体外诱导兔骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞的实验研究

目的：研究兔骨髓间充质干细胞（BMMSCs）向软骨细胞分化的潜能。方法：将兔髂骨骨髓液进行原代和传代培养，以高糖DMEM无血清特定培养液诱导（含TGF-β2 10ng／ml、地塞米松7mol／L-10mol／L、维生素C50μmol／L），相差显微镜下观察细胞形态变化，免疫组织化学染色检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达。结果：BMMSCs诱导后细胞体外扩增能力显著降低，细胞形态由成纤维样细胞梭形向多角形、多边形或类圆形转变，诱导21天后细胞形态变化最为显著，Ⅱ型胶原免疫组化染色深而均匀。结饿在适当条件下，体外培养的BMMSCs可定向诱导分化为软骨细胞。     

Pellet培养与纤维蛋白凝胶支架体外成软骨能力的比较

目的比较Pellet培养和纤维蛋白凝胶支架两种培养方式诱导脂肪干细胞向软骨细胞分化及合成细胞外基质的差异。方法人脂肪组织酶消化分离脂肪干细胞,培养基为DMEM含10%胎牛血清,利用Pellet培养和纤维蛋白凝胶支架两种培养体系将P3代脂肪干细胞诱导成软骨后21天取材进行苏木精-伊红染色,番红O染色,DMMB法测定胞外基质中GAG含量,荧光定量PCR测定Ⅱ型胶原基因表达。结果苏木精-伊红染色与番红-O染色显示,纤维蛋白凝胶实验组软骨细胞外基质大量分泌,并融合成片,说明纤维蛋白凝胶支架可更好促进干细胞成软骨分化、维持软骨细胞表型。GAG/DNA结果显示,纤维蛋白凝胶组促GAG分泌的能力优于其余各组(P0.05),其Ⅱ型胶原m RNA表达的能力也最强(P0.05)。结论利用纤维蛋白凝胶支架诱导人脂肪干细胞成软骨分化的能力优于无支架的Pellet三维培养体系。     

人骨肉瘤组织中I、II和III型胶原基因的表达

目的　研究人骨肉瘤组织中I、II和III型胶原蛋白和mRNA的表达及其与骨肉瘤分型和分化的关系。方法　用饱和苦味酸 天狼星红 偏振光镜、免疫组化LSAB和原位杂交法检测 4 6例人骨肉瘤组织中I、II和III型胶原蛋白和mRNA的表达 ,E MAL 2 0 0真彩图像分析系统进行分析和半定量测定。结果　骨肉瘤组织中不仅有I型胶原蛋白的表达 (阳性率 87% ,灰度值171.99± 14 .74 ) ,且出现了II型和III型胶原蛋白 (阳性率分别为 30 .4 %和 4 3.4 % ,灰度值分别为 15 3.0 7± 18.82和 16 8.2 9± 18.36 ) ;II型胶原在软骨母细胞型和混合型的表达明显高于其它型 (P <0 .0 1) ,而I、III型胶原的表达在各型骨肉瘤间差异无显著性 ;高、中、低三组不同分化程度的骨肉瘤I型胶原表达阳性率和灰度值分别为 10 0 % ,15 7.38± 5 .4 9;83.33% ,173.5 8± 12 .6 1;76 .92 % ,186 .5 9± 6 .92 ;三组间差异有显著性 (P <0 .0 1) ,分化越低表达越少 ;天狼星红与免疫组化染色结果基本一致。I、II型胶原mRNA原位杂交与蛋白免疫组化所得结论基本一致。结论　II型胶原可作为软骨母细胞型和混合型骨肉瘤的分型参考指标 ,I型胶原的表达可作为骨肉瘤分化及恶性度判断的参考指标。天狼星红染色是鉴别I、III型胶原简便、经济的方法之一。     

Snail基因在不同分化程度胃癌细胞中的表达及其意义

目的探讨Snail基因在不同分化程度人胃癌细胞中的表达及意义。方法分别以0ng/ml、5ng/ml、10ng/mlTGF-β1处理未分化、低分化、中分化的人胃癌细胞株,RT-PCR法测定Snail基因的表达。结果在0ng/ml浓度TGF-β1刺激下,不同分化程度人胃癌细胞SnailmRNA表达有显著性差异,随着肿瘤分化程度的降低,SnailmRNA表达水平增高;在5ng/ml浓度TGF-β1刺激下,不同分化程度人胃癌细胞SnailmRNA表达有显著性差异,随着肿瘤分化程度的降低,SnailmRNA表达水平增高;在10ng/ml浓度TGF-β1刺激下,不同分化程度人胃癌细胞SnailmRNA表达有显著性差异,随着肿瘤分化程度的降低,SnailmRNA表达水平增高。结论 Snail在分化程度越低的胃癌细胞中表达水平越高,Snail可以作为判断肿瘤恶性程度的辅助标志。     

