食管鳞状细胞癌中Survivin与Smac蛋白的表达及临床意义

目的:研究Survivin和Smac蛋白在食管鳞状细胞癌组织及其对应正常组织中的表达情况,以及与临床生物学指标的关系。方法:运用Western blot检测Survivin和Smac在42例食管鳞癌患者标本中的表达量,分析蛋白表达与患者临床资料的关系。结果:Survivin在食管鳞癌中的表达较正常组织高(t=25.733,P<0.05),Smac在癌旁正常组织的表达高于食管癌组织(t=7.510,P<0.05),且都有显著性差异。二者在肿瘤组织中的含量与肿瘤分化程度及淋巴结转移有关(P<0.05)。Survivin和Smac蛋白在肿瘤组织中表达呈负相关(r=-0.407,P=0.008)。结论:Survivin和Smac蛋白在食管鳞癌组织中表达异常,提示两者参与了食管鳞癌的发生发展和肿瘤转移。     

Mel-18和Bmi-1在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨Mel-18和Bmi-1在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法采用实时定量聚合酶链反应（QRT—PCR）及Westernblot方法检测29例食管鳞状细胞癌组织及配对癌旁组织中Mel-18和Bmi-1mRNA的表达。另选取芯片库中60例食管鳞状细胞癌及癌旁组织。免疫组织化学方法检测以上所有89例食管鳞状细胞癌组织及配对癌旁组织中Mel-18和Bmi-1蛋白的表达,分析二者在食管鳞状细胞癌中的表达情况与各临床病理因素之间的关系。结果QRT．PCR结果显示食管鳞状细胞癌中Mel-18mRNA阴性表达率为55．17％（16／29）,Bmi．1mRNA阳性表达率为62．07％（18／29）。Westernblot结果显示,与癌旁组织比较,食管鳞状细胞癌中Mel-18蛋白低表达（0．724±0．095比0．899±0．089,t=2．319,P=0．028）,Bmi．1蛋白高表达（0．980±0．068比0．729-1-0．066,t=2．863,P=0．008）,差异均有统计学意义。免疫组织化学结果显示食管鳞状细胞癌组织中Mel-18的阴性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义[66．3％（59／89）比31．5％（28／89）,X。21．606,P〈0．05];食管鳞状细胞癌中Bmi-1的阳性表达率高于癌旁组织,差异具有统计学意义[74．2％（66／89）比30．3％（27／89）,Х^2=34．249,P〈0．05]。89例食管鳞状细胞癌患者中,Mel-18表达与肿瘤的临床分期（Х^2=8．003,P=0．004）、浸润深度（Х^2=17．094,P=0．001）、淋巴结转移（Х^2=5．156,P=0．026）相关,Bmi-1表达与分化程度（Х^2=14．625,P=0．001）、临床分期（Х^2=7．863,P=0．005）、淋巴结转移（Х^2=5．771,P=0．005）相关。另外,通过QRT—PCR及免疫组织化学检测发现在食管鳞状细胞癌中Mel-18和Bmi-1的表达负相关（r=-0．592,P=0．001;r=-0．285,P=0．007）。结论在食管鳞状细胞癌的发生发展中,Mel-18可能起抑癌作用,而Bmi-1可能起致癌作用,二者可望成为食管鳞状细胞癌明确诊断及判断预后的新指标。     

食管鳞癌中DACT2基因表达及甲基化状态研究

[目的]检测食管鳞状细胞癌(ESCC)中DACT2基因表达及启动子区甲基化状态,探讨DACT2基因在食管鳞癌发生发展中的作用.[方法]分别应用逆转录—聚合酶链反应(RTPCR)以及甲基化特异性PCR(MSP)的方法检测DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-dC)处理前后的食管癌细胞系(TE1、TE13、T.Tn、Eca109)以及食管鳞癌组织及相应癌旁组织中DACT2 mRNA表达情况及启动子区甲基化状态.[结果]经5-aza-dC处理后4种食管癌细胞系中DACT2基因的表达均增高.4种未经5-aza-dC处理的食管癌细胞系中DACT2基因呈高甲基化状态.应用5-aza-dC处理后,DACT2基因在4种细胞系中均呈非甲基化状态.DACT2基因在食管鳞癌组织中的表达显著低于癌旁组织(0.66±0.53 vs 0.95±0.64,t=-2.43,P=0.018),并与淋巴结转移密切相关(t=-2.030,P=0.048).食管鳞癌组织中DACT2基因的启动子区甲基化率显著高于癌旁组织(50.0％ vs 21.1％,x2=9.439,P=0.002),并与TNM分期、组织学分化程度和淋巴结转移密切相关(P均＜0.05).发生DACT2基因甲基化的食管鳞癌组织中DACT2基因的表达量显著低于未发生甲基化的食管鳞癌组织(0.46±0.32 vs 0.78±0.61,t=-2.341,P=0.023).[结论]DA CT2基因在食管鳞癌中的异常低表达与食管鳞癌的发生、发展密切相关,且其启动子区甲基化可能是导致其表达沉默的机制之一.     

