薯蓣丸抗I型变态反应作用及其机理研究

目的:探讨薯蓣丸抗I型变态反应作用及其机制。方法:以卵白蛋白为变应原制备大鼠I型变态反应模型,制备抗卵白蛋白的抗血清(含IgE),采用大鼠同种被动皮肤过敏反应(PCA)实验法观察测定各组动物蓝斑直径、蓝斑光密度(OD)及蓝斑抑制率;以抗卵白蛋白血清被动致敏的大鼠颅骨肥大细胞模型观察对肥大细胞脱颗粒的影响;通过Elisa法检测I型变态反应模型大鼠血清中IL-4、IFN-γ、IgE含量变化的影响。结果:薯蓣丸蜜丸可明显抑制大鼠同种PCA反应,降低Ⅰ型变态反应模型大鼠血清中IL-4、IFN-γ、IgE含量。结论:薯蓣丸蜜丸有抗I型变态反应的作用,其机制可能是通过促进IFN-γ分泌、降低IL-4及IgE含量、调节Th1/Th2细胞因子水平完成的。     

粉尘螨滴剂对Ⅰ型变态反应的影响

 目的考察粉尘螨滴剂对Ⅰ型变态反应的影响。方法2,5,10倍临床拟使用剂量的粉尘螨滴剂于大鼠或豚鼠舌下给药4～5周,进行大鼠的同种被动皮肤过敏反应(PCA反应)实验、豚鼠支气管哮喘实验、致敏豚鼠离体回肠平滑肌过敏性收缩实验(Schultz Dale test)、大鼠肥大细胞释放组胺实验和致敏大鼠肺中白细胞浸润实验。结果粉尘螨滴剂按拟定的临床给药方案给药4～5周能够明显减小大鼠PCA反应的蓝斑直径和染料的渗出,明显延长卵白蛋白致豚鼠死亡时间,降低豚鼠死亡率,抑制豚鼠回肠Schultz Dale反应时的收缩(P<0.05),抑制抗原再次刺激时大鼠肥大细胞释放组胺,明显减少致敏大鼠抗原再次刺激时肺内过敏性白细胞渗出(P<0.01)。结论粉尘螨滴剂舌下给药4~5周能抑制Ⅰ型变态反应。     

大鼠皮肤类过敏试验的组织学机制

目的探索大鼠皮肤类过敏试验的组织学机制。方法大鼠背部脊柱两侧分别皮内注射C48/80、吐温-80、碘海醇注射液、紫杉醇注射液、注射用血塞通(冻干)、喜炎平注射液后,立即尾静脉注射0.5%伊文思蓝溶液,15 min后麻醉处死,剪取背部皮肤,测量蓝斑直径,取蓝斑皮肤观察肥大细胞形态,计算脱颗粒率。再采用Pearson检验进行相关性分析。结果皮内注射C48/80、吐温-80、碘海醇注射液、紫杉醇注射液、注射用血塞通(冻干)后,蓝斑直径、肥大细胞脱颗粒率与药物质量浓度(体积分数)均呈正相关,两者之间亦然,但肥大细胞数均无明显变化[除0.8、1.6 mg/mL注射用血塞通(冻干)外];皮内注射喜炎平注射液后,蓝斑直径、肥大细胞数、脱颗粒率均无明显变化(除质量浓度5 mg/mL时蓝斑直径外)。结论大鼠皮肤类过敏试验组织学机制是类过敏阳性物质致皮肤肥大细胞脱颗粒,其脱颗粒率与阳性物质浓度、皮肤蓝斑直径呈高度正相关,可作为药物类过敏性及其反应强度评判的一项补充指标。     

补肾温肺合剂抗过敏作用的实验研究

目的 研究补肾温肺合剂的抗过敏作用.方法 采用抗血清致大鼠同种被动皮肤过敏及颅骨肥大细胞脱颗粒试验,测量蓝斑光密度并计算蓝斑抑制百分率,观察肥大细胞脱颗粒情况并计算肥大细胞脱颗粒率和抑制率.结果 与阴性对照组比较,补肾温肺合剂的高、中、低三个剂量组均能显著降低皮肤蓝斑的吸光度、显著抑制大鼠颅骨骨膜的肥大细胞脱颗粒,但随着剂量的加大蓝斑吸光度及肥大细胞脱颗粒率均有增加的趋势.结论 补肾温肺合剂具有抗过敏作用,且临床等效剂量显示的抗过敏作用最显著.     