不同分离方法对骨髓基质干细胞成软骨分化的影响

目的探讨分离骨髓基质干细胞（BMSCs）的两种基本方法-贴壁分离法和密度梯度离心法对BMSCs成软骨分化能力的影响。方法抽取兔双侧股骨骨髓，等分，一份（A组）用贴壁分离法，另一份（B组）用密度梯度离心法分离BMSCs，倒置显微镜观察BMSCs的生长情况，选择两组同代的BMSCs，用TGF-β1诱导其向软骨方向分化。诱导后的细胞用免疫组化检测Ⅱ型胶原表达情况，用原位杂交检测Ⅱ型胶原mRNA表达情况，最后计算两种检测方法的细胞阳性率。结果A、B两组细胞经TGF—β1诱导后，Ⅱ型胶原免疫组化阳性率分别为76．1％和77．7％，Ⅱ型胶原mRNA原位杂交阳性率分别为70．3％和71．0％。结论贴壁分离法和密度梯度离心两种分离方法对BMSCs的生长和成软骨分化无显著差别。     

单细胞克隆肝癌干细胞向间充质样细胞的分化潜能

探讨单细胞克隆肝癌干细胞（liver cancer stem cell,LCSCs）向间充质样细胞分化的潜能。方法：通过有限稀释法获得单个细胞来源的LCSC克隆,采用RT-PCR法鉴定干细胞标志物;将该单细胞克隆分别用成骨、软骨和脂肪诱导分化培养基培养3周后,采用Real-time PCR及特殊染色技术比较诱导前后LCSC表达成骨、软骨及脂肪细胞特异标志物的差异。结果：单细胞克隆的LCSC表达多种干细胞标志物、干细胞因子（stem cell factor,SCF）、干细胞因子受体、C-kit、巢蛋白（nestin）、CD34、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2（ATP-binding cassette sub-family G member 2,ABCG2）、CD133。分化诱导培养3周后,成骨方向诱导的细胞茜素红染色呈现橘红色钙结节形成,软骨方向诱导的细胞阿尔新蓝染色显示蓝色蛋白多糖沉积,脂肪方向诱导的细胞油红O染色显示大量脂滴形成。Real-time PCR结果显示,诱导后成骨细胞特异标志物骨钙素和Ⅰ型胶原、软骨细胞特异标志物蛋白聚糖和Ⅱ型胶原、脂肪细胞特异标志物脂联素和过氧化物酶体增殖物激活受体γ的mRNA表达均较对照组显著上调（Ⅰ型及Ⅱ型胶原间为P<0.05,其他指标间均为P<0.01）。结论：LCSC具有可塑性,在特定的微环境下具有向间充质样细胞分化的潜能。     

注射型支架与脂肪源性干细胞复合成软骨的研究

目的探讨在特定的软骨细胞诱导培养液中,由纤维蛋白和硫酸软骨素复合所构建的新型注射型支架材料对脂肪源性干细胞向软骨细胞分化的影响。方法分离兔脂肪干细胞,分别种植在纤维蛋白与纤维蛋白和硫酸软骨素复合的两种胶体支架材料上,并在特定软骨诱导液中培养14d。应用MTT检测细胞增殖,生化方法检测硫酸软骨素的含量,RT—PCR检测Ⅱ型胶原的表达,形态学染色和扫描电镜观察细胞形态及细胞与支架材料的生物相容性。结果脂肪源性干细胞在纤维蛋白与纤维蛋白和硫酸软骨素复合的两种胶体支架材料上均呈现出软骨细胞的表型,较之单纯的纤维蛋白载体,由纤维蛋白和硫酸软骨素复合所构建的新型注射型支架材料更有利于脂肪源性干细胞增殖与表达硫酸软骨素和Ⅱ型胶原等软骨细胞表型,向软骨细胞分化。结论纤维蛋白和硫酸软骨素复合所构建的新型注射型支架材料具有促进脂肪源性干细胞向软骨细胞分化的作用,并表现出可能应用于关节软骨修复的潜在价值。     