ADAMTS1、ADAMTS18基因在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的:分析食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中含凝血酶敏感素1型基序的解聚素样金属蛋白酶(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1,ADAMTS1)及ADAMTS18基因的表达,探讨ADAMTS1和ADAMTS18基因在ESCC发生、发展中的作用。方法:收集2008年6月至2011年8月河北医科大学第四医院手术切除的72例ESCC组织及癌旁组织,应用RT-PCR及免疫组化S-P法分别检测ESCC组织及癌旁组织中ADAMTS1、ADAMTS18 mRNA及其蛋白的表达。结果:1 ESCC组织中ADAMTS1 mRNA的表达显著低于相应的癌旁组织[(0.394±0.123)vs(0.895±0.276),P<0.01],有淋巴结转移组ADAMTS1 mRNA表达显著高于无淋巴结转移组[(0.482±0.157)vs(0.298±0.102),P<0.05];2ESCC组织中ADAMTS18 mRNA表达显著低于相应的癌旁组织[(0.361±0.115)vs(0.879±0.265),P<0.01),高、中分化鳞癌组ADAMTS18 mRNA表达显著高于低分化鳞癌组[(0.496±0.153)vs(0.232±0.088),P<0.05];3ESCC组织中ADAMTS1和ADAMTS18蛋白阳性表达率显著低于癌旁组织[38.9%(28/72)、34.7%(25/72)vs94.4%(68/72)、93.1%(67/72),均P<0.01],高、中分化组ADAMTS18蛋白阳性表达率显著高于低分化鳞癌组[45.4%(20/44)vs 17.8%(5/28),P<0.05];4ESCC组织中ADAMTS1与ADAMTS18的蛋白表达无明显相关性(χ2=1.338,P>0.05)。结论:ADAMTS1基因在ESCC中的异常表达可能与ESCC的发生及有无淋巴结转移有关;ADAMTS18基因在ESCC中的异常表达可能与ESCC的发生及组织分化程度有关;两种基因在ESCC组织中蛋白的表达不存在明显的相关性。     

食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达及意义

目的:探讨食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达情况及其与临床病理因素的关系.方法:应用RT-PCR和免疫组化SP法检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管粘膜组织中mRNA和蛋白的表达.结果:在食管鳞癌癌变过程中RECK在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常粘膜组织中mRNA的含量依次增高,分别为1.052±0.078、1.274±0.235、1.306±0.121,组间比较有明显差异(F=49.936,P＜0.05):不同分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移的食管鳞癌组织之间RECK mRNA相对含量差异均有统计学意义(F=5.081,F=26.084,U=24.011,P均＜0.05).食管鳞癌组织及癌旁不典型增生组织中RECK蛋白表达均低于正常粘膜组织,表达量分别为59.7%(37/62)、71.0%(22/31)、85.5%(53/62),组间比较有明显差异(x2=10.331,P＜0.01);食管鳞癌组织中RECK蛋白表达与癌组织的分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移密切相关(P＜0.05).结论:食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白表达均降低,其低表达可能与食管鳞癌发生有关.检测RECK mRNA及蛋白的表达可望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.     

间隙连接蛋白Cx26和Cx43的表达及与食管鳞癌浸润和转移关系

 目的探讨间隙连接蛋白Cx26和Cx43的表达在食管鳞状细胞癌发生、发展以及浸润和转移中的作用。方法通过RT-PCR、免疫组织化学技术联合检测Cx26和Cx43在42例食管鳞状细胞癌组织、17例癌旁不典型增生组织以及42例相应正常食管黏膜组织的表达情况。结果在食管鳞癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜中Cx26、Cx43 mRNA相对表达量及蛋白阳性表达率均低于正常食管黏膜和癌旁不典型增生组织。Cx26、Cx43蛋白和mRNA阳性表达率均随癌组织浸润深度的加深而明显降低,在有淋巴结转移的癌组织均明显低于无淋巴结转移组癌组织。Cx26、Cx43在食管鳞癌组织中mRNA相对表达量均随分化程度降低呈下降趋势。Cx26与Cx43 mRNA表达和蛋白表达之间均呈正相关关系。结论Cx26、Cx43基因抑制食管鳞癌发生、发展及浸润、转移,是早期预测食管鳞癌发生和浸润转移的有效指标。     

