藏药蔓菁抗氧化活性多糖的提取及纯化工艺优选

目的: 优化藏药蔓菁中抗氧化活性多糖的提取、纯化工艺。 方法: 以粗多糖得率、总多糖质量分数和抗氧化活性的综合评分为指标,采用正交试验考察浸提次数、料液比及浸提时间对蔓菁多糖提取工艺的影响;以色素去除率和多糖损失率为综合评价指标,通过正交试验考察脱色温度、吸附时间、活性炭用量对脱色工艺的影响。 结果: 蔓菁多糖最佳提取工艺为料液比1:30,于90 ℃水浴浸提3次,每次2 h;最佳脱色工艺为加3%活性炭于60 ℃吸附40 min。蔓菁多糖纯度达4.66%,其清除DPPH自由基的IC₅₀=6.71 g·L^-1。 结论: 优选的提取、纯化工艺稳定可靠,所得多糖的含量高、杂质少,适合于蔓菁多糖的工业化生产。     

六月青一种木脂素苷的体外抗氧化活性

目的: 研究六月青一种木脂素苷(6R,7S,8S)-7α-[(β-glucopyranosyl)oxy] lyoniresinol的抗氧化活性。 方法: 采用酶标仪微量法和紫外-可见光分光光度法,以维生素C为阳性对照,分别测定(6R,7S,8S)-7α-[(β-glucopyranosyl)oxy] lyoniresinol对1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH ·)自由基、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O^-₂·)的清除能力。 结果: (6R,7S,8S)-7α-[(β-glucopyranosyl)oxy] lyoniresinol对DPPH·(半数清除率IC₅₀ 8.11 mg·L^-1),·OH(IC₅₀ 21.61 mg·L^-1)和O^-₂·(IC₅₀ 10.30 mg·L^-1)均具有清除作用,且呈明显的量效关系。 结论: (6R,7S,8S)-7α-[(β-glucopyranosyl)oxy] lyoniresinol在体外有明显的抗氧化作用。     

油柑多糖的提取与清除氧自由基作用研究

 目的：从油柑中提取油柑多糖，并分析其清除氧自由基作用。方法：建立热水提取 乙醇沉淀 鞣酸除蛋白H₂O₂脱色工艺制备油柑多糖(PePS)，并作了糖及蛋白质含量测定、多糖的特征分析及清除氧自由基活性测定。结果：油柑多糖得率为1.94%。多糖经SephadexG-100柱层析，洗脱峰为一糖峰及一蛋白峰。总糖含量为64.5%％。蛋白质含量为35.0%。红外吸收光谱分析(IR)，具有多糖及蛋白质的特征吸收峰。差示扫描量热分析(DSC)，结果见该多糖除出现117.20℃的特大吸热峰外，尚有三个小吸热峰和一个小放热峰。测定清除·OH自由基活性，其IC₅₀为638μg；清除超氧阴离子自由基(O₂)活性，其IC₅₀为500μg；抑制脂质过氧化(LPO)作用，其IC₅₀为1.25mg。结论：油柑多糖具有清除氧自由基的作用，其活性大小与多糖的用量呈正相关。     

秦巴山区中药材藿香枝叶中多糖研究

目的: 对中药材藿香枝叶中的多糖进行提取,并测试其抗氧化活性,为藿香药材资源的综合利用提供科学依据。方法: 采用超声法辅助提取藿香枝叶中的多糖,设计L₉(3⁴)正交试验考察料液比、pH和超声提取时间对藿香枝叶中多糖提取的影响,确定其多糖的最佳提取工艺,并对藿香多糖进行清除·OH试验。结果: 藿香多糖的最佳提取工艺为料液比1:10、超声提取30 min、pH为6,可使藿香多糖的提取率高达7.50%,藿香多糖对Fenton反应产生的·OH有明显的清除作用。结论: 藿香多糖具有抗氧化活性,可从藿香枝叶中提取多糖,其多糖有开发价值。     

正交试验优选桑籽中总生物碱、总黄酮及粗多糖的提取工艺

目的： 优选桑籽中总生物碱、总黄酮及粗多糖的提取工艺。 方法： 将桑籽脱脂后,以总生物碱、总黄酮及粗多糖提取量的综合评分为指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察提取时间、乙醇体积分数及盐酸摩尔浓度对提取工艺的影响。总黄酮、总生物碱及粗多糖的含量测定依次采用Al（NO₃）₃法、雷氏盐比色法及蒽酮-硫酸法。 结果： 最佳提取工艺为提取时间2 h,乙醇体积分数50%,盐酸摩尔浓度0.03 mol·L^-1;总生物碱、总黄酮及粗多糖平均提取量分别为23.15,0.57,0.51 mg·g^-1。 结论： 该工艺稳定可行,提取效率高,适用于工业化生产,为桑籽资源的开发利用提供参考。     

