鼻咽癌活检组织及外周血白细胞EB病毒DNA的检测及其意义

目的：探讨鼻咽组织、外周血血白细胞ＥＢＶ基因组分布及与ＮＰＣ的关系。方法：采用ＰＣＲ法检测２６例ＮＰＣ,４例癌旁及１４例慢性鼻咽炎鼻 组织吸外周血白细胞中ＥＢＶ ＤＮＡ。同时采用酶免疫法测定血清ＶＣＡ－ＬｇＡ。结果：１．ＮＰＣ、癌旁及鼻咽炎组织ＥＢＶ ＤＮＡ无明显差异。２．ＮＰＣ与鼻咽炎组外周血白细胞ＥＢＶ ＤＮＡ有明显差异,Ｐ〈０．０５。３．ＮＰＣ与鼻咽炎组血清ＶＣＡ－ＩｇＡ之间存在明显差异。Ｐ     

鼻咽脱落细胞的AgNOR定量观察对鼻咽癌的诊断意义

本文对临床诊断为鼻咽癌（ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＮＰＣ）者２０８例分别行鼻咽脱落细胞、病理活检、组织印片及血清免疫酶测定ＶＣＡ－ＩｇＡ，结果发现活检（第１次）准确率为８５．７％，组织印片为８８．９％，涂片ＨＥ染色为６３．４％，涂片ＡｇＮＯＲ为９０．５％，ＶＣＡ－ＩｇＡ为７８．６％。以脱落细胞涂片ＡｇＮＯＲ染色准确率最高。认为该方法简便，快速，不失为ＮＰＣ诊断的一种有意义的辅助方法。     

鼻咽脱落细胞的AgNOR定量观察对鼻咽癌的诊断意义

本文对临床诊断为鼻咽癌（ｎａｓｏｐｈａｒｎｇｅａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＮＰＣ）者２０８例分别行鼻咽脱落细胞、病理活检、组织印片及血清免疫酶测定ＶＣＡ－ＩｇＡ，结果发现活检（第１次）准确率为８５．７％，组织印片为８８．９％，涂片ＨＥ染色为６３．４％，涂片ＡｇＮＯＲ为９０．５％，ＶＣＡＩｇＡ为７８．６％。以脱落细胞涂片ＡｇＮＯＲ染色准确率最高。认为该方法简便，快速，不失为ＮＰＣ诊断的一种有意义的辅助     

原位免位PCR检测喉癌中人类乳头状瘤病毒E6蛋白

针对常规免疫组化检测石蜡包埋的喉癌组织中人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１６／１８型Ｅ６蛋白阳性率低、信号模糊等缺点，我们探索出一种敏感而有效的检测方法———原位免疫ＰＣＲ（ＩｎＳｉｔｕＩｍｍｕｎｏ－ＰＣＲ，ＩＳＩ－ＰＣＲ），报告如下：１　材料与方法１．１　材料：９例１６／１８型ＨＰＶＤＮＡ阳性的喉癌高分化鳞癌石蜡包埋组织。生物素标记ＰａＴＥＬ１４／ＥｃｏＲＩＤＮＡ片断。ＰＣＲ引物：５’－ＡＴＡＣＣＴＡＴＴＧＣＣＴＡＣＧＧＣＡＧ－３’；５’－ＣＧＴＴＡＧＴＡＡＡＴＧＡＡＴＴＴＴＣＴ－３’。１．２　方法…     

新疆汉族和维吾尔族鼻咽癌组织的PCR和免疫组化检测比较

目的：了解新疆汉族维吾尔族（维）族鼻咽癌（ＮＰＣ）发病因素的差别。方法：用ＰＣＲ与免疫组化技术对７３例ＮＰＣ组织（汉族４１例,维族３２例）分别进行ＥＢ病毒脱氧核糖核酸（ＥＢＶ－ＤＮＡ）、ＥＢ病毒核抗原（ＥＢＮＡ２）、潜伏膜蛋白（ＬＭＰ－１）检测。     

小儿喉乳头状瘤HPV-DNA及体液免疫检测

目的：探讨小儿喉乳头状瘤（ＪＬＰ）人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染途径及发病机理。方法：采用ＰＣＲ及ＰＣＲ产物斑点杂交技术检测ＪＬＰ组织ＨＰＶ－ＤＮＡ;散射免疫比浊法测定血清Ｉｇ及补体Ｃ３。结果：ＪＬＰ组织ＨＰＶ总感染率为９５％（１９／２０）,其中ＨＰＶ。型为５５％（１１／２０）,ＨＰＶ１１为３０％（６／２０）,ＨＰＶ６＋１１型为１０％（２／２０）;ＪＬＰ患者血清ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、Ｃ３值正常,对照     

