应用BMP与FGF修复兔桡骨缺损的实验研究

目的 联合应用成骨及成血管的生长，探索治疗骨缺损的有效方法。方法 联合应用BMP bFGF及单纯BMP复合去抗原异种松质骨，采用X线摄片及组织学方法检测两种方法修复兔挠骨2cm缺损效果。结果 联合应用BMP bFGF修复兔挠骨2cm缺损在12周时缺损完全骨性连接，骨髓腔完全再通，明显优于单纯BMP组的修复效果(P＜0．01)。结论 联合应用BMP bFGF修复兔挠骨2cm缺损在12周时缺损完全骨性连接，骨髓腔完全再通，能成为修复缺损的新的有效方法。     

一种新型注射型骨修复材料对犬桡骨骨缺损修复的实验研究

目的 探讨以纤维蛋白胶(fibrin sealant,FS)为载体复合牛骨形态发生蛋白(bBMP)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的注射型骨修复材料修复犬桡骨节段性缺损的效果. 方法 12只家犬随机分为实验组和对照组,每组6只.12只成年健康家犬右侧桡骨中上段造成2.0 cm缺损,制成犬桡骨2.0 cm骨缺损实验模型,然后严密缝合皮下组织及皮肤.对照组和实验组分别经切口周围正常皮肤注射FS和FS bFGF bBMP到骨缺损处,术后4、8、16、24周进行放射学检查,术后24周取标本进行组织学和骨密度检查,研究其成骨效应. 结果 ①影像学:实验组术后4周缺损区有密度较低的骨痂形成;术后24周,皮质完全连接,髓腔再通.对照组术后24周内缺损区均无骨痂生长,骨缺损未得到修复.②骨密度测定:术后24周时实验组的骨密度(456.33±13.74)mg/cm2显著高于健侧(433.33±6.77)mg/cm2(t=2.57,P=0.00)及对照组(0mg/cm2)的骨密度.③组织形态学:术后24周实验组新生皮质骨十分致密,骨皮质连接完整,髓腔完全再通;对照组无新生骨形成,缺损处完全为结缔组织修复. 结论 以FS为载体复合bBMP和bFGF的注射型骨修复材料具有高效的骨修复能力,对家犬的骨缺损有良好的修复效果.     

BMP/bFGF生物活性材料修复关节软骨损伤的实验研究

[目的]探讨骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)生物材料在关节软骨缺损修复过程中的作用,为内源性修复关节软骨缺损提供实验基础.[方法]取24只14龄成年大白兔随机分成4组,每只动物于双侧膝关节股骨膑股关节面制备直径5mm全层关节软骨缺损模型.钻通骨髓腔.A组应用BMP/bFGF生物活性材料,B组应用BMP生物活性材料,C组应用bFGF生物活性材料,D组单纯应用生物蛋白胶材料.于8、12、24周在大体,光镜及电镜下观察损伤修复效果,组织学评分.[结果]A组于8、12周时,软骨缺损被白色半透明坚硬组织平滑修复,富有光泽,24周时修复组织正常软骨边界模糊,连接紧密,质地坚硬,表面平滑光润.B、C组于8、12、24周时候均未见软骨缺损完全修复,边界清楚,中央凹陷明显残留.D组全程均未见软骨修复.组织学平分A组明显优于B、C、D组,而B、C组之间无差别.[结论]BMP/bFGF生物活性材料可以有效修复兔大面积关节软骨损伤,疗效明显优于单独应用骨形态发生蛋白或碱性成纤维细胞生长因子,为关节软骨损伤治疗提供新的治疗方法.     

涂层双相陶瓷复合BMSC修复骨缺损的实验观察

目的比较双相陶瓷（Biphasie calcium phosphate，BCP）经低结晶羟基磷灰石（Low crystalline hydroxyapatite，LcHA）涂覆改性后构建的组织工程化骨（LcBCP）与单纯BCP复合骨髓基质干细胞（Bone marrow stromal cells，BMSCs）修复兔桡骨节段性缺损的成骨差异。方法BMSCs复合LcBCP（实验组）修复12只兔左侧桡骨15mm缺损；BMSCs复合BCP（对照组）植入右侧桡骨同样大小缺损，植入后第4、8和12周取材，通过大体形态、组织学、影像学和生物力学检测骨缺损修复效果。结果BMSCs—LcBCP复合物在体内骨缺损处生长良好。X线检测显示实验组连接处骨痂形成，对照组连接处在各个时间点愈合稍差。12周时，实验组骨修复良好，髓腔再通，组织学显示板层骨形成，连接处骨性愈合；对照组连接处尚有较多编织骨形成。实验组和对照组生物力学检测有统计学差异。结论BMSCs—LcBCP复合物可修复兔桡骨节段性缺损，低品态羟基磷灰石涂层有助于增强双相陶瓷的成骨能力。     

