由Hb H病和重型β地中海贫血引起的一个罕见中间型地中海贫血病例及其产前诊断应用

目的 分析1例中间型地中海贫血(地贫)患者的基因型与表型的关系,探索进行重症β地贫复合血红蛋白H病这类复杂基因型组合方式的产前诊断临床实践.方法 表型检测采用标准的血液学分析技术测量红细胞参数和血红蛋白组分.采用反向点杂交技术诊断β地贫基因突变,采用缺口聚合酶链反应技术检测α地贫缺失突变.通过基于家系调查的表型与基因型分析探讨该病例的发病机制.利用羊水细胞DNA对该家系1例地贫高风险胎儿进行产前基因诊断.结果 先证者诊断为β0/β 地贫(βCD17A＞T/βIVS2-654C＞T)双重杂合子复合血红蛋白H病(--SEA/-α4.2)的偏重的中间型地贫患儿,其父母分别为β地贫杂合子合并轻型α地贫和β地贫杂合子合并静止型α地贫个体.在此基础上,我们对该家庭的地贫高风险胎儿进行了产前基因诊断,结果显示胎儿的基因型为重症β地贫合并静止型α地贫,通过遗传咨询实施了中止妊娠.结论 首次报道罕见中间型地贫案例,为国内外产前诊断提供可借鉴的临床经验.     

聚合酶链反应技术用于缺失型α—地中海贫血的分子筛查和产前诊断

用血液学方法筛查育龄夫妇８４３２人，检出α－地中海贫血（α－地贫）６４６例，从中随机取出典型阳性样本１００例，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）直接分析法进行基因诊断，结果９６例“标准型”α－地贫和３例血红蛋白（Ｈｂ）Ｈ病的ＤＮＡ样品均可检测到（－－ＳＥＡＩ）突变，另１例α－地贫复合ＨｂＱ样品未检测到该突变。此外，采用本法完成了７个重症α－地贫高风险胎儿的产前诊断。     

771例α地中海贫血产前基因诊断

目的：对可能生育α地中海贫血(地贫)高危胎儿的夫妇进行产前基因诊断。方法：通过绒毛膜穿刺、羊膜腔穿刺及脐带血穿刺获取胎儿DNA,应用聚合酶链反应(PCR)等方法进行α地贫产前基因诊断,并于分娩后取胎儿脐带血检测Hb Bart's含量。结果：771对夫妇的胎儿检出Hb Bart's胎儿水肿综合征73例,HbH病47例,东南亚(SEA)缺失型α地贫-1杂合子251例,α地贫-2(-α^3,7,-α^4,2。缺失型或非缺失型Hb CS)杂合子85例,α珠蛋白基因正常315例,及2例纯合子α地贫2。胎儿合并重型β地贫21例,轻型β地贫45例。误诊HbH病1例。结论：广西地区α地贫携带者夫妇的基因型组合较为复杂,合并β地贫亦较常见。本文所实施的产前基因诊断可有效检出Hb Bart's胎儿水肿综合征、HbH病胎儿,及各种α地贫杂合子。     

用TAUPAGE法对5649例血红蛋白病疑诊者进行珠蛋白肽链分析

目的：报据血红蛋白肽链分析签定各种血红蛋白病并评价现行的血红蛋白分析方法。方法：应用Tritonx--100／尿酸／聚丙烯酰胺凝胶电泳(TAUPAGE)结合醋纤膜电泳(CAE)(pH8．6)等5顶常规实验对5 649例标本进行分析。结果：在血红蛋白5项常规实验分析未检出异常的2 584例标本中，有1 830例检出ζ链，诊断为α地贫1；86例检出潜在性血红蛋白，为异常血红蛋白；2268例β地贫中有334例检出ζ链，为β地贫复合α地贫1双重杂合体，其中有2例复合异常血红蛋白并检出ζ链，为血红蛋白病三重杂合体；同时可从电泳凝胶上观察各种肽链含量的变化情况，诊断出β^0、α^0纯合子地贫。结论：①TAUPAGE结合醋纤膜电泳等5项实验可提高血红蛋白病的检出率；②对检出α地贫l基因携带者和潜在性血红蛋白有特异性；②能检出血红蛋白病的双重杂合体和三重杂合体，对血红蛋白病高发区的诊断、治疗、预防提供了重要的科学实验依据；④方法简便、价廉，适用于临床一般实验室。     