正交试验法优选加味四君子汤提取工艺

目的： 优选加味四君子汤的提取工艺。 方法： 以人参皂苷总提取量为指标,采用L₉（3⁴）正交试验考察乙醇体积分数及用量、提取次数、提取时间对醇提工艺的影响;以总多糖得率为指标,通过正交试验考察料液比、提取次数、提取时间对水提工艺的影响。采用HPLC测定人参皂苷含量,流动相乙腈-水（13：87）,检测波长203 nm;利用UV测定总多糖含量,检测波长489 nm。 结果： 最佳醇提工艺为加6倍量70%乙醇提取2次,每次1.5 h;人参皂苷提取量达7.69 mg·g^-1。最佳水提工艺为加8倍量水提取3次,每次2 h;总多糖得率达2.18%。 结论： 优选的提取工艺稳定可行,可充分提取加味四君子汤中醇溶性和水溶性有效成分。     

新疆鼠尾草总酚酸的体外抗氧化活性

目的：研究新疆鼠尾草总酚酸提取物和纯化物的体外抗氧化活性。方法：以40%乙醇提取和大孔吸附树脂纯化分别制备得到新疆鼠尾草总酚酸的提取物和纯化物,以维生素C（VC）为对照,通过体外化学模拟方法测定新疆鼠尾草总酚酸提取物和纯化物的还原能力、对·DPPH自由基、羟基自由基（·OH）和超氧自由基（O₂^-·）的清除能力,研究新疆鼠尾草总酚酸的抗氧化活性。结果：新疆鼠尾草总酚酸提取物和纯化物清除·DPPH自由基的作用50%清除浓度（IC₅₀,分别为0.029,0.039 g·L^-1）弱于VC（IC₅₀0.018 g·L^-1）;对羟基自由基（·OH）的清除作用（IC₅₀分别为0.212,0.165 g·L^-1）强于VC（IC₅₀0.356 g·L^-1）;对超氧自由基（O₂^-·）的清除能力（IC₅₀分别为3.735,1.913 g·L^-1）弱于VC（IC₅₀0.390 g·L^-1）,其纯化物还具有一定的还原能力。结论：新疆鼠尾草总酚酸具有较强的抗氧化作用。     

大孔树脂纯化紫心甘薯总黄酮及其抗氧化活性研究

 目的 研究紫心甘薯总黄酮的大孔树脂纯化工艺及其抗氧化活性。方法 以静态饱和吸附量和解析率为指标,对4种大孔树脂(D101,NKA-9,AB-8,NKA-Ⅱ)进行筛选,并以回收率为指标,通过选用L₉(3⁴)正交表设计实验,确立纯化总黄酮的最佳条件;以VC为对照品,采用邻苯三酚自氧化法和邻二氮菲法研究提取物对超氧阴离子(O^{－·₂)和羟基自由基(·OH)的抗氧化活性。结果 AB-8纯化紫心甘薯总黄酮效果最好,最佳纯化工艺：上样液质量浓度为0.81 mg·mL-1,淋洗pH为2,乙醇洗脱液体积分数为70%,洗脱流速为2 mL·min-1;邻苯三酚自氧化法和邻二氮菲法中抗氧化活性以半数抑制浓度(IC₅₀)表示分别为 0.037 4,0.105 mg·mL-1。结论 大孔树脂纯化紫心甘薯总黄酮的效果显著,紫心甘薯黄酮类化合物具有较强的抗氧化活性。}     

肉苁蓉总苷体外清除自由基及对OH·引发的DNA损伤的保护作用

 目的研究肉苁蓉总苷体外清除自由基作用及对OH·引起的DNA损伤的保护作用。方法采用现代生物化学发光技术,检测肉苁蓉总苷对O₂,OH·,H₂O₂等自由基的清除作用。并通过Cu²-Phen-H₂O₂-VitC-DNA发光体系研究肉苁蓉总苷对OH．引起的DNA氧化损伤的保护作用。结果肉苁蓉总苷对O₂,OH·,H₂O₂活性氧自由基均有清除作用。其50%抑制浓度( IC₅₀)分别为0.0731,7.031,0.098,0.1254mg·mL^{-1。对DNA化学发光的IC50为0.4211ug·mL-1。结论实验结果表明,肉苁蓉总苷能有效地清除各种活性氧自由基,能保护OH·引发的DNA氧化损伤。}     