麻杏石甘汤对肥大细胞脱颗粒的影响

目的:探讨麻杏石甘汤(麻黄、杏仁、甘草、石膏)抗Ⅰ型变态反应的作用机制。方法:通过大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)实验,用比色测定法检测麻杏石甘汤在体内对Ⅰ型变态反应的影响;体外实验先制备麻杏石甘汤的含药血清,然后将其加入致敏的RBL-2H3细胞中,观察麻杏石甘汤对RBL-2H3细胞脱颗粒及其他炎性物质的影响。结果:麻杏石甘汤药物血清能明显抑制RBL-2H3细胞脱颗粒,并能抑制RBL-2H3细胞释放组胺、肿瘤坏死因子α及白细胞因子4。结论:麻杏石甘汤的抗过敏作用与抑制肥大细胞的脱颗粒及炎性物质释放有关。     

精制熊胆粉对IgE诱导的肥大细胞脱颗粒和血管通透性的影响

目的:观察精制熊胆粉的抗过敏作用,并探讨其可能的作用机制。方法:通过IgE诱导大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)实验,用比色法测定熊胆粉在体内对肥大细胞影响。体外实验观察精制熊胆粉对IgE诱导组胺释放、细胞内钙摄入及肿瘤坏死因子-α、白细胞介素6以及NF-κB p65的影响。结果:体内实验显示,精制熊胆粉高(100mg/kg)、中(50mg/kg)剂量组能明显抑制大鼠PCA。体外实验显示,高(100μg/L)、中(50μg/L)浓度精制熊胆粉明显抑制了肥大细胞脱颗粒、组胺的释放、细胞内钙摄入以及肿瘤坏死因子-α、白细胞介素6以及NF-κB p65蛋白表达。结论:精制熊胆粉可能通过抑制NF-κB阻止肥大细胞的活化。     

凉血清营颗粒对Ⅰ型变态反应的影响

目的:研究凉血清营颗粒对Ⅰ型变态反应的影响.方法:用天花粉蛋白所致小鼠速发型超敏反应及大鼠同种异体被动超敏反应(PCA)观察对Ⅰ型变态反应的影响;用化合物48/80所致小鼠过敏性休克死亡及大鼠颅骨肥大细胞模型观察对肥大细胞脱颗粒的影响;用组织胺所致小鼠皮肤毛细血管通透性亢进试验观察对组织胺的直接对抗作用.结果:凉血清营颗粒能一定程度拮抗天花粉蛋白所致小鼠过敏性休克及大鼠PCA,并能明显抑制化合物48/80及天花粉蛋白所致腹腔或骨膜肥大细胞脱颗粒,还能明显对抗组织胺所致毛细血管通透性亢进.结论:凉血清营颗粒具有显著的抗Ⅰ型变态反应作用,此作用可能是其能抑制IgE生成、肥大细胞脱颗粒及直接拮抗组织胺作用的综合效果.     

祛风合剂对Ⅰ型变态反应影响的实验研究

为研究祛风剂抗Ⅰ型变态反应的药理作用。进行小鼠耳异种被动皮肤过敏试验（PCA）,大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒试验。大鼠组胺诱发的足跖肿造型试验,观察祛风合剂大,小,剂量和西药（异丙肾上腺素,异丙嗪）对其影响。结果：大,小剂量祛风合剂均对小鼠耳异种被动性皮肤过敏有明显的抑制作用。且其作用与异丙肾上腺素相似;大,小剂量祛风合剂,异丙肾上腺素都能抑制肥大细胞脱颗粒,但祛风合剂作用弱于异丙肾上腺素,且大,小剂量组之间无明显差异,P＞0．05;光镜下肥大细胞形态学呈现类似变化;祛风合剂能抑制由组胺诱发的足跖肿,但作用比异丙嗪弱,在30min和240min时,小剂量组优于大剂量组,P＜0．05,提示祛风合剂可抑制抗原与特异性IgE结合,抑制肥大细胞脱颗粒及抗组胺,从而起到抗Ⅰ型变态反应作用。     

