降钙素基因相关肽和心房肽对心肌缺血犬冠脉循环及离体冠脉的影响

本实验利用冠脉内给药和离体血管灌流等方法，观察并比较了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）和心房肽（ＡＮＰ）对犬冠脉循环的影响及心肌缺血后冠脉对二者反应性的变化。结果表明，冠脉内注射ＣＧＲＰ或ＡＮＰ均能明显逆转急性心肌缺血所致冠脉血流量的显著减少和大小冠脉阻力的显著增加，其中对远端小冠脉阻力降低的程度明显大于犬冠脉，而且ＣＧＲＰ的上述作用显著强于ＡＮＰ。ＣＧＲＰ和ＡＮＰ均可呈剂量依赖性舒张正常及心肌缺血后的大、小冠脉血管；二者对大冠脉的舒张作用显著弱于小冠脉，而ＣＧＲＰ的舒血管效应又强于ＡＮＰ。心肌缺血后大冠脉对ＣＧＲＰ和ＡＮＰ反应性显著降低，而小冠脉无此现象。结果提示，ＣＧＲＰ是一种强有力的内源性扩血管物质，对缺血性心脏病的治疗有益。     

降钙素基因相关肽对定量冠脉狭窄后冠脉血流动力学的作用

本实验用犬冠脉定量狭窄模型，观察了由冠脉注射降钙素基因相关肽对犬正常有不同程度冠脉狭窄时的冠脉血流动力学的影响，结果表明，冠脉内注射ＣＧＲＰ（０．３ｇ／ｋｇ）可使冠脉血流量和远端小动脉压有不同程度增加，平均动脉压轻度下降，冠脉血管总阻力、大冠脉血管阻力及小冠脉血管阻力减小。在中度冠脉狭窄３０ｍｉｎ后注射ＣＧＲＰ，ＭＡＰ无明显改变，ＣＢＦ增高，而ＤＣＰ、ＲＴ、ＲＬ、ＲＳ均降低，且持续３０ｍｉｎ，在重     

类风湿性关节炎患者单个核细胞对合成肽反应性研究

目的：寻找与类风湿性关节性相关的Ｔ细胞表位。方法：用４种合成的短肽；ＤＷ１５肽，ＨＳＰ肽，ＧＲＰ肽，ＣⅡ肽，体外刺激从类风关患者外周血，关节液，滑膜中得到的单个核细胞。结果：关节内（关节液＋滑膜）ＭＮＣ对ＧＲＰ肽的反应与正常对照差异显著。关节内ＭＮＣ对ＰＨＡ刺激的反应显著低于患者及正常人外周血ＭＮＣ。结论：ＧＲＰ肽是部分类风关患者关节内Ｔ细胞的Ｔ细胞表位。     

大鼠胃肠胰系统中降钙素基因相关肽的免疫组织化学定位

用免疫组织化学ＡＢＣ法，对降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）在大鼠胃肠胰系统中的分布进行了研究，结果表明：整个胃肠胰系统都明ＣＧＲＰ免疫反应性的神经纤维分布，在胃窦部和胰岛还分布有ＣＧＲＰ免疫反应阳性的内分泌细胞，这些结果说明，胃肠胰系统中的ＣＧＲＰ有两种来源，即来源于神经和内分泌细胞。文内还对ＣＧＲＰ在胃肠胰系统中的可能功能进行了讨论。     

大鼠三叉神经节及尾侧亚核内降钙素基因相关肽在面口部伤害性刺激时的动态变化

为了探讨降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）在面口部伤害性刺激条件下合成、运输和释放的规律，将福尔马林注入大鼠一侧口周皮下，分别于刺激后不同时间取材，用原位杂交和免疫组织化学方法观察ＣＧＲＰｍＲＮＡ及ＣＧＲＰ样阳性结构（ＣＧＲＰ－ＬＩ）在三叉神经节（ＴＧ）和三叉神经尾侧亚核（Ｖｃ）内的动态变化。原位杂交结果显示：ＴＧ内表达ＣＧＲＰ的两种亚型α－ＣＧＲＰ和β－ＣＧＲＰｍＲＮＡｓ神经元的数量分别于福尔马林刺激后２ｈ和４ｈ有明显增加，８ｈ达到高峰，然后渐下降，至４８ｈ后恢复至正常。免疫组织化学结果显示：Ｖｃ浅层ＣＧＲＰ－ＬＩ的含量在刺激后１ｈ内明显减少，２ｈ后渐增，１２ｈ达到高峰，２４ｈ后趋向正常。ＴＧ内ＣＧＲＰ－ＬＩ神经元的数量在刺激后１ｈ内也明显减少，此后逐渐回升至正常并有轻度增加，但与正常间无明显差异。     