正交试验法优选骨愈搽剂的提取工艺

目的: 优选骨愈搽剂的提取工艺。 方法: 以羟基红花黄色素A含量为指标,采用HPLC测定,通过L₉(3⁴)正交试验法考察乙醇体积分数、提取次数、溶剂用量、提取时间对骨愈搽剂提取工艺的影响。 结果: 最佳提取工艺为加12倍量70%乙醇回流提取2次,每次1.5 h。 结论: 优选的提取工艺稳定可行,且羟基红花黄色素A含量较高。     

密闭性中药复合敷料的提取工艺优选

目的： 优选密闭性中药复合敷料的提取工艺。方法： 以人参皂苷Rg₁,Rb₁含量和浸膏得率为评价指标,通过单因素试验优选提取次数,利用正交试验考察乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间对密闭性中药复合敷料提取工艺的影响。采用HPLC测定人参皂苷Rg₁,Rb₁含量,流动相水（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0~10 min,81% A;10~38 min,81%~79% A;38~90 min,79%~66% A）,检测波长203 nm。结果： 各因素对提取工艺的影响顺序为乙醇体积分数>提取时间>乙醇用量。最佳提取工艺条件为加8倍量70%乙醇提取2次,每次2 h;平均浸膏得率25.45%,人参皂苷Rg₁,Rb₁平均质量浓度分别为0.46,0.37 g·L^-1。结论： 建立的含量测定方法准确、重复性好,优选的提取工艺稳定、合理、可行,为民间外伤验方的二次开发提供参考。     

九州虫草Zn2+胁迫下金属硫蛋白的诱导产生规律及性质研究

目的 探讨Zn^2＋胁迫下九州虫草Cordyceps kyusyuensis金属硫蛋白（MT）的产生及性质。方法 以培养基中添加ZnSO₄的方式,研究九州虫草在Zn^2＋胁迫下MT的产生规律。通过超声波细胞破碎、提取和凝胶柱色谱法对MT进行分离纯化,利用考马斯亮蓝法进行纯度鉴定。用电喷雾质谱法测定MT的相对分子质量,以Ellman’s方法测定巯基的量,以原子火焰吸收法测定Zn的量,以Ag饱和分析法结合原子吸收光谱（AAS）测定MT的量,用氨基酸自动分析仪对Zn-MT进行氨基酸组成分析。通过对羟基自由基（HO?）、DPPH自由基（DPPH?）和超氧阴离子自由基（O^-2）的清除率实验探讨九州虫草MT的抗氧化活性。结果 菌丝体中Zn和MT的量随着培养基中Zn^2＋质量浓度（0～15 g/L）的增加而增加。在10 L发酵罐培养时,培养基中Zn^2＋质量浓度为15 g/L,培养时间为56 h,金属硫蛋白的量为14.335 mg/g菌丝体（湿质量）。对九州虫草的菌体蛋白通过2次凝胶柱色谱,冷冻干燥得到九州虫草MT,电喷雾质谱法测得其相对分子质量为6 750,每分子Zn-MT氨基酸总量为56个,含有20个半胱氨酸,含极少量的芳香族氨基酸,可结合6个Zn原子。九州虫草Zn-MT对于HO?、DPPH?、O^-2有较好的清除作用,清除效果依次为O^-2＞DPPH?＞HO?,其半数清除率质量浓度（IC₅₀）分别为71.49、80.58、100.65 mg/L。结论 通过紫外扫描图谱分析、蛋白柱色谱图谱分析、九州虫草Zn-MT理化性质以及抗氧化活性的测定,可以判断其与标准的兔肝MT非常相似,进一步可以确定通过九州虫草菌丝体液态发酵法可生产MT,以期为工业生产提供可靠的理论依据。     

冠突散囊菌不同溶剂提取物体外抗氧化活性研究

目的：研究冠突散囊菌体外抗氧化活性。方法：采用萃取法对冠突散囊菌甲醇提取物萃取获得石油醚,乙酸乙酯和正丁醇3种提取物,并以维生素C（VC）为阳性对照,用清除二苯代苦味酰基（DPPH）自由基和（ABTS）自由基测定法,对冠突散囊菌3种提取物抗氧化活性进行测定。结果：冠突散囊菌石油醚提取物清除 DPPH和ABTS⁺自由基半数清除浓度（IC₅₀）分别为0.078,0.083 g·L^-1 ,乙酸乙酯提取物IC₅₀分别为0.21,0.13 g·L^-1;正丁醇提取物对DPPH和ABTS⁺自由基几乎没有清除作用;3种提取物清除DPPH和ABTS⁺自由基的能力均比阳性对照VC（IC₅₀分别为0.032,0.024 g·L^-1）弱。结论：冠突散囊菌石油醚和乙酸乙酯提取物均具有抗氧化活性,且石油醚提取物活性较强。     

