阴沟肠杆菌142株耐药性分析

目的 测定分析阴沟肠杆菌对临床常用抗生素的耐药情况。方法 对四川大学华西医院2001年11月～2003年3月从临床分离的142株阴沟肠杆菌采用琼脂平皿对倍稀释法测定12种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)，分析耐药情况。结果阴沟肠杆菌对氨苄西林、头孢呋辛的耐药率高达99.30％、88.03％。对第二代头孢菌素、氟喹诺酮类的耐药率高于87％，对头孢吡肟、头孢哌酮／舒巴坦、阿米卡星的耐药率低于40％，亚胺培南对90％的分离株具有抗菌活性。氟喹诺酮类药物的交叉耐药严重。结论阴沟肠杆菌对临床常用抗菌药物具有高耐药率和高耐药水平，多重耐药现象较普遍，亚胺培南是对其最稳定、最可靠的敏感药物。     

头孢西丁耐药肠杆菌科高产AmpC酶的细菌研究

目的 研究头孢西丁耐药肠杆菌科细菌高产头孢菌素酶（AmpC酶）菌株的分离、分布及耐药现状。方法 无重复收集临床分离头孢西丁耐药肠杆菌科细菌86株,酶提取物三维试验检测高产AmpC酶,纸片扩散法测定菌株对12种常用抗菌药物的敏感性。结果 头孢西丁耐药肠杆菌科细菌高产AmpC酶阳性率为23．3％（20／86）,以阴沟肠杆菌最高,达39．4％（13／33）。在常用β-内酰胺类抗生紊中,除亚胺培南和头孢吡肟外,高产AmpC酶菌株的耐药率显著高于非产酶株。结论 细菌高产AmpC酶是对头孢西丁耐药的主要原因之一;高产AmpC酶菌株的多重耐药和交叉耐药现象相当严重,应高度重视高产AmpC酶细菌的监测与控制。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性和基因分型研究

目的调查重庆地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布。方法采用纸片扩散法测定10种抗菌药物对产ESBLs肺炎克雷伯菌的敏感性,应用PCR方法检测产酶株的TEM、SHV及CTX-M基因。结果35株产ESBLs菌对亚胺培南全部敏感,对头孢吡肟耐药率为22.9%;但对其他抗菌药物耐药率均>50%,其中对头孢噻肟、头孢他啶和头孢曲松的耐药率分别为82.9%、68.5%和65.7%;基因型分析显示有26株携带CTX-M基因,24株携带TEM基因,15株携带SHV基因。结论产ESBLs的肺炎克雷伯菌耐药严重,重庆地区以CTX-M型ESBLs多见。     

老年感染性疾病患者中肠杆菌科细菌产AmpC β-内酰胺酶菌株的临床分析

目的 了解产AmpC酶肠杆菌科细菌在老年感染性疾病患者中的感染情况，指导临床合理使用抗生素。方法 对233份老年患者的各类标本中分离出的肠杆菌科细菌进行分析鉴定，采用酶提取物三维试验检测产AmpC酶菌株，纸片扩散法测定产AmpC酶菌株对12种常用抗菌药物的敏感性。结果 检出产AmpC酶菌株20例，总检出率为8．6％，以阴沟肠杆菌检出率最高，达到35．1％(13／37)。产AmpC酶菌株对亚安培南、头孢吡肟较为敏感，其中对亚安培南的敏感率为100％；对第3代头孢菌素类抗生素及氨曲南有较高耐药性，耐药率在85％～100％之间。结论 产AmpC酶菌株对常用抗菌药物的耐药性已相当严重，应重视产AmpC酶细菌的监测与控制。     