转化生长因子-β、碱性成纤维生长因子和血小板衍生生长因子在骨折愈合中的表达

目的观察转化生长因子-β（TGV-β）、碱性成纤维生长因子（bFGF）和血小板衍生生长因子（PDGF）在骨折愈合中的表达和分布情况,进而探讨其作用机制。方法选用SD大鼠制作胫骨骨折愈合模型,伤后不同时期处死取材,分别进行组织学和TGF-β、bFGF和PDGF免疫组化染色观察。结果伤后3天开始形成原始骨痂。1周时肉芽组织中的间质细胞开始分化为软骨细胞,软骨形成后再进行软骨内化骨。4周时形成连接骨折端的桥接骨痂。伤后早期血肿中炎性细胞表达bFGF、PDGF。伤后1周骨膜增殖细胞、肉芽组织中的成纤维细胞、内皮细胞、骨端骨细胞以及原始骨痂成骨细胞表达TGF、bFGF和PDGF。伤后2周软骨细胞表达TGF-β、bFGF和PDGF。结论TGF、bFGF和PDGF有着各自的表达和分布特点,并共同调节骨原细胞的增殖和成骨细胞、软骨细胞的分化,最终完成骨折愈合。     

TGF-β1诱导HL-60细胞凋亡及TIEG1,Bcl-2/Bax的表达变化

目的:研究TGF-β1诱导HL-60细胞凋亡后TIEG1及Bcl-2/Bax的表达变化。方法:用不同浓度的TGF-β1处理HL-60细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率。用10.4 ng/ml TGF-β1处理HL-60细胞,以流式细胞仪检测细胞凋亡,以RT-PCR方法检测TIEG1、Bcl-2及Bax的表达。结果:TGF-β1对HL-60细胞具有增殖抑制作用,其抑制效应呈时间及剂量依赖性。10.4 ng/ml TGF-β1增殖抑制作用较为明显。在细胞凋亡过程中,TIEG1、Bax表达呈升高趋势,而Bcl-2呈下降趋势。结论:TGF-β1可以抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡,且呈时间、剂量依赖性。在TGF-β1诱导HL-60细胞凋亡的过程中,TIEG1表达逐渐加强,与HL-60细胞凋亡呈负相关。Bcl-2/Bax与TGF-β1诱导HL-60细胞的凋亡相关,且与TIEG1的表达有相关性。     

人骨髓间充质干细胞多向分化的诱导与鉴定

目的探讨人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)体外多向分化的潜能,为体内移植实验提供种子细胞。方法采用全骨髓贴壁培养法,分离、自制无血清培养基培养hBMSCs;取生长良好的P4代hBMSCs,免疫荧光法检测其表面抗原CD34、CD44和CD105的表达;应用含不同诱导剂的培养基进行诱导培养,油红O染色检测成脂诱导分化,茜素红染色鉴定成骨细胞诱导分化,阿利新蓝染色检测成软骨诱导情况。结果 hBMSCs表面抗原CD44、CD105呈阳性,CD34呈阴性;经过诱导培养,油红O染色、茜素红染色以及阿利新蓝染色均呈阳性。结论分离培养的hBMSCs能够分化为成脂细胞、成骨细胞和软骨细胞,说明hBMSCs具有多向分化的潜能,可以作为体内移植实验较为理想的种子细胞。     

整合素与软骨细胞去分化

正构建组织工程化软骨常常需要体外扩增软骨细胞。骨但是,软骨细胞在体外培养、扩增过程中常发生去分化((dedifferentiation)而丧失细胞表型~([1]),导致再生软骨中1II型胶原、氨基葡萄糖(GAG)合成减少,易发生退变。区目前有关去分化的具体机理尚未阐明,但以往的研究表短明去分化主要与体外扩增的软骨细胞缺乏细胞与细胞外结基质(extracellular matrix,ECM)之间有效的信号刺激有高关~([2-3])。Integrin(整合素)作为细胞膜上的一种跨膜糖蛋半     