MDM 2基因在鼻咽癌中的表达及其与p53蛋白表达、EB病毒潜伏感染的关系

目的：探讨ＭＤＭ２基因在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达情况及其与ｐ５３蛋白表达、ＥＢ病毒（ＥＢＶ）潜伏感染的关系。方法：运用非同位素原位杂交、免疫组化和多聚酶链反应技术对４６例ＮＰＣ、１２例慢性鼻咽炎症粘膜（ＣＩＮＥ）分别进行ＭＤＭ２ｍＲＮＡ、ＭＤＭ２蛋白、ｐ５３蛋白及ＥＢＶ－ＤＮＡ的检测。结果：４６例ＮＰＣ中,１４例ｍＲＮＡ及ＭＤＭ２蛋白高表达,３８例为ｐ５３蛋白阳性,４３例为ＥＢＶ－ＤＮＡ阳性,１２     

聚合酶链反应检测EB病毒亚型对区分鼻咽良恶性病变的价值

以ＥＢ病毒核抗原（ＥＢＮＡ）Ａ亚型特异性引物作聚合酶链反应（简称ＰＣＲ－Ａ）同时用Ａ、Ｂ亚型ＤＮＡ片段和Ｂａｍ－Ｗ片段为探针，与鼻咽活检组织ＤＮＡ作打点核酸杂交（简称ＤＢＨ－Ａ、ＤＢＨ－Ｂ和ＤＢＨ－Ｗ）。ＤＢＨ－Ｂ结果全部阴性，ＰＣＲ－Ａ“ＤＢＨ－Ａ和ＤＢＨ０Ｗ检测的阳性率，３１例鼻咽癌分别为８３．９％（２６／３１）、７４．２％（２３／３１）和８０．６％（２５／３１）；３３例非鼻咽癌分别为１５．２     

聚合酶链反应检测EB病毒亚型对区分鼻咽良恶性病变的价值

以ＥＢ病毒核抗原（ＥＢＮＡ）Ａ亚型特异性引物作聚合酶链反应（简称ＰＣＲ－Ａ），同时用Ａ、Ｂ亚型ＤＮＡ片段和Ｂａｍ－Ｗ片段为探针，与鼻咽活检组织ＤＮＡ作打点核酸杂交（简称ＤＢＨ－Ａ、ＤＢＨ－Ｂ和ＤＢＨ－Ｗ）。ＤＢＨ－Ｂ结果全部阴性，ＰＣＲ－Ａ、ＤＢＨ－Ａ和ＤＢＨ－Ｗ检测的阳性率，３１例鼻咽癌分别为８３．９％（２６／３１）、７４．２％（２３／３１）和８０．６％（２５／３１）；３３例非鼻咽癌分别为１５．２％（５／３３）、６９．７％（２３／３３）和４２．２％（１４／３３），其中２５例慢性鼻咽炎分别为１２．０％（３／２５）、９２．０％（２３／２５）和４０．０％（１０／２５）。鼻咽癌组与非癌组和慢性鼻咽炎之间，ＰＣＲ－Ａ阳性率的差异有非常显著的统计学意义（Ｐ＜０．０００１），可作为区别鼻咽良恶性病变的一个有价值的参考指标。这为鼻咽癌的病毒发病学提供了有价值的线索，也使将来用ＰＣＲ早期诊断鼻咽癌成为可能。     

100例鼻咽癌患者及其家属血清中EBV－VCA－IgA抗体检测

１００例鼻咽癌患者及其家属血清中ＥＢＶ－ＶＣＡ－ＩｇＡ抗体检测赵素萍，肖健云，谭莉，陶正德鼻咽癌患者血清中可检出高滴度抗非洲淋巴细胞瘤（ＥＢＶ）相关抗体，尤以病毒壳蛋白抗原－免疫球蛋白Ａ（ＶＣＡ－ＩｇＡ）抗体在鼻咽癌患者更具有特异性，故认为ＥＢＶ感染...     

鼻咽癌患者唾液和血清及外周血白细胞中EBV-DNA的定量检测

目的对鼻咽癌患者唾液、血清及外周血白细胞中的EBV-DNA进行检测,分析唾液、血清、外周血白细胞中EB病毒的DNA含量与鼻咽癌的相关性。方法对40例初诊鼻咽癌患者和50例正常人的唾液、血清及外周血白细胞中的EBV-DNA进行荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)检测。结果EBV-DNA在鼻咽癌患者血清中的检出率为67.5%,显著高于正常人血清中的EBV-DNA检出率2%(χ2=44.48,P<0.001);鼻咽癌患者的唾液、外周血白细胞EBV-DNA检出率与正常人相比,无显著性差异;鼻咽癌患者和正常人的唾液EBV-DNA拷贝数与外周血白细胞EBV-DNA拷贝数呈正相关性;鼻咽癌患者血清EBV-DNA拷贝数与TNM分级有关,分级越晚含量越高。结论 EB病毒长期存在于多数人的唾液中,也可存在于外周血B淋巴细胞中。血清EBV-DNA检测在鼻咽癌的临床诊断中具有较高的敏感性和特异性,有助于鼻咽癌的早期诊断;血清EBV-DNA拷贝数与TNM分级有关,可在分子水平对鼻咽癌的TNM分级进行补充。     