核心结合因子α1基因修饰骨髓间充质干细胞对骨缺损的修复研究

目的 探讨以核心结合因子α1（core-binding factor a1，Cbfa1）基因修饰骨髓间充质干细胞（marrow mesenchymal stem cells，MSCs）作为种子细胞，与猪脱细胞骨基质材料复合构建组织工程骨修复兔桡骨缺损的可行性。方法选择3月龄日本大白兔40只，建立桡骨1．2cm缺损模型，根据不同的修复方式分成4组。A组：Cbfa1基因修饰MSCs与脱细胞骨基质材料复合后修复；B组：未行基因修饰的MSCs与脱细胞骨基质材料复合后修复；C组：单纯脱细胞骨基质支架材料修复；D组：空白对照，不作任何植骨处理。术后4、8和12周分别行大体、X线片和组织学观察评价修复效果，并对修复后桡骨进行生物力学检测。结果大体观察至术后12周取材时，A组原骨缺损植骨区新生骨成熟度好、饱满、质硬；B组植骨区有骨性连接，质软；C组可在植骨区发现少量骨性连接；D组形成骨不连。X线片和组织学观察示：术后4、8周A组支架材料降解、新骨生成及髓腔再建优于其它3组。术后12周A组支架材料完全降解，新骨塑形完成，骨髓腔通畅，皮质骨改建成正常的板层骨结构；B组缺损区近端部分骨髓腔塑形再通；C组截骨两端骨痂向植骨中长入，髓腔塑形不明显；D组纤维组织充填，形成骨不连。以前述各组健侧桡骨为正常对照组（仍为D组），余分组同前，行破坏压缩载荷检测，结果示12周后A、B组与D组比较差异无统计学意义（P〉0．05），而C组与D组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论Cbfa1基因修饰MSCs与脱细胞骨基质材料复合构筑的组织工程骨可较好地修复兔桡骨址螺     

hBMP-7基因直接体内转染修复兔桡骨缺损实验研究

目的　探讨含人骨形态发生蛋白 7(hBMP - 7)基因逆转录病毒液与左旋聚丙交酯 (PLLA)生物材料复合后修复兔桡骨缺损的效果。方法　制备含hBMP - 7真核细胞表达载体的逆转录病毒液PT -PLNCX2 -BMP7。制备新西兰大白兔桡骨 1 5cm缺损模型 ,修复实验分为 4组 :PT -PLNCX2 -BMP7+PLLA修复组 ,空载体 (PT -PLNCX2 ) +PLLA修复组 ,单纯PLLA生物材料修复组 ,空白组。每组 6个样本。分别于术后 8、12、16周进行大体观察、X线检测和组织学检测。结果　PT -PLNCX2 -BMP7重组病毒液与生物材料复合修复组可见在骨缺损处有骨性连接形成 ,组织学观察见有大量新生骨组织形成 ,而PT -PLNCX2 病毒液修复组、单纯材料修复组和未修复组均未见骨性连接形成 ,仅在部分骨缺损两断段形成少量骨组织。结论　利用hBMP - 7基因体内局部、直接转移的方法能够用于兔桡骨缺损的修复     

兔自体骨髓基质细胞经皮移植修复骨缺损的实验研究

目的 :比较兔骨髓基质细胞 (MSC)与新鲜红骨髓经皮注射到骨缺损处后的成骨能力。方法 :1 8只新西兰兔经穿刺抽取骨髓培养 ,将扩增的MSC收集稀释成悬液 0 .5ml(细胞数约 5× 1 0 6) ,加入 1 0 0ngBMP后经皮注射到兔双侧桡骨缺损中的一侧 ( 1 8侧 ) ,对侧分别注射骨髓 0 .5ml (含BMP 1 0 0ng)( 1 3侧 )。分别于 2、 4、 8周行X线、组织病理学检查。结果 :X线、组织病理切片表明BMP MSC组多数术后 2周有明显的骨痂生成 ,术后 4～ 8周形成骨性连接 ,新骨形成、骨改建及骨髓成熟度指标均优于对照组 ,两行差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :在相同条件下 ,体外扩增诱导的MSC较新鲜红骨髓有更强、更快的成骨能力。经皮注射MSCs BMP能够迅速促进兔桡骨缺损处新骨形成 ,修复骨缺损。     

