达,从而减轻大鼠SAP ALI.     

白芍总苷对重症急性胰腺炎大鼠胰腺病理学改变及NF-κB通路的影响

目的 研究白芍总苷(TGP)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺病理学改变的影响及其作用机制.方法 180只SD大鼠随机分为假手术组、SAP组、TGP(20、40、60 mg/kg)组和加贝酯(gabexate mesylate,GM)10 mg/kg组,每组30只;采用逆行胰胆管注射浓度为3.5％牛磺胆酸钠(1 mL/...     

清胰汤对急性胰腺炎大鼠的保护作用

目的研究清胰汤对急性胰腺炎的治疗机制.方法采用逆行胆胰管注入牛磺胆酸钠制成大鼠急性胰腺炎模型,观察不同实验性急性胰腺炎治疗组(分别在造模2h后给予生理盐水、石蜡油和清胰汤治疗)大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)、内毒素(ET)、淀粉酶(AMY)改变.结果和其他治疗组比较,清胰汤可明显降低急性胰腺炎模型大鼠造模后24h和48h时的TNF和AMY的水平(和生理盐水、石蜡油组比较,P<0.05),造模后48h清胰汤治疗组大鼠血中ET含量显著低于其他治疗组(P<0.05).结论清胰汤的治疗作用可能是多方面的,包括保护胰腺细胞、调节细胞因子的释放、保护肠粘膜防止肠道细菌和内毒素的移位.     

牛磺胆酸钠诱导急性坏死性胰腺炎大鼠模型的理想浓度

目的 探讨牛磺胆酸钠诱导急性坏死性胰腺炎(ANP)并发多器官功能衰竭(MODS)大鼠模型的量-效关系及理想浓度.方法 280只大鼠按数字随机法分为对照组(40只)和ANP组,分别采用经胰胆管逆行注射3.5%、4%、4.5%、5%牛磺胆酸钠制备ANP模型(每浓度组60只).术后1、3、6、12、24 h分批处死大鼠,检测血清淀粉酶、总胆红素、肌酐水平,行血气分析,常规胰腺病理检查并评分;各ANP组另留20只大鼠观察建模后24 h生存率.结果 各ANP组的血清淀粉酶、总胆红素、肌酐水平及氧合指数(PaO_2/FiO_2)、胰腺病理评分均随牛磺胆酸钠浓度增加而升高,呈明显的量-效和时-效关系.4.5%牛磺胆酸钠建模组于术后6 h出现肝、肾功能障碍高峰,12 h出现呼吸功能障碍高峰,其MODS发生率为52.5%,显著高于3.5%、4.0%牛磺胆酸钠建模组的15.0%和37.5%;24 h生存率为65%,显著高于5%牛磺胆酸钠建模组的30%.结论 4.5%牛磺胆酸钠诱导ANP大鼠模型具有较高的MODS发生率和24 h生存率,是ANP并发MODS诊治研究的理想建模浓度.     

鼠的实验性胰腺炎:牛磺胆酸钠所致急性出血性胰腺炎

本文系根据急性胰腺炎的发病之一,即胆汁反流学说而设计一种方法,在实验动物中造成急性出血性胰腺炎模型,以供研究急性胰腺炎的发病机制。作者等在大鼠的胆胰管内注射结合胆盐(牛磺胆酸钠),可无例外地引起致命的急性出血性胰腺炎。材料与方法:实验用96只雌、雄性Wistar鼠,体重在180～200g,分为6组。可随意饮水、进食。打开腹腔,在胰管系统内注射0.2ml生理盐水或0.2ml牛磺胆酸钠(用三种不同浓度)。用手推压力,在60秒内注完。手术后在背部皮下注射4ml生理盐水,以补充手术中液体的丢失。第1组:7只大鼠,注入生理盐水0.2ml。分别于术后1分钟、15分钟及1、3、6、12、24小时,用乙醚过量的方法处死1只。第2组:21只大鼠,注入5％牛磺胆酸钠溶液0.2ml。如第1组的间隔时间,每次处死3只。第3组:15只大鼠、管内注入生理盐水0.2ml。第4组:17只大鼠,注入3％牛磺胆酸钠溶