炒紫苏子醇提物对肥大细胞脱颗粒及组胺释放的影响

目的肥大细胞脱颗粒及组胺释放是过敏性疾病发生机制中的重要环节之一,研究炒紫苏子醇提取物对其的作用,为研制和开发新的抗过敏中药提供实验依据。方法制备致敏大鼠腹腔肥大细胞悬液,体外和不同浓度药物作用,观察脱颗粒百分率和组胺释放水平,判断药物的抗过敏作用。除正常组(非致敏组)外,设空白对照组、炒紫苏子醇提取物320、640、1280μg/mL各剂量组、色甘酸钠阳性对照组、木犀草素组共7组。并对实验各个因素进行优化。结果经过最佳实验条件的优化,选择药物与肥大细胞作用时间为20min,OVA的触发浓度为20μg/mL。炒紫苏子醇提取物320、640、1280μg/mL各剂量组和木犀草素组均能明显降低IgE所致的I型过敏反应肥大细胞脱颗粒百分率(P<0.01),也明显降低其组胺释放(分别为P>0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01),并表现明显的剂量依赖关系。结论炒紫苏子醇提取物具有明显的肥大细胞脱颗粒及组胺释放等抗过敏作用。     

防风与刺蒺藜抗Ⅰ型变态反应的实验研究

目的:探讨防风、刺蒺藜单用及二药合用的抗Ⅰ型变态反应作用。方法:采用小鼠同种PCA反应模型、大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒模型及Schu lz-Dale反应模型进行观察。结果:防风、刺蒺藜、防刺合煎剂均可明显抑制小鼠同种PCA,大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒及Schu lz-Dale反应。结论:防风、刺蔟藜、防刺合煎剂均有抗Ⅰ型变态反应作用,防风与刺蔟藜合用的效应较单用为相加。     

检测原代肥大细胞组胺释放分析中药注射剂致类过敏性

目的: 通过检测组胺释放考察19种临床常用中药注射剂致大鼠腹腔原代肥大细胞脱颗粒情况,为评价中药注射剂致类过敏性提供参考。 方法: 应用荧光法检测组胺,并进行条件优化以适用于中药注射剂所致肥大细胞释放组胺的检测。分离大鼠腹腔肥大细胞,分别将19种中药注射剂、阳性药C48/80和肥大细胞混合孵育1h,采用优化的荧光法检测组胺,再计算组胺释放率并进行统计学分析。 结果: 荧光法检测组胺最佳缩合反应时间为3 min,终止反应后7.5~30 min缩合物稳定性好;采用间接检测组胺释放率与直接检测组胺释放率两方法结果间无显著差异。痰热清、清开灵、参麦、丹参、血塞通、参附、双黄连、生脉、香丹、热毒宁、复方当归等11种中药注射剂致肥大细胞释放组胺作用明显。脉络宁、黄芪、艾迪、醒脑静、黄芪多糖、红花、盐酸川芎嗪、参芪等8种注射剂未见明显致肥大细胞释放组胺作用。 结论: 中药注射剂引发的过敏样反应可能大多为类过敏,检测组胺释放分析原代肥大细胞脱颗粒试验可以为评价中药注射剂的致类过敏性提供参考。     

舒宁康水提液抗过敏药效研究

目的:观察舒宁康水提液对肥大细胞脱颗粒及组胺释放的影响,研究其抗过敏作用.方法:以卵蛋白(OVA)为致敏原,在OVA质量浓度为40 mg·L-1作用30 min条件下,观察舒宁康0.1,1,10 g·L-1在体外对致敏大鼠肥大细胞脱颗粒及其释放组胺量的影响.结果:以色甘酸钠为阳性对照,舒宁康水提液具有明显的抑制肥大细胞脱颗粒作用,模型组、舒宁康水提液高、中、低剂量组及阳性对照组脱颗粒率分别为(47.53±5.57)％,(25.11±2.56)％,(35.71±6.99)％,(47.11±4.26)％,(22.87±6.52)％;舒宁康水提液对组胺的释放亦有显著的抑制作用,与模型组比,舒宁康水提液高、中、低组及阳性对照组的抑制率分别为16.85％,20.06％,6.58％,16.85％.结论:舒宁康水提液有良好的抗过敏作用,为将其开发成抗敏中药提供了实验依据.     