96株大肠埃希菌耐药性及其产ESBLs、AmpC酶菌株基因型检测

目的 了解大肠埃希菌耐药现状及其及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和AmpCβ-内酰胺酶（AmpC酶）菌株基因型,以指导临床医师合理使用抗菌药物。方法自本院尿路感染患者标本中分离大肠埃希菌96株,采用确证试验和改良三维试验检测其ESBLs、AmpC酶表达情况,用K-B法测定其对亚胺培南等16种抗菌药物的敏感性,用PCR法检测TEM、SHV、PER、CTX-M-1群、CTX-M-2群、CTX—M-3群、DHA和ACT-1基因型分布情况,用接合转移试验了解耐药基因转移方式。结果96株大肠埃希菌单产ESBLs30株,同时产ESBLs和AmpC酶4株,单产AmpC酶2株;产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢噻肟四种抗生素耐药率达到100％,而对左氧氟沙星、复方新诺明和呋喃妥因的耐药率亦〉80％,对亚胺培南和美罗培南均敏感;ESBLs基因型以CTX—M和TEM型为主,AmpC酶基因为DHA型,两酶能通过接合转移方式将质粒携带的耐药性传递至受体菌。结论大肠埃希菌所致感染对碳青霉烯类药物较为敏感;临床应及时了解本地区产ESBLs、AmpC酶大肠埃希菌的耐药表型和基因型,以指导临床合理使用抗生素、延缓细菌耐药性产生、控制耐药菌株播散和流行。     

产气肠杆菌连续分离株的耐药性及β-内酰胺类抗生素耐药机制的研究

目的 探讨临床连续分离的产气肠杆菌耐药性及耐碳青霉烯类药物菌株对β-内酰胺类药物耐药的主要机制。方法 用Vitek2-Compact仪对临床连续分离的240株产气肠杆菌进行鉴定和常规药敏试验,并筛选出耐碳青霉烯类药物的菌株;用琼脂稀释法测定其对碳青霉烯类药物的MIC值;用改良的三维试验方法分别检测耐药菌株的ESBLs与AmpC酶;改良Hodge试验法检测碳青霉烯酶;用PCR扩增法检测3种β-内酰胺酶的耐药基因;结果 240株产气肠杆菌对23种常用抗生素的耐药率在3.8%～100%之间,最高为头孢西丁(100%)、最低为亚胺培南(3.8%);筛选出10株耐碳青霉烯类产气肠杆菌;三维试验10株菌ESBLs 及AmpC酶均为阳性,Hodge试验阳性7株。PCR结果示,携带blaKPC基因7株;携带blaCTX-M基因7株,携带blaSHV基因2株;携带blaDHA基因6株,携带blaACT/MIR型ampC基因4株; 16SrRNA基因定量确定ampC基因的表达增加的3株。结论 产气肠杆菌对临床常用抗菌药物具有较高的耐药性,其主要耐药机制为产碳青霉烯酶、ESBLs与AmpC酶。     

医院检出阴沟肠杆菌耐药性及耐药基因

目的了解临床分离阴沟肠杆菌耐药性与耐药基因情况,为临床合理选用抗菌药物提供理论依据。方法收集赣南医学院第一附属医院临床分离的阴沟肠杆菌40株,琼脂稀释法与纸片扩散法检测常用抗菌药物的敏感性,采用PCR方法对12种耐药基因进行检测。将该院检出的40株阴沟肠杆菌作为研究样本,采用琼脂稀释法与纸片扩散法行药敏试验,而后采用序列分析法与PCR(聚合酶反应)对12种耐药相关基因进行分析。结果经分析后的药物敏感结果显示,40株阴沟肠杆菌标本对头孢吡肟耐药率以15.0%为最低,而对美罗培南与亚胺培南敏感率均为100%,其他抗菌耐药率范围为42.0%~92.5%;耐药基因共8类,分别为sull、Int I 1、aac(3,')-I、Amp C、CTX-M-9、CTX-M-3、SHV-2a、TEM-1,sull+Int I1为大部分菌株所携带;耐药谱分为9型(A-I),其中以A、D占比较高,且基因分型与其分型存在一定的相关性。结论阴沟肠杆菌有高度与多重耐药性特征,其耐药机制较为复杂且为多种耐药机制共同作用。     

