基于SAMP8小鼠开展针刺干预阿尔茨海默病的实验研究进展

本文对近年来以快速老化模型P系小鼠(SAMP8小鼠)开展的针刺干预阿尔茨海默病的实验研究进行归纳整理。研究显示,针刺能够通过干预β-淀粉样蛋白生成和清除、Tau蛋白磷酸化过程,改善线粒体和突触结构,增强自噬活性,提高脑血流量,提高雌激素含量等多途径、多靶点地干预阿尔茨海默病的病理过程,改善SAMP8模型小鼠的学习记忆能力。     

针刺对痴呆鼠SAMP8老化体征及认知能力的影响

[目的]探讨针刺延缓衰老、改善认知的作用。[方法]将快速老化痴呆小鼠(SAMP8)及其正常同源对照小鼠(SAMR1)分为SAMR1对照组、SAMP8对照组、SAMP8针刺组和SAMP8非穴组。针刺组给予"益气调血,扶本培元"针法治疗,非穴组针刺双胁下两个固定非穴位点,其余两组给予等量的捉抓刺激,每日1次,持续15 d。采用老化度评分表评价SAMP8的衰老程度,Morris水迷宫评价动物的学习记忆能力。[结果]与SAMR1对照组相比,SAMP8各组呈现皮毛稀疏无光、眼周粗糙、行动缓慢等老化体征;其学习能力及记忆保持能力也出现明显损伤,表现为思维僵化、学习过程减慢等。针刺能明显改善SAMP8的认知能力,但对其老化症状无影响。[结论]针刺能有效改善衰老后认知功能减退,为阿尔茨海默病治疗提供了新的选择。     

补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠海马区形态功能和皮层胆碱能系统的影响

目的研究补益脾胃元气方药人参、大补元煎、洗心汤对快速老化痴呆模型(SAMP8)小鼠空间学习记忆能力、海马区形态功能和皮层胆碱能系统的影响,探讨其治疗阿尔茨海默病的可能作用机制。方法 3月龄雄性SAMP8小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组、人参组、洗心汤组、大补元煎组,以雄性抗快速老化型(SAMR1)小鼠为对照组。除对照组和模型组ig蒸馏水外,其余各组ig药物(10 mL/kg),1次/d,连续3个月。实验结束后采用Morris水迷宫实验检测小鼠空间学习记忆能力,透射电镜观察小鼠海马CA3区突触超微结构,免疫组化法检测CA1区神经元密度、脑组织β淀粉样蛋白(Aβ)水平,生物化学法检测海马胆碱乙酰基转移酶(Ch AT)和乙酰胆碱酯酶(ACh E)的活性。结果补益脾胃元气方药各组小鼠逃避潜伏期平均值明显下降,在目的象限游泳时间、穿过平台次数显著增加(P0.05、0.01);各组小鼠Aβ阳性细胞数目显著降低(P0.05、0.01),神经元特异核蛋白(Nue N)阳性细胞密度有上升趋势,但无显著差异;各组小鼠Ch AT活性升高(P0.05、0.01),人参、洗心汤组小鼠ACh E活性降低(P0.05)。结论补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠空间识别和学习记忆能力有明显改善作用,其机制可能与影响小鼠海马突触结构、促进海马神经元修复、降低小鼠脑内Aβ表达、调节海马胆碱能系统有关。     

针刺对快速老化小鼠SAMP10氧化应激相关基因表达的影响

【目的】探讨快速老化小鼠SAMP10脑衰老的机制，揭示“益气调血、扶本培元”针法改善SAMP10脑衰老症状的部分机制。【方法】应用cDNA阵列技术(cDNA Array)，观察快速老化小鼠SAMP10与正常老化小鼠SAMR1前脑588个基因表达的差异，同时观察“益气调血、扶本培元”针法对上述基因表达的影响。【结果】SAMP10与SAMR1相比，谷胱甘肽S转移酶、热休克蛋白86、成纤维细胞生长因子8、NF-kappa-B转录因子p65亚单位4个与氧化应激反应有关的基因表达上调，而针刺可使这些基因的表达下调。【结论】SAMP10的快速老化可能与其脑内的氧化应激水平升高有关，针刺可改善氧化应激水平进而达到延缓脑衰老的作用。     