鼻咽组织及脱落细胞中EB病毒对鼻咽癌诊断价值的对照研究

目的：探讨一种快速准确普查及诊断鼻咽癌（NPC）的方法。方法：应用聚合酶链反应（PCR）技术对临床怀疑NPC的144例患者的鼻咽组织和鼻咽脱落细胞中EB病毒（EBV）DNA进行检测,并与病理诊断对照。结果：PCR技术检测鼻咽组织中EBV DNA诊断NPC的敏感性和特异性分别为92．16％和80．95％;检测鼻咽脱落细胞中EBV DNA诊断NPC的敏感性和特异性分别为86．27％和71．43％,其差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论：检测鼻咽脱落细胞中EBV快速、简单,患者痛苦小,敏感性和特异性均较高,可用于NPC的诊断;对NPC的普查及流行病学调查尤其方便、实用,值得推广。对凡是EBV检测阳性的患者均应提高警惕,追踪观察。     

咽拭子检测潜伏膜蛋白1在鼻咽癌诊断中的应用

目的：验证咽拭子法检测EB病毒（EBV）潜伏膜蛋白1（LMP1）在鼻咽癌诊断中应用的可行性;检测LMP1野生型及30bp缺失变异型在鼻咽癌中的分布情况。方法：用咽拭子法收集鼻咽癌组及对照组鼻咽部脱落细胞,微量提取DNA,经PCR扩增人β珠蛋白基因序列验证咽拭子法的可行性,用特异性引物扩增出特异的LMP1序列,验证其在鼻咽癌诊断中的意义。测序分析LMP1变异情况。结果：咽拭子合格率为96．4％,LMP1基因作为鼻咽癌的检测指标,灵敏度为91．7％,特异性为95．6％,其中变异型LMP1在鼻咽癌中的表达频率为80．6％,野生型为11．1％。结论：咽拭子法可作为一种基因检测手段,LMP1基因的检测可以协同EB病毒壳抗原（EBVCA）-IgA作为鼻咽癌诊断的辅助指标,在LMP1（＋）的鼻咽癌患者中LMP1—30bp缺失突变普遍存在。     

EB病毒DNA与鼻咽癌关系的动态研究

目的：探讨EB病毒DNA（EBV—DNA）在鼻咽癌放疗前后的动态变化及与复发、远处转移的关系。方法：采用PCR加限制性内切酶酶切技术检测EBVDNA。结果：放疗前,74例标本中有71例（95．9％）EBV—DNA片段检出阳性;放疗50Gy／5周时,23例鼻咽原发灶和颈部淋巴结消失,其阳性率为13．0％（3／23）,余51例肿块未消者阳性率为62,7％（32／51）;放疗至70Gy／7周时,7例放疗后有残留,有残留者在放疗结束时EBV—DNA片段的检出阳性率为71．4％（5／7）,在67例肿块消失者中未检出阳性EBV—DNA片段。12例复发者中,11例EBV-DNA片段检出阳性;8例转移者中EBV—DNA片段检出均为阳性。结论：检测血浆EBV—DNA能很好地反映肿瘤的消长,是诊断鼻咽癌残留、复发及远处转移的敏感指标。     

血浆EB病毒DNA 定量测定对鼻咽癌的诊断价值

目的分析血浆EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）DNA定量测定对鼻咽癌的诊断价值。方法采用荧光定量聚合酶链反应（fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR）技术,测定35例经病理确诊的鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA含量,并与50例健康对照者比较。结果鼻咽癌患者血浆EBV-DNA阳性率和复制量均高于健康对照者。两组阳性率和中位浓度的比较均有统计学差异。结论血浆EBV-DNA定量分析不能作为临床上确诊鼻咽癌的方法,但对鼻咽癌的筛查有实用价值,值得进一步研究。     

鼻咽癌临床特征及82例误诊分析

目的 分析82例鼻咽癌的临床表现和误诊原因。方法 收集2002年11月至2009年11月我科收治、经病理确诊的82例鼻咽癌患者的病史资料,分析其临床表现及误诊率。结果 本组鼻咽癌病例的主要临床表现包括涕血、鼻塞、耳鸣、听力下降、头痛、颈部包块、颅神经损害和Horner′s征。EBV-VCA-IgA阳性率为93.90%。首诊时的误诊率为67.07%。结论 鼻咽癌的临床表现复杂,误诊率高,出现以上症状者宜进行仔细的耳鼻喉科检查。     