产新型β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的耐药性及RAPD分型分析

目的了解医院感染阴沟肠杆菌的现状、耐药与流行状况。探讨产新型β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的耐药机制与基因分型。方法细菌的药敏试验采用K-B法;产超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶检测分别采用双纸片确证试验和三维试验;基因分型采用随机扩增多态性DNA（RAPD）法。结果60株阴沟肠杆菌中产超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶分别为23株和32株,产新型β-内酰胺酶株14株。RAPD将60株阴沟肠杆菌分为7种株型。其中Ⅰ、Ⅱ型、Ⅲ型占68.3%,是主要的流行株。产新型β-内酰胺酶阴沟肠杆菌对11种常用抗生素的耐药率为21.3%～100%。结论医院感染阴沟肠杆菌对不同抗生素具有较高的耐药性,不同产酶类型对抗生素的耐药性不同。产新型β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的出现与流行是阴沟肠杆菌多重耐药与高耐药的重要原因。     

多药耐药阴沟肠杆菌临床株ampC基因的克隆和表达

目的克隆一株临床分离的多药耐药阴沟肠杆菌的ampC基因,并研究其编码的AmpCβ-内酰胺酶的特性。方法聚合酶链反应(PCR)扩增阴沟肠杆菌ECLC074的ampC基因,将扩增的目标片段连接入pMD18-T进行双链测序后,进一步克隆入pACYC184质粒,用获得的pACYC184/ampC重组质粒转化大肠杆菌MC4100。采用琼脂稀释法测定阴沟肠杆菌ECLC074,大肠杆菌MC4100及大肠杆菌MC4100重组菌的抗生素敏感性,采用三维试验及等电聚焦电泳研究β-内酰胺酶的特性。结果DNA测序及限制性酶切分析结果表明,阴沟肠杆菌ECLC074的ampC基因已被克隆入pACYC184质粒,大肠杆菌MC4100重组菌和阴沟肠杆菌ECLC074均产生一种等电点为7.8的β-内酰胺酶,该酶具有AmpCβ-内酰胺酶的耐药表型特征。结论阴沟肠杆菌的ampC基因可以被克隆入pACYC184质粒,并能在大肠杆菌MC4100中表达,这为深入研究染色体AmpCβ-内酰胺酶创造了条件。     

老年住院患者院内感染产ESBLs肺炎克雷伯菌情况及其耐药性分析

目的了解老年住院患者院内感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌情况、感染患者的临床科室分布情况及菌株的耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法选取广西壮族自治区江滨医院等3家三甲医院的老年住院患者460例为研究对象,收集患者致病菌标本包括痰、尿、分泌物、支气管肺泡灌洗液、胸腹水、引流液、血液等共460份进行检测分析。结果共纳入老年住院患者460例,收集患者痰、尿、分泌物、支气管肺泡灌洗液、胸腹水、引流液、血液等致病菌标本460份,分离出肺炎克雷伯菌460株。通过纸片扩散法表型确证试验确认产ESBLs肺炎克雷伯菌株308株(66.96%),其中痰液分离出156株(50.65%),尿液分离出74株(24.03%)。产与不产ESBLs肺炎克雷伯菌均对亚胺培南及美罗培南敏感,产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南及美罗培南的耐药率分别为8.12%、7.14%,而不产ESBLs肺炎克雷伯菌对两抗菌药的耐药率分别为0.66%、1.97%,产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药率显著高于不产ESBLs肺炎克雷伯菌(P0.05)。产ESBLs肺炎克雷伯菌对其他临床常用抗菌药物(氯霉素、哌拉西林/他唑巴坦、氨苄西林/舒巴坦、阿米卡星、阿莫西林/克拉维酸除外)的耐药率均显著高于不产ESBLs菌株(P0.05)。结论老年住院患者院内感染产ESBLs肺炎克雷伯菌的概率较高,感染率达66.96%,患者痰和尿液的细菌检出率较高;感染患者主要分布在重症监护病房(ICU)、呼吸内科、神经内科和内分泌科等临床科室。产ESBLs菌株对氨苄西林、头孢曲松和哌拉西林的耐药率已接近甚至达到100%,对复方磺胺甲恶唑、左氧氟沙星、环丙沙星、头孢吡肟、氨曲南等临床常用抗菌药物的耐药率已达64%以上,但对哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉维酸、阿米卡星耐药率还处于9.1%以下的较低水平。     

