慢性重型肝炎患者乙型肝炎病毒S基因区变异对其RNA二级结构的影响

重型肝炎患者由于肝功能衰竭和机体免疫功能低下，病死率较高，但目前的相关研究主要集中在前C区变异及e抗原的存在状态对肝炎进展的影响上，关于RNA方面的研究多见于ε环变异对病毒包装的影响。我们选取慢性重型肝炎患者的血清佯本，通过扩增HBVs基因及测序，应用软件模拟构建其RNA二级结构并考察其变化，以探讨慢性重型肝炎患者血清中HBV变异的存在情况及其对疾病的影响。     

乙型肝炎病毒耐药变异的研究近况

变异是生物适应环境谋求生存的重要方式。乙型肝炎病毒（HBV）是嗜肝DNA病毒的原型。在慢性感染过程中，为适应生存环境，HBV发生基因变异是较为常见的现象。     

加强对乙型肝炎病毒变异的研究

加强对乙型肝炎病毒变异的研究斯崇文乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）是一种高变异病毒。由于它在复制过程中，必须经过ＲＮＡ中间体的逆转录复制，在这一逆转录复制过程中，因ＲＮＡ聚合酶和逆转录酶缺乏校正功能，使病毒基因在复制过程中，可以发生一个核苷酸（点突变）和多个核...     

乙型肝炎病毒感染及病毒变异

乙型肝炎病毒感染及病毒变异骆抗先，侯金林，梁炽森对乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染已进行了广泛的研究，仍有许多问题亟待解决。问题之一是慢性进展性肝病患者还在大量增加，对有些患者似很难阻断其继续进展。ＨＢＶ感染后可发生轻重悬殊的肝脏疾病，宿主对ＨＢＶ抗原的免...     

乙型肝炎病毒变异与临床疾病

过去对乙型肝炎病毒(HBV)感染,常以不同免疫状态来解释不同的临床现象。由于近年分子病毒学的进步,发现HBV变异与宿主免疫应答相关,进而发生不同的临床疾病。 一、暴发性乙型肝炎 一贯认为其发病机理是由于宿主免疫系统对急性感染的过度应答,但何以过度应答的原因不明。分子流行病学调查发现是由于新感染一种变异毒株,不能合成HBeAg。 HBeAg是HBV感染的一种免疫调节因子,吸引并抑制血流中T细胞毒活性,从而形成宿主对HBV感染的免疫耐性。婴幼儿童大多处于病毒水平很高的慢性无症状携带状态,就由HmeAg调节所形成。     

乙型肝炎病毒耐药变异研究的回顾与展望

核苷(酸)类似物长期抗HBV治疗面临的最重要问题之一是HBV的耐药性问题。目前所有口服核苷(酸)类似物,包括拉米夫定、阿德福韦、恩替卡韦和替比夫定,治疗:过程中均可出现耐药性。特别是最近报道发现未用过阿德福韦的患者对阿德福韦原发耐药,序贯联合孩苷(酸)类似物治疗的患者出现多重耐药性等更引起临床医师的高度关注。有     

乙型肝炎病毒对阿德福韦耐药的研究进展

核苷（酸）类似物类抗HBV药物的问世是慢性乙型肝炎治疗史上的里程碑之一。这类药物的广泛应用在为慢性乙型肝炎患者带来福音的同时,也带来了较为严重的耐药问题。由于HBV的复制需通过逆转录机制,而HBV聚合酶缺乏校正的功能,因此,HBV比其他DNA病毒更容易发生变异。随着治疗时间的延长,对核苷类药物耐药的变异株被选择出来，且逐渐成为优势毒株，在临床上表现为HBVDNA水平的反弹，有些患者会出现病情的加重。阿德福韦自2002年上市以来已广泛应用于临床，随着时间的延长，HBV对阿德福韦的耐药率也逐渐增加，引起了人们的广泛重视。[第一段]     