中间型β地中海贫血的基因诊断

研究中间型β地中海贫血（地贫）的分子缺陷，为中间型β地中海贫血的基因诊断和产前诊断提供科学依据。方法应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交、多重等位基因特异聚合酶链反应（ＭＡＳ－ＰＣＲ）、双链ＤＮＡ循环测序和珠蛋白肽链生物合成速率测定等技术，对１４例中间型β地贫病例进行了血液学、珠蛋白基因（α、β和γ）以及珠蛋白肽链生物合成速率的分析。并对２５０例脐带血的α珠蛋白基因组织进行了鉴定。结果１４例β地贫病人中４例为β地贫杂合子复合右侧和（或）左侧不等交换型α珠蛋白基因增多（ααａｎｔｉ３．７和／或αααａｎｔｉ４．２），３例为β地贫遗传复合体复合α珠蛋白基因减少，１例为β地贫遗传复合体复合γ珠蛋白基因上游启动区－１５８ｎｔＣ→Ｔ的突变杂合子，６例的α和Ｇγ珠蛋白基因未见异常。对２５０例脐带血共５００条染色体的α珠蛋白基因的分析表明，共有８条染色体的α珠蛋白基因异常，占染色体总数的１．６％，其中—ＳＥＡ１条，α－３．７４条，αααａｎｔｉ３．７３条。结论除β地贫基因纯合子或遗传复合体复合α珠蛋白基因缺失外，β地贫基因杂合子复合α珠蛋白基因增多是导致中间型β地中海贫血的又一种重要的分子病因。     

374例新生儿脐带血α-地中海贫血检测结果的报告

作者对本院妇产科３７４例新生儿脐带血作了血红蛋白（Ｈｂ）电泳等分析；发现ＨｂＢａｒｔ′ｓ阳性者５２例，占被检人数１３．９０％，其中壮族检出率１６．１７％；汉族检出率１０．２９％，在检出的５２例中，除３例ＨｂＨ＋ＨｂＢａｒｔ′ｓ外，主要为α－地２杂合子和α－地１杂合子两种类型。提示ＨｂＨ病或ＨｂＢａｒｔ′ｓ胎儿（胎儿水肿综合征）发生的机率增高，同时提出了一些预防措施     

用PCR方法对6例α－地贫家系进行产前检测

用ＰＣＲ方法检测东南亚缺失型α－地贫１－－ＳＥＡ／αα基因的方法对６例α－地贫家系进行胎儿产前检测，结果：１例为Ｂａｒｔ水肿胎儿（死胎），１例为东南亚缺失型α－地贫１基因携带者，其余４例为α－地贫２携带者或正常胎儿。该法简洁、易行、准确性高，为α－地贫早期胎儿诊断及α基因的检测提供一种新方法。     

β-地中海贫血的早期产前诊断

利用人珠蛋白基因簇内限制性内切酶息点的多态性为遗传标志,通过家系分析,成功地完成了四例β-地中海贫血的早期产前诊断。三例利用连锁多态性进行诊断,一为β-地贫纯合子,建议终止妊娠后,用胎儿血的血红蛋白肽链分析证实了这一诊断。一为正常或β-地贫杂合子,排除了β-地贫纯合子。另一例为β-地贫杂合子。第四例经分析与特异等位基因相连锁的DNA多态性证实为β-地贫杂合子。以上三例均建议继续妊娠。     