TGF-β2通过基质金属蛋白酶通路影响胶质瘤干细胞的侵袭能力

目的： 研究TGF-β2对胶质瘤干细胞侵袭能力的影响及其可能机制。 方法： 收集2016年4月至2017年4月中国医科 大学附属第一医院神经外科手术切除的8例人多形性成胶质细胞瘤组织标本,通过胰蛋白酶消化法进行胶质瘤细胞原代培养,部 分胶质瘤细胞加入含有EGF、bFGF、B27的DEME/F12培养基中进行无血清培养获得悬浮生长的肿瘤细胞球,免疫荧光染色及分 化实验验证肿瘤球是否为胶质瘤干细胞。ELISA方法检测胶质瘤干细胞分泌TGF-β2的水平,转染TGF-β2 siRNA后应用Tran- swell方法检测TGF-β2对胶质瘤侵袭能力影响,Western blotting检测TGF-β2对胶质瘤干细胞中基质金属蛋白酶（matrix metallo- proteinase,MMP）表达影响。 结果： 通过免疫荧光染色及分化实验证明原代培养的悬浮生长肿瘤细胞球为胶质瘤干细胞,肿瘤 细胞球表达CD133,在含血清培养基中可以分化为神经元和胶质细胞。胶质瘤干细胞比原代培养的胶质瘤 TGF-β2 分泌水平 明显升高[(74.13±3.63) vs (46.13±2.61) pg/ml, P<0.05]。沉默 TGF-β2 可以降低胶质瘤干细胞侵袭细胞数[(105.71±8.69) vs (63.67±5.93)个,P<0.05],并抑制MMP-2和MMP-9表达（均P<0.05）。 结论： TGF-β2 通过 MMP-2 和 MMP-9 通路增强胶质瘤 干细胞的侵袭能力。     

Gli-1信号通路对TGF-β1诱导的人胃癌细胞上皮间质转化和侵袭的影响

目的:探讨核转录因子神经胶质瘤关联癌基因同源物1（glioma associated oncogene homolog 1,Gli-1）对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人胃癌SGC-7901细胞发生上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的作用机制。方法:体外采用10 ng/ml TGF-β1对胃癌SGC-7901细胞进行处理,使用倒置显微镜观察细胞形态变化,RT-PCR和Western blot检测EMT上皮表型蛋白E-cadherin和间质表型蛋白Vimentin的表达水平;Transwell细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力变化,检测TGF-β1 对SGC-7901细胞发生EMT 的影响;同时采用RT-PCR和Western blot检测Gli-1的mRNA和蛋白表达水平。随后进一步采用Gli-1基因特异性阻断剂GANT 61阻断Gli-1表达,并使用TGF-β1（10 ng/ml）对SGC-7901细胞进行处理,RT-PCR 和Western blot检测Gli-1、E-cadherin和Vimentin mRNA 及其蛋白表达水平的改变,并使用Transwell细胞侵袭实验检测阻断Gli-1对SGC-7901细胞侵袭能力的影响。结果:TGF-β1可以诱导人胃癌SGC-7901细胞发生上皮间质转化并促进细胞侵袭。TGF-β1可以在mRNA和蛋白水平下调上皮表型蛋白E-cadherin的表达、提高Gli-1和间质表型蛋白Vimentin的表达。TGF-β1可以明显提高SGC-7901细胞侵袭,而阻断Gli-1后可以抑制TGF-β1诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化和细胞侵袭。结论:胃癌SGC-7901细胞中Gli-1 可能参与TGF-β1 介导的EMT 的发生,Gli-1 可能作为胃癌基因治疗中的有效靶点发挥作用。     

TGF-β1诱导乳腺癌细胞上皮-间充质转化中相关miRNAs筛选

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)诱导乳腺癌细胞MCF-7上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的最佳浓度以及miRNAs在其中的差异表达.方法:不同浓度的TGF-β1作用于MCF-7细胞48h,光学显微镜下观察MCF-7细胞形态学的变化,同时Real-time PCR检测MCF-7细胞中上皮和间充质标志物表达变化;进一步利用Real-time PCR对通过生物信息学挑选的差异表达的miRNAs进行验证.结果:10ng/ml的TGF-β1作用MCF-7细胞48h后,能诱导MCF-7细胞发生EMT转化,同时筛选出与EMT密切相关的4个miRNAs(miR-16,miR-196a,miR-196b和miR-21).结论:miR-16、miR-196a、miR-196b和miR-21在TGF-β1诱导的EMT细胞模型中表达上调,发现这4个miRNAs与TGF-β1诱导的EMT密切相关.     