补肾增效液对辐射损伤小鼠脾组织p53 mRNA及Caspase-3蛋白表达的影响

目的:研究以补肾填精为主的补肾增效液对辐射损伤小鼠p53 mRNA及Caspase-3蛋白表达的影响。方法:设正常对照组、模型组、中药高、中、低剂量组和阳性药组,共灌胃8天。灌胃7天后,除正常对照组外,其余各组以~(60)Coγ射线照射小鼠造成辐射损伤。造模1天后取脾检测。p53 mRNA表达的检测采用原位杂交法;Caspase-3蛋白表达检测采用免疫组化法。结果:运用病理图像分析系统分析,各用药组均能上调辐射后小鼠脾组织p53 mRNA的表达,且与模型组比较,差异具有非常统计学意义(P<0.01);各用药组能下调Caspase-3蛋白表达,其中,阳性药组、高剂量组和中剂量组与模型组比较,差异具有非常统计学意义(P<0.01)。结论:补肾增效液通过调控与DNA损伤密切相关的p53基因及相关Caspase-3蛋白的表达而促进辐射损伤的修复。     

葡萄内酯对快速老化小鼠SAMP8学习记忆的影响及其机制研究

目的探讨葡萄内酯对快速老化小鼠学习记忆能力的影响及其机制.方法以SAMP8小鼠为研究对象,给予葡萄内酯,连续灌胃45 d.采用Morris水迷宫方法测定小鼠学习记忆能力,用比色法测定脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活力、丙二醛(MDA)和谷氨酸(Glu)含量.结果 葡萄内酯中、高剂量组到达平台的时间明显缩短,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);葡萄内酯剂量组AChE活性、MDA和Glu含量明显降低,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论葡萄内酯可以明显改善SAMP8小鼠学习记忆能力,其作用机制可能与抑制脑组织AChE活性有关.     

针刺疗法对老年痴呆小鼠脑内p53蛋白表达的影响

目的 观察益气调血,扶本培元针刺法对老年痴呆小鼠脑内p53蛋白表达的影响。方法 选取SAMP8小鼠,分为SAMP8对照组、针刺组、非穴组,并设同源SAMR1对照组。针刺组采用益气调血,扶本培元针法,针刺膻中、中脘、气海、血海（双）、足三里（双）;非穴组取双侧胁下两个固定非经非穴点。采用Western blot法测定小鼠皮质和海马内p53蛋白表达;HE染色法观察各组小鼠海马CA1区、颞叶、枕叶神经元细胞病理形态;免疫组化法测定皮质p53阳性细胞表达情况。结果 SAMP8皮质内p53蛋白呈较高表达的状态,针刺治疗后明显下调,与SAMP8对照组差异明显（P<0.05）,与SAMR1对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）;非穴刺激对p53蛋白表达无显著影响。海马组织内,各组p53蛋白表达差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 益气调血,扶本培元针刺法能下调小鼠脑内p53蛋白表达,改善脑细胞病理形态,从而提高老年痴呆小鼠的学习记忆能力,改善其认知功能,且具有腧穴特异性。     

淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP10学习记忆能力 以及胆碱能系统活性的影响

目的:探讨淫羊藿苷(ICA)对快速老化小鼠SAMP10的学习记忆能力以及胆碱能系统的影响.方法:采取8月龄快速老化小鼠SAMP10为实验对象,随机分为模型SAMP10组,阳性药多奈哌齐组(1 mg· kg-1),ICA低、中、高剂量(50,100,200 mg·kg-1)组,每组12只,以12只同月龄抗快速老化小鼠SAMR1为正常对照.灌胃给药30 d,通过Morris水迷宫、SMG-2迷宫、小鼠跳台仪检测ICA对SAMP10学习记忆能力的影响,通过比色法测定皮层中乙酰胆碱酯酶(AChE)的活力,采用酶联免疫吸附测定法检测乙酰胆碱(ACh)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)以及M-胆碱能受体结合力(MCBC)来探讨ICA对SAMP10小鼠胆碱能系统的作用.结果:ICA可以改善SAMP10小鼠的空间探索能力以及定位航行能力,缩短SAMP10小鼠在SMG-2迷宫的潜伏期,提高其在跳台实验中的被动反应能力,增加SAMP10小鼠大脑皮层ACh的含量,提高SAMP10小鼠皮层中MCBC以及ChAT的活性,但对SAMP10小鼠皮层中的AChE活性作用不明显.结论:不同剂量的淫羊藿苷可不同程度的改善SAMP10小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与对胆碱能系统的影响有关.     