α和β地中海贫血的羊水产前基因诊断

目的研究单管多重PCR体系检测缺失型α-地中海贫血及反向点杂交法检测β-地中海贫血在产前诊断中的应用价值。方法应用单管多重PCR体系产前检测37例父母均为α-地中海贫血杂合子的风险胎儿的羊水地贫基因及应用反向点杂交法产前检测18例父母均为β-地中海贫血杂合子的风险胎儿的羊水地贫基因。结果37例α-地中海贫血风险胎儿中检出Hb Bart纯合子7例,左缺失型H病3例,右缺失型H病2例。18例β-地中海贫血的风险胎儿检出2例IVS-nt 654/CD41-42双重杂合子,1例IVS-nt 654纯合子。结论应用单管多重PCR体系及反向点杂交法进行α和β地中海贫血产前羊水基因检测,能快速、准确作出诊断,从而预防重症患儿的出生,达到优生目的。     

β地中海贫血基因突变类型的研究及产前诊断

目的 开展β地中海贫血的基因分析及产前基因诊断。方法应用PCR—RDB技术，完成了54例β地贫患者及双亲共216条染色体的基因突变类型及频率数据。并进行8个家庭的8例β地贫高风险胎儿的产前诊断。结果 8例被检胎儿中4例为一种突变类型的杂合子，2例为双重杂合子，2例为正常胎儿。有6例出生后基因分析验证结果与产前诊断完全一致。结论显示，进行产前诊断能较准确地控制重型β地贫患儿出生，对实行优生具有重要意义。     

脐血血红蛋白电泳在产前诊断中的价值

目的探讨脐血血红蛋白电泳在产前诊断中的价值,评估其在经皮脐血取样的质量控制及重型α-地中海贫血的快速诊断中的意义。方法在超声引导下进行经皮脐血取样,将1～2滴待检血液滴入5ml的NaOH溶液中行碱变性法检测（碱变试验）;2ml脐血送血红蛋白电泳检测;③必要时另取2ml脐血送地中海贫血基因诊断。结果235例标本中,232例碱变试验阴性,3例可疑。该3例血红蛋白A（HbA）含量高达95％以上,标本为成人血。17例Bart′s血红蛋白达70％以上,其中16例经基因诊断显示为重型α-地贫东南亚缺失纯合子（--SEA/--SEA）,1例经常规检测测出东南亚缺失杂合子（--SEA/αα）,经进一步检测发现为罕见的东南亚缺失及泰国缺失双重杂合子（--THAI/--SEA）;1例Bart′s血红蛋白含量为38．9％,基因诊断为α-地贫点突变型血红蛋白H病（--SEA/ααQS）;其余214例HbF含量在70．10％～97．20％（平均90．05％）,232例证实为胎儿血。结论血红蛋白电泳检测在经皮脐血取样中不仅可以辨别所取标本是否为胎儿血,还能实现重型α-地中海贫血的快速诊断,并帮助检测出罕见的基因型,避免漏诊。     

血红蛋白H病复合非缺失型遗传性胎儿血红蛋白持续存在综合征44例临床分析

目的：探讨复合非缺失型遗传性胎儿血红蛋白持续存在综合征(nd-HPFH)对血红蛋白H病(Hb H病)的影响。方法：收集2022年1—12月在广西医科大学第一附属医院进行地中海贫血筛查诊断为Hb H病的患者148例，对研究对象进行血常规检查，采用高效液相色谱法进行血红蛋白(Hb)分析；DNA测序方法检测γ-珠蛋白基因突变；荧光PCR熔解曲线法和Gap-PCR法检测α-和β-地中海贫血基因突变。结果：148例Hb H病患者中，检出44例复合nd-HPFH，检出率为29.7%,基因突变类型为^Gγ-158C>T突变杂合子27例，^Aγ-225～-222缺失杂合子13例，^Gγ-158C>T突变纯合子2例，^Gγ-158C>T突变杂合子复合^Aγ-225～-222缺失纯合子1例，^Gγ-158C>T突变杂合子复合^Aγ-225～-222缺失杂合子1例。Hb分析结果显示，1例胎儿血红蛋白(Hb F)升高，为5.3%；血常规检查结果：轻...     

