中药复方PC-SPES Ⅱ抑制人前列腺癌细胞LNCaP增殖及其对AR, PSA表达的影响

基于雄激素受体(AR)信号通路探讨中药复方PC-SPES Ⅱ抑制人前列腺癌细胞LNCaP增殖的作用。采用MTT法检测PC-SPES Ⅱ对LNCaP细胞增殖的影响,显示PC-SPES Ⅱ质量浓度为180~1 440 mg·L^-1时能显著抑制LNCaP细胞增殖,PC-SPES Ⅱ作用24,48 h的IC₅₀分别为311.48,199.01 mg·L^-1;流式细胞仪检测细胞周期分布的变化发现240 mg·L^-1 PC-SPES Ⅱ能阻滞细胞于G₂/M期,在G₀/G₁峰前出现明显的凋亡峰,随作用时间的增加而升高;同时采用Hoechst 33258染色观察凋亡细胞形态和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测凋亡细胞比例,PC-SPESⅡ质量浓度为480 mg·L^-1时凋亡细胞比率增加,作用效果均呈一定剂量依赖性;通过ELISA法检测LNCaP细胞分泌PSA的水平,以25 mg·L^-1 Bic作为阳性对照药,发现480 mg·L^-1PC-SPES Ⅱ能显著降低细胞分泌PSA;采用qRT-PCR和Western blot方法检测AR,PSA mRNA和蛋白表达的变化,结果显示以人工合成雄激素25 μg·L^-1R1881诱导LNCaP细胞后,240~480 mg·L^-1 PC-SPES Ⅱ能显著下调AR,PSA mRNA和蛋白表达,抑制AR由细胞质转移入细胞核。以上结果表明,PC-SPES Ⅱ对LNCaP细胞体外增殖有抑制作用,阻滞细胞周期于G2/M期并诱导细胞凋亡,其机制可能与下调AR,PSA的表达,抑制AR核转位有关。     

补骨脂中对脂多糖诱导RAW 264.7细胞产生一氧化氮抑制作用的补骨脂酚及其衍生物

目的研究补骨脂70%乙醇水提取物的环己烷溶性部分的补骨脂酚及其衍生物对脂多糖(LPS)诱导的鼠性巨噬细胞RAW 264.7产生一氧化氮(NO)抑制作用的生物学活性。方法采用硅胶、高效液相色谱等柱色谱方法进行分离纯化,通过化合物的谱学数据鉴定其结构。采用LPS离体诱导RAW264.7细胞的NO生成模型,研究化合物对NO生成的抑制活性。结果从补骨脂70%乙醇水提取物的环己烷溶性部分分离出12个化合物,分别鉴定为补骨脂酚(1)、12,13-二氢-12,13-环氧补骨脂酚(2)、Δ3,2-羟基补骨脂酚(3)、12-氧代补骨脂酚(4)、补骨脂醚酚B(5)、补骨脂醚酚C(6)、(12′S)-双补骨脂酚C(7)、Δ1,3-补骨脂酚(8)、13-甲氧基异补骨脂酚(9)、双补骨脂酚B(10)、双补骨脂酚A(11)和12,13-二氢-12,13-二羟基补骨脂酚(12)。在LPS诱导的RAW 264.7细胞NO生成实验模型中,以L-N6-(1-亚胺乙基)-赖氨酸(L-NIL)应用为阳性对照药,其抑制NO生成的半数抑制浓度(IC50)为(10.29±1.10)μmol/L。化合物1、3、5、10、11抑制作用的IC50值大于50μmol/L,化合物8、9、12的IC50值接近于阳性药,但化合物2、4、7的IC50值皆小于阳性对照药,且具有统计学意义。结论化合物4为新的天然产物。生物活性实验结果提示化合物2、4、7～9、12可能具有潜在的抗炎作用。     

补骨脂中补骨脂酚的含量测定

建立了补骨脂酚气相色谱定量方法。3%SE₃₀填充柱,气化和柱温分别为250℃和220℃,氢火焰离子检测器。经测定其线性范围0.24～2.4μg,平均回收率98.82%,RSD1.58%。对11个地区所售补骨脂进行测定,含量为1%～7%。     