老年患者医院感染前五位常见革兰阴性杆菌ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶分析

目的了解华东医院老年患者前5位常见革兰阴性杆菌产酶类型,为指导临床合理选用抗菌药物提供依据。方法收集2011年9月-2012年8月分离自老年医院感染患者的前5位常见的耐头孢西丁的革兰阴性杆菌,用改良的三维试验检测并分析革兰阴性杆菌的产酶类型。结果前5位常见的革兰阴性杆菌分别为鲍曼不动杆菌（88株）、铜绿假单胞菌（61株）、阴沟肠杆菌（42株）、产气肠杆菌（21株）和肺炎克雷伯菌（15株）,共计227个菌株;AmpCβ-内酰胺酶（简称AmpC酶）阳性率9．25％（21株）,ESBLs阳性率14．10％（32株）,同时产AmpC酶和ESBLs酶（简称SSBLs）的阳性率12．78％（29株）,其他水解酶阳性率28．19％（64株）。结论老年医院感染患者前5位常见细菌的产酶率高,耐药现象严重,应加强耐药性监测和控制。     

2000年武汉地区产超广谱β-内酰胺酶菌种的分布及药敏分析

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的细菌分离、分布及对抗生素的敏感性。方法 用APl或V1TEK-AMS系统(Bio’Merieux，法国)鉴定菌种，用NCCLS推荐的初筛和确证法检测产ESBLs的细菌，并用K-B法测定其对14种抗生素的敏感性。结果 2000年武汉地区的269株大肠埃希菌、202株肺炎克雷伯菌、149株阴沟肠杆菌、67株费劳地枸椽酸杆菌、43株产酸克雷伯菌中：ESBLs的检出率分别为40．9％、29．2％、20．1％、29．9％、和23．3％。产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南全部敏感，产ESBLs的大肠埃希菌对阿米卡星的耐药率为22．4％，对其它抗生素有不同程度的耐药。结论 产ESBLs的菌株集中在肠杆菌科菌中，以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、费劳地枸椽酸杆菌的ESBLs产出最高。阴沟肠杆菌、产酸克雷伯菌ESBLs的产出应引起重视。治疗其感染时应首选亚胺培南。     

Genetic control of beta-lactamase production in Enterobacter cloacae

In Enterobacter cloacae, mutations in favor of overproduction of beta-lactamase--leading to resistance to third-generation cephalosporins--occur at frequencies of 10(-4)-10(-7). Cloning experiments reveal that at least three genes are involved in the regulation of chromosomal beta-lactamase expression. The structural gene, ampC, is located adjacent to the regulatory gene, ampR, coding for a protein that can serve as an activator in the presence of an inducer. An example of an ampR mutant that is independent of an inducer has been studied. More important for the development of cefotaxime resistance in E. cloacae are mutations in the ampD gene and other proposed regulatory genes. Inactivation of the ampD gene leads to elevated beta-lactamase production. Thus, ampD negatively controls ampC expression. Evidence for the existence of a third regulatory gene, ampE, has been found.     

