诱导细胞凋亡及抗凋亡的药物研究进展

细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)又称程序性死亡 (ＰＣＤ) ,是一种生理的“细胞自杀”过程。ＰＣＤ与坏死性死亡不同 ,其主要靶目标是细胞核。ＰＣＤ可形成“死亡小体”(ａｐｏｐｔｉｘｂｏｄｙ) ,在琼脂糖凝胶电泳下可呈现典型的ＤＮＡ“梯状结构”(ｌａｄｄｅｒｐａｔｔｅｒｎ)。研究ＰＣＤ不仅可以揭示“死”的秘密 ,而且也是理解“生”的需要。如果该“亡”的细胞不能凋亡 ,而该“生”的细胞过早凋亡 ,都将影响机体正常“生”的需要。下面就将近年来人们在诱导凋亡及抗凋亡药物方面的研究进展作一概述。1　诱导细胞凋亡药物及其相关因素…     

冬凌草甲素诱导三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及对细胞内活性氧水平的影响

冬凌草甲素是从中药冬凌草Rabdosia rubescens中分离得到的一种贝壳杉烯二萜类的天然有机化合物,具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性。该实验观察冬凌草甲素对三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。采用MTT法检测冬凌草甲素对MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用,PI单染、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术分析冬凌草甲素对MDA-MB-231细胞凋亡的影响,活性氧(ROS)试剂盒检测细胞内ROS水平的变化,Western blot分析PARP,Bcl-2,caspase-3蛋白的表达情况。结果表明,冬凌草甲素对乳腺癌MDA-MB-231细胞具有明显的凋亡诱导作用,显著升高细胞内的ROS水平,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,并促进caspase-3及其底物PARP的切割。提示,冬凌草甲素诱导MDA-MB-231细胞凋亡的作用可能与升高细胞内ROS水平、下调Bcl-2的表达以及激活caspase-3相关。     

中药诱导胃癌细胞凋亡的研究进展

胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。随着科学技术的发展和人类对健康的需求,国内外对胃癌的研究越来越深入。目前,在胃癌综合治疗中,中医药所发挥的作用越来越大,可明显提高患者的生活质量,并延长生存期。中医药的抗癌机制研究日益受到重视,尤其是诱导癌细胞凋亡的相关作用机制。通过对单味中药及中药复方诱导胃癌细胞凋亡的总结,从而为中医药治疗胃癌的基础机制及临床应用提供指导,促进中医药在临床中治疗胃癌的发展。     

雷公藤诱导细胞凋亡的研究进展

雷公藤Tripterygium wilfordii提取物在临床上常用于治疗类风湿关节炎等多种疾病，其疗效已被广泛认可，近5年来国内外学者从其提取物诱导细胞凋亡的角度，对其药理机制进行了细胞分子水平的探讨，现对其研究进展进行综述。     

中药诱导胃癌细胞凋亡的研究进展

目的：探讨中药诱导胃癌细胞凋亡的研究进展。方法：对近年来相关文献进行分析、总结。结论：中药可通过对肿瘤细胞的直接杀伤作用、阻滞肿瘤细胞增殖周期、增强免疫活性、诱生细胞因子、影响凋亡信号的传导来诱导细胞凋亡,诱导细胞凋亡已成为中药防治胃癌的重要机理。     

中药诱导肝癌细胞凋亡的研究进展

细胞凋亡是指由体内外因素触发的,受机体严密调控的细胞程序性死亡过程,它呈现其独特的、有别于细胞坏死的形态学和生物化学特点, 被普遍认为是有机体维持个体内稳态恒定的极其重要的机制之一。细胞凋亡的意义在于:使细胞增生与细胞死亡保持在一个动态的平衡水平,以维持细胞总数的相对恒定;清除损伤、衰老和多余的细胞,防止细胞癌变;维持正常胚胎发育的免疫系统的克隆选择。它与有丝分裂相反而又互补,并共同参与调控细胞群落、细胞数量的恒定,其调控机制的失常则是包括肿瘤在内的一系列疾病产生的重要　　　　　　　　　　　　　　　　　　…     