乙型肝炎病毒X区核苷酸序列变异的检测

目的：了解乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒（HBV）DNA X区核苷酸序列的变异情况。方法：采用聚合酶链反应（PCR）扩增24例乙型肝炎患者血清HBV DNA X区产物，并直接测序进行分析。结果：24例患者血清中HBV DNA X区都有程度不等的点突变（2－15），11例同时具有nt1762(A→T),nt1764(G→A）发生变异，8例患者同时在nt1636-nt1741几处位点发生变异。结论：HBV DNA X区核苷酸位于nt1762,nt1764双位变异与HBeAg阴性表型有关。     

接受核苷（酸）类似物治疗的慢性乙型肝炎患者HBV逆转录酶区耐药变异危险因素分析

目的:分析可能影响慢性HBV感染者逆转录酶（RT）区变异的危险因素。方法:回顾性收集2016年1月1日至2016年12月31日于天津市第二人民医院门诊和住院行HBV RT变异基因检测的慢性HBV感染者678例,其中诊断符合慢性乙型肝炎者417例,肝硬化219例,原发性肝癌患者42例。未使用任何抗病毒治疗者268例,曾用...     

抗—HBe阳性慢性乙型肝炎病毒感染：病毒前C变异与病变活动

抗－ＨＢｅ（＋）的慢性活动性肝炎５１例，以聚合酶链反应检出ＨＢＶ ＤＮＡ４８例（９４．１％）。对６例以反应产物直接序列分析，发现前Ｃｎｔ８３发生Ｇ→Ａ（Ａ８３）点突变，使密码２８由于ＴＧＧ变异为终止密码ＴＡＧ而不能编码ＨＢｅＡｇ。以抗－ＨＢｅ（＋）的慢性无症状ＨＢＶ携带者３０例为对照，仅１２例（４０％）检出弱ＨＢＶ，ＤＮＡ带。５例序列分析未发现Ａ８３变异。结果提示：变异病毒逃避免疫清除而继续活跃复     

HBV反转录酶A181位点变异与临床耐药的关系

目的分析核苷（酸）类似物（NA）疗程中HBV反转录酶（rt）A181位点的变异与临床耐药的关系。方法对5例rtA181位点变异的慢性HBV感染患者做回顾性调查与随访,对比核苷类似物治疗前后的病毒学及肝功能生化应答情况。结果在85例HBV反转录酶测序中发现5例rtA181位点变异,5例中2例发生rtA181V变异,2例发生rtA181T变异,1例发生rtA181S变异,均未出现rtN236T及YMDD（rtM204）变异,其中4例与临床耐药相关。结论rtA181V／T／S变异与NA治疗中的耐药有关。     

乙型肝炎病毒感染不同状态下血清病毒反转录酶区准种特点及其临床意义

目的 研究HBV感染不同状态下血清病毒反转录酶(RT)区准种特点和临床意义.方法 50例未接受抗病毒治疗的HBV感染者分为慢性HBV携带者(ASC)组10例、慢性乙型肝炎(CHB)组30例和乙型肝炎肝硬化(LC)组10例.收集患者外周血血清,抽提HBV DNA,PCR扩增RT区基因组后克隆、测序.每例患者获得15～30个序列,进行HBV RT区的准种异质性分析及相关基因突变统计等生物信息学分析.多均数比较采用方差分析,中位数比较采用非参数检验分析,非计量资料比较采用x2检验.结果 总共测序1221个克隆,其中ASC组152个,CHB组780个,LC组289个.3组间基因型构成差异无统计学意义.准种复杂度为LC组＞CHB组＞ASC组,3组间差异有统计学意义(F=33.400,P＜0.05).准种离散度为LC组＞CHB组＞ASC组,LC组与CHB组及ASC组均差异有统计学意义(F=18.070,P＜0.05),CHB组与ASC组间差异无统计学意义.结论 慢性HBV感染过程中,免疫清除期比免疫耐受期具有更宽的HBV变异谱系,随着病程的延长和病情加重,HBV的准种趋向复杂.     