中药干预雄激素受体治疗前列腺癌的研究进展

前列腺癌(Prostate cancer,PCa)是男性常见的雄激素驱动的与内分泌有关的恶性肿瘤。随着社会的发展,饮食结构和生活习惯的改变以及老龄化的到来,前列腺癌在我国的发病率逐年增高。雄激素受体(androgen receptor, AR)是前列腺生长发育以及维持自身内稳态的关键信号分子,也是前列腺癌治疗中最为重要的药物靶点。临床药物机制多为抑制雄激素受体的活性和雄激素的合成,治疗后可以有效减缓病程发展,但大多数PCa患者后期会发展为去势抵抗性前列腺癌,并且产生耐药性,对临床治疗构成挑战。中医药在提高患者生存质量、减轻临床症状、延长生存期等方面显示出一定的优势,为PCa的治疗提供新的方向。概述了中药干预雄激素受体治疗前列腺癌的研究进展。     

雄激素在前列腺癌细胞内通过作用于Gαs诱导PKA的活化

目的：探讨雄激素能否在前列腺癌细胞内通过非经典信号传导途径直接激活PKA。方法：运用免疫印迹法检测前列腺癌细胞系在不同浓度雄激素刺激下,磷酸化的VASP的差别,即PKA的活化的差别。结果：雄激素在前列腺癌细胞内能激活PKA;阻断cAMP的产生或抑制Gs的活性,能有效的抑制雄激素诱导的PKA的活化。结论：雄激素通过作用于信号传导途径：Gs／腺苷酸环化酶／cAMP,诱导PKA的活化。     

一种制备补骨脂酚的简单、高效的方法

[目的]本研究旨在建立一种制备补骨脂酚的简单、高效的方法。[方法]补骨脂药材粉碎,经石油醚冷浸提取,得到补骨脂酚粗提物,再经硅胶柱色谱分离,石油醚洗脱,得到补骨脂酚粗品;再经硅胶柱色谱分离,石油醚-乙酸乙酯(12∶1)洗脱得到补骨脂酚纯品。[结果]通过核磁共振波谱仪鉴定为补骨脂酚;经UPLC检测,在246 nm下补骨脂酚纯度98%,补骨脂酚得率1.0%。[结论]该方法具有简单、快速、高效的特点,能够大量制备补骨脂酚。     

总状升麻提取物BNO1055抑制人前列腺癌LNCaP细胞的增殖

有人认为总状升麻Cimicifuga racemosa（CR）提取物抑制人乳腺癌细胞MCF-7的增殖是由于其抗雌激素作用，然而CR中成分与所有已知的雌激素受体没有结合作用，因此其抗肿瘤机理与这些受体无关。环境污染毒物中的多环芳香烃类化合物可通过激活芳基烃类受体（AhR）直接产生抗雌激素作用。有研究表明许多植物提取物（包括CR）具有AhR激活作用。鉴于激活AhR能抑制前列腺癌细胞生长，作者对CR进行了以下实验。     