降钙素基因相关肽单克隆抗体的研制及初步鉴定

以人工合成的降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）－牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联物（ＣＧＲＰ－ＢＳＡ）为免疫原，用微量脾内免疫法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取其免疫脾细胞与小鼠Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ法筛选、３次克隆化后，获得３株能稳定分泌抗ＣＧＲＰ单克隆抗体的杂交瘤细胞３Ｂ４、７Ｅ１１和８Ｆ２。用琼脂双扩散法鉴定，３Ｂ４为ＩｇＧｌ亚类，７Ｅ１１和８Ｆ２均为ＩｇＭ类。杂交瘤细胞的染色体条数在９２￣     

降钙素基因相关肽在大鼠纹状体内分布的生后发育研究

目的：了解大鼠纹状体内的钙离子基因相关肽（ＣＧＲＰ）在纹状体和苍白球内分布的生后发育变化。方法：对出生后１天至１年的大鼠脑行冠状组织切片,尔后进行ＣＧＲＰ的ＡＢＣ法免疫细胞化学染色。结果：ＣＧＲＰ在纹状体的近尾侧部主要分布在纹状体的边缘区,为大量的密度很高的免疫反应阳性纤维,在纹状体的远尾侧部几乎遍布整个尾壳核,但以其外侧缘和腹侧为多,在尾壳核的外侧部形成一条浓密的阳性纤维带。苍白球内可见少量的ＣＧＲＰ免疫反应纤维存在,多靠近苍白球的内侧缘。ＣＧＲＰ在纹状体内分布的生后发育特征为：Ｐ０１时边缘区有少量阳性纤维分布,Ｐ０５时形成带状纤维分布,Ｐ１０时尾壳核腹外侧部有阳性纤维分布,Ｐ３０以后同成年。结论：ＣＧＲＰ在纹状体和苍白球内具有独特的分布特征和生后发育规律。     

大鼠习瓣膜含神经肽Y血管性肠肽P物质和降钙素基因相关肽神经的分布及年龄变化

用免疫组织化学ＡＢＣ法结合葡萄糖氧化酶－ＤＡＢ－硫酸镍铵增强技术，研究了１月、８月和１８月龄大鼠心瓣膜中ＮＰＹ、ＶＩＰ、ＣＧＲＰ和ＳＰ免疫反应阳性神经纤维的分布。结果显示，以上４种含肽神经纤维在８月龄大鼠房室瓣上均有分布，密度顺序为ＮＰＹ＞ＣＧＲＰ＞ＶＩＰ和ＳＰ，含ＶＩＰ和ＳＰ神经纤维的密度相近。三尖瓣中含ＮＰＹ和ＳＰ神经纤维的密度大于二尖瓣，含ＶＩＰ和ＣＧＲＰ神经纤维的密度与二尖瓣的相近。瓣膜中的含肽神经纤维可从瓣膜附着处的心壁及乳头肌内的神经两个方向延伸而来。主动脉和肺动脉瓣内仅发现有ＮＰＹ神经。随大鼠年龄增长，房室瓣中含ＮＰＹ神经的密度有增加趋势。含ＣＧＲＰ、ＶＩＰ、ＳＰ神经在１月龄大鼠房室瓣上的密度为零，在８月和１８月储时的密度与１月龄时的差异非常显著，８月和１８月龄时的密度间无明显差异。１月龄和１８月龄大鼠的主动脉和肺动脉瓣上，未见到４种含肽神经。我们的结果为心瓣膜的神经支配提供了新的资料，但这些含肽神经在心瓣膜的作用尚待探讨。     

降钙素基因相关肽的放射免疫测定及其临床应用

本文利用合成的降钙素基因相关肽的抗原决定簇Ｔｙｒ－ＣＧＲＰ（２７～３７）制备抗ＣＧＲＰ抗血清,用Ｉｏｄｏｇｅｎ做氧化剂标记抗原,以免疫沉淀剂进行Ｂ与Ｆ分离,从而建立了降钙素基因相关肽的放免测定方法。方法灵敏度为６ｐｇ／ｍＬ,回收率６５％～８０％,批内ＣＶ７７６％,批间ＣＶ１１３８％．正常人血浆ＣＧＲＰ水平４３５７±５２８ｐｇ／ｍＬ,急性心梗患者血浆ＣＧＲＰ水平７０２４±６２３ｐｇ／ｍＬ,两者有显著差异（Ｐ＜００５）。体外循环病人手术期间血浆ＣＧＲＰ较术前有明显变化（Ｐ＜００５）,术后２４小时ＣＧＲＰ较术前及术中有明显升高（Ｐ＜００５）。     