自体微小颗粒骨复合骨形成蛋白修复兔桡骨缺损

目的探讨自体微小颗粒骨复合I型胶原以及骨形成蛋白(bone morphogenetic protein，BMP)移植修复节段性兔桡骨缺损的效果。方法新西兰大耳白兔56只，切取自体髂骨研磨成微小颗粒，分别与BMP及I型胶原复合，实验分成4组（n=16)。A组：自体微小颗粒骨复合BMP、I型胶原，B组：自体微小颗粒骨复合I型胶原，C组：自体微小颗粒骨，用于修复兔桡骨干1．5cm缺损的动物模型。D组：空白对照组(n=8)，双侧桡骨缺损不作处理。术后2、4、8和12周，行X线片、组织学观察，骨密度及生物力学检测，比较各移植物修复节段性骨缺损的疗效。结果X线片显示，A组术后8周即可使骨缺损完全修复，而B组术后12周使骨缺损完全修复。术后8、12周骨量测定A组成骨量最多，12周生物力学测定显示移植物修复后的骨缺损具有最佳生物力学表现，而C组则不能完全修复骨缺损。结论自体微小颗粒骨复合BMP、I型胶原及自体微小颗粒骨复合I型胶原均能有效修复节段性骨缺损，以复合BMP移植效果更理想。     

兔桡骨骨缺损动物模型中骨缺损长度及缺损位置的影像学比较研究

[目的]通过CT影像学研究分析6个月龄新西兰兔桡骨大段骨缺损模型的合理缺损长度与缺损位置。[方法]选用健康6个月龄雄性新西兰兔24只,其中18只兔按骨缺损长度,分为1.0 cm组,1.5 cm组,2.0 cm组,依次记为A、B、C组,每组6只,双侧手术共计12侧。在全麻下行双侧桡骨中段骨缺损手术,分别于术后当日,术后4、8、12周行CT三维重建检查,应用Hedberg评分评估骨缺损愈合情况,术后12周处死实验兔,留取尺桡骨标本,行HE染色组织学分析缺损处新生骨情况;根据实验结果选择最佳缺损长度,以距尺骨鹰嘴远端3.0 cm为桡骨近段骨缺损的中心,完成D组6只兔双侧桡骨近段骨缺损实验,应用上述方法比较近段与中段缺损的骨愈合情况及术后并发症。[结果]术后2只实验兔因严重感染,予处死并及时补充。术后4周时,D组中2只实验兔出现单侧尺骨骨折,骨折一侧未计入统计。术后12周时,大体观察见,A组中11侧(91.7%)桡骨已经完全桥接并且塑形较完全,新生桡骨表面光滑。B组、D组完全桥接仅3侧,C组未见桥接,缺损断端已封闭,见少量成骨,缺损区域为纤维组织填充。CT断层图像见A组完全桥接的桡骨已形成髓腔再通,未桥接的骨缺损断端及缺损尺侧均见少量新骨生成;组织学结果示,A组缺损多已修复完成,髓腔再通,塑形完成,而其余三组多表现为断端封闭,缺损区域纤维组织填充;CT三维重建的Hedberg评分结果示B组(1.75±1.06)与A组(3.83±0.39)有统计学差异(P<0.05),而与C组(1.33±0.65)、D组(1.60±0.70)均无统计学差异(P>0.05)。[结论]6个月龄新西兰兔桡骨大段骨缺损模型的缺损长度选择1.5 cm较为合适,其中,缺损位置选择在桡骨中段或者近段均可。     

以纤维蛋白胶为载体的注射型骨修复材料对兔桡骨骨缺损修复的实验研究

目的　了解以纤维蛋白胶 (FS)为载体的注射型骨修复材料修复兔桡骨节段性骨缺损的能力 ,为其临床的应用提供实验依据。方法　实验分组为 :实验组b (FS +bFGF +牛BMPbBMP)、对照组b1(FS +bBMP)、实验组r (FS +bFGF +rhBMP- 2 )、对照组r1(FS +rhBMP)、对照组FS。于 70只新西兰白兔右侧桡骨干处造成 1 5cm缺损 ,然后严密缝合皮下组织及皮肤 ,将各组材料经正常皮肤注射骨缺损处 ,术后不同时间进行放射学、组织学和骨密度等方法检查 ,对其成骨效应进行研究。结果　在以bBMP为成骨因子的实验区中 ,实验组b骨缺损区在成骨活跃程度、骨密度和再生髓腔结构等方面均显著优于对照组b1,使骨缺损得到了较彻底的修复 (P <0 0 1) ;同样 ,在以rhBMP - 2为成骨因子的实验区中 ,实验组r骨缺损区在成骨活跃程度、骨密度和再生髓腔结构等方面均显著优于对照组r1,使骨缺损得到了较彻底的修复 (P <0 0 1) ,对照组FS不能产生骨性愈合。结论　以FS为载体复合BMP和bFGF的注射型骨修复材料具有高效的骨修复能力。     