痛泻要方抑制致敏大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒的研究

目的观察痛泻要方对化合物48/80(C48/80)诱导的大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒的影响,探讨痛泻要方对肠易激综合征的作用机制。方法应用钙离子荧光指示剂Fluo-3,通过光学显微镜和激光共聚焦荧光显微镜,观察痛泻要方对致敏大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒百分数及肥大细胞内游离钙浓度和组胺释放的影响。结果实验组(痛泻要方组)致敏大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒百分数为13%,对照组为41%,2组有显著性差异(P<0.05);对照组和实验组致敏大鼠腹腔肥大细胞内游离钙浓度分别为(436.16±12.30)nmol/L和(78.31±3.28)nmol/L,2组相比有显著性差异(P<0.05);对照组和实验组大鼠腹腔肥大细胞上清液组胺浓度分别为(98.41±7.23)nmol/L和(33.23±21.50)nmol/L,2组相比有显著性差异(P<0.05)。结论痛泻要方对C48/80诱导的大鼠腹腔肥大细胞的脱颗粒过程有明显的抑制作用,表明痛泻要方是通过抑制肠道肥大细胞活化,从而减少其释放组胺等递质实现治疗作用的。     

基于IL-23/IL-17炎症轴探讨玉屏风颗粒治疗CU大鼠的效应机制

目的:研究玉屏风颗粒对慢性荨麻疹(CU)大鼠皮肤肥大细胞脱颗粒的影响及白细胞介素-23(IL-23),白细胞介素-17(IL-17)炎症轴的干预机制。方法:选用SPF级SD大鼠,取60只随机分为正常组,模型组,氯雷他定组(0.9 mg·kg~(-1)·d~(-1)),玉屏风颗粒高、中、剂量组(4.05,2.7,1.35 g·kg~(-1)·d~(-1))。运用腹腔注射卵白蛋白与氢氧化铝悬液和百白破疫苗进行致敏复制CU大鼠模型。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠皮肤组织病理学改变;甲苯胺蓝染色观察大鼠皮肤组织肥大细胞脱颗粒现象;免疫组化(IHC)检测皮肤组织IL-23,IL-17蛋白表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测皮肤组织IL-23,IL-17 mRNA转录水平。结果:玉屏风颗粒可显著改善CU大鼠皮肤真皮水肿、胶原束距离增宽、炎性细胞浸润等病理表现,同时可减轻CU大鼠皮肤组织肥大细胞脱颗粒反应。与正常组比较,模型组CU大鼠皮肤的IL-23,IL-17 mRNA水平及蛋白表达评分均明显增加(P0.05,P0.01);与模型组比较,玉屏风颗粒能显著下调CU大鼠皮肤的IL-23 mRNA水平及蛋白表达评分(P0.05,P0.01),以高剂量组疗效最佳;玉屏风颗粒对IL-17无显著调控作用。结论:玉屏风颗粒可显著减轻CU大鼠皮肤组织肥大细胞脱颗粒,改善真皮水肿、浆液性渗出、炎性细胞浸润等病理表现,其机制可能与其抑制IL-23促炎细胞因子分泌而改善CU病变有关。     