降钙素基因相关肽对脑缺血大鼠脑血流的影响

大鼠侧脑室注入降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）或等体积甘露醇为对照，用非损伤阻抗法测定一侧颈总动脉结扎后ＣＧＲＰ对脑血流的影响。结果表明，一侧颈总动脉结扎后，脑血流量降低３４％，此时侧脑室给予ＣＧＲＰ即刻使脑血流图波幅增加，５分钟时达高峰，比注药前平均增加６５％，与甘露醇对照相比差别非常显著（Ｐ＜０．０１），４０分钟时作用开始减弱，１００分钟后作用消失。与颈总动脉结扎前相比，在脑血供不足时，ＣＧＲＰ增     

人胚胎期小肠六种肽能神经发生的研究

采用免疫组织化学ＰＡＰ法，对５３例不同胎龄的人胚胎小肠的亮氨酸脑啡肽（Ｌ－Ｅｎｋ）、Ｐ物质（ＳＰ）、神经肽Ｙ（ＮＰＹ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）、血管活性肠肽（ＶＩＰ）和甘丙素（ＧＡＬ）等６种肽能神经的发生发育过程进行观察，并与ＡＣｈ能神经和膀胱的肽能神经的发生做了对比研究。结果表明，人胚胎小肠神经中ＡＣｈ能神经发生早于肽能神经；同一个体不同器官肽能神经并非同时发生。本文观察到的小肠肽能神经的     

豚鼠回肠Peyer＇s集结含神经肽Y、P物质和降钙素基因相关肽神经的分布

用免疫组织化学ＡＢＣ法结合ＧＤＮ显色技术，在光镜水平观察了含ＮＰＹ、ＳＰ和ＣＧＲＰ神经纤维在豚鼠回肠Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结的定位与分布。结果显示，邻近Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结的粘膜下层内有以上３种肽能神经纤维和神经元胞体分布，Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结不同区域含ＮＰＹ、ＳＰ和ＣＧＲＰ神经纤维的定位有明显差异。在上皮下圆顶区，３种肽能神经分支均形成纤细的神经网，并向滤泡相关上皮方向延伸；滤泡间区含ＮＰＹ神经多循微血管壁走行、仅少数分支定位于免疫细胞之间，而含ＳＰ和ＣＧＲＰ神经以非血管性纤维为主、常分布于此区的免疫活性细胞间；滤泡区内仅见少量含ＮＰＹ和ＳＰ神经终末分布、未发现含ＣＧＲＰ神经分支。总体上，Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结内含ＮＰＹ和ＳＰ神经纤维数较ＣＧＲＰ免疫反应纤维为多。Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结含ＮＰＹ、ＳＰ和ＣＧＲＰ神经支配的发现，为研究神经肽调节消化道粘膜免疫功能提供了形态学依据。本文对Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结内这些肽能神经的起源、性质及其在胃肠粘膜局部免疫反应中可能的调节机制进行了讨论。     

大鼠心瓣膜含神经肽Y血管活性肠肽P物质和降钙素基因相关…

用免疫组织化学ＡＢＣ法结合葡萄糖氧化酶－ＤＡＢ－硫酸镍铵增强技术，研究了１月、８月和１８月龄大鼠心瓣膜中ＮＰＹ、ＶＩＰ、ＣＧＲＰ和ＳＰ免疫反应阳性神经纤维的分布。结果显示，以上４种含肽神经纤维在８月龄大鼠房室瓣上均有分布，密度顺序为ＮＰＹ〉ＣＧＲＰ〉ＶＩＰ和ＳＰ，含ＶＩＰ和ＳＰ神经纤维的密度相近。三尖瓣中含ＮＰＹ和ＳＰ神经纤维的密度大于二尖瓣，含ＶＩＰ和ＣＧＲＰ神经纤维的密度与二尖瓣的相近。瓣膜中     

降钙素基因相关肽拮抗内皮素生物效应的研究

本实验在大鼠及小鼠的整体、离体器官及细胞水平上系统观察了降钙素基因相关肽对内皮素的拮抗作用。结果表明，ＣＧＲＰ显著地拮抗ＥＴ的升压、增加血管张力、促进血管平滑肌细胞增殖、损伤心肌以及致小鼠猝死等作用，并明显降低大鼠血浆ＥＴ含量。结果提示ＣＧＲＰ可能是机体内源性ＥＴ拮抗剂，给予外源ＣＧＲＰ可能对与ＥＴ有关的心脑血管疾病有防治意义。     

大鼠心肌顿抑时血浆及心肌组织中降钙素基因相关肽含量的变化

目的：观察大鼠心肌顿抑时降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）的变化规律。方法：采用大鼠在体心肌顿抑模型,用放射免疫分析法测定血浆及心肌组织中ＣＧＲＰ含量。结果：心肌顿抑时血浆ＣＧＲＰ水平较对照组显著升高,而心肌组织中ＣＧＲＰ含量则较对照组显著降低。结论：心肌组织中与血浆中的ＣＧＲＰ含量呈负相关关系。     