注射型软骨组织工程活性材料修复关节软骨缺损的实验研究

目的 利用注射型活性材料修复兔关节软骨,比较碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblastic growth factor,bFGF)和骨形态发生蛋白(Bone morphogenic protein,BMP)的治疗效果。方法 取18只14周龄成年大白兔随机分为3组,每只动物于双侧膝关节股骨髌股关节面制备直径4mm全层软骨缺损模型,钻通骨髓腔。准备注射型bFGF和BMP生物蛋白胶材料,三组分别接受如下治疗。A组注射型碱性成纤维细胞生长因子,B组注射型骨形态发生蛋白,C组单纯生物蛋白胶治疗。于8周,12周,24周观察大体和形态学特征,组织学评分。结果 A组于8,12周时,软骨缺损被白色半透明坚硬组织平滑修复,富有光泽,与正常软骨边界清楚,24周时修复组织与正常软骨边界模糊,质地坚硬,表面平滑光润。B组于8,12,24周时候均未将缺损表面修复平滑,为疏松组织缺损底部,凹陷明显残留。C组全程均未见软骨修复。组织评分A组明显优于B组C组(P<0.05),而B组和C组间无差异(P>0.05)。结论 注射型碱性成纤维细胞生长因子可以有效修复兔关节软骨的缺损,效果明显优于BMP治疗组,为关节镜等微创治疗方法提供了实验参考。     

复合骨形态发生蛋白胎儿骨修复长骨缺损的实验研究

寻找满意的骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）的载体一直是应用ＢＭＰ修复骨缺损研究中的一个重要课题，为探讨胎儿骨（ＦＢ）能否成为ＢＭＰ载体，制备了复合ＢＭＰ胎儿骨（ＢＭＰ／ＦＢ），将其植入兔桡骨中段１５ｍｍ人工缺损处，以单纯ＦＢ植入、异体骨（ＡＬＢ）植入、空白作为对照，通过Ｘ线摄片，光镜观察，电子探针钙磷元素测定等方法了解各组骨缺损修复速度和愈合程度。结果发现ＢＭＰ／ＦＢ植入侧４周时骨缺损处有大量间充质细胞聚集，８周形成骨小梁，ＦＢ基本被吸收，１２周出现部分板层骨，钙磷值达到正常桡骨皮质骨水平，１６周骨细胞成熟，髓腔再通，外观塑形较好，在不同时间点骨缺损修复程度，ＢＭＰ／ＦＢ组明显优于ＦＢ组，ＦＢ组优于ＡＬＢ组，空白组骨缺损则被纤维组织，脂肪组织等填充。实验证明ＦＢ是一种良好的ＢＭＰ载体。     

三种快速成型制作的聚酯/钙磷盐人工骨修复兔桡骨缺损的实验研究

目的检验3种聚酯／钙磷盐植骨材料修复兔桡骨缺损的效果,筛选理想的组织工程用生长因子载体。方法分别采用复合牛骨形态发生蛋白(bBMP)及单纯快速成型工艺制作的3种聚酯／钙磷盐载体材料修复兔桡骨15mm缺损,通过量化评价、影像学、组织学、材料降解及骨密度评价3种聚酯／钙磷盐载体材料修复兔桡骨缺损的效果。结果12周时各材料实验组骨缺损均愈合,各检测指标同对照组比较差异均有统计学意义,空白对照组骨缺损未愈合,以聚乳酸．聚羟基乙酸共聚物／磷酸三钙(PLGA／TCP)材料实验组修复效果最好,聚消旋乳酸／磷酸三钙(PDLLA／TCP)材料实验组次之,最后为聚左旋乳酸／磷酸三钙(PLIA／TCP)材料实验组。结论3种聚酯／钙磷盐材料制作的仿生活性人工骨皆可以修复兔15mm长骨骨缺损,其中以PLGA／TCP材料效果最为理想。     