基于转录组学的补骨脂酚致小鼠肝损伤种属差异

目的 探究补骨脂酚在Institute of Cancer Research（ICR）小鼠和昆明（KM）小鼠不同种属之间的肝毒性应答差异。方法 通过急性毒性和亚急性毒性动物实验证实补骨脂酚致小鼠肝毒性的客观表现,运用转录组学比较正常ICR小鼠和KM小鼠2种不同种属小鼠间的差异基因富集通路,在此基础上采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）验证相关通路上关键基因的mRNA表达证实补骨脂酚致肝损伤的种属差异。结果 补骨脂酚亚急性毒性实验,与正常组比较,ICR小鼠血清碱性磷酸酶（ALP）,5′-核苷酸酶（5′-NT）含量均有不同程度升高,差异无统计学意义,KM小鼠无明显变化;病理结果显示ICR小鼠以肝细胞肥大为主要病理特征,KM小鼠主要表现为肝细胞脂肪变性。补骨脂酚急性毒性实验,给药3 d,KM小鼠出现竖毛,精神萎靡,濒死,ICR小鼠无明显毒性表现。与正常组比较,KM小鼠（400 mg·kg^-1）血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST）显著升高（P<0.01）,肝脏总活性氧（SOD）酶活力显著降低（P<0.01）;ICR小鼠（400 mg·kg^-1）血清5′-NT,胆碱酯酶（CHE）含量显著升高（P<0.01）。ICR小鼠肝脑比增加20.34%,KM小鼠增加29.14%（P<0.01）。ICR小鼠肝脏病理主要表现为肝细胞肥大,KM小鼠以局灶性炎症为主,伴肝细胞肥大、肝细胞脂肪变性。转录组学京都基因和基因组数据库（KEGG）通路和Reactome通路富集分析,发现ICR小鼠和KM小鼠不同种属间差异基因表达主要涉及氧化磷酸化、胆汁分泌、胆汁酸及胆汁酸盐合成和代谢通路。与正常组比较,细胞色素P450家族成员7A1（CYP7A1）在各给药组均显著上调（P<0.01）,多耐药相关蛋白（MRP2）在KM小鼠各给药组均显著降低（P<0.01）,在ICR小鼠各给药组显著升高（P<0.01）;胆汁酸盐输出泵（BSEP）在ICR小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组明显降低（P<0.05）;SHP1在KM小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组高表达,法尼醇X受体（FXR）在ICR小鼠亚急性肝损伤（200 mg·kg^-1）组显著降低（P<0.01）;SOD1,过氧化氢酶（CAT）,核转录因子E₂相关因子2（NFR2）在KM小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组显著降低（P<0.01）,CAT在KM小鼠亚急性肝损伤（200 mg·kg^-1）组显著降低（P<0.01）;谷胱甘肽巯基转移酶1（GSTA1）,谷胱甘肽过氧化物酶1（GPX1）在KM小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组显著增强（P<0.01）,SOD1,CAT,NRF2,GSTA1在ICR小鼠亚急性肝损伤（200 mg·kg^-1）组显著升高（P<0.01）,CAT,NRF2在ICR小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组显著升高（P<0.01）。结论 随着补骨脂酚给药剂量增加,KM小鼠氧化应激所致肝损伤逐渐加重;ICR小鼠表现出更强的抗氧化能力。通过比较2种小鼠对补骨脂酚的毒性应答反应,关于研究补骨脂酚所致小鼠肝脏肝毒性机制,ICR小鼠更适合研究胆汁分泌及胆汁酸代谢相关的机制,KM小鼠更易受氧化应激的影响而发生肝损伤。     

补骨脂酚对酪氨酸酶活性的影响及动力学分析

目的:采用酶促反应动力学方法研究补骨脂酚对酪氨酸单酚酶和二酚酶活性的影响,并考察补骨脂酚对酪氨酸酶的作用机制及动力学参数。方法:在p H 6.8的磷酸盐缓冲体系中,分别以L-酪氨酸和左旋多巴为底物,37℃反应后在475 nm处测定吸光度,研究补骨脂酚对酪氨酸酶催化反应进程和酶活性抑制的影响,计算抑制动力学参数。结果:补骨脂酚对酪氨酸单酚酶和二酚酶均有抑制作用,半抑制浓度分别为1.49,0.41 mmol·L~(-1),其中对酪氨酸二酚酶的抑制作用表现为可逆抑制,其抑制作用表现为竞争性抑制,抑制常数0.955 mmol·L~(-1)。结论:在低浓度范围内,补骨脂酚对酪氨酸酶的抑制作用较熊果苷更明显,具有开发成天然酪氨酸酶抑制剂的潜力。     

补骨脂酚诱导人乳腺癌MCF-7细胞S期周期阻滞及机制研究

目的研究补骨脂酚对人乳腺癌MCF-7细胞生长抑制作用及其机制。方法采用噻唑蓝法(MTT法)考察补骨脂酚对MCF-7细胞生长的影响;采用流式细胞术检测补骨脂酚处理后细胞周期分布情况及活性氧(ROS)的产生;利用荧光显微镜观察补骨脂酚对MCF-7细胞核的影响;采用蛋白免疫印迹法检测补骨脂酚作用下MCF-7细胞凋亡、周期相关蛋白和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族蛋白的表达;引入ROS清除剂及MAPK家族蛋白抑制剂考察其在补骨脂酚作用下对MCF-7细胞生长抑制率和细胞周期相关蛋白表达的影响。结果补骨脂酚可以呈时间、剂量依赖性抑制MCF-7细胞生长,其抑制作用明显强于阳性药5-氟尿嘧啶。补骨脂酚可诱导MCF-7细胞产生ROS,同时上调p-p53及p21蛋白表达水平,下调细胞周期相关蛋白CDK2和CyclinA2表达水平,进而引起细胞发生S期阻滞。而上述影响可被ROS清除剂Tiron逆转,表明ROS参与补骨脂酚诱导的S期阻滞。加入p38MAPK抑制剂SB203580后,细胞产生的ROS水平降低,表明ROS的产生依赖于p38MAPK途径。结论补骨脂酚抑制MCF-7细胞增殖的作用与其引起细胞发生S期阻滞有关,ROS参与S期阻滞过程。     

