幽门螺杆菌cagA基因3’端多态性分析及其临床意义

目的探讨幽门螺杆菌（H．pylon）eagA基因3’端多态性及其与临床疾病的相关性。方法收集NCBI网络数据库H．pylorieagA基因全序列95条，eagA基因3’端可变区碱基、氨基酸序列387条，用Vector NTI advance 10软件对已知疾病背景的256条网络数据库eagA氨基酸序列进行多序列比较，分析eagA基因3’端序列特征及其与临床疾病的相关性。结果（1）91条eagA基因全长氨基酸序列之间相同氨基酸百分比为27％，相似性较低；其3’端序列之间差异明显，存在大量氨基酸的插入、缺失、替换外和重复，而5’端序列相对保守。（2）eagA基因3’端氨基酸序列含有六种重复序列，分别命名为C1，C2，C3，C4，C5，C6；其中C3，C4，C6可分为两种类型，东亚型（Cn东）和西方型（Cn西）。大部分（81．86％）eagA基因3’端氨基酸序列基本结构为C1—C2-C1-C3东／C3西-C4东／C西-C5-C1-C6东／C6西。少数菌株eagA基因3’端氨基酸序列长度较长，具有不同的重复序列数目及组合方式，根据其重复序列数目及组合方式不同，可将这少数菌株eagA基因3’端氨基酸序列分为10型，其中1、7、9、10型仅存在于西方来源菌株，2、3、5、8型仅存在于东方来源菌株，4、6型为东西方菌株共有类型。（3）〉4个EPIYA模体的菌株检出率在萎缩性胃炎组（11．90％）与消化性溃疡（PU）组（1．27％）比较差异有统计学意义（P〈’0．05），且含有4个以上EPIYA模体的菌株87．5％是在萎缩性胃炎及胃癌（GU）中检出。含多个EPIYA—C／D位点的菌株在胃癌患者中的检出率（16．67％）显著高于消化性溃疡（5．06％）患者（P〈0．05）。c4数目=3时，GC组（14．81％）与Pu组（2．53％）比较差异有统计学意义（P〈0．05），其余重复序列数目在不同胃十二指肠疾病中无统计学意义（P〉0．05）。第6型菌株在胃癌患者中的检出率（14．81％）显著高于消化性溃疡（2．53％）患者（P〈0．05）。结论（1）且pylori菌株casA基因3’可变区多态性明显，其差异主要由重复序列的种类、数目和组合方式造成。（2）感染〉4个EPIYA模体的CagA＋H.pylori可能与萎缩性胃炎及胃癌有关。（3）含多个EPIYA—C／D位点的CagA＋H.pylori及第6型CagA＋H．pylori可能与胃癌有关。     

上海地区幽门螺杆菌cagA基因3‘区和vacA基因的多态性分析及其临床意义

目的：探讨上海地区人群杆菌（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ）ｃａｇＡ基因３’区和ｖａｃＡ基因的多态性及其临床意义。方法：９９株Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ菌株分离自１７例慢性浅表性胃炎（ＣＳＧ）、２１例慢性萎缩性胃炎（ＣＡＧ）、１９例胃溃疡（ＧＵ）、２３例十二指肠溃疡（ＤＵ）和１９例胃癌（ＧＣ）患者。用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ菌株的ｃａｇＡ基因３’区和ｖａｃＡ基因基因信号序列及中间区等位基因进行扩增和检     

幽门螺杆菌的cagA因子与胃癌的关系

幽门螺杆菌(Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ,Ｈｐ)是慢性胃炎的重要病因,与消化性溃疡发生和复发密切相关,并与胃癌相关。1994年ＷＨＯ/ＩＡＲＣ会议将Ｈｐ确定为Ⅰ类致癌原[1],但Ｈｐ确切的致癌因子及致癌机制尚不明了。Ｈｐ的毒力因子我括运动力(鞭毛)、粘附力(粘附素)、尿素酶活性、脂多糖内毒素样活性物质、蛋白分解酶及磷脂酶Ａ等,这些毒力因子为所有的Ｈｐ具有。但另外两种毒力因子只存在于50%-60%的Ｈｐ中,所以越来越受人们的关注:它们是分子量为90ｋＤａ(Ｍｒ90000)的细胞空泡毒素(Ｖａｃｕｏｌａｔｉｎｇｃｙｔｏｔｏｘｉｎ…     

幽门螺杆菌cagA基因与致病性的研究

１材料和方法１．１材料１９９７／１９９８我校附属医院消化科门诊和住院部患者．通过临床和内镜镜检诊断为十二指肠溃疡病（ＤＵ）２４例,胃溃疡病（ＧＵ）１９例,慢性胃窦胃炎（ＧＩ）３９例,无明显病变者２０例．年龄２１岁～６９岁,男女比例相当．１．２方法①Ｈ...     