中医药诱导细胞凋亡治疗恶性肿瘤的研究进展

目的探讨中医药诱导细胞凋亡治疗恶性肿瘤的临床效果及展望。方法选取我院在2009年8月至2012年6月间收治的54例恶性肿瘤患者,对所有患者的临床资料及实际情况进行分析。并对患者采用中医药诱导细胞凋亡方法进行治疗,评估患者的治疗效果。结果所有患者的病情均有一定程度的改善,54例患者中,显效29例,好转20例,无效5例,治疗有效率为90.7％,有效提高了生存质量,延长了生命周期。结论临床上应用中医药诱导细胞凋亡治疗恶性肿瘤的效果较为显著,值得进行推广应用。     

去甲斑蝥素诱导活性氧的产生介导SKOV3细胞凋亡和G_2/M期周期阻滞

目的:研究去甲斑蝥素对人卵巢癌SKOV3细胞的细胞毒作用及作用机制。方法:MTT法检测去甲斑蝥素对细胞增殖的影响,倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞的形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平,蛋白印迹法检测相关蛋白的表达。结果:去甲斑蝥素能够时间和剂量依赖性地抑制SKOV3细胞生长。52μmol/L的去甲斑蝥素作用12～48 h后可使细胞核皱缩、染色质凝聚,形成明显的凋亡小体;还可时间依赖性地诱导细胞凋亡、G_2/M期周期阻滞以及活性氧的产生。活性氧清除剂NAC可以显著降低去甲斑蝥素诱导的活性氧的产生,抑制细胞凋亡和G_2/M期周期阻滞(P0.05)。5 mmol/L NAC抑制去甲斑蝥素引起的Bax和p21表达上调,增加去甲斑蝥素引起的procaspase-3和Bcl-2的表达降低。结论:去甲斑蝥素通过升高活性氧的水平介导SKOV3细胞凋亡和G_2/M期周期阻滞。     

橙皮苷诱导人胃癌AGS细胞凋亡机制的研究

目的探讨橙皮苷对胃癌AGS细胞的诱导凋亡作用及其相关分子机制。方法采用MTT比色法检测橙皮苷对AGS细胞的杀伤作用;Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞术检测橙皮苷对AGS细胞的诱导凋亡作用、活性氧水平及加入活性氧清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)后细胞凋亡变化情况;Western blotting法检测细胞凋亡相关蛋白和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白的表达。结果 MTT比色法检测结果显示橙皮苷对AGS具有良好的增殖抑制作用。经橙皮苷处理后AGS细胞呈现细胞核固缩、细胞皱缩等凋亡现象。Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞术检测结果表明橙皮苷可以诱导AGS细胞发生线粒体依赖性凋亡,增加细胞内活性氧的水平,预处理NAC后,橙皮苷的诱导凋亡作用被抑制。Western blotting检测结果显示p-JNK、p-p38、Bad、cleavedCaspase-3及活化的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleavePARP)蛋白表达水平升高,抗凋亡蛋白磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)及Bcl-2表达水平降低,说明橙皮苷激活了AGS细胞中的MAPK信号通路及线粒体依赖性凋亡。结论橙皮苷对AGS细胞具有良好的杀伤作用,并通过提高AGS细胞内活性氧水平,进而调控MAPK信号通路来诱导AGS细胞发生线粒体依赖性凋亡。     

紫草素通过激活活性氧自由基诱导大肠癌细胞的凋亡

目的:研究紫草素通过激活活性氧(ROS)自由基诱导大肠癌细胞凋亡的作用机制.方法:通过MTT测定法检测紫草素对人结肠癌细胞系HCT116和SW480细胞活力的影响,结合Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒及流式细胞术检测细胞凋亡情况;通过Caspase 3/9活性测定试剂盒检测半胱天冬酶活性,使用ROS检测...     

活性氧在血小板活化和凋亡中的作用机制研究进展

血小板在血栓与出血性疾病的发生中起重要作用。当血管内皮细胞受到损伤或在病理性血流高剪切力作用下,血小板通过膜表面的各种受体启动信号转导途径,引起血小板活化。活化的血小板相互聚集成团,形成血小板血栓,因此,血小板活化在生理性止血和病理性血栓形成过程中起关键作用。近年来,血小板凋亡逐渐引起研究者的关注。目前,血小板活化和凋亡的分子机制还未完全阐明。很多研究已证实,各种能诱导血小板活化或凋亡的刺激物,能诱导血小板产生活性氧(ROS),ROS在血小板活化和凋亡中的作用正逐渐引起研究者的关注。文章将主要综述ROS在血小板活化和凋亡中作用的最新研究进展。     