腺病毒介导HIF-1α修饰的脂肪源性干细胞异位成软骨的研究

目的 探讨重组腺病毒介导的低氧诱导因子-1α (HIF-1α)基因转染对脂肪源性干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)异位成软骨的作用.方法 构建能介导HIF-1α基因转染和表达的腺病毒载体(Ad-HIF-1α-GFP),转染体外培养的ASCs,RT-PCR检测其HIF-1α基因的表达,同时检测转染后细胞II型胶原的表达.随后将纤维蛋白胶分别与Ad-GFP-ASCs和Ad-HIF-1α-GFP-ASCs复合种植在裸鼠皮下,4周后行HE染色和甲苯胺蓝(Toluidine blue)染色进行观察.结果 荧光显微镜观察证实Ad-HIF-1α-GFP-ASCs的转染效率可达到80%;RT-PCR检测结果显示Ad-GFP-ASCs组微弱表达HIF-1α,Ad-HIF-1α-GFP-ASCs组HIF-1α基因则高表达,且Ad-HIF-1α-GFP-ASCs组II型胶原表达量明显高于Ad-GFP-ASCs组(P＜0.05);形态学染色表明Ad-HIF-1α-GFP转染的ASCs主要为圆形,细胞伸展比率较低,但细胞数目较多,且细胞分泌较多的蛋白多糖.结论 腺病毒介导的HIF-1α可诱导ASCs向软骨细胞分化.     

TGF-β1通过SMAD非依赖途径诱导胃癌细胞fascin1基因表达的研究

目的 转化生长因子-β1(TGF-β1)对转移相关基因fascin1表达的作用及机制的研究.方法 以胃癌细胞系MKN45为研究对象,采用蛋白质印迹法检测TGF-β1(10 ng/ml)不同作用时间fascin1表达变化.瞬时转染SMAD2和SMAD4的干扰小RNA(siRNA),检测SMAD依赖信号通路在TGF-β1诱导fascin1表达中的作用.应用ERK、JNK和p38信号通路的特异性阻断药,检测SMAD非依赖途径是否参与TGF-β1诱导fascin1表达.结果 TGF-β1(10 ng/ml)作用MKN45细胞24、48 h后,fascin1表达水平明显高于未处理前(0 h),差异有统计学意义(P﹤0.05).RT-PCR和蛋白质印迹瞬时转染SMAD siRNA,SMAD2和SMAD4基因表达下调,而HK几乎不影响SMAD2和SMAD4基因表达.有效地抑制SMAD2和SMAD4表达后,TGF-β1处理对fascin1表达无明显影响.ERK和JNK信号通路的特异性阻断药PD98095和SP600125处理MKN45细胞后,TGF-β1诱导fascin1表达的作用明显降低;而p38信号通路的特异性阻断药SB203580作用前后,TGF-β1对fascin1表达无明显影响.结论TGF-β1可以通过ERK和JNK信号通路调节转移相关基因fascin1的表达.     

C-藻蓝蛋白抑制TGF-β1诱导的宫颈癌Caski细胞上皮-间充质转化

目的：探究C-藻蓝蛋白（C-phycocyanin,C-PC）对转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1,TGF-β1）诱导的 宫颈癌Caski细胞上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）的影响。方法：根据处理方法不同将Caski细胞分为 3组即10 ng/ml TGF-β1处理组、 10 ng/ml TGF-β1+300 μg/ml C-PC共处理组和对照组（未加药处理）,处理24 h后观察细胞的形态 变化;采用划痕实验及Transwell实验分别检测TGF-β1和C-PC对Caski细胞迁移和侵袭的影响;Western blotting方法检测C-PC 对TGF-β1诱导的Caski细胞上皮表型标志蛋白E-cadherin、间质表型标志蛋白N-cadherin表达水平的影响;qPCR 法检测间质表 型相关锌指转录因子Snail、Zeb1、Twist mRNA的表达。结果：TGF-β1处理组Caski细胞失去原有的上皮表型的特征, 而TGF-β 1+C-PC共处理组细胞保持正常的上皮表型的特征;TGF-β1处理组Caski细胞的迁移率[（60.0±1.4） % vs（33.5±2.2） %、（40.0± 2.8） %, 均P<0.05]和侵袭穿膜细胞数[（108.2±6.2）vs（25.2±3.1）、（39.8±5.4）个, 均P<0.01]较共处理组和对照组显著升高;与对照 组相比,TGF-β1处理组Caski细胞中E-cadherin表达显著降低（P<0.05）,Twist、Snail、Zeb1的mRNA表达水平显著升高（P<0.01）, 而加入C-PC共处理可逆转上述改变（P<0.05或P<0.01）,同时显著降低N-cadherin的蛋白表达水平（均P<0.05）。结论：C-PC处 理能够抑制TGF-β1诱导的Caski细胞侵袭转移能力进而影响EMT过程,其机制可能与C-PC处理降低Twist、Snail、Zeb1的 mRNA表达有关。     