具有cagA,vacA基因的幽门螺杆菌与胃肠疾病

Ｈｐ感染后可导致不同的临床及病理结果，受感染者可形成慢性胃炎，胃或十二指肠球部溃疡、甚至胃癌。造成上述不同结果的机制尚不清楚。近年随着分子生物学技术的发展及应用，认为Ｈｐ菌株中ｃａｇＡ、ｖａｃＡ基因的存在与表达可能与上述结果的形成有关。本文就ｃａｇＡ、ｖａｃＡ基因的检测及其在胃肠疾病中的致病作用作一综述。     

幽门螺杆菌cagA基因3''''端可变区和CagA蛋白EPIYA基序研究进展

细胞毒素相关基因A（cagA）编码CagA蛋白，是研究最多的幽门螺杆菌（H．pylori）基因之一。CagA蛋白经由Ⅳ型分泌系统进入Hpylori黏附的胃上皮细胞，其C-端发生酪氨酸磷酸化，磷酸化的CagA可引起细胞骨架重排、诱导细胞发生形态学变化、增强细胞动力，造成细胞异常运动和增殖．最终导致癌变。因此cagA阳性H．pylori菌株较cagA阴性菌株毒力更强。cagA基因3’端可变区重复序列数目的差异造成了cogA基因结构的多态性以及CagA蛋白大小、功能和细菌毒力（致病性）的差异。因此，cagA基因3’端可变区及其蛋白的EPIYA基序与H．pylori感染临床结果的相关性，成为目前H.pylori研究的热点之一。     

上海地区幽门螺杆菌cagA基因3′区和VacA基因的多态性分析及其临床意义

目的:探讨上海地区人群中幽门螺杆菌(H.Pylori)cagA基因3′区和vacA基因的多态性及其临床意义.方法:99株H.pylori菌株分离自17例慢性浅表性胃炎(CSG)、21例慢性萎缩性胃炎(CAG)、19例胃溃疡(GU)、23例十二指肠溃疡(DU)和19例胃癌(GC)患者.用聚合酶链反应(PCR)技术对H.Pylori菌株的cagA基因3′区和vacA基因信号序列及中间区等位基因进行扩增和检测.结果:99株H.Pylori菌株中84株(84.8%)cagA基因阳性,其3′区产物大小均约650 bp,属A型.vacA基因信号序列仅检出s1a型,见于从94.1%(16/17)的CSG、95.2%(20/21)的CAG、89.5%(17/19)的GU、87.0%(20/23)的DU和89.5%(17/19)的GC患者中分离的菌株(P=0.87);中间区等位基因仅检出m2型,见于从70.6%(12/17)的CSG、71.4%(15/21)的CAG、63.2%(12/19)的GU、73.9%(17/23)的DU和57.9%(11/19)的GC患者中分离的菌株(P=0.72).结论:上海地区人群中H.Pylori菌株的cagA基因3′区相对保守;绝大多数vacA基因属s1a/m2型.本研究结果不支持这些基因的多态性与H.Pylori感染临床结局相关的观点.     

西安地区幽门螺杆菌cagA,iceA基因与其所致疾病的相关性

目的: 研究幽门螺杆菌( H pylori) cagA、iceA基因及其不同组合对H pylori感染结局的影响, 探讨西安地区H pylori的优势致病基因型.方法: 用快速尿素酶试验(rapid urease test,RUT)筛选出H pylori阳性胃黏膜标本101例,细菌基因组DNA提取试剂盒提取DNA, 用聚合酶链反应(PCR)扩增尿素酶C( ureC)基因的方法筛选出H pylori阳性标本91例. 经PCR及琼脂糖凝胶电泳对cagA, iceA的基因亚型进行检测, 用χ2检验以及Fisher精确检验分析各基因及其不同组合与疾病的相关性.结果: cagA基因的阳性率为79.1%, iceA的总检出率为75.82%, 其中iceA1为50.5%, iceA2为38.5%, cagA+/ iceA1+的检出率高于其他组,单一基因及其不同组合在各疾病组中分布没有显著差异. iceA与cagA存在相关性. iceA2分别发现有229、334、439、549 bp以及229bp+334 bp的基因片段.结论: cagA+/ iceA1+是西安地区H pylori的优势致病基因型, cagA、iceA1、iceA2各单一基因以及其不同组合与感染的临床结局无关. iceA与cagA基因可能存在协同作用, 该地区iceA2基因有较大的变异性.     