院内阴沟肠杆菌的感染状况及耐药性的4年分析

目的了解阴沟肠杆菌的医院感染现状及其耐药性变迁。方法对我院2004-2007年分离出阴沟肠杆菌的药敏试验结果进行回顾分析。结果132株阴沟肠杆菌标本主要源于痰(66株,50.00)和血液(31株,23.49);菌株分布于住院部各个病区;阴沟肠杆菌对碳青酶烯类、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦的敏感性较高,耐药率均<20.00。结论阴沟肠杆菌是临床感染性疾病的常见病原菌之一,危重患者是阴沟肠杆菌感染的易感人群,其耐药率较高,合理选择抗菌药物要以药敏实验为依据。     

猪源大肠杆菌耐药性及超广谱β-内酰胺酶流行性分析

目的 对福建地区分离的猪源大场杆菌进行耐药性测定以及对ESBLs流行性进行分析,以期为临床合理用药科学提供依据。方法 采用琼脂稀释法测定373株菌大肠杆菌对12种抗菌药物的敏感性,并用PCR方法检测ESBLs耐药基因的携带情况以及分析CTX-M阳性菌的种系发育关系。结果 分离株对甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、萘啶酸、氟苯尼考及氨苄西林耐药率较高,分别为93.8%、82.8%、73.7%和70.0%;对恩诺沙星、四环素、庆大霉素、多西环素、环丙沙星、卡那霉素、头孢噻呋和头孢噻肟的耐药率依次为54.4%、53.1%、52.0%、46.6%、44.0%、41.0%、35.9%和30.8%。在373株大肠杆菌中,共有122株菌携带有ESBLs耐药基因,检出率为32.7%,其中CTX-M、TEM及OXA的检出率分别是18.0%(67)、12.1%(45)和7.5%(28),其中CTX-M的阳性菌中以CTX-M-14最为流行,其次是CTX-M-65和CTX-M-55;其种系发育显示分离株主要分布在A群。结论 福建地区猪大肠杆菌对抗菌药表现出较强的耐药性,ESBLs在猪源大肠杆菌中广泛流行,CTX-M是其主要流行的基因型,并且多数菌以共生型大肠杆菌为主。     

浙江省产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌流行情况及耐药性

目的 调查浙江省产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs)的大肠埃希菌（E.coli）和肺炎克雷伯菌（K.pneumoniae）的流行情况及耐药性。方法 收集各地区临床分离的E.coli和K.pneumoniae共362株,经抑制剂增强的肉汤稀释法筛选出产ESBLs细菌,并用浓度梯度法（E-test）检测其对9种抗菌药物的耐药性。结果 浙江省E.coli和K.pneumoniae中ESBLs检出率分别为37.9%和41.2%,总检出率为39.2%。产ESBLs细菌对头孢他啶（CAZ）、头孢噻肟（CTX）、头孢西丁（FOX）、头孢吡肟（FEP）、头孢哌酮/舒巴坦（CFP/SUL）、哌拉西林/他唑巴坦（PZP/TAE）、阿米卡星（AMC）、环丙沙星（CIP）的耐药率比不产酶株都有不同程度地增加,所有菌株对亚胺培南（IMP）都敏感。结论 浙江各地区ESBLs在E.coli和K.pneumoniae中的检出率高。产ESBLs菌对所测试的8种抗菌药物的耐药程度比不产酶株为高,但所有菌株对亚胺培南均敏感。     

A case of sepsis caused by Enterobacter cloacae producing both type SHV-12 and type CTX-M-14 ESBLs in a post bone-marrow transplantation patient

Third-generation cephalosporin-resistant Enterobacter cloacae was isolated from the blood culture of a 31-year-old woman after bone-marrow transplantation. Since this strain was resistant to third-generation cephalosporins, the production of extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) was suspected. PCR and a sequence analysis confirmed two ESBL genes, bla(SHV-12) and bla(CTX-M-14). No bacteria were detected after meropenem was administered, and symptoms abated. This is, to our knowledge, the first report in Japan of E. cloacae clinical isolates simultaneously producing both SHV-12 and CTX-M-14 ESBL. In cases where chromosomal AmpC over-production of E. cloacae concomitantly produces ESBL, caution should be exercised due to the potential development of resistance against extended-spectrum beta-lactam agents.