蜜炙过程对黄芪(体外)抗氧化作用的影响

实验结果表明,蜜炙过程不明显影响黄芪对超氧阴离子自由基(O₂^-)清除作用,但生黄芪对羟自由基(·OH)和多形核白细胞(PMN)呼吸爆发产生的活性氧的清除作用优于制黄芪水提物。提示加热炮制可部分降低黄芪抗氧化作用的能力。     

补骨脂抗氧化、抑制α-葡萄糖苷酶和抗菌活性成分研究

从补骨脂中分离得到12个化合物,分别为异补骨脂素(1),补骨脂素(2),8-甲氧基补骨脂素(3),补骨脂定(4),补骨脂宁(5),补骨脂甲素(6),大豆苷元(7),补骨脂乙素(8),补骨脂二氢黄酮甲醚(9),新补骨脂素异黄酮(10),大豆苷(11)和紫云英苷(12)。采用体外清除DPPH和ABTS自由基以及α-葡萄糖苷酶抑制活性对化合物1~4,6,7,11,12抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性进行筛选,利用K-B法筛选化合物5,8~10的抗菌活性。结果显示,补骨脂定具有清除DPPH自由基的能力(IC₅₀ 43.85 mg·L^-1);补骨脂定,补骨脂甲素,大豆苷,大豆苷元和紫云英苷具有清除ABTS自由基的能力 (IC₅₀分别为1.32,4.97,10.47,34.22,31.27 mg·L^-1);补骨脂定,补骨脂甲素和大豆苷元显示出强的α-葡萄糖苷酶抑制活性 (IC₅₀分别为40.74,45.73,49.44 mg·L^-1);补骨脂乙素和新补骨脂异黄酮均有明显的抑制SA,MRSA,ESBLs-SA的作用 (MIC分别为0.781 3,1.562 5,0.781 25 μg·disc^-1和6.25,6.25,6.25 μg·disc^-1)。     

基于体外抗氧化能力探讨枳葛橘对酒精性肝氧化损伤的保护作用

目的: 以体外抗氧化能力初步筛选复方枳葛橘对酒精性肝氧化损伤保护作用的最佳配伍比。 方法: 采用正交试验法设计枳椇子、葛花和化橘红的不同配伍比,考察不同配伍比处方水提液清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼·],羟自由基(hydroxyl radical,·OH)和超氧阴离子(superoxide anion free radical, O^2-·)等的能力,综合评价其体外抗氧化能力,以抗氧化能力强者为复方枳葛橘的最佳配伍。 结果: 正交试验分析得到复方枳葛橘对酒精性肝氧化损伤保护作用的最佳配伍比例为枳椇子-葛花-化橘红(3:3:2),在此配伍比例下复方水提液的综合抗氧化能力较强,在生药质量浓度1.0 g·L^-1下对DPPH,O^2-·和·OH的清除率分别为69.94%,32.47%,58.81%。 结论: 复方枳葛橘体外抗氧化最佳配伍比为枳椇子-葛花-化橘红(3:3:2),在此配伍比条件下其综合抗氧化能力较强。     

宁夏枸杞总黄酮对H2O2损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的: 研究宁夏枸杞总黄酮对过氧化氢(H₂O₂)损伤的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的保护作用及可能的机制. 方法: 采用H₂O₂诱导HUVEC氧化应激损伤模型.实验分为正常组、1 mmol·L^-1H₂O₂损伤模型组、枸杞总黄酮保护(100,200,400 mg·L^-1) 预孵育24 h组,以及阳性对照(维生素C 20 mg·L^-1)组,预孵育24 h.采用噻唑蓝(MTT)法检测枸杞总黄酮对1 mmol·L^-1 H₂O₂损伤 4 h细胞活性,测定细胞上清液中丙二醛(MDA),乳酸脱氢酶(LDH),超氧化物歧化酶(SOD),一氧化氮(NO). 结果: 与正常组比较,H₂O₂损伤模型组MDA含量、LDH活性均增高,NO生成量、SOD活性明显下降,其差异均具有显著性(P<0.01).枸杞黄酮保护组MDA含量、LDH活性均下降,NO生成量、SOD活性较H₂O₂损伤模型组明显增高(P<0.01),MDA含量、LDH活性的下降程度,NO生成量、SOD活性的增高程度,与枸杞总黄酮呈剂量依赖性. 结论: 宁夏枸杞总黄酮对H₂O₂所致人血管内皮损伤有保护作用,其机制可能与宁夏枸杞总黄酮抑制损伤细胞的脂质过氧化,以及有效提高机体抗氧化酶的活性、清除自由基,促进一氧化氮(NO)的合成有关.     