采用竞争性定量PCR检测幽门螺杆菌cagA基因

目的建立竞争性定量 PCR 检测幽门螺杆菌 cagA 基因的方法。方法以重组 PCR 将乳糖操纵子中 Lac 阻抑蛋白特异性结合序列(21bp)重组入 cagA 基因397bp 的片段中构建内参标模援(rfcagA)。体外克隆并表达具有双功能的 GST-LacI 融合蛋白,其一端只有 GST 酶活性,另一端可特异性地与重组内参标模板结合。在定量 PCR 中,以 rfcagA 为内参标模板,pMC3 或 Hp 基因组 cagA 作为竞争性模板,PCR 产物的5′-端标记了生物素,可与包被了亲和素的微孔板结合,只有 rfcagA 的 PCR 产物可与融合蛋白结合而显色。结果 GST 底物的显色程度与样本的 ca-gA 含量呈负相关,当反应体系中的起始模板量为10-10~5拷贝,循环次数小于等于20次。原始模板数以指数方式增长,并建立了原始模板的考贝数与 A_(340)值同的标准曲线。用该方法检测12份已知菌株中的 cagA 含量,8份 cagA 阳性,cagA 基因的拷贝数为6.3×10~(10)-2.14×10~(11)/L,特异性为100%,敏感度达可检出 cagA 基因2倍的差别。结论这是一个特异、敏感及很实用的定量检测 cagA 基因的方法。     

具有cagA基因的幽门螺杆菌感染与胃十二指肠粘膜损伤的关系

具有ｃａｇＡ基因的幽门螺杆菌感染与胃十二指肠粘膜损伤的关系张小勇，张红杰，赵志泉作者单位，２１００２９南京医科大学第一附属医院消化科幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏ－ｒｉ，Ｈｐ）是慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因素之一，并与胃癌的发生密切...     

广东地区幽门螺杆菌cagA基因与细菌定植及其致病性关系的研究

目的：分析广东地区细胞毒素相关基因（cagA）在幽门螺杆菌（H.pylori)中的分布情况及其与患者性别、年龄的关系；探讨H.pylori cagA在不同胃肠疾病发生中的作用及其与胃粘膜慢性炎症程度及H.pylori定植密度的关系。方法：采用改良Skirrow培养基分离培养得到191株H.pylori，用特定引物对各株细菌的cagA 3′端行聚合酶链反应（PCR）扩增鉴定；对其中83例患者再各取胃窦粘膜2块，经HE及Giemsa染色后观察胃粘膜慢性炎症程度及H.pylori定植密度。结果：广东地区H.pylori cagA阳性者占85.3%(163/191)；H.pylori cagA阳性率与患者的性别、年龄无关；消化性溃疡及胃癌患者的H.pylori cagA阳性率显著高于慢性胃炎患者；cagA阳性H.pylori菌株在胃粘膜表面的定植密度较cagA阴性菌株更高，引起的胃粘膜慢性炎症也更为严重；H.pylori的定植密度与其引起的慢性炎症程度呈正相关。结论：广东地区cagA阳性H.pylori感染者占绝大多数；cagA阳性菌株较cagA阴性菌株具有更强的致病力，可能引起更为严重的胃肠道损害。     

含cagA基因幽门螺杆菌感染与胃、十二指肠疾病的相关性研究

幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染是引起胃、十二指肠疾病的重要病因。Ｈｐ感染可持续数十年甚至终生,但是,Ｈｐ感染人群大多无症状,只有少数人可致病,这主要是由于Ｈｐ菌株间毒力不同所致。含ｃａｇＡ基因（细胞毒素相关蛋白的基因）的菌株,无论表型和基因型都与无ｃａｇＡ基...     