带血供肌瓣作为骨形态发生蛋白载体修复骨缺损的实验研究

目的 探讨带血供肌瓣作为骨形态发生蛋白（BMP）载体修复骨缺损的可行性。方法 观察带血从肌瓣复合BMP和单纯BMP组修复骨缺损时的成骨情况;对纤维蛋白粘合剂、带血供肌瓣、无血运肌瓣、同种异体脱钙骨4种不同BMP载体的成骨能力进行比较。结果 以指深屈肌支为蒂制备的带血供肌瓣复合BMP修复骨缺损,效果优于单纯BMP组;带血供肌瓣联合纤维蛋白粘合剂复合BMP修复骨缺损,效果优于单纯BMP组;带血供肌瓣联合纤维蛋白粘合剂复合BMP组修复骨缺损,效果优于其它载体。结论 带血供肌瓣可作为BMP的良好载体。带血供肌瓣联合纤维蛋白粘合剂作BMP的载体效果更优。     

游离骨膜与复合rhBMP2的异种骨联合移植修复骨缺损的实验研究

目的 探讨复合基因重组人ＢＭＰ２（ｒｈＢＭＰ２）的异种骨与游离骨膜（ＦＰ）联合移植修复节段性骨缺损的效果。方法 将ｒｈＢＭＰ２与去抗原牛松质骨载体（ＢＣＢ）复合,制成ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ;选用新西兰大耳白兔２８只,制成烧骨干１５ｍｍ缺损动物模型,分别行ＦＰ和ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ复合移植（ｎ＝６）、ｒｈＢＭ２／ＢＣＢ移植（ｎ＝６）和单纯ＢＣＢ移植（ｎ＝２）;术后４、８、１２、１６周取材,通过Ｘ线、生     

bFGF/BMP/AACB复合物修复犬股骨头缺损坏死模型的实验研究

目的制备bFGF/BMP/AACB复合物,通过动物实验研究其对股骨头缺损坏死模型的修复作用及相关问题,探讨临床应用的可能性。方法制备异体脱抗原松质骨(AACB),并将其与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及骨形态发生蛋白(BMP)复合制成bFGF/BMP/AACB复合物,植入通过液氮冷冻建立的犬股骨头缺损坏死模型,术后不同时间处死动物。通过大体解剖、X线片、组织学染色、图像分析、血管免疫组化染色、X线能谱分析、生物力学测定等手段观察缺损坏死模型的修复情况。结果术后各组动物均无毒性反应和炎症反应。A组(空白缺损组)术后12周缺损仍未愈合;B组(AACB组)虽然优于A组,但成骨作用不及C组(BMP/AACB组);而D组(bFGF/BMP/AACB组)成骨和成血管作用优于A、B、C组。早期(3、6周)甚至优于E组(自体骨组),后期(12周)的骨修复及骨改建效果与E组相当。结论bFGF/BMP/AACB复合物具有明显促进犬股骨头缺损坏死模型再血管化及新骨形成的作用,可望成为新型的股骨头缺血性坏死(ANFH)修复材料。     

Repair of the radial defect of rabbit with polyester/ tricalcium phosphate scaffolds prepared by rapid prototyping technology

Objective： To evaluate the effects of repairing rabbit radial defects with polyester/tricalcium phosphate scaffolds prepared by rapid prototyping technology loaded with bovine bone morphogenetic protein （ bBMP）, and find new carriers for growth factors. Methods： Polyester/tricalcium phosphate scaffolds prepared by rapid prototyping technology loaded with and without bovine BMP were used to repair the 15 mm radial defect in rabbit. Then the results of radiography, histology, scaffolds degrade rates and bone mineral density （BMD） were appraised to examine the effects at the 12th week. Results ： At the 12th week postoperatively, all defects treated with bBMP were radiographically repaired. No radius implanted polyester/tricalcium phosphate scaffolds without bBMP showed radiographic and histological union. At experimental groups, longitudinal alignment of lamellar structure was observed histologically at the 12th week,indicating that remodeling of regenerated bone was complete in different degree. Of the three experimental groups, the bony regeneration and remodeling of callus in poly lactide-co-glycolide/tricalcium phosphate （PLGA/ TCP） group was the best. The BMD values were beyond 70% of normal value at the 12th week while the PLGA/ TCP scaffolds group was the highest, and no abnormalities were observed in the surrounding soft tissue in all groups. Conclusions - Polyester/tricalcium phosphate scaffolds prepared by rapid prototyping technology loaded with bovine BMP can repair a 15 mm radial defect of rabbit. As for the results, the PLGA/TCP scaffold is ideal and better than poly L-lactide-co-D, L-lactide （ PDLLA/TCP ） scaffold, but the ploy L-lactic acid （PLLA/TCP） is not so good for its low degradation rates.