补骨脂化学成分研究进展

补骨脂是豆科植物Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实,作为一种传统的中药,其在我国已有几千年的临床应用历史,广泛地用于心血管疾病、肾炎、骨质疏松和癌症等的治疗。植物化学研究显示,香豆素类、杂萜类和黄酮类是其主要化学成分。对补骨脂化学成分研究进行系统梳理,以期为临床更安全、有效地使用补骨脂和研究补骨脂现代中药提供理论依据。     

补骨脂-肉豆蔻药对含药血清指纹图谱研究

目的建立补骨脂-肉豆蔻药对含药血清指纹图谱并分析补骨脂-肉豆蔻药对的入血成分。方法对20只SD大鼠分别ig 10个不同批次的补骨脂-肉豆蔻药对提取物,采用UPLC法比较体外供试品、含药血清和空白血清指纹图谱,分析其入血成分。结果测定给药后入血成分并建立UPLC指纹图谱,标出13个共有峰(相似度均在0.90以上),其中10个峰来源于体外供试品中原型成分,3个峰为代谢产物。结论首次采用血清药物化学方法,建立了补骨脂-肉豆蔻药对血清指纹图谱,反映补骨脂-肉豆蔻药对口服给药吸收入血情况,为其体内药效物质研究奠定基础。     

Evaluation of the efficacy and safety of Salvia officinalis in controlling hot flashes in prostate cancer patients treated with androgen deprivation

The purpose of this pilot study was to evaluate the efficacy and safety of Salvia officinalis in controlling hot flashes in prostate cancer patients treated with androgen deprivation therapy (ADT). Ten patients experiencing hot flashes were included in a single‐centre prospective pilot study. Treatment consisted of 150 mg of Salvia officinalis extract taken orally three times daily. A diary questionnaire scoring hot flashes, subjective side effects and quality of life (QOL) had to be completed. Clinical examination was performed at every visit and the concentration of ADT‐linked hormones, haemoglobin and cholesterol was measured before, during and after ending treatment. Before the start of treatment, a 1 week baseline registration was performed. An analysis of variance with time of measurement as a within‐subject factor was performed. When analysing the hot flashes score, one patient was excluded due to insufficient diary notes. The mean weekly score declined from 112 (SD = 71) at baseline to 59 (SD = 54) at the end of treatment (p = 0.002). Hot flashes diminished significantly from the first week up to and including week 3. This was maintained during treatment. There was no effect on QOL. There were no side effects. It is concluded that Salvia officinalis is efficient and safe in the treatment hot flashes, without improving QOL. Copyright © 2011 John Wiley & Sons, Ltd.     

补骨脂-肉豆蔻配伍前后血中移行成分的UPLC-Q-TOF/MS分析

目的分析鉴定口服补骨脂-肉豆蔻药对后大鼠血中移行成分,进一步研究补骨脂-肉豆蔻配伍对移行成分的影响。方法采用超高效液相色谱-四极杆飞行质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术快速分析补骨脂-肉豆蔻药对提取物在大鼠体内移行成分,并结合Peakview软件进行分析。结果与体外补骨脂提取物相比,有15个原型成分入血;与体外补骨脂-肉豆蔻药对提取物相比,有26个原型成分入血;与体外肉豆蔻药材提取物相比,有6个原型成分入血。结论 UPLC-Q-TOF/MS能快捷、准确、较全面地鉴定补骨脂-肉豆蔻药对的化学成分,为补骨脂-肉豆蔻药对的药效物质基础和质量控制等研究奠定了基础。     