3,4-二甲氧基-D-甘露醇的制备及其抗氧化活性

 目的合成目标化合物3,4-二甲氧基-D-甘露醇,并研究其体外抗氧化活性。方法以海藻中提取的海洋活性物质D- 甘露醇为原料,经缩合、醚化和脱保护反应,制备目标化合物。利用红外光谱、元素分析、核磁共振氢谱、碳谱和质谱分析对合成的中间体和目标产物的结构进行确证。采用体外实验研究目标化合物3,4-二甲氧基-D-甘露醇酯对超氧阴离子、羟自由基、自由基1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)、双氧水(H₂O₂)诱导的红细胞氧化溶血以及小鼠肝匀浆脂质过氧化作用的保护作用。结果合成了目标产物并确定了结构,两种方法的总收率分别为43.32％和50.92％。抗氧化结果表明,3,4-二甲氧基-D-甘露醇酯对超氧阴离子、羟自由基、DPPH,H₂O₂诱导的红细胞氧化溶血以及小鼠肝匀浆脂质过氧化作用均有不同程度的抑制作用, 对超氧阴离子有良好的清除作用,IC₅₀为1.4 g·L^-1。同时发现对D-甘露醇3,4位的羟基进行甲醚化后,所得的甘露醇衍生物对自由基DPPH的清除作用和对大鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制作用都有明显的提高,对羟自由基的清除作用和对H₂O₂诱导的小鼠红细胞氧化溶血的作用基本没有变化,而对超氧阴离子自由基的清除作用则有显著的降低。结论目标化合物3,4-二甲氧基-D-甘露醇酯具有显著的体外抗氧化活性,但与D-甘露醇相比,只是对自由基DPPH的清除作用和对大鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制作用有明显提高。     

黔产苗药"薄丈达"中不同极性组分DPPH自由基清除活性的研究

为进一步开发贵州药用植物新资源,寻找更多天然抗氧化剂,该实验以黔产苗药"薄丈达"(bod zangd dak)为原料,利用60%乙醇等为溶剂,通过提取分离得到该药材中不同极性组分,以抗坏血酸为阳性对照,采用DPPH自由基(1,1-二苯基-2-苦肼基自由基)清除法评价苗药"薄丈达"中不同极性组分的抗氧化活性。结果黔产苗药"薄丈达"中不同极性组分的IC₅₀依次为抗坏血酸(0.033 4 g·L^-1)<乙酸乙酯部位(0.052 3 g·L^-1)<总鞣质部位(0.054 9 g·L^-1)<60%乙醇提取物部位(0.076 7 g·L^-1)<正丁醇部位(0.110 g·L^-1)<水溶性多糖部位(0.168 g·L^-1)<水提取物部位(0.174 g·L^-1)<萃取后水部位(0.226 g·L^-1)<总多糖部位(0.645 g·L^-1)。研究表明黔产苗药"薄丈达"中不同极性组分均有不同程度的清除DPPH自由基活性,这为进一步寻找其活性成分和研究抗氧化活性机制提供一定的实验依据。     

铂化金属硫蛋白与羟自由基反应速率常数的测定

 目的:测量铂化金属硫蛋白(Pt₇Th)与羟自由基(OH^·)的反应速率常数?方法:脉冲辐解N₂O饱和的Pt₇Th及其KSCN竞争体系的水溶液?结果:Pt₇Th中的巯基(RS^-)与羟自由基(OH^·)反应生成巯基自由基(RS^·)的反应速率常数为1.6×10¹¹L·mol^-1·s^-1,RS与RS^·生成阴离子自由基RSSR^·-的正反应速率常数为8.2×10⁹L·mol^-1·s^-1,逆反应速率常数为1.2×105s^-1?结论:Pt₇Th具有较强的清除OH^·的能力,对含铂抗癌药物的临床应用具有重要意义?