双氢青蒿素通过调节凋亡相关蛋白的表达及活性氧的产生而抑制胰腺癌JF-305细胞的增殖

探讨双氢青蒿素诱导人胰腺癌JF-305细胞凋亡作用及活性氧在双氢青蒿素诱导JF-305细胞凋亡中的作用。采用MTT法考察不同浓度双氢青蒿素对人胰腺癌JF-305细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期,Hochest 333258荧光染色法观察细胞凋亡形态,Annexin V荧光染色法检测JF-305细胞凋亡的变化,DCFH-DA检测凋亡过程中活性氧(ROS)的变化。Western blot检测细胞内Bax,Bcl-2,Cleaved caspase-3,Cleaved caspase-9和Cyto C蛋白表达的变化。与对照相比,双氢青蒿素作用JF-305细胞48 h,细胞增殖受到明显抑制(P0.05);细胞被阻滞于G2/M期;细胞出现核浓缩聚集、碎裂的凋亡形态,细胞凋亡比例升高(P0.05);DCFH-DA检测双氢青蒿素给药组细胞ROS明显升高(P0.05);Western blot结果显示,双氢青蒿素作用后细胞内Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调,Bax/Bcl-2蛋白表达比例升高,Cleaved caspase-3,Cleaved caspase-9和Cyto C蛋白表达升高。双氢青蒿素能诱导JF-305细胞凋亡,其凋亡过程可能与ROS的生成增加相关。     

中药诱导肺癌细胞凋亡的研究进展

细胞凋亡（apoptosis）又称程序性细胞死亡（programmedcelldeath,PCD）,是个体发育过程中基因调控下的细胞自杀活动,是多细胞有机体为调控机体发育、维护内环境稳定,由基因编码程序的细胞主动死亡过程。可以说细胞凋亡是“为生而死”,是生命体适应环境而生存的一种重要机制。细胞凋亡的分子机制迄今尚未完全阐明,     

龙葵碱调控还原型谷胱甘肽和活性氧氧化还原体系损伤线粒体超微结构诱导HepG2细胞凋亡

目的 探讨龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡与线粒体损伤的关系.方法 倒置显微镜观察细胞形态,Annexin V/PI 双染激光共聚焦扫描显微术检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡率.透射电镜观察细胞线粒体超微结构,CDFH-DA染色激光共聚焦扫描显微术检测活性氧(ROS)相对量,比色法检测还原型谷胱甘肽(GSH)量.结果 龙葵碱组HepG2细胞贴壁细胞数量减少,部分出现死亡.Annexin V/PI双染激光共聚焦扫描显微镜下观察发现龙葵碱组细胞Annexin V-FITC高染,细胞膜呈绿色荧光;PI低染,细胞核呈红色荧光,呈现明显的早期凋亡特征.流式细胞术分析0.4、2、10 μmol/L龙葵碱作用HepG2细胞24 h后,早期凋亡率分别为4.0%、8.5%、20.1%.透射电镜观察发现龙葵碱作用HepG2细胞24 h,细胞线粒体超微结构出现肿胀,嵴排列紊乱、嵴消失,重度空泡样变性等变化;细胞内ROS水平升高,GSH的水平降低.结论 龙葵碱通过降低HepG2细胞内GSH量,使ROS不能被及时清除而损伤线粒体结构,导致HepG2细胞凋亡.     

基于活性氧机制的叶黄素诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究

目的探讨叶黄素对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制效应及其凋亡机制。方法通过SRB法、Hoechst33342/PI荧光染色法观察叶黄素对胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用及诱导凋亡机制,并采用荧光分析法检测叶黄素作用SGC-7901细胞后细胞内ROS的变化。结果 40mg/L的叶黄素作用SGC-7901细胞24,48,72 h的抑制率分别是(8.57±2.43)%、(25.07±2.90)%和(32.33±1.81)%;160mg/L的叶黄素作用SGC-7901细胞的抑制率上升为(34.72±4.06)%、(64.55±2.48)%和(83.29±0.10)%。Hoechst33342/PI荧光染色法检测细胞的凋亡情况,对照组显示低蓝光低红光,40mg/L部分显示高蓝光低红光,80 mg/L大部分显示高蓝光低红光,160 mg/L的大部分显示低蓝光高红光;荧光分光光度计检测叶黄素作用胃癌SGC-7901细胞后细胞内ROS的活性变化,结果显示随着叶黄素浓度的升高,细胞内ROS的活性降低(P<0.01)。结论叶黄素对胃癌SGC-7901细胞的生长抑制以及诱导其凋亡的分子机制,可能是通过降低细胞内ROS的活性所介导的。     