740例 HBV 感染者血清 HBV 逆转录酶区耐药位点分析

目的：了解乙型肝炎病毒（HBV）感染者 HBV 基因型的构成状况及 HBV P 区基因变异的特点。方法对2010年8月～2011年10月送检的740份 HBV 感染者血清,采用 ABI 基因测序仪检测 HBV 耐药位点和基因型,应用 SPSS15.0软件进行统计分析。结果在740例 HBV 感染者中,检出 HBV B 基因型40例（5.41%）,C 基因型695例（93.92%）,D 基因型5例（0.68%）;与拉米夫定、阿德福韦酯和恩替卡韦耐药明确相关的位点突变377例（50.95%）,其中195例（51.72%）患者既往有明确的应用核苷（酸）类似物（NA）史,在这195例发生耐药的患者中,B基因型12例,C 基因型183例,两基因型间耐药发生率无明显差异,他们中包括 CHB 患者118例,肝硬化患者77例,主要耐药变异模式为 M204V＋L180M、M204I、M204I＋L180M 和 A181V,两组间 ALT、HBV DNA 载量和主要耐药变异模式检出率均无统计学差异;HBV DNA 载量是影响 NA 耐药的相关因素（x2=0.496,P〈0.001）,但耐药与年龄、性别、疾病严重程度（CHB 或肝硬化）和 ALT 水平无显著性相关;此外,本文还检出多处未知变异位点,如 rt64、rt126、rt178和 rt129等。结论核苷（酸）类似物的使用将伴随病毒变异的发生,其耐药基因变异位点具有一定的特点及规律性,动态监测 HBV DNA 载量对早期发现耐药有一定的价值。     

阿德福韦耐药乙型肝炎病毒毒株生物学特性的研究

目的 体外研究阿德福韦(ADV)耐药相关变异对于HBsAg产生及HBV复制等生物学特性的影响.方法 收集12例在ADV治疗过程中出现病毒学突破的慢性乙型肝炎患者血清,对其HBV反转录(RT)区进行PCR扩增和测序分析.对其中4例患者的HBV进行全基因扩增、测序、序列分析及克隆.将优势株的HBV全基因插入PHY106载体,构建成1.1拷贝HBV基因组表达载体,进而转染Huh7细胞,ELISA法检测细胞培养上清液中HBsAg及HBeAg水平,了解不同ADV耐药相关变异类型对HBsAg分泌的影响.抽提转染细胞内病毒核心颗粒HBV DNA,实时荧光定量PCR方法 检测HBV DNA水平.将rtA181T/sW172*变异株与rtA181非变异株质粒按不同比例混合,共转染Huh7细胞,检测上清液中HBsAg及细胞内病毒核心颗粒HBV DNA水平.结果在12例出现病毒学突破的患者中,10例出现ADV耐药相关位点变异,以rtA181变异为主,其中5例有rtA181T变异,4例为rtA181T/S+rtN236T变异.将含rtA181T/sW172*变异的质粒转染细胞后,上清液中不能检测到HBsAg,而含其他变异类型的质粒转染细胞后,上清液中HBsAg和细胞内病毒核心颗粒HBV DNA水平与非变异株相似;含不同变异的HBV临床分离株转染后的细胞内核心病毒颗粒HBV DNA水平未见明显差异.将rtA181T/sw172*变异株及rtA181非变异株的质粒共转染后.随着rtA181非变异株比例的增加,上清液中HBsAg水平也逐渐增高,但细胞内核心病毒颗粒HBV DNA水平无明显差异.结论 rtA181变异是ADV耐药相关性变异的主要类型,rtA181T变异较多见.rtA181T/sW172*变异株可引起HBsAg分泌障碍,但rtA181非变异株可纠正rtA181T/sW172*变异株的HBsAg分泌障碍.不同类型的ADV耐药相关变异对HBV的复制能力无显著影响.