cagA阳性幽门螺杆菌感染与老年胃十二指肠病的相关性

目的　探讨老年人幽门螺杆菌 (Hp)cagA基因存在状况及其与老年胃十二指肠病的关系。方法　收集 89例老年和 96例青壮年慢性胃炎、消化性溃疡患者及 3 0例正常人群的血清标本及胃组织标本 ,应用血清学方法检验其Hp cagA阳性菌株感染状况。结果　 89例老年患者中慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡的Hp cagA基因的阳性率分别为 73 .5 % ( 3 8/5 2 )、81.3 % ( 13 /16)和85 .7% ( 18/2 1) ;96例青壮年患者中慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡的Hp cagA基因的阳性率分别为 5 9.3 % ( 3 2 /5 4)、68.8% ( 11/16)和 61.5 % ( 16/2 6) ;对照组Hp cagA阳性菌株感染率为 3 3 .3 %。各疾病组间Hp cagA阳性菌株感染率比较无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,但均高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;老年组cagA阳性菌株感染率高于青壮年组 (P <0 .0 5 )。结论　老年患者cagA阳性菌株感染与上述 3种胃十二指肠疾病的发生均密切相关 ,老年患者感染的Hp绝大多数为cagA阳性菌株     

中国幽门螺杆菌cagA克隆和基因序列分析

目的　了解和分析中国幽门螺杆菌（ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ, Ｈｐ）菌株细胞毒素相关基因Ａ（ｃａｇＡ） 的核苷酸序列特性．方法　从两位患胃溃疡儿童的胃粘膜中分离两株 Ｈｐ 菌株,用ＰＣＲ方法扩增ｃａｇＡ 基因的５○端和３○端的两个片段并作克隆和序列分析．结果　两株中国 Ｈｐ 菌株ｃａｇＡ 基因之间的同源性为９４ ％ ～９５ ％ ． 中国Ｈｐ 菌株与国外菌株相同区段比较,５○端的同源性为８９ ％ ～９２ ％ ,３○端的同源性为６９ ％ ．结论　中国Ｈｐ 菌株与国外Ｈｐ 菌株ｃａｇＡ 基因５○端序列部分区域的同源性较好,可以作为分子检测 Ｈｐ 感染的靶基因序列,而ｃａｇＡ 基因３○端序列部分区域的同源性较差,可以作为Ｈｐ 分子流行病学研究的靶基因序列．     

幽门螺杆菌iceA、cagA相关性研究

目的研究幽门螺杆菌(Helicobecterpylori)cagA、iceA与胃十二指肠疾病的关系及二者的相关性。方法从138例胃黏膜活检组织中分离培养H·pylori,PCR扩增检测cagA、iceA,并测序。结果cagA /iceA1 /iceA2 在消化性溃疡中的阳性率明显高于慢性胃炎和胃癌。cagA、iceA1同时阳性为55·4%(62/112),cagA阴性iceA1阳性为11·5%(3/26),存在统计学差异。cagA、iceA2同时阳性为51·8%(58/112),cagA阴性iceA2阳性为30·8%(8/26),存在统计学差异。结论cagA /iceA1 /iceA2 菌株可能与消化性溃疡的发生、发展相关,cagA和iceA1可能存在协同作用,和iceA2关系不大。     

上海地区幽门螺杆菌cagA基因3’区和vacA基因的多态性分析及其临床意义

探讨上海地区人群中幽门螺杆菌（H．pylori）cagA基因3’区和vacA基因的多态性及其临床意义。方法：99株H．pylori菌株分离自17例慢性浅表性胃炎（CSG）、21例慢性萎缩性胃炎（CAG）、19例胃溃疡（GU）、23例十二指肠溃疡（DU）和19例胃癌（GC）患者。用聚合酶链反应（PCR）技术对H．pylori菌株的cagA基因3’区和vacA基因信号序列及中间区等位基因进行扩增和检测。结果：99株H．pylori菌株中84株（84．8％）cagA基因阳性,其3’区产物大小均约650bp,属A型。vacA基因信号序列仅检出sla型,见于从94．1％（16／17）的CSG、952％（20／21）的CAG、89．5％（17／19）的GU、87．00（20／23）的DU和89．5％（17／19）的GC患者中分离的菌株（P＝0．87）;中间区等位基因仅检出m2型,见于从70．6％（12／17）的CSG、71．4％（15／21）的CAG、63．20（12／19）的GU、73．9％（17／23）的DU和57．9％（11／19）的GC患者中分局的菌株（P＝0．72）。结论：上海地区人群中H．pylori菌株的cagA基因3’区相对保守;绝大多数vacA基因属sla／m2型。本研究结果不支持这些基因的多态性与H．pylori感染临床结局相关的观点。