IL-10和TGF-β介导的生物学治疗犬椎间盘退变的体外实验研究

目的探索利用细胞因子抑制退变椎间盘细胞释放炎症因子的生物学机制及作用,评价IL-10和TGF-β抑制退变椎间盘细胞释放炎症因子的有效性。方法建立6条1岁龄比格犬针刺退变模型,6周后处死动物取出退变椎间盘髓核组织,体外分离培养,将培养的退变髓核细胞分为4组:20 ng/ml IL-10治疗组,20 ng/ml TGF-β治疗组,20 ng/ml IL-10联合20 ng/ml TGF-β治疗组及未治疗组,正常髓核细胞作为对照组。采用ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)和real-time PCR检测IL-10和TGF-β对细胞炎症因子蛋白水平与基因水平表达量的影响。结果检测未治疗组髓核细胞高表达炎症因子,而采用IL-10和TGF-β的组别炎症因子的表达受到了明显的抑制。IL-10和TGF-β能够阻断退行性椎间盘细胞产生的炎性细胞因子的级联反应和椎间盘细胞炎症反应的发展。结论 IL-10和TGF-β能够稳定地抑制椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)中IL-1β和TNF-α的表达,有介导治疗IDD的应用前景。     

IHH信号转导与骨关节炎患者软骨代谢的研究进展

正骨关节炎(osteoarthritis,OA)是关节软骨的局部损伤和丢失、异常重塑和磨损、局部炎症等一系列病理改变导致的退行性变[1]。关节软骨是覆盖于关节的表面的一层透明软骨,大约由5%软骨细胞和95%基质构成,基质以蛋白多糖凝胶以及II型胶原为主,有着承受机械负荷、润滑关节、防止磨损等重要作用[2]。成人关节软骨细胞处于一种"生长停滞状态",当OA发生时,软骨细胞出现了一种类似于软骨内成骨的分化过程:软骨细胞肥大、终末分     

NPM1 A型突变体对TGF-β1诱导K562细胞增殖及AKT磷酸化的影响

  目的  观察核仁磷酸蛋白（nucleophosmin 1,NPM1）A型突变体过表达对TGF-β1诱导的K562细胞增殖及AKT磷酸化的影响。  方法  腺病毒载体（Ad5－NPM1）转染髓系白血病K562细胞建立过表达NPM1蛋白细胞株;应用Western blot法及ELISA法分别检测细胞NPM1蛋白表达及上清液含量,Western blot法检测K562细胞NPM1、AKT和P-AKT蛋白表达,MTT法检测细胞增殖。  结果  K562细胞NPM1蛋白表达水平呈Ad5-NPM1转染复数[（multiplicity of infection,MOI）:30-200]依赖性增加,与空载组（Ad5-vector-100）相比,Ad5-NPM1-30、Ad5-NPM1-100组K562细胞及细胞上清液NPM1蛋白水平均显著增高（P < 0.01）。TGF-β1（10 ng/mL）能够诱导K562细胞AKT蛋白磷酸化,但对总AKT水平无明显影响。TGF-β1（10 ng/mL）+Ad5-NPM1-100组K562细胞P-AKT水平显著高于TGF-β1处理组（P < 0.05）,各组总AKT水平无显著差别（P>0.05）。与空白对照组（CT）相比,TGF-β1（10 ng/mL）处理可促进K562细胞增殖;但TGF-β1（10 ng/mL）+Ad5-NPM1-100组细胞的增殖水平明显高于TGF-β1处理组（P < 0.01）。  结论  NPM1可促进TGF-β1诱导的K562细胞增殖。NPM1促进TGF-β1诱导的K562细胞可能与AKT磷酸化有关。