食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达及意义

目的探讨食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达情况及其与临床病理因素的关系.方法应用RT-PCR和免疫组化SP法检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管粘膜组织中mRNA和蛋白的表达.结果在食管鳞癌癌变过程中RECK在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常粘膜组织中mRNA的含量依次增高,分别为1.052±0.078、1.274±0.235、1.306±0.121,组间比较有明显差异(F=49.936,P＜0.05);不同分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移的食管鳞癌组织之间RECK mRNA相对含量差异均有统计学意义(F=5.081,F=26.084,U=24.011,P均＜0.05).食管鳞癌组织及癌旁不典型增生组织中RECK蛋白表达均低于正常粘膜组织,表达量分别为59.7%(37/62)、71.0%(22/31)、85.5%(53/62),组间比较有明显差异(X2=10.331,P＜0.01);食管鳞癌组织中RECK蛋白表达与癌组织的分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移密切相关(P＜0.05).结论食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白表达均降低,其低表达可能与食管鳞癌发生有关.检测RECK mRNA及蛋白的表达可望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.     

食管鳞状细胞癌组织Bin1基因启动子甲基化状态及其临床意义

目的:探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)患者的食管鳞癌组织、癌旁组织中Bin1基因启动子甲基化状态及其mRNA的表达及其临床意义.方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测58例经病理证实的ESCC患者的食管鳞癌组织、癌旁组织中Bin1基因mRNA的表达情况;用甲基化特异性PCR(MSP)检测上述食管鳞癌组织中Bin1基因启动子甲基化状态,比较ESCC患者Bin1甲基化状态与临床病理分期的关系.结果:ESCC组织中Bin1基因启动子甲基化率明显高于癌旁组织(58.62％ vs 25.86％,x2=12.76,P＜0.01),Bin1甲基化状态与患者TNM分期、肿瘤侵润深度、分化程度、淋巴结转移相关(均P ＜0.05).ESCC组织中Bin1 mRNA的表达水平明显低于癌旁组织[(0.78 ±0.05) vs (1.03±0.03),t=9.643,P＜0.01)];发生Bin1甲基化的组织中Bin1 mRNA表达水平明显低于未发生甲基化的组织[(0.68±0.04) vs (0.85±0.07),t=2.476,P＜0.05].结论:Bin1基因启动子区甲基化状态可能与ESCC的发生密切相关,它是ESCC中Bin1 mRNA低表达或缺失的机制之一,且与ESCC进展和淋巴结转移有关.     

Bub1在食管鳞状细胞癌组织和正常食管黏膜的表达及临床意义

目的:观察Bub1 mRNA及Bub1蛋白在食管鳞状细胞癌和正常食管黏膜组织中的表达差别,探讨Bub1在食管鳞状细胞癌发生、发展中的作用及其临床意义。方法:收集40例食管鳞状细胞癌标本及相应的食管切缘正常黏膜组织,利用免疫组化染色及原位杂交技术检测Bub1蛋白和Bub1 mRNA在食管鳞状细胞癌组织和正常食管黏膜组织中的表达。结果:与正常黏膜组织相比较,Bub1 mRNA及Bub1蛋白在食管鳞状细胞癌组织中表达水平明显降低(P<0.005),且Bub1 mRNA及Bub1蛋白的表达水平与食管鳞状细胞癌分化程度及有无淋巴结转移相关(P<0.05)。结论:Bub1表达水平高低可能与食管鳞状细胞癌的发生发展及淋巴结转移具有一定关系。     

EHD2蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的:探讨EHD2蛋白在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达情况及意义。方法:采用Western blot技术和免疫组织化学法(SP法)检测ESCC和相应癌旁正常组织EHD2蛋白的表达水平,分析其表达与患者临床病理学参数的关系。结果:在8对新鲜食管鳞癌组织中,EHD2蛋白在食管鳞癌组织中的表达明显低于癌旁正常组织(P<0.01);在44例石蜡标本中,EHD2蛋白在食管鳞癌组织的阳性表达率明显低于癌旁正常组织(P<0.05),且EHD2蛋白的表达明显与有无淋巴结转移(P=0.006)和组织分化程度相关(P=0.023),与患者的年龄、性别、肿瘤大小和TNM分期无相关性(P>0.05)。结论:EHD2蛋白在食管鳞癌组织中低表达,提示EHD2蛋白可能是新的食管鳞癌抑癌因子,并有望为食管鳞癌的预后判断和治疗提供新的思路。