EB病毒基因BARF1在鼻咽癌中的表达及其意义

目的 EB病毒与鼻咽癌(特别是低分化鳞癌)密切相关。BARF1基因是EBV裂解期中的早期基因，本研究通过检测BARF1基因在鼻咽癌组织中的表达，希望能进一步揭示EB病毒与鼻咽癌的关系及致癌的可能机制。方法 对经病理确诊的47例鼻咽低分化鳞癌病人分别取癌组织、癌旁组织及相对正常鼻咽黏膜和13例其他头颈部恶性肿瘤癌组织及8例正常人鼻咽黏膜组织(均证实有EB病毒潜伏感染)，采用巢式-PCR技术检测BARF1在这些组织中的表达情况。结果 鼻咽癌组织BARF1基因表达率为91．5％(43／47)，其中39例相对强表达，4例弱表达；癌旁组织BARF1基因表达率为46．8％(22／47)，其中儿例相对强表达，儿例弱表达；相对正常黏膜BARF1基因表达率为6．4％(3／47)，3例均为弱表达；携带EB病毒的其他头颈部恶性肿瘤组织、正常人鼻咽黏膜组织均未检测到：BARY1基因表达。结论 从相对正常鼻咽黏膜到癌旁组织再到鼻咽癌组织BARF1基因的表达趋势为从不表达到表达，从弱表达到强表达。说明EB病毒与鼻咽癌的发生确实存在密切相关性；提示启动BARF1基因的表达有可能是EB病毒致鼻咽癌的重要条件之一。     

Epstein-Barr virus DNA measured in nasopharyngeal brushings in patients with nasopharyngeal carcinoma: pilot study

OBJECTIVE: We measured the amount of tumour-derived Epstein-Barr virus (EBV) deoxyribonucleic acid (DNA) in the nasal brushings of nasopharyngeal carcinoma (NPC) patients to determine the correlation with tumour load and response to treatment. MATERIALS AND METHODS: Twenty-eight patients with NPC were included in the study. Baseline measurements of EBV from nasopharyngeal brushings were obtained from 26 patients prior to treatment. A follow-up sample was available from 11 of these patients post-treatment and from 2 additional patients who did not have a baseline sample. Quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR) using SYBR Green I fluorescent dye was used to detect the EBV DNA copy number. RESULTS: Nasopharyngeal brush biopsies showed a high copy number of EBV DNA in most of the pretreatment samples (median 9714 copies/mL). The highest copy number detected was 14536944 copies/mL in one sample. In the post-treatment follow-up samples, the copy number was significantly lower (median 6 copies/mL). CONCLUSIONS: We have demonstrated that EBV DNA can be detected in the brush biopsies from NPC patients using quantitative real-time PCR. These pilot data suggest that nasopharyngeal brushings with PCR detection of EBV may be an effective tool for determining local tumour response. The potential of this technique as an NPC tumour marker for post-treatment follow-up is being validated with larger patient numbers.     

鼻咽癌患者血清唾液酸动态观察

目的探讨血清唾液酸(sialicacid,SA)在鼻咽癌的诊断价值及作为病情动态监测指标的可行性。方法对50例鼻咽癌患者治疗前、治疗结束时、治疗后2年的血清唾液酸进行检测,并与EB病毒衣壳抗原免疫球蛋白A(Epstein-Barrvirus-viralcoatantigensIgA,EBVVCA-IgA)作比较;以健康成年人、头颈部良性病变者各50例,作为对照。结果鼻咽癌患者治疗前血清唾液酸和EBV-VCA-IgA阳性率均明显高于健康人,差异有统计学意义(P值均<0.01);不同时期血清唾液酸与EBVVCAIgA平均值呈明显正相关。血清唾液酸在鼻咽癌患者治疗前、后及随访期变化差异有统计学意义(P<0.01),治疗前阳性率达94.0%(47/50),治疗结束时阳性率2.0%(1/50),随访期有复发者阳性率96.2%(25/26),未复发者阳性率4.2%(1/24);而EBVVCAIgA变化不太明显。作为诊断试验,血清唾液酸对鼻咽癌的敏感度为94.0%,高于EBVVCAIgA的90.0%;特异性为93.0%,低于EBV-VCA-IgA的96.0%。结论血清唾液酸可能成为鼻咽癌病情变化的动态监测指标,结合EBV-VCA-IgA的检测,可用于高危人群的普查、筛选,以及对临床疗效的判断和预后的评估。