紫草素诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡机制的探讨

目的:研究紫草素诱导人前列腺癌细胞(PC-3)凋亡及其作用机制。方法:以PC-3细胞为研究对象,以不同浓度的紫草素处理PC-3细胞,另设空白组,处理不同时间后,分别采用噻唑蓝(MTT)法检测紫草素对PC-3细胞增殖抑制情况;显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和磷酸化-细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达。结果:不同浓度的紫草素对PC-3细胞的生长抑制呈时间和剂量依赖性;形态学观察结果显示紫草素作用PC-3细胞后可使细胞变圆,脱落,皱缩,细胞内出现空泡,周围出现凋亡小体;与空白组比较,不同浓度的紫草素明显升高Caspase-3和Bax蛋白的表达,明显降低Bcl-2蛋白的表达,不同浓度的紫草素作用细胞48 h后可诱导细胞产生ROS,ROS清除剂二硫苏糖醇(DTT)可以明显逆转紫草素诱导的PC-3细胞的生长抑制率,且0.2 mmol·L-1DTT可以抑制由紫草素诱导的Caspase-3和ERK1/2的活化。结论:紫草素通过ROS/ERK1/2信号通路诱导人前列腺癌PC-3细胞发生凋亡。     

中药诱导白血病细胞凋亡的实验研究进展

综述了现代医学用观测细胞凋亡的方法来研究中药对白血病细胞的作用，观察发现很多中药提取物或单体有明显的体外促进白血病细胞凋亡的作用。     

活性氧在δ-榄香烯诱导人结肠腺癌DLD-1细胞凋亡中的作用研究

目的探讨δ-榄香烯诱导人结肠腺癌DLD-1细胞凋亡的机制以及活性氧（reactive oxygen species,ROS）在δ-榄香烯诱导人结肠腺癌细胞DLD-1凋亡中的作用。方法采用MIT法考察了δ-榄香烯对人结肠腺癌DLD-1细胞和人正常肝胚胎WRL-68细胞增殖的影响;采用氯甲基二氯荧光素二乙酸酯（CM—H2DCFDA）定量检测凋亡过程中ROS的变化;流式细胞术JC-1标记检测凋亡细胞中线粒体膜电位（△φm）的影响。结果δ-榄香烯明显抑制DLD-1细胞的增殖,对WRL-68细胞的细胞毒作用不明显。200μM的δ-榄香烯作用DLD-1细胞1小时、3小时和6小时所引起的ROS含量的增加,分别接近空白对照组的7．8倍、18．2倍和21．8倍;这种作用可以被谷胱甘肽（glutathione,GSH）（ROS的清除剂）显著性抑制,即加入GSH后δ-榄香烯对ROS生成率（3．46％）与空白对照（2．11％）相比无显著性差异。流式细胞仪检测结果表明,线粒体膜电位（△φm）的降低呈时间依赖性,6小时、12小时、24小时线粒体膜电位降低量分别是空白组的（2．24±0．12）倍,（2．85±0．33）倍,（5．11±0．24）倍。结论△φm的降低表明δ-榄香烯的抗肿瘤作用是以诱导肿瘤细胞凋亡的方式产生的,且其凋亡过程提示可能与ROS的生成增加相关。     

中药诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展

介绍了近年来中药对细胞凋亡的影响及研究进展。细胞死亡是人们很早注意到的现象。早在1972年Kell首先提出了有别于一般死亡意义的一种新的概念一凋亡(apoptosis),引用发育学的术语来描述细胞死亡过程又称为程序化细胞死亡(Programmed cell death,PCD)。它们的概念有别于细胞受到严重损伤后发生的死亡即坏死(necrosis)细胞凋亡的重大意义在于发现了正常细胞的死亡是一种主动自杀过程,对探索细胞间死亡与增殖的精确平衡及其调控的分子机制有划时代的意义。近年来此项研究取得迅速的发展并取得一定进展。中药对肿瘤细胞凋亡的作用研究也有一定成果。