降钙素基因相关肽（CGRP）放射免疫检测方法的初步建立

目的；采用国内合成的降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）及本实验室制备的抗ＣＧＲＰ单克隆抗体建立检测ＣＧＲＰ的放射免疫分析法。方法：酰化试剂法标记ＣＧＲＰ（１－３７），采用平衡饱和加样程序法建立放免分析法。结果：纯化后的标记物计算标记率为３５－４１％，比活度１０００－１２００Ｃｉ／ｍｍｏｌ，放化纯度为９３－９８％，免疫活性〉９２％；该方法的灵敏度为１０－２０ｐｇ／ｍｌ，平均批内及批间变异系数分别为１１．４     

降钙不基因相关肽放射免疫分析的建立

本文采用皮下、腹腔内联合免疫方法获得抗降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）抗体。利用Ｉｏｄｏｇｅｎ＾１２５Ｉ标记ＣＧＲＰ，经高效液相色谱（ＨＰＬＣ）分离纯化，建立了ＣＧＲＰ放射免疫分析（ＲＩＡ）。测定范围２０￣１２００ｐｇ／ｍＬ，批内ＣＶ７％，批间ＣＶ１２％，正常人血浆含量为５０．６±２４．５ｐｇ／ｍＬ（ｎ＝２５）。初步用于临床，观察了ＧＣＲＰ与内皮素（ＥＴ）在高血压，十二指肠疾病中的相互关系，所得结果与     

抗原刺激对豚鼠肠系膜淋巴结肽能神经影响的形态计量学研究

采用免疫组织化学ＡＢＣ－ＧＤＮ显色技术结合体视学方法，在光镜下观察了绵羊红细胞免疫反应高峰期豚鼠肠系膜淋巴结内含ＳＰ、ＣＧＲＰ和ＮＰＹ神经纤维的长度密度变化。结果表明，在免疫反应高峰期，淋巴结髓质内含ＳＰ神经纤维的长度蜜度（１６７．４±１２．８ｍｍ／ｍｍ３）较对照组（１２０．１±１０．０ｍｍ／ｍｍ３）明显增加（Ｐ＜０．０５）；含ＮＰＹ神经纤维的长度密度（６５．４±１１．０ｍｍ／ｍｍ３）较对照组（１０８．９±９．４ｍｍ／ｍｍ３）显著下降（Ｐ＜０．０１）；含ＣＧＲＰ神经纤维的长度密度（１６４．６±１１．６ｍｍ／ｍｍ３）与对照组（１３７．６±１０．９ｍｍ／ｍｍ３）相差不显著（Ｐ＞０．０５）。淋巴结皮质内上述３种肽能神经纤维的长度密度在免疫反应高峰期均无明显变化（Ｐ均大于０．０５），这提示抗原刺激可能影响免疫器官内肽能神经的活动。     

降钙素基因相关肽与免疫调节

降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）是由降钙素（ＣＴ）／ＣＧＲＰ基因复合体在神经系统中表达、具有强大的扩血管作用的生物活性多肽。在体内可直接与Ｔ，Ｂ细胞、巨噬细胞上的受体结合，或是通过间接作用于淋巴细胞、成纤维细胞等发挥其免疫调节功能。进一步研究ＣＧＲＰ与机体免疫调节的关系，可为探讨肿瘤、真菌感染和内毒素休克的诱因或发病机制提供有效途径。     

自发性高血压大鼠心瓣膜上含神经肽Y和含降钙素基因相关肽神经的变化

用免疫组织化学（ＡＢＣ）方法，观察了含神经肽Ｙ（ＮＰＹ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＤ）神经在自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）心瓣膜分布的变化。结果表明，在ＳＨＲ二尖瓣、三尖瓣上含ＮＰＹ、含ＣＧＲＰ神经的密度，和对照Ｗｉｓｔａｒ－Ｋｙｏｔｏ（ＷＫＹ）大鼠相比较，无明显差异。但ＳＨＲ二尖瓣及三尖瓣含ＮＰＹ神经的Ｒ值，即心壁和乳头肌两个来源的含肽神经相延续所在的腱索数目与本片瓣膜上的总腱索数的比值，大于ＷＫＹ大鼠；而ＳＨＲ心瓣膜含ＣＧＲＰ神经的Ｒ值和ＷＫＹ大鼠无差异。本文对ＳＨＲ心瓣膜上含ＮＰＹ和含ＣＧＲＰ神经的变化作了讨论。