广东省梅州地区地中海贫血的调查报告

目的　调查梅州地区地中海贫血发生的频率及类型 ,为本地区该病的防治及优生优育奠定基础。方法　红细胞渗透脆性两步法、血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳 (pH 8 6CMA缓冲系统 )和血红蛋白一分钟碱变性法。结果　在 62 1 5例中共检出α地贫杂合子 62 3例 ,检出率为 1 0 0 2 % ,检出 β地贫杂合子 1 92例 ,检出率为 3 0 9%。结论　α地贫杂合子明显高于广东省的平均水平 (8 3 % ) ,β地贫杂合子检出率与广东省平均水平 2 6 %比较接近     

2例假性HbE纯合子的实验室鉴别诊断

ＨｂＥ是常见的异常Ｈｂ，ＨｂＥ纯合子偶有报道，假性Ｈｂ纯合子在区内尚未见报道，假性ＨｂＥ纯合子实质上是一组ＨｂＥ和β地贫双重杂合子复合α地贫１的临床综合征，现将２例假性ＨｂＥ纯合子的鉴别诊断报告如下。例１，男，３５岁，因生育的地贫患儿夭折而欲进行产前...     

2650例育龄期妇女地中海贫血的筛查结果分析

目的：对南宁地区2650例育龄期妇女进行地中海贫血（简称：地贫）的筛查结果分析,了解人群地贫的发生率、携带率及基因类型。方法采用血液学检查和血红蛋白（Hb）电泳对受检人群进行实验室检查,筛查疑似人群,再进一步基因分析确诊。结果初筛出的536例疑为地贫患者（或基因携带者）的血液学检查结果：病例组红细胞、网织红细胞数高于对照组;Hb 低于对照组;平均红细胞体积和平均红细胞 Hb 含量显著低于对照组。 Hb 电泳结果中,检出512例结果异常者,其中α地贫表型阳性68例,β地贫表型阳性438例,确诊为α地贫（68例）和β地贫（438例）共计506例,占总受检人数的19．09％。结果显示本地区常见的α地贫基因型为东南亚缺失型杂合子（‐SEA /αα）、右缺失型杂合子（‐α3．7/αα）、左缺失型杂合子（‐α4．2/αα）、Hb Constant Spring （‐αCS /αα）点突变等,β地贫基因型为 CD41‐42杂合子、CD17杂合子、CD71‐72杂合子、CD28杂合子等。结论广西是地贫高发区,开展育龄期妇女婚前、孕前筛查,指导合理的联姻、妊娠,并通过人群干预来预防常见的人类单基因致死、致残性遗传病,对促进优生优育,提高人口素质有重要意义。     

广东省清远地区人群α-地中海贫血基因型及临床表型特点

目的 分析2014-2015年广东省清远地区5 063例疑诊地中海贫血样本中α-地贫基因型分布及其临床特点.方法 采用单管多重聚合酶链反应法结合跨越断裂点PCR(gap-PCR)检测人群基因组DNA样本中3种α-珠蛋白基因缺失--5EA、-α3.7、-α4.2;采用PCR-反向点杂交法(PCR-RDB)技术检测3种常见的α-珠蛋白基因突变αWSα、αCSα、αQSα.结果 5 063例受检标本中,检出α-地贫基因1 735例,基因携带率为34.27％.α-珠蛋白基因缺失型α-地贫为1 598例(92.10％),其中以东南亚杂合子--SEA/αα基因型最常见(1 265例,72.91％),其次为右缺失型杂合子-α3.7/αα(233例,13.43％)和左缺失型杂合子-α4.2/αα(97例,5.59％),而纯合子-α4.2/-α4.2为2例,双重杂合子-α3.7/-α4.2为1例.非缺失型α-地贫为80例(4.61％),包括ααWS/αα 37例、ααQS/αα 22例、ααCS/αα20例及ααWS/ααCS 1例.另外,双重杂合子-α3.7/ααWS 3例.血红蛋白H病(Hb H)为54例(3.11％),包括--SEA/-α3.7 33例、--SEA/-α4.216例、--SEA/ααWS 4例、--SEA/ααQS 1例.1 735例α地中海贫血中,静止型409例,轻型1 272例(血液学表现为轻度小细胞低色素贫血),Hb H病54例,临床表现为中重度贫血,可伴有肝脾肿大、黄疸等.结论 广东省清远地区α-地中海贫血以东南亚杂合子--SEA/αα基因型最常见,临床存在较多的轻型α-地贫患者,该地区人群婚配生育Hb H病或重型α-地贫患儿的概率较高.     