补骨脂盐炙前后对肾阳虚大鼠肝肾功能及水通道蛋白表达的影响

目的观察补骨脂盐炙前后对肾阳虚大鼠肝肾功能及口腔唾液腺水通道蛋白5(AQP5)、结肠AQP4、肾脏AQP2基因表达的影响,分析阐明盐炙缓和补骨脂毒副作用的机制。方法采用sc氢化可的松的方法复制大鼠肾阳虚模型,以化学试剂法测定大鼠血清中总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)的量,荧光定量PCR(q RT-PCR)法测定口腔唾液腺AQP5、结肠AQP4、肾脏AQP2 m RNA的表达。结果与模型组比较,补骨脂生品和盐炙品组大鼠血清中的ALT、AST量显著升高,Alb量显著降低(P0.05);补骨脂盐炙品组ALT、AST水平低于生品组;各给药组BUN及Scr水平显著高于模型组(P0.05)。q RT-PCR结果显示,与对照组比较,模型组大鼠AQP2、AQP4 m RNA表达明显降低(P0.05),AQP5的m RNA表达明显增加(P0.05);与模型组比较,补骨脂生品组大鼠AQP4 m RNA表达显著升高(P0.05),AQP5 m RNA表达显著降低(P0.05);与补骨脂生品组比较,补骨脂盐炙品组AQP2、AQP5 m RNA表达明显升高(P0.05),AQP4 m RNA表达明显降低(P0.05)。结论补骨脂盐炙后可缓解药物对肾阳虚大鼠肝肾功能的副作用;同时缓解生品的燥性,盐炙对药物燥性的缓解作用可能与其对体内AQP的基因表达调控有关。     

基于指纹图谱结合多模式化学计量学方法评价补骨脂药材质量

目的 采用指纹图谱并结合多种化学计量方法,筛选特征化学成分,区分不同来源的药材,综合评价中药的质量.方法 采用HPLC法建立补骨脂药材指纹图谱,相似性分析(similarity analysis,SA)、聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal co...     

贾英杰教授运用“黜浊培本”法治疗前列腺癌部分雄激素缺乏综合征经验

文章总结贾英杰教授运用“黜浊培本”法辨证施治前列腺癌部分雄激素缺乏综合征经验。贾教授强调“黜浊”“培本”兼施，“培本”重在培植本元，从肾论治、兼顾他脏，“黜浊”宜截断癌浊之来路、给癌浊以出路，先证而治，因势利导。     

响应面法优选虎耳草抗前列腺癌活性部位提取工艺

目的 优选虎耳草Saxifraga stolonifera抗前列腺癌活性部位的提取工艺.方法 以岩白菜素、槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷、槲皮素以及总黄酮的提取率为考察指标,采用单因素试验结合Box-Behnken中心组合设计方法进行提取工艺优化研究.结果 虎耳草抗前列腺癌活性部位的最佳提取工艺条件为回流提取,乙醇体积分数60.04％,料液比例1∶13.79,提取时间89.98 min,提取温度80℃,在此条件下岩白菜素、槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷和槲皮素以及总黄酮的提取率分别为97.15％、98.13％、98.37％、97.82％、96.33％.结论 采用响应面法优化了虎耳草中抗前列腺癌活性部位的提取工艺,对虎耳草的综合利用以及产业化发展提供了科学依据.     

A steroid fraction of chloroform extract from bee pollen of Brassica campestris induces apoptosis in human prostate cancer PC-3 cells

Bee pollen of Brassica campestris L. is widely used in China as a natural food supplement and an herbal medicine in strengthening the body's resistance against diseases including cancer. The present study was carried out to investigate the effect of a steroid fraction of chloroform extract from bee pollen of Brassica campestris L. on human cancer cell viability. Our studies show that among nine cancer cell lines of different origin (PC-3, LNCaP, MCF-7, Hela, BEL-7402, BCG-823, KB, A549 and HO8910), this steroid fraction displayed the strongest cytotoxicity in human prostate cancer PC-3 cells. The mode of cell death appeared to be apoptosis in PC-3 cells, as shown by flow-cytometric analysis and fluorescence microscopes. Caspase-3 activity was obviously enhanced after the cells were treated with the fraction. A time-dependent decrease in the expression of anti-apoptotic protein Bcl-2 was also observed by Western blot analysis. It is suggested that the steroid fraction could induce cytotoxicity in prostate cancer PC-3 cells by triggering apoptosis. The studies indicate that the steroid fraction of chloroform extract from bee pollen of Brassica campestris L. may be a promising candidate for the treatment of advanced prostate cancer.     

补骨脂素药理作用及肝毒性机制的研究进展

补骨脂素是源于补骨脂Psoralea corylifolia的香豆素成分,具有抗骨质疏松、神经保护、抗肿瘤、雌激素样、抗炎等多重药理作用,有着良好的临床应用潜力.随着对补骨脂用药安全问题的不断关注,近年来关于补骨脂素的肝脏毒性研究也逐渐增多.通过查阅近20年国内外相关文献,对补骨脂素的药理作用和肝毒性研究概况进行整理和...