电针治疗血管性痴呆大鼠对海马CA1区p53表达的影响

血管性痴呆(Vascular dementia,VD)是由一系列脑血管因素导致脑组织损害引起的痴呆综合征的总称。本实验采用动物实验的方法对VD大鼠脑内的p53的表达进行基础性研究,以期探讨血管性痴呆的发病机理及电针治疗的作用机制。     

电针对SAMP8小鼠海马线粒体呼吸链功能的影响

目的:从线粒体角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制.方法:选取8月龄SAMP8小鼠12只,随机分为模型组6只,电针组6只,另选取6只8月龄的SAMR1小鼠为对照组.电针组电针“百会”“大椎”“肾俞”“太溪”穴,每日1次,每次20 min,10次为一疗程,共治疗3个疗程;其他两组不做治疗干预,只进行相同方式、相同时间和相同程度的抓取和小鼠固定器固定.疗程结束后,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,分光光度法检测海马线粒体呼吸链酶复合物的活性,反相高效液相色谱法检测细胞三磷酸腺苷(ATP)水平.结果:与对照组相比,模型组小鼠平均逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间缩短,海马线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性降低,细胞ATP含量减少;与模型组比较,电针组平均逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,海马线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性升高,细胞ATP含量增加.结论:电针能够提高小鼠海马线粒体呼吸链酶复合物活性及细胞ATP含量,改善线粒体功能,可能是治疗AD的机制之一.     

针刺对快速老化痴呆小白鼠脑组织CA神经递质的影响

目的：探讨针刺治疗痴呆的中枢作用机制。方法：采用快速老化痴呆小白鼠（SAMP8）为模型，以补肾、健脾针刺法作为处理因素，用高效液相色谱电化学检测法测脑组织儿茶酚胺类（CA）神经递质。结果和结论：10月龄SAMP8较正常老化小白鼠（SAMR1）脑组织CA神经递质降低；补肾针法对于改善痴呆和升高降低的CA神经递质的作用优于健脾针法。针刺疗法具有穴位特异性。     

二苯乙烯苷对SAMP8小鼠APPmRNA和PS1mRNA表达的影响

目的:探讨灌胃给二苯乙烯苷(TSG)后SAMP8小鼠β淀粉样蛋白前体(APP)mRNA和早老蛋白-1(PS1)mRNA表达的变化。方法:6月龄快速老化模型小鼠SAMP8 50只,随机均分为SAMP8空白组,阳性药石杉碱甲对照组,高、中、低剂量TSG组(0.3,0.1,0.033 g·kg-1·d-1)共6组;6月龄正常老化小鼠SAMR1鼠10只为正常对照组。各组分别灌胃相应药物60 d后,应用实时定量PCR法检测海马组织APP和早老蛋白-1(PS1)mRNA的表达。结果:与SAMP8空白组比较,TSG组APP mRNA 2-△△CT值明显降低,PS1 mRNA 2-△△CT值也明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),表明TSG组APP mRNA和PS1 mRNA表达下调。结论:二苯乙烯苷对痴呆小鼠SAMP8有显著地抗痴呆作用,其作用机制可能与调控APP,PS1表达有关。     

早期电针干预对SAMP8小鼠学习记忆能力和海马磷酸化Tau蛋白水平的影响

目的:探讨早期电针"百会""大椎""肾俞"穴对快速老化小鼠(SAMP8小鼠)学习记忆能力和海马磷酸化Tau蛋白表达的影响,为临床电针治疗阿尔茨海默病(AD)时间点的选择提供参考。方法:将36只3月龄SAMP8小鼠随机分为模型组、3月龄电针组、9月龄电针组,每组12只;以12只同龄正常老化SAMR1小鼠作为空白对照组。3月龄电针组及9月龄电针组分别于小鼠3月龄及9月龄时予电针"百会""大椎""肾俞"穴治疗(连续波,2 Hz,1.5～2 mA),20 min/次,每日1次,8 d为一疗程,疗程间隔2 d,共治疗3个疗程。每组小鼠在水迷宫检测学习记忆能力结束后统一于10月龄取材;免疫组织化学法、免疫蛋白印迹法(Western blot)检测小鼠海马磷酸化Tau蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测小鼠海马Tau mRNA表达。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),原平台象限停留时间较短,跨越平台次数减少(P<0.01),海马磷酸化Tau蛋白及Tau mRNA表达较高(P<0.01);与模型组比较,3月龄电针组及9月龄电针组小鼠逃避潜伏期缩短(P...     