地中海贫血表型阳性平均红细胞体积和平均血红蛋白浓度截断值及应用

目的 探讨平均红细胞体积(MCV)和平均血红蛋白浓度(MCH)在地贫筛查中的诊断截断值及应用价值.方法 在南宁农村育龄夫妇地贫筛查中以血清铁蛋白正常的经基因分析确认的153例健康成人、55例β地贫杂合子、76例α地贫1、59例α地贫2和18例不贫血或只有轻度贫血的αβ复合型地贫MCV和MCH通过受试者工作曲线确定其地贫筛查截断值,并以确定的截断值分析其临床诊断意义.结果 诊断地贫的截断值分别为MCV≤78.25fl和MCH≤25.65pg,此截断值的敏感度和特异度分别为MCV:85.6%和94.8%,MCH:82.7%和94.8%.55例β地贫杂合子和18例复合型地贫MCV和MCH均低于上截断值,76例α地贫1除1例MCH高于截断值外其它均低于截断值,59例α地贫2中30例MCV低于上截断值,24例MCH低于上截断值,而健康成人中分别有8例MCH和/或 MCV低于上截断值.结论 以MCV≤78.25fl和MCH≤25.65pg作为地贫表型阳性截断值进行地贫筛查有较高的应用价值.     

深圳地区地中海贫血患病率调查及其基因分型

目的调查深圳地区地中海贫血的患病率及其基因分型。方法用二步法筛查地中海贫血,基闳诊断采用PCR及PCR／RDB技术。结果在12220名受检者中检出携带者或轻症病人714例,检出率为5．84％,其中广东籍人472例,占广东籍人的10．19％。进一步基因诊断,其中α1地中海贫血杂合子386例,β珠蛋白基因突变杂合子326例,2例异常血红蛋白基因诊断不明。对16对双方均为β地贫基因携带者夫妇的胎儿实施产前诊断,检出纯合子或双重杂合子胎儿4例。结论深圳人以广东等南方省区为主,人群中地中海贫血检出率高,开展大规模的人群筛查和遗产咨询,对指导优生优育具有重大意义．     

重庆地区血红蛋白病的患病率及其基因型和血液学表型分析

目的：分析重庆地区血红蛋白病的携带率、基因型构成及血液学特征，为血红蛋白病筛查及诊断方法的合理选择提供依据。方法：对49 551例进行血红蛋白病筛查的患者外周血样本，采用多重PCR-导流杂交或测序等方法检测地中海贫血常见23种基因位点及血红蛋白变异体(hemoglobin variants,HbVs)相关突变位点；再对确诊血红蛋白病患者的血常规和血红蛋白电泳结果进行回顾分析，评估血常规、血红蛋白电泳二者联合检查在血红蛋白病筛查诊断中的价值。结果：共检出3 511例血红蛋白病(7.09%)，其中α地贫携带者1 840例，以--^SEA/αα、-α^3.7/αα和-α^4.2/αα为主；β地贫携带者1 540例，以CD17、IVS-Ⅱ-654、CD41-42为主；异常血红蛋白病65例，β链变异体为主；复合血红蛋白病64例，α地贫复合β地贫携带者57例，地贫复合异常血红蛋白病7例。血红蛋白病患者的血红蛋白、红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白量指标降低与α或β链合成的减少程度呈正相关，而血红蛋白A2(adult hemoglobin ...     

地中海贫血的快速产前基因诊断

本研究采用聚合酶链反应(PCR)技术,完成了20例重症β-地中海贫血(β-地贫)及2例重症α-地中海贫血(α-地贫)高危胎儿的产前基因诊断。20倒重症β-地贫高危胎儿中,双重杂合子及纯合子6例,杂合子10例,正常胎儿4例,其中10例已经正常分娩后或流产后基因分析验证,结果与产前诊断完全一致。讨论了三种取材方法及影响PCR的主要因素。PCR技术具有简便快速、早期取材、诊断率高及结果准确可靠等优点,便于推广使用。