金荞麦提取物对肠易激综合征大鼠肥大细胞,PAR-2,SP的影响

目的:观察金荞麦提取物(Fag)对肠易激综合征(IBS)模型大鼠内脏高敏感的作用以及对肥大细胞(MC),蛋白酶激活受体-2(PAR-2),P物质(SP)的影响。方法:将清洁级新生雄性乳大鼠采用新生期母婴分离、乙酸灌肠、鸡卵清白蛋白腹腔注射的复合造模方法制备IBS内脏高敏感模型,大鼠随机分为正常组(生理盐水),模型组(生理盐水),Fag低、中、高剂量组(0.14,0.42,1.26 g·kg-1),酮替芬组(0.18 mg·kg-1),每组10只,连续灌胃14 d。采用腹壁撤退反应(AWR)评估大鼠内脏敏感性,免疫组化法(immunohistochemistry)检测大鼠结肠MC数量、脱颗粒程度,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PAR-2蛋白表达,免疫组化、酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠结肠SP水平。结果:与正常组比较,模型组20,40,60 mm Hg(1 mm Hg=0.133 k Pa)压力下AWR评分明显升高,结肠MC数量,脱颗粒程度,PAR-2,SP表达明显上升(P0.05);与模型组比较,Fag中剂量组(20,40,60 mm Hg压力下),Fag高剂量组(20,40 mm Hg压力下)的AWR评分,远端结肠MC数量,脱颗粒程度,PAR-2,SP表达明显下降(P0.05);与酮替芬组比较,Fag高剂量组AWR评分(40 mm Hg压力下),SP水平降低(P0.05)。结论:Fag能降低IBS模型大鼠内脏敏感性,其机制与抑制MC数量及活化脱颗粒程度,下调PAR-2受体,降低SP有关,并且镇痛作用优于酮替芬。     

Mast cell stabilization and antihistaminic potentials of Curculigo orchioides rhizomes

Aim of the study

To investigate the mast cell stabilization and antihistaminic activities of the rhizomes of Curculigo orchioides (COR). Extract of Curculigo orchioides Gaertn. (Fam. Amaryllidaceae) has been reported to possess immunostimulant, and anti-inflammatory potentials. In Indian traditional system of medicine it is also used as anti-asthmatic and anti-inflammatory.

Materials and methods

Estimation of histamine release is key parameter for evaluating any target for its anti-allergic potential. The stabilization potential of the alcoholic extract of COR (100–400 mg/kg) against mast cell degranulation was studied on isolated mice peritoneal mast cells. The antihistaminic activity was performed by determining the mortality rate of mice upon exposure to compound 48/80 and effect on inhibition of histamine release upon degranulation.

Results

The raised number of intact mast cells intimates that the COR stabilized the mast cell degranulation (60.96 ± 1.96%) and percentage antihistaminic potential of the extract (63.58 ± 1.8 inhibition at dose of 400 mg/kg) and it virtues further work towards the isolation of phytoconstituents from this plant.

Conclusion

This finding provides evidence that COR inhibits mast cell-derived immediate-type allergic reactions and mast cell degranulation.     

Anti-allergic activity of German chamomile (Matricaria recutita L.) in mast cell mediated allergy model

Ethnopharmacological relevance

Chamomile is most popular used medicinal plant and extensively consumed as a tea or tisanes. Traditionally this plant was used for treatment of many ailments such as allergy disorders and inflammatory mediated diseases.

Aim of the study

We investigated the effects of anti-allergic activity of Matricaria recutita L. on mast cell mediated allergic models.

Materials and methods

The protective effect of methanol extract of Matricaria recutita against compound 48/80 induced anaphylaxis and pruritis models for acute phase of hypersensitivity reactions were carried out. The late phase hypersensitivity reactions by compound 48/80 induced mast cell degranulation and histamine release from blood along with serum nitric oxide (NO), rat peritoneal fluid nitric oxide (NO) and bronchoalveolar fluid nitric oxide (NO) levels were measured.

Results

The methanol extract of Matricaria recutita L. showed inhibitory effects on anaphylaxis induced by compound 48/80 and significant dose dependent anti-pruritis property was observed by inhibiting the mast cell degranulation. Mast cell membrane stabilization activity was also observed in compound 48/80 induced mast cell activation. Dose dependent reduction in the histamine release, along with decreased release of serum, rat peritoneal and BAL fluid nitric oxide (NO) levels were observed.

Conclusion

These results suggest that the methanol extract of Matricaria recutita showed potent anti-allergic activity by inhibition of histamine release from mast cells.     

蝉蜕的免疫抑制和抗过敏作用

蝉蜕可减轻小鼠免疫器官重量,明显降低单核巨噬细胞系统的吞噬能力,显著抑制小鼠耳异种PCA和大鼠颅骨骨膜肥大细胞税颗粒.对DNCB所致小鼠耳迟发型超敏反应亦具有明显抑制作用。