快速老化痴呆鼠海马,皮质p38表达的增龄变化及针刺影响的实验研究

[目的]探讨针刺的作用机制.[方法]采用western blotting技术,以快速老化痴呆鼠(SAMP10)为材料,同源正常老化小鼠(SAMR1)为对照,观察2、4、6、8、10、12月龄海马和皮质中p38表达的增龄变化,以及"益气调血,扶本培元"针法对8月龄SAMP10海马和皮质p38表达的影响.[结果]1)p38表达在正常老化R1海马和皮质均随增龄呈平稳上升趋势.8月龄后较2月龄存在明显差异.而P10则呈波动上升趋势.海马中4月龄即升高,6月龄达峰值后下降,10月龄至低谷但仍显著高于2月龄,此后至12月龄又上升;皮质中2月龄即升高,4月龄达峰值后下降,6月龄至低谷后再次升高并于8月龄达峰值,此后至12月龄再度下降,但仍显著高于2月龄水平.2)与8月龄R1相比,p38在P10海马和皮质表达普遍增高."益气调血,扶本培元"针法具有腧穴特异性,可降低该蛋白在P10两个脑区的表达,使之接近R1的水平.[结论]1)p38表达在R1与P10两系相同脑区之间随增龄存在差异.2)p38的增龄变化与P10快速老化痴呆特征的时间段接近.3)"益气调血,扶本培元"针法可有效降低8月龄P10海马和皮质p38表达量.     

针刺对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8学习记忆能力的影响

目的:研究"益气调血,扶本培元"针法对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8学习记忆能力的影响。方法:选取SAMP8小鼠,分为SAMP8对照组、针刺组、非穴组,并设SAMR1对照组。针刺组采用"益气调血,扶本培元"针法,针刺膻中、中脘、气海及双侧血海、足三里;非穴组取双侧胁下两个固定非经非穴点。应用Morris水迷宫观测各组小鼠空间参考记忆能力的变化,分析针刺对SAMP8小鼠认知功能的影响。结果:"益气调血,扶本培元"针法能有效改善SAMP8小鼠的认知能力。     

通络醒脑泡腾片经Nampt/SIRT1/FOXO3途径改善SAMP8小鼠的学习记忆

目的考察通络醒脑泡腾片(川芎、当归和黄芩)对SAMP8小鼠学习记忆的影响,探究其改善认知功能作用机制。方法将SAMP8小鼠药物干预60 d,采用Morris水迷宫评价其认知变化,随后采用ELISA法和免疫组化法分别测定脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、羰基化蛋白、NAD~+/NADH和海马尼克酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)、沉默调节蛋白1(SIRT1)和叉头蛋白3(FOXO3)的表达。结果通络醒脑泡腾片能够缩短SAMP8小鼠在隐藏平台实验中第5天的逃避潜伏期和显著增加平台象限所占时间百分比,明显增加SAMP8小鼠在空间探索实验中进入目标象限次数;能够明显提升SAMP8小鼠脑组织SOD活力和NAD~+/NADH比值及降低羰基化蛋白浓度;能够显著上调SAMP8小鼠海马Nampt和SIRT1的表达,下调FOXO3的蛋白表达。结论通络醒脑泡腾片提高SAMP8小鼠认知功能与其调节海马Nampt/SIRT1/FOXO3途径有关。     

Electroacupuncture with Bushen Jiannao improves cognitive deficits in senescence-accelerated mouse prone 8 mice by inhibiting neuroinflammation

OBJECTIVE: To investigate effect of electroacupuncture(EA) with Bushen Jiannao on learning and memory ability in senescence-accelerated mouse prone 8(SAMP8) mice and the related mechanisms.METHODS: 8-month-old senescence-accelerated-resistant(SAMR1) and SAMP8 mice were treated with EA at Baihui(GV 20), Shenshu(BL 23), and Taixi(KI 3) acupoint once a week for 8 weeks. The Morris water maze, enzyme linked immunosorbent assay,immunohistochemistry, and Western blot were used to assess Alzheimer’s di...     

七宝美髯口服液对SAMP8小鼠海马神经元凋亡的影响

目的:考察七宝美髯口服液对SAMP8小鼠学习记忆功能及海马Neu N、Nampt和Aβ和表达的影响。方法:SAMP8小鼠灌胃给予七宝美髯口服液,SAMR1小鼠平行对照,连续干预60d,采用Morris水迷宫法考察小鼠学习记忆功能,采用免疫组化法考察小鼠海马Neu N、Aβ和Nampt的表达。结果:与模型对照组比较,七宝美髯口服液(1.44g/kg)能显著提高SAMP8小鼠的学习记忆能力,缩短逃避潜伏期,增加小鼠进入平台象限次数,提高进入平台象限百分比;能显著促进海马Neu N和Nampt的表达,提高其平均光密度值;能显著抑制小鼠海马Aβ的表达,降低其平均光密度值。结论:七宝美髯口服液能够改善SAMP8小鼠的学习记忆功能,该作用与其增强SAMP8小鼠海马Neu N和Nampt表达